Токсикологическое состояние сыворотки крови рыб

УДК 574.64: 616.5
ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ
СЫВОРОТКИ КРОВИ РЫБ
Ф.Х. Тахтаев
Нижегородский госуниверситет
Применяемые в токсикологии органолептические, бактериологические и
химические методы для оценки влияния на организм животных и рыб веществ, вызывающих отравление (интоксикацию), не позволяют оценить физиологическое состояние живых организмов. Применение электрофоретического метода разделения белков сыворотки крови и оценка кристаллографической картины позволили выявить как физиологическое состояние организма рыб, так и диагностировать отравление.
В советское время, до начала 90-х годов, в рыбопромысловых водоемах наблюдались случаи массового заболевания, отравления и гибели рыб. В основном,
к причинам этих явлений относили загрязнение воды водоемов веществами антропогенного характера: тяжелыми металлами, нитратами, пестицидами, гербицидами, инсектицидами. Известно, что воздействие вышеупомянутыми токсическими соединениями сопровождается, как правило, развитием заболеваний живых
организмов.
В постсоветское время резко уменьшился уровень применения в сельском хозяйстве пестицидов, гербицидов, инсектицидов. Однако, согласно данным токсикологических лабораторий, уровень осаждения таких соединений, как гексахлорциклогексан, дихлордиметилтрихлорэтан может сохраняться в водоемах постоянным до 5 лет. В связи с вышеизложенным возник интерес к вопросу — как снижение загрязнения воды водоемов веществами антропогенного происхождения
влияет на токсикологическое состояние сыворотки крови рыб?
Материалы и методы. Исследования проводились на рыбе (карп), отловленной в рыбопромысловом водоеме «Борок» Нижегородской области в весеннелетний период, по общепринятой методике (Инструкция..., 1986). Токсические
изменения сыворотки крови рыб выявлялись по содержанию белка сыворотки
рефрактометрическим методом (Балаба и др., 1957), по содержанию и соотношению альбуминовых и глобулиновых фракций белка — электрофоретическим методом (Лукьяненко, 1967; Метелев и др., 1973), разделение белков осуществлялось на ацетатно-целлюлозной мембране «Владипор» МФЛ-МА № 4 (аппарат для
электрофореза ПИЭФ-01М). В качестве контроля использовалась сыворотка человеческой крови. Использовался также кристаллографический метод (Тахтаев,
Тахтаева 1998). Для оценки токсикологического состояния сыворотки крови было
взято 15 особей карпа средним весом 815±41.3 г, длиной 39.9±0.49 см., степенью
зрелости от 2 до 5, обоего пола. Кровь брали из хвостовой вены.
Результаты исследований. Определение уровня белка сыворотки крови карпа
показало величину 2.85±0.14 г%, что является показателем, близким к норме для
данного времени года (Сорвачев, 1957).
144
Белок сыворотки крови карпа состоит из следующих фракций: альбумины,
α1-, α2-, β1-, β2-, γ-глобулины. Определение (денситометрическое) соотношения
фракций показало резкий сдвиг в сторону увеличения грубодисперсных фракций
β1-, β2-глобулинов. Соотношение альбуминов и глобулинов, оцениваемое по коэффициенту А/Г, равно 0.309±0.042 и свидетельствует о сильном снижении содержания альбуминов и увеличении уровня глобулинов. Количество альбуминов
колеблется от 7.7 до 30.2% при норме по данным литературы (Лукьяненко, 1967;
Метелев и др., 1973) до 55%. Полученные данные о резком снижении альбуминовой фракции являются показателем нарушения функционального состояния печени, где осуществляется синтез альбуминов, а также осуществляются детоксикационные процессы.
Подтверждением отравления организма рыб служит также кристаллографическая картина сыворотки крови карпа. В качестве контроля к визуальной кристаллографии биологических объектов используются кристаллограммы чистого глицина, состоящие из мелких полиэдрических монокристаллов размерами 4–6 мм,
при отсутствии центров кристаллизации. При расшифровке кристаллограмм учитываются следующие показатели: число центров кристаллизации и их размеры,
характер лучей, их толщина, наличие вторичных центров кристаллизации, характер общего рисунка.
Анализ кристаллографической картины сыворотки крови карпа из водоема
«Борок» показал, что в поле зрения кристаллограмм присутствуют центры кристаллизации в форме фигур, имеющих конфигурацию «бахромы», «ожерелий»,
«листьев» с параллельными прожилками, размерами от 7 до 20 мм. На многих
кристаллограммах отмечено появление центров кристаллизации не из кристаллов,
а как бы «налета» на стекле, имеющих конфигурацию «паутинки». Большинство
кристаллограмм характеризуется присутствием кристаллов типа «параллелепипеда» полуаморфной формы длиной от 3 до 60 мм. Присутствуют также кристаллы
с конфигурацией скошенных квадратов, имеющих длину 5–6 мм и ширину до 5
мм. В поле зрения некоторых кристаллограмм обнаружены образования в форме
«глыбок» длиной 4–6 мм, шириной 2–3 мм и высотой до 2–3 мм. Анализируя картину кристаллографии по количеству центров кристаллизации, как наиболее отчетливому показателю интоксикации, можно отметить, что в поле зрения кристаллограмм сыворотки крови карпа из водоема «Борок» присутствуют от 4 до 9
центров кристаллизации, т. е. наблюдается явно выраженная интоксикация организма рыб чужеродными веществами.
На основании полученных данных можно прийти к заключению, что несмотря
на снижение применения в сельском хозяйстве пестицидов, гербицидов, инсектицидов в течение десятка лет, до настоящего времени в отдельных рыбопромысловых водоемах наблюдается отчетливо выраженный уровень отравления организма
рыб.
ЛИТЕРАТУРА
Балаба Т.Я., Гурьева И.П., Мешкова И.П. и др. Определение белка рефрактометрически // Практикум по биохимии для медвузов. М., 1957. С. 52–59.
Инструкция по физиолого-биохимическим анализам рыбы. М., 1986.
Лукьяненко В.И. Токсикология рыб. М., 1967.
145
Метелев В.В., Канаев А.И., Дзасохов И.Г. Водная токсикология. М., 1973.
Сорвачев К.Ф. Изменения белков сыворотки крови карпа во время зимовки // Биохимия. 1957. Т. 22, вып. 5. С. 872–878.
Тахтаев Ф.Х., Тахтаева Д.Ф. Патент № 2108580 Способ определения токсичности
крови рыб // Изобретения: Офиц. бюлл. 1998. № 10, ч. 11. С. 298.
146