Иркутск – 2008г.

МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РОССИИ
Государственное образовательное учреждение
Высшего профессионального образования
ИРКУТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ
(ГОУ ВПО ИГМУ Минздравсоцразвития России)
Медико-профилактический факультет
Кафедра микробиологии
Методические рекомендации
к практическим занятиям для студентов ИГМУ
по теме:
«ВИРУСЫ – ВОЗБУДИТЕЛИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ»
для специальности: 060101 – Лечебное дело, дневное отделение (ЛДдо)
060103 – Педиатрия (ПЕД)
060104 – Медико-профилактическое дело (МПД)
Иркутск – 2008г.
Методические рекомендации составлены:
зав. кафедрой микробиологии ИГМУ, проф. Р. В. Кибортом,
проф. Е. В. Симоновой
ассистентом кафедры Т. А. Платоновой
Методические рекомендации составлены в соответствии с типовым
учебным планом общеобразовательного стандарта подготовки студентов
высших медицинских учебных заведений и медицинских факультетов
университетов по курсу «Микробиология с вирусологией и
иммунологией» и рабочей программой кафедры микробиологии ИГМУ.
Методические рекомендации обсуждены на заседании кафедры
микробиологии ИГМУ.
Протокол № ______ от _____________ 2008г.
Методические рекомендации рассмотрены и рекомендованы к
изданию на заседании цикловой методической комиссии кафедр медикобиологического профиля ИГМУ.
Протокол № ___ от __________2008г.
Председатель ЦМК профессор Р.В. Киборт.
ЗАНЯТИЕ № 1
Тема занятия: «Вирусы – возбудители инфекционных заболеваний».
Вопросы для самостоятельной подготовки студентов к занятию:
1.
Морфология вирусов. Особенности биологии вирусов.
2.
Культивирование вирусов: клеточные культуры, эмбрионы птиц,
организм лабораторных животных. Типы культур ткани, используемые для
культивирования вирусов.
3.
Индикация вирусов на биологических моделях. Цитопатогенное действие
вирусов. Вирусные включения. Бляшкообразование под агаровым покрытием.
Гемадсорбция. Сероидентификация вирусов.
4.
Методы
лабораторной
диагностики
вирусных
инфекций:
вирусологический, вирусоскопический, серологический, Молекулярно-генетический.
5.
Особенности противовирусного иммунитета.
6.
Возбудители вирусных кишечных инфекций. Общая характеристика.
Роль в патологии человека
7.
Материал для микробиологического исследования в зависимости от
циркуляции вируса в организме.
8.
Принципы лабораторной диагностики на примере вируса полиомиелита.
Студент должен знать:
1.
Принципы классификации вирусов.
2.
Морфологические особенности вирионов.
3.
Механизмы развития вирусных инфекций и роль факторов патогенности
в этом процессе.
4.
Механизмы противовирусного иммунитета.
5.
Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.
6.
Кишечные вирусы. Таксономия. Экология, распространение. Патогенез
кишечных вирусных инфекций.
7.
Иммуно-биологические препараты, применяемые для диагностики,
профилактики и лечения кишечных вирусных инфекций.
Студент должен уметь:
1.
Проводить индикацию вирусов на объектах окружающей среды и в
материалах больного.
2.
Идентифицировать выделенные вирусы.
3.
Ставить и учитывать реакцию нейтрализации вирусов, поставленную на
основе «цветной пробы».
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ НА ЗАНЯТИИ
Задание 1. Используя учебник, укажите заболевания, вызываемые вирусами,
относящимися к разным таксономическим группам, данные внесите в таблицу 1.
Задание 2. Изучите по рис.1 и 2 методы культивирования вирусов и способы их
индикации. Ответьте на поставленные вопросы.
МЕТОДЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ
В биологических объектах
Организм
чувствительных
лабораторных
животных
В культурах ткани
Перевиваемые
Полуперевиваемые
Куринные
эмбрионы
Неперевиваемые
(первично- трипсинизированные)
Рис.1
1. Чем обусловлено требование: «используются чувствительные лабораторные
животные»?
2. От чего зависит метод введения исследуемого материала лабораторным
животным?
3. Для заражения используются ______ -дневные куринные эмбрионы.
4. Какие способы введения материала используются при заражении куринных
эмбрионов?
МЕТОДЫ ИНДИКАЦИИ ВИРУСОВ
Цитопатическое
действие
Выявление
включений
клетках ткани
Бляшкообразование на
клеточном
монослое
под
агаровым
покрытием
в
Выявление
включений
клетках ткани
Реакция
гемагглют
инации
в
«Цветная
проба»
Солка
Гемадсорбция
эритроцитов
Рис.2
1. Какое цитопатическое действие можно наблюдать при репродукции вирусов в
клетках ткани?
2. Что представляет собой бляшки на клеточном монослое?
3. В каких структурах клетки могут образовываться включения? Как называются
эти включения?
4. Какие вирусы можно выявить с помощью реакций гемагглютинации и
гемадсорбции?
5. Какие клетки используются для получения тканевых культур?
6. Чем отличаются неперевиваемые и перевиваемые культуры тканей?
Задание3. Изучите методы лабораторной диагностики вирусных инфекций,
используя Таблицу 2. Ответьте на поставленные вопросы:
1. Какой материал используется при диагностики вирусных инфекций?
2. Как можно выявить наличие вируса в исследуемом материале?
3. Какие вирусные включения вы знаете?
4. Как проявляется цитопатическое действие вируса? Как определить ЦПД при
вирусоскопическом исследовании?
5. Какие реакции можно использовать для сероидентификации вирусов?
Задание 4. Разобрать по таблице 3 лабораторную диагностику энтеровирусных
заболеваний.
Таблица 3
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ЭНТЕРОВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Исследуемый материал
Вирусологический метод
Серологический метод
Испражнения больного, мазки из носоглотки
(вирусы Коксака и ECHO), кровь (гепатит А)
Выделение вируса из исследуемого материала
на первичных и перевиваемых культурах
клеток, а также при заражении мышей-сосунков.
Идентификация в РН («Цветная проба»).
Для гемагглютинирующих вирусов ECHO и
Коксаки - РТГА
Исследуются парные сыворотки,
диагностическим является нарастание титра Ат
не менее чем в 4 раза.
Ставятся РН, РСК, РТГА
Задание 5. В инфекционную больницу госпитализирован больной Н. с подозрением
на кишечную инфекцию. Проведенное бактериологическое исследование не выявило
возбудителей бактериальных кишечных заболеваний.
1. Какой материал необходимо направить на вирусологическое исследование?
2. Как провести индикацию и идентификацию кишечных вирусов?
«Цветная проба» Солка
«Цветная проба» Солка основана на изменении цвета питательной среды,
предназначенной для культивирования культуры ткани (среда 199, Игла и др.),
содержащей индикатор – феноловый красный рН 7,4-7,8. В культурах тканей, не
зараженных вирусом, под влиянием продуктов метаболизма клеток, реакция среды
меняется в кислую сторону (рН 7,0). Поэтому цвет среды меняется с малиновокрасного сначала на оранжево-розовый, а затем в желтый цвет. В случае, если клетки
культуры ткани инфицированы вирусом, то вирус, оказывая цитопатическое действие,
меняет их метаболизм или вызывает гибель. В этом случае цвет питательной среды
остается неизменным – красным.
Феномен «цветной пробы» Солка используется для сероидентификации вирусов.
Реакция нейтрализации по методу «цветная проба»
В этой реакции под действием специфических антител вирус утрачивает
способность к репродукции и вследствие этого не вызывает гибель клеток культур
ткани. При этом в ней сохраняются характерные метаболические процессы и цвет
среды меняется с красного на желтый.
Задание 6. У ребенка с кишечной инфекцией при вирусологическом исследовании
выделен вирус полиомиелита.
Определите серотип вируса полиомиелита, если при постановке реакции
нейтрализации по методу «цветная проба» с поливалентной сывороткой (I пробирка) и
монорецепторными сыворотками к серотипам I, II и III (соответственно, II, III и IY
пробирки) изменение цвета среды с красного на желтый произошло в I и III пробирках
(Рис. 3).
Исходный
Вариант
I
II
III
К.К
Рис. 3
Заключение: Выделенный вирус полиомиелита относится к……..серотипу.
Задание 7. Разобрать диагностические, профилактические и лечебные
препараты, которые используются при энтеровирусных инфекциях.
Диагностически препараты:
1. Поливалентная и типоспецифические полиомиелитные сыворотки I-III типов.
Применяются для серотипирования вирусов полиомиелита.
2. Поливалентные и типоспецифические сыворотки Коксаки и ECHO.
Применяются для дифференцировки и типирования соответствующих вирусов.
Профилактические препараты:
1.Пероральная живая вакцина против полиомиелита. Содержит аттенуированные
штаммы вирусов полиомиелита I-III серотипов, выращенных на культуре клеток почек
африканских зеленых мартышек. Вакцина выпускается в жидком виде и в форме
дражже для перорального применения.
Таблица 1
КЛАССИФИКАЦИЯ ВИРУСОВ
ДНК- содержащие
РНК- содержащие
Корона1.
Онкогенные
вирусы
Респиратор
ные вирусы
Покс1.
2.
Герпес1.
2.
3.
Пикорна1.
2.
3.
Парва1.
2.
Адено
1.
2.
Папова1.
Миксовирусы
Парамиксо1.
2.
Ортомиксо1.
2.
3.
Ретра1.
2.
Рабдо1.
2.
Арбовирусы
Тога1.
2.
Арнена
1.
Рео1.
2.
Буньян1.
Таблица 2
МЕТОДЫ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Вирусоскопический
Вирусологический
Выявление вирусов, их включений,
цитопатического действия
Серологический
Сеодиагностика
с
использованием
реакций
нейтрализации, РСК, РНИФ,
ИФА и др.
I этап: Накопление вируса
Культивирование на лабораторных
животных, в куринных эмбрионах,
культуре ткани.
II этап: Индикация вируса
По ЦПД, по наличию характерных
включений, бляшек
III этап: Идентификация
Сероидентификация – РН, РТГА, РИФ,
ИФА, ПЦР
Таблица 4.
ФОРМЫ СУЩЕСТВОВАНИЯ ВИРУСОВ
Внеклеточная
Внутриклеточная
(потенциально-инфекционная)
НК вируса (геном) тесно связан со структурой и метаболизмом клетки-хозяина
покоящаяся
называется: элементарным тельцем,
вирусной частицей, вирионом
форма разнообразная:
Инфекционные
Интеграционные
округлая – миксовирусы,
(автономная репликация генов)
Опухолеродные
цилиндрическая - реовирусы,
Вызывает лизис клеток
Вызывают
злокачественную
пулевидная – рабдовирусы
трансформацию клеток, затрагивая
кубоидальная – вирус натуральной
метаболизм
оспы,
Фаги
20-ти- гранники – все остальные
вирусы.
Таблица 5.
ПРОТИВОВИРУСНЫЙ ИММУНИТЕТ
(виды и факторы)
Естественный иммунитет
Механические и
химические
барьеры
Резистентность
клеток
Температурный
фактор
Термолабильные
-ингибиторы и
ко-факторы
Приобретенный иммунитет
Интерферон
Вируснейтрали
зующие
антитела
Фагоциты
Т-лимфоциты
ЗАНЯТИЕ № 2
Тема занятия: «Респираторные вирусные инфекции: грипп, парагрипп, корь,
коревая краснуха, аденовирусные заболевания, герпетическая инфекция, оспа.
Возбудители гепатитов».
Вопросы для самостоятельной подготовки студентов к занятию:
1. Характеристика семейства Ортомиксовирусов. Вирусы гриппа. Структура и
химический состав, антигены, культивирование и репродукция. Патогенез и
иммунитет. Диагностика. Специфическая профилактика.
2. Семейство парамиксовирусов. Характеристика семейства. Антигенная
структура, репродукция. Лабораторная диагностика.
3. Вирусы парагриппа человека, их характеристика, патогенез иммунитет.
4. Вирус паратита. Патогенез заболеваний и иммунитет. Специфическая
профилактика.
5. Вирус кори. Патогенез заболеваний и иммунитет. Диагностика. Специфическая
профилактика.
6. Аденовирусы. Антигены, культивирование и репродукция. Патогенез
заболеваний. Иммунитет. Эпидемиология. Специфическая профилактика.
7. Характеристика семейства герпесвирусов.
Альфа-герпесвирусы. Вирус ветряной оспы и опаясывающего лишая. Патогенез
заболеваний, лабораторная диагностика. Специфическая профилактика.
Бета-герпесвирусы. Характеристика цитамегаловирусной инфекции.
Гамма-герпесвирусы. Вирус натуральной оспы. Структура и химический состав,
антигены, патогенез заболеваний, иммунитет, экология, распространение, лабораторная
диагностика, профилактика.
8. Вирусы гепатитов.
Гепатит А. Структура и химический состав, культивирование, патогенез
заболеваний, эпидемиология, лабораторная диагностика, специфическая профилактика.
Гепатит В. Структура и химический состав, культивирование, патогенез
заболеваний, эпидемиология, лабораторная диагностика, специфическая профилактика.
Другие возбудители вирусных гепатитов. Их характеристика, диагностика.
Студент должен знать:
1. Принципы классификации и таксономии вирусов, вызывающих респираторные
заболевания.
2. Экологию возбудителей, пути распространения инфекции.
3. Механизмы развития заболеваний и механизмы развития иммунитета.
4. Методы лабораторной диагностики респираторных вирусных инфекций.
5. Специфические препараты, используемые для профилактики этих заболеваний
6. Характеристику вирусов- возбудителей гепатитов, их отличительные
особенности.
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ НА ЗАНЯТИИ
Задание 1. Разобрать методы лабораторной диагностики респираторных
вирусных заболеваний, используя Рис. 1. Ответьте на поставленные вопросы:
1.
Какие изменения можно выявить при цитоскопии, указывающие на
вирусную инфекцию?
2.
Относится ли реакция гемагглютинации к серологическим?
3.
При каких заболеваниях для диагностики можно использовать РГА,
гемадсорбции и РТГА?
4.
С какой целью используется серологический метод диагностики?
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКИ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ
ИНФЕКЦИЙ
Экспресс-методы
(обнаружение Аг в исследуемом
материале). ИФА, РИФ, ПЦР
Вирусологический
Метод
(эпидемическая направленность)
I. Накопление вируса в
куринных эмбрионах, на
культурах ткани, в организме
лабораторных животных.
Серологический
метод
(Серодиагностика)
При гриппе,
парагриппе,
аденовирусах
ретроспективная
При остальных
инфекциях основа
на на определении классов Ig
и их титров
II.Индикация вируса – ЦПД,
гибель, бляшки, включения,
специфическое
месторасположение вируса в
клетке.
III.Идентификация
типоспецифическими
сыворотками в РСК,
ИФА, РИФ, РТГА.
с
РН,
Вирусоскопический
метод
Цитоскопия
–выявление
характерных изменений в
пораженных клетках:
1. ЦПД:
А) гибель, слущивание
эпителия
–
грипп,
парагрипп
Б) образование симпластов
- корь, герпесвирусы
В) вирусные включения
цитоплазматические
–
натуральная
оспа
(т.Пашена),
ядерные – аденовирусы.
2. нахождение крупных
вирусов, их характерное
расположение
Задание2. У больного Н. респираторное заболевание. Поставьте реакцию
гемагглютинации для
определения гемагглютинирующего вируса в смыве из
носоглотки. Подтвердите или опровергните диагноз ОРВИ. Результаты запишите в
тетрадь.
Реакция гемагглютинации
Наличие гемагглютинирующих вирусов в смыве из носоглотки определяется в
ориентировочной реакции агглютинации на предметном стекле. Для этого на
предметное стекло наносят каплю исследуемого материала (смыв из носоглотки) и
добавляют каплю взвеси эритроцитов крови группы I (О). Вирусы несущие на капсиде
гемагглютинин
(гемагглютинирующие)
вызывают
склеивание
эритроцитов
(гемагглютинацию), которая проявляется в течение нескольких минут. При
отрицательном результате, т.е. при отсутствии гемагглютинирующих вирусов в капле
наблюдается равномерное помутнение в виде взвеси эритроцитов.
«»
Заключение: У больного
гемагглютинирующие вирусы.
«+»
Н.
в
смыве
из
носоглотки
…………..
Задание 3. У больного В. поставили диагноз грипп. Используя реакцию
торможения гемагглютинации (РТГА), определите серотип вируса гриппа.
Результаты реакции запишите в тетрадь и сделайте заключение.
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
Для постановки реакции торможения гемагглютинации используют стеклянную
пластинку, разделенную на квадраты. В каждый квадрат внесите по 1-2 капли
типоспецифической сыворотки: А, А1, А2, В, С и нормальной сыворотки (N). Затем
добавьте по 1-2 капли алантоисной жидкости, содержащей выделенный и накопленный
вирус, к N-сыворотке (контроль) добавьте физиологический раствор. Во все клетки
внесите 1-2 капли взвеси эритроцитов.
Учет результатов реакции проводят через несколько секунд. Феномен ТРГА
заключается в торможении гемагглютинации (склеивания эритроцитов), т.к. в
результате взаимодействия антигена с антителами специфической сыворотки вирус
нейтрализуется, т.е. утрачивает гемагглютинирующие свойства.
Заключение: У больного В. выделен вирус гриппа серотипа…………
Задание 4. Для медико-профилактического факультета.
В городе А. В декабре-январе эпидемическая вспышка гриппа. Необходимо
провести типирование вируса и определить эпидемически значимый серотип
возбудителя.
1.
Сколько людей необходимо обследовать?
2.
Какой метод лабораторной диагностики может быть использован?
3.
Какой исследуемый материал необходимо взять у обследуемых?
4.
Какую реакцию можно использовать?
5.
При каком статистическом показателе можно сделать заключение о
эпидемически значимом серотипа возбудителя?
Задание 5. У ребенка 7 л., на основании клинических проявлений поставлен
диагноз – «корь». Для подтверждения данного диагноза использован серологический
метод диагностики. Для серодиагностики использовались парные сыворотки, а
исследование проводилось с помощью реакции торможения гемагглютинации (табл.1).
Учтите результаты РТГА и данные внесите в таблицу 1, оцените полученные
результаты и напишите заключение.
Таблица 1
Результаты РТГА с парными сыворотками больного
Исследу
Разведения парных сывороток
емые сы1:10
1:20
1:40
1:80
1:160
КС
КА
Воротки
1-я
2-я
Заключе В парных сыворотках больного ребенка титр антител (увеличился в
ние
……..раз/не увеличился). Поэтому данный клинический диагноз
(подтвержден/не подтвержден).
«» реакция РТГА
«+» реакция РТГА
Задание 6. В детском коллективе зарегистрирован случай заболевания корью.
1.
Какие мероприятия необходимо провести для выявления наличия
иммунитета у контактных детей?
2.
Какие профилактические мероприятия должны быть проведены в
детском коллективе?
3.
Какие лечебно-профилактические препараты могут быть использованы и
на чем основано их действие?
Задание 7. В лабораторию поступила сыворотка больного с диагнозом
«герпетическая ангина», взятая на 8 день с начала заболевания. Необходимо с
помощью РПГА определить титр специфических антител.
Учтите результаты РПГА и данные внесите в таблицу 2, оцените полученные
результаты и напишите заключение.
Таблица 2.
Разведения исследуемой сыворотки
1:10
1:20
1:40
1:80
1:160
1:320
КС
КА
Заключение
В сыворотке больного с диагнозом «герпетическая ангина» обнаружены
антитела в титре………. Учитывая, что диагностический титр реакции 1:40,
диагноз заболевания считается (подтвержденным/не подтвержденным).
Задание 8. Решите ситуационные задачи.
1. Оценить и прокомментировать опасность заражения краснухой беременной
женщины.
2. Обсудить и прокомментировать возможные источники заражения ребенка
ветряной оспой в семье, где один из взрослых болеет опаясывающим лишаем.
3. В лабораторию поступила сыворотка больного с предварительным диагнозом
«аденовирусная инфекция», полученная на 8 и 18 день от начала заболевания.
Поставлена РСК и получены следующие результаты:
1-я сыворотка – титр 1:40
2-я сыворотка – титр 1:160
а) можно ли по полученным результатам подтвердить поставленный диагноз?
б) обоснуйте избранный метод диагностики.
4.
Прокомментируйте необходимость применения антибиотиков
лечении гриппа и ОРЗ вирусной этиологии.
при
Задание 9. Изучите препараты для лечения и профилактики вирусных
респираторных инфекций.
Лечебно-профилактические препараты, применяемые при
респираторных вирусных инфекциях
1. Вакцина гриппозная аллантоисная живая сухая интраназальная для детей 3-14
лет.
Содержит вирусы гриппа типов А и В. Используют для активной профилактики
гриппа у детей 3-14 лет.
2. Вакцина гриппозная аллантоисная очищенная живая сухая для
интраназального применения взрослым.
Содержит аттенуированный вирус гриппа типа А (Н1N1 или Н3N2) или В.
3. Вакцина гриппозная инактивированная.
Содержит вирус гриппа типа А и В. Препарат содержит в 1 мл по 20 мкг
гемагглютинина подтипа А (Н3N2) и (Н1N1) и 26 мкг типа В.
4. Вакцина коревая культуральная живая сухая.
Аттенуированный штамм вируса кори «Ленинград-16» (Л-16) или клонированный
вариант штамма Москва–5.
5. Вакцина паратитная культуральная живая сухая.
6. Вакцина оспенная живая сухая.
Препарат предназначен для профилактики натуральной оспы по эпидемическим
показаниям, а также вакцинации лиц, работающих с вирусными осповакцинами и оспы
животных, патогенных для человека
7. Вакцина герпетическая культуральная инактивированная сухая
Представляет собой инактивированный формалином вирус простого герпеса I и II
антигенных типов. Предназначается для лечения больных герпетической инфекцией с
тяжелыми рецидивирующими формами герпетических поражений кожи и слизистых
различных локализаций. Вакцина стимулирует клеточные механизмы резистентности
организма человека к вирусу простого герпеса I и II типов.
8.Иммуноглобулин человека нормальный.
Применяют для профилактики гепатита А, кори, гриппа, полиомиелита и ряда
бактериальных заболеваний.
9. Иммуноглобулин человека противогриппозный.
Применяют для профилактики и лечения гриппа, особенно его токсических форм.
10. Интерферон человеческий лейкоцитарный сухой.
Препарат предназначен для профилактики и лечения гриппа, а также других
острых респираторных вирусных инфекций.
Задание 10. Изучить по таблице 3 характеристику вирусов гепатитов.
Ответьте на следующие вопросы:
1.
Какой путь заражения характерен для вируса гепатита А? В и С?
2.
Какой из вирусов гепатита является ДНК-м?
3.
Для каких вирусов характерен фекально-оральный путь передачи?
4.
Почему наркоманы составляют группу риска при заболевании
гепатитами В и С.
Признаки
Вирус гепатита Вирус гепатита
А
В
Открыты
1973 Фейстон
1963-64
австралийский
Аг, 1970 Дейн
Семейство, род Picornaviridae
Hepadnovirus
Hepadnavirus
Тип НК
РНК
ДНК
однонитевая,
двуцепочечная,
позитивная
кольцевидная
Дельта-вирус
D
1977 Ризетто
Вирус гепатита
С
1981Citnick
1987 Taboze
1989 Choo, Kuo
Flavoviridae
Вирус гепатита Вирус гепатита
Е
G
1984 Bradley,
1996 Дейнгардт
1990
Reyes,
Pazdly
Calciciridae
Flaviviridae
РНК
одноцепочечная,
позитивная
30-38 нм
В цитоплазме
РНК
однонитевая,
позитивная
Шимпанзе,
Мармозеты
HE-Ag
Тамарины
Размеры
Локализация в
клетке
Патогенность
для животных
Антигены
27-28 нм
В цитоплазме
42нм
В ядре
РНК
кольцевидная,
одноцепочечная
36 нм
В ядре
Шимпанзе,
мармозеты
HA-Ag
Шимпанзе
Шимпанзе
Шимпанзе
HBsAg, HD-Ag
HC-Ag
Источники
Больные,
носители
HBsAg,
HBeAg,
HBcAg, HBxAg
Больные,
носители,
хр.больные
Больные,
носители
HBsAg
Больные,
носители,
хр.больные
Больные
Больные,
носители
(доноры)
Пути передачи
Фекальнооральный
Парентеральный,
плацентарный,
контактный
(половой)
Парентеральный,
плацентарный,
контактный при
травмах
Парентеральный,
плацентарный,
контактный
(половой)
Фекальнооральный
Парентеральный,
плацентарный
Инкубационный период
15-50 дней
50-180 дней
1,5мес-6мес
1-2 мес.
30-50 дней
Персистенция,
носительство
27-30 нм
В цитоплазме
РНК
позитивная
В цитоплазме
HCV-AG
Формы
заболевания,
течение
Острая
желтушная,
легкое
Длительность
2-3 недели
заболевания
Материал для Кровь,
исследования
сыворотка,
испражнения
Диагностика.
Обнаружение
вирусов (Аг) и
антител
Культивирован
ие в культуре
ткани
Постинфекционный
иммунитет
РИА,
ИФА,
ПЦР
Латентная,
желтушная,
злокачественная,
хроническая,
цирроз,
карцинома,
тяжелое
Коинфекция,
суперинфекция
цирроз,
гепатома,
тяжелое
Длительное
Длительное
Кровь, сыворотка, Кровь,
испражнения,
сыворотка
слюна,
желчь,
моча
РИД, РИА,
ИФА, РИФ,
ИЭМ, ИЭМ,
РИД, РИА
ПЦР, РОНГА
Hep-2, Hela
Длительный
прочный
Острая,
хроническая,25
%- легкая, 50%
хроническая,
20%
цирроз,
рак
Длительное
Желтушная,
Коинфекция,
интоксикация, хроническая,
легкое, тяжелое легко
у беременных
Сыворотка
Кровь,
сыворотка,
испражнения
ИФА, Обнаружение
ИФА, РИА
Ат в ИФА,
РИА
Клетки печени Не
эмбриона
размножаются
человека
Длительный
пожизненный
Не
размножаются
Не
размножаются
Длительный
пожизненный
Кровь
ПЦР
ЗАНЯТИЕ № 3
Тема занятия: «Вирусы – возбудители нейровирусных инфекций: клещевого
энцефалита, желтой лихорадки, гемморрагической лихорадки, бешенства.
Медленные вирусные инфекции. Ретровирусы. Онковирусы. Вирус СПИДа».
Вопросы для самостоятельной подготовки студентов к занятию:
1. Характеристика семейства Флавовирусов. Структура и химический состав.
Распространение и репродукция. Патогенез заболеваний человека и иммунитет.
Лабораторная диагностика.
2. Вирус клещевого энцефалита. Патогенез заболеваний человека и иммунитет.
Распространение и специфическая профилактика.
3. Вирус желтой и вирус гемморрагической лихорадки. Патогенез заболеваний.
Распространение и специфическая профилактика.
4. Семейство Рабдовирусов. Вирус бешенства. Структура и химический состав.
Культивирование и репродукция. Патогенез заболеваний человека и иммунитет.
Экология
и
распространение.
Лабораторная
диагностика. Специфическая
профилактика.
5.
Возбудители медленных вирусных инфекций.
6.
Характеристика семейства Ретровирусов. Онковирусы. Характеристика
ДНК-содержащих онкогенных вирусов.
7.
Вирус иммунодефицита человека. История открытия. Структура и
химический состав. Антигенная структура. Культивирование и репродукция. Патогенез
СПИДа и иммунитет. Лабораторная диагностика. Профилактика и лечение.
Студент должен знать:
1. Принципы классификации и таксономии нейровирусов, вирусов медленных
вирусных инфекций, онковирусов.
2. Методы культивирования и индикации вирусов данной группы.
3. Особенности лабораторной диагностики вирусных инфекций этой группы.
4. Механизмы формирования иммунитета при нейровирусных инфекциях.
5.
Механизмы формирования иммунитета при ВИЧ-инфекции.
Студент должен уметь:
1. Интерпретировать результаты лабораторных исследований при клещевом
энцефалите.
2. Выявлять тельца Бабеша-Негри в клетках слюнных желез при бешенстве.
3. Интерпретировать результаты лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции.
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ НА ЗАНЯТИИ
Задание 1. Используя рис.1 изучите методы лабораторной диагностики
клещевого энцефалита.
Материал для исследования
Вирусологический метод
Кровь, ликвор больных, мозг умерших
Накопление вируса
Интрацеребральное заражение белых
мышей, куриные эмбрионы, культуры
клеток: фибробласты куриных эмбрионов
и клетки почек свиньи.
Идентификация
с
помощью
специфических сывороток в реакциях РН
на белых мышах, РИФ, РСК, РТГА.
Серологический метод
Выявление специфических антител в
парных сыворотках и титра Ig М у
недавно переболевших в РТГА, РСК.
Задание 2. В инфекционное отделение госпитализирован больной С., у которого
отмечается лихорадка, бред. В анамнезе: 10 дней назад больной находился в лесу,
собирал черемшу. Отмечает факт снятия с себя клещей, два из которых были
насосавшимися крови.
- Какое заболевание можно предположить?
- Какие методы можно использовать для диагностики этого заболевания?
- На каком основании можно поставить диагноз?
Задание 3. Больному К. по данным анамнеза и клиническим проявлениям
поставлен диагноз: «Клещевой энцефалит». Проведена серологическая диагностика.
Для этого с помощью РСК исследованы парные сыворотки.
Учтите результаты РСК, внесите их в таблицу 1. Оцените полученные результаты
и напишите заключение.
Таблица 1
1:50
1:100
1:200
1:400
1:800
1:1600
КА
КС
1-я сы
ворот.
2-я сы
ворот.
Заключение: В парных сыворотках больного титр антител увеличился 2 …… раза.
Клинический диагноз «клещевой энцефалит» подтвержден.
Задание 4. По таблице изучите препарат среза клеток аммонового рога с
тельцами Бабеша-Негри. Зарисуйте.
Подтверждение диагноза «бешенство» проводится после смерти животного или
человека при обнаружении телец Бабеша-Негри в нейронах головного и спинного
мозга.
В клетках слюнных желез, выявление вирусного антигена проводят с помощью
РИФ.
Задание 5. Гражданин С. три дня назад был укушен собакой. Распишите схему
лечебно-профилактических мероприятий.
Задание 6. Изучите лечебно-профилактические препараты.
Вакцина антирабическая культуральная инактивированная сухая. (РабивакВнуково-32).
Представляет собой культуру производственного штамма фиксированного вируса
бешенства Внуково-32, выращенного на первичной культуре клеток почек сирийского
хомячка, концентрированную и очищенную методом ультрафильтрации или
ультрацентрифугирования,
инактивиррованную
ультрафиолетовыми
Лиофилизированная.
Вакцина индуцирует выработку иммунитета против бешенства.
лучами.
Вакцина клещевого энцефалита культуральная инактивированная.
Применяют:
1.
Для профилактической вакцинации людей против клещевого энцефалита.
2.
Для вакцинации доноров с целью получения специфического
иммуноглобулина и иммунной плазмы.
Вакцина желтой лихорадки живая сухая.
Профилактика желтой лихорадки у лиц, постоянно проживающих в районах,
неблагоприятных по заболеваемости желтой лихорадкой. Вакцина стимулирует
выработку иммунитета к вирусу продолжительностью 10-15 лет
Иммуноглобулин человеческий жидкий против клещевого энцефалита.
Оказывает профилактическое и терапевтическое действие благодаря
нейтрализации вируса клещевого энцефалита, специфическими антителами.
Назначают для экстренной профилактики или лечения.
Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади жидкий.
Нейтрализует вирус бешенства, как in vitro, так и in vivo. Применяют в
комбинации с антирабической вакциной.