ГЕМОПАРАЗИТАРНЫЕ БОЛЕЗНИ И СПЕЦИФИЧЕСКИЙ
реклама
ГЕМОПАРАЗИТАРНЫЕ БОЛЕЗНИ И СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ R. Masake и A. Musoke International Livestock Research Institute (ILRI), P.O. Box 30709, Nairobi, Kenya Оригинал на английском языке Резюме: по результатам исследования, проведенного Международным эпизоотическим бюро, посвященного распространению гемопаразитарных болезней в Странах-Членах, признано, что протозойные (трипанозомоз, тейлериоз, бабезиоз) и риккетсиозные (анаплазмоз, гидроперикардит и эрлихиоз) болезни приобрели важное экономическое значение. Все вышеперечисленные болезни привели к серьезным экономическим последствиям в странах, где проводилось исследование. Выживаемость этих паразитов обеспечивается сложностью их молекул и наличием антигенных вариантов. Специфический иммунный ответ на паразитов-возбудителей инфекции сложен, он проявляется не только на клеточном уровне иммунитета, но и на гуморальном уровне. При трипанозомозе рост паразита сдерживается главным образом ответами антител, зависящими от лимфоцитов T различных поверхностных гликопротеинов и, не исключено, от других молекул на поверхности паразитов. Клеточные иммунные ответы также проявляются на уровне иммунного подавления анти-лимфоцитов B. Помимо этого различные иммуномодулярные цитоцины производятся при проникновении инфекции. Исследования по тейлериозу продемонстрировали важность гуморальных реакций на спорозойное инфицирование; однако, на шизонтной стадии очистка паратизированных клеток зависит от цитотоксических лимфоцитов T. В случае с Babesia лимфоциты T являются главными элементами иммунозащиты. К настоящему времени мы не располагаем данными по борьбе с риккетсиозами при острых анаплазмозах. Однако было продемонстрировано, что поднабор лимфоцитов T является определяющим при имуннозащите. При инфицировании паразитами видов Ehrlichia и Cowdria развивается гипергаммаглобулинемия, при отсутствии прямой зависимости от иммунозащиты, что приводит к вовлечению клеток в механизмы иммунной защиты. В настоящем исследовании обозревается состояние научных знаний касательно специфических иммунных ответов при гемопаразитарных болезнях и приводится обильная информация по трем протозоазам. Однако, данные, касающиеся специфических иммунных ответов на инфекции, вызываемые Ricksettia, являются далеко не полными. 1. ВВЕДЕНИЕ Гемопаразитарные болезни являются серьзной помехой развитию животноводства во многих развивающихся странах, в частности в регионе африканской Сахары. Эти патологии вызваны наличием Protozoa и Ricksettia, переносимыми различными способами. Протозоазами, представляющими особую важность в отношении животных, являются: трипанозомоз, тейлериоз и бабезиоз, а наиболее широко распространен трипанозомоз (см. Таблицу 1). Эти протозоазы встречаются в 49 Странах-Членах МЭБ, расположенных в Латинской Америке, Африке, на Среднем Востоке, в Южной Европе и Азии, из числа 59 стран, заполнивших вопросник по гемопаразитарным болезням (см. Таблицу 1). Важно отметить, что трипанозомы Babesia и Theileria имеют сложные биоциклы. Каждая стадия их развития может содержать набор антигенов, требующих особого типа иммунного ответа. Бедность иммуногенных реакций антигенов препятствует защите хозяина от протозоазов и антигенных вариаций. Кроме того, иммунный ответ на определенной стадии развития может не совпадать с защитой на последующих стадиях. Инфекции Ricksettia представляют острейшую проблему в африканской Сахаре и в несколько меньшей степени - в Азии и Европе. Риккетсиозами, имеющими наибольшую экономическою важность являются: анаплазмоз, гидроперикардит и эрлихиоз. Эти болезни встречаются в 36 из 59 вышеупомянутых стран. Иммунный ответ на эти организмы происходит с привлечением как гуморальной, так и клеточной иммунный систем. Исследования по гидроперикардиту позволяют думать, что клеточный иммунный ответ играет главнейшую роль. - 73 - Рассмотрим современное состояние научных знаний касательно иммунных специфических реакций на трипанозомы Theileria, Babesia, Anaplasma, Cowdria и Ehrlichia, в частности - у жвачных. 2. ТРИПАНОЗОМОЗ Трипанозомоз наносит значительный урон животноводству африканской Сахары (40) и в несколько меньшей степени - Латинской Америки и Азии. Географическое распространение заболевания находится в зависимости от наличия мух цеце и жалящих мух. Трипанозомозы, передаваемые через муху цеце, зарегистрированы в 39 странах Сахары (см. Таблицу 1). Трипанозомозы, непередаваемые через муху цеце, присутствуют в Латинской Америке, на Среднем Востоке, в Азии, Восточной Европе и, в несколько меньшей степени - в Африке (см. Таблицу 1). Встречаются также паразиты, передаваемые механическим путем, особенно с тех странах, где существуют трипанозомы, передаваемые мухой цеце. Среди них наибольшую важность, как зоонозы имеют Trypanosoma congolense, T. vivax и T. brucei для крупного рогатого скота, овец и коз и T. simiae для свиней. Наиболее важными видами патогенных трипанозом, живущих вне пояса распространения мухи цеце, являются T. vivax и T. evansi, которые передаются механически жалящими мухами а также виды T. equiperdum и Trypanosoma evansi, передающиеся половым способом. Trypanosoma evansi вызывает зоонозы у лошадей, верблюдов, свиней, буйволов и крс, в то время как T. equiperdum поражает лошадей и ослов. 2.1. Гуморальный иммунитет Трипанозомы вызывают болезни, сопровождающиеся различными симптомами в зависимости от инфицированного хозяина, вида трипанозомы и серодэмы. Обычно трипанозомозы характеризуются гипертермией, анемией, кахексией, снижением продуктивности и бесплодием; в том случае, когда животное не подвергается лечению, оно умирает от сердечной недостаточности или вследствие какойлибо оппортунистической инфекции. Зараженные животные имеют тенденцию показывать нестабильную постоянную паразитемию, в том числе серию трипанозомных волн, говорящих о присутствии различных поверхностных гликопротеинов (VSG) (7, 76). При таком виде паразитемии хозяин подвергается воздействию серии поверхностных антигенов, весьма различных по своей антигенетичности. Гены VSG кодируют семейство протеинов, которые показывают значительную гетерогенетичность в элементах N, в то время как в элементах C схожесть достаточно велика (56, 65). Элемент C ковалентно связан с димиристил-фосфатидилиноситолом, что обеспечивает его закрепление на мембране (17). Разделение фосфатидилиноситола вариантного поверхностного антигена (VSG) эндогенной фосфолипазой C приводит к последующей экспозиции эпитопным криптическим детерминантом, характеризующимся перекрестными реакциями и частью состоящим из терминального фосфорического инозитола (65). Показано, что хозяин дает гуморальный иммунный ответ как в элементах N, так и C генов VSG. Антитела, направленные против элементов N, являются характерными для VSG и несут ответственность за устранение паразитов, располагающихся на поверхности VSG. Эти паразиты удаляются опсонизацией макрофагами (75). Несмотря на эффективность активных специфических антител поверхностных антигенов, полному удалению трипанозом мешает стремительное появление таких, которые обладают отличными поверхностными антигенами, и при встрече с которыми хозяин не показывает иммунной реакции. Устойчивость циркулирующих паразитов приводит к постоянному стимулированию иммунной системы хозяина, что демонстрируются заметным увеличением размеров и деятельности герминативных центров, сопровождаемое повышением числа лимфоцитов, размножающихся в медулярных шнурах, в паракортексе лимфатических узлов и в перартериальных областях, а также в периферических фолликулярных зонах селезенки (33). Несмотря на очевидность, повышенная стимуляция органов, в которых сосредоточены иммунные реакции, повышенные уровни иммуноглобулинов IgM и IgG, вызванные африканским трипанозомозом, являются специфическими для «штамма»/серодермы, вызывающих инфекцию, учитывая тот факт, что трипанозомы-переносчики инфекции могут абсорбировать от 85 до 100% производимых иммуноглобулинов (45). Иммунные ответы на инвариантные антигены прочих, помимо VSG, генов также возникают при инфекции трипанозомозом (4). Даже если эти ответы не имеют никакой связи с борьбой с паразитемией, было установлено, что ответ с преобладанием IgG на цистеин-протеазе, протеин термического шока (hsp 70/BIP) и криптический эпитоп VSG могут быть связаны с толерантностью к трипанозомным инфекциям (3). Это заставляет предполагать, что инвариантные антигены могут играть роль в модуляции инфекции. - 74 - Таблица 1: Страны-Члены МЭБ, сообщившие о гемопаразитарных болезнях Страны Trypanosomosis Theileriosis Babesiosis Anaplasmosis Cowdriosis Алжир T. evansi T. annulata Babesia spp. Anaplasma spp. Ангола T. brucei T. congolense T. vivax Аргентина T. evansi T. theileri B. bovis A. marginale B. bigemia B. bovis A. marginale Австралия T. buffeli Австрия Babesia spp. Бельгия Babesia spp. Бенин T. brucei T. congolense T. vivax T. mutans B. Bovis A. marginale T. sergenti B. ovis Anaplasma spp. B. bigemina B. bovis B. equi A. marginale Коста-Рика Babesia spp. Anaplasma spp. Хорватия B. canis Куба B. bigemina B. bovis Дания B. divergens Болгария Колумбия T. evansi T. vivax Эквадор T. evansi Египет T. evansi T. equiperdium Эритрея T. vivax T. evansi T. annulata T. ovis Anaplasma spp. B. bovis B. ovis B. equi A. marginale A. centrale Babesia spp. Anaplasma spp. Babesia spp. Финляндия B. divergens Габон C. ruminantium E. phagocytophila Anaplasma spp. T. congolense T. vivax Германия Индонезия C. ruminantium A. marginale Babesia spp. Эстония Ehrlichiosis T. evansi Ирландия B. major B. divergens Anaplasma spp. Babesia spp. Anaplasma spp. B. divergens Япония T. sergenti B. ovata Иордания T. ovis B. ovis B. equi B. motasi - 75 - Anaplasma spp. E. ovis Таблица 1: Страны-Члены МЭБ, сообщившие о гемопаразитарных болезнях (продолжение) Страны Trypanosomosis Theileriosis Babesiosis Кения T. brucei T. congolense T. vivax T. evansi T. parva B. bigemina B. bovis A. marginale A. centrale A. ovis Республика Корея T. sergenti B. gibsoni B. ovata A. marginale Латвия Anaplasmosis Cowdriosis C. ruminantium Ehrlichiosis E. ondivi Babesia spp. Ливия T. evansi Малайзия Марокко T. evansi Babesia spp. T. orientalis B. bovis A. marginale A. centrale T. annulata B. bigemina B. equi B. cabali A. marginale E. canis Молдавия Ehrlichia spp. Намибия T. congolense T. vivax Новая Каледония Babesia spp. Anaplasma spp. T. orientalis Нидерланды T. theileri Норвегия Оман T. evansi Парагвай T. evansi B. divergens B. canis E. phagocytophila E. canis B. divergens E. phagocytophila T. annulata B. bigemina Anaplasma spp. B. bovis B. equi Катар T. evansi Россия Сенегал T. brucei T. congolense T. vivax T. evansi Южная Африка T. brucei T. congolense T. vivax T. equiperdium T. annulata B. equi T. annulata B equi T. mutans T. parva T. taurotragi T. velifera A. marginale Babesia spp. Anaplasma spp. C. ruminantium B. bigemina B. bovis B. equi A. marginale C. ruminantium A. centrale A. ovis Ehrlichia spp. Швеция B. divergens B. motasi Ehrlichia spp. Швейцария B. equi Ehrlichia spp. Таиланд T. evansi Theileria spp. Babesia spp. Anaplasma spp. Тунис T. annulata Babesia spp. Anaplasma spp. Турция T. annulata B. bigemina B. bovis B. ovis Таблица 1: Страны-Члены МЭБ, сообщившие о гемопаразитарных болезнях (продолжение) Страны Trypanosomosis Theileriosis Babesiosis - 76 - Anaplasmosis Cowdriosis Ehrlichiosis Уганда T. parva B. bigemina A. marginale Украина Babesia spp. Anaplasma spp. Соединенное Королевство Babesia spp. Вьетнам T. evansi T. mutans B. bigemina B. bovis A. marginale Зимбабве T. brucei T. congolense T. vivax T. parva B. bigemina B. bovis A. marginale 2.2. C. ruminantium C. ruminantium E. bovis Опосредованно клеточный иммунитет Африканский трипанозомоз, и в несколько меньшей степени - инфекция домашних буйволов T. evansi связаны с глубоким подавлением иммунных реакций хозяина на генетерологические антигены, появляющиеся по закреплению инфекции (5, 61, 62). Выяснено, что лимфоциты B являются одной из целей иммунодепрессии, о чем говорит заметное снижение реакций IgG1 и IgG2 животных после вакцинации на Brucella abortus (61). Однако известно и то, что иммунодепрессия, возникающая при трипанозомозе варьирует в зависимости от штамма паразита и породы животного. У мышей иммунодепрессия объяснялась поликлональной активацией (75). Такая поликлональная активация связывалась с появлением антител посторонних антигенов, c повышением концентрации IgG в серуме, с массовыми ответами плазменных клеток в лимфатических узлах и селезенке и с относительным снижением специфических иммунных реакций на вакцины (24). При исследовании причин иммунодепрессии была четко установлена роль, которую играют макрофаги. Действительно, удаление клеток, выражающих Mac-1 (макрофаги, ряды лимфоцитов B CD5+ и гранулоциты) в культуре in vitro клеток лимфатических узлов приводило к 100% восстановлению реакций пролиферации, в то время как исчезновение фракции Thy-1+ (лимфоциты T) не приводило к такой пролиферации (68). Влияние рядов макрофагов на иммунодепрессию было ранее доказано (Borowy и др. (8)), когда авторы уничтожили иммунодепрессию у мышей путем обработки сложным метиловым эфиром L-лейцина. Кроме того, добавка в культуры клеток селезенки инфицированных мышей клеток здоровых мышей, восстанавливала пролиферационную деятельность (22, 23). Взаимодействие активных макрофагов и трипанозом и лимфоцитов T приводит к повышению регуляции секереции IFN-γ лимфоцитами T CD8+, сопровождаемому последующим подавлением выражения IL-2R на лимфоциты T CD8+et CD4+. Такой эффект может быть аннулирован протеином 40-45 kDa, содержащимся в T. brucei brucei (49, 50). Помимо иммунных реакций модулированных у крс-хозяина, активированные макрофаги могут также играть ключевую роль в подавлении эритроцитов окруженных иммуноглобулинами, и приводить к искажению поверхностных мембран. Эритрофагоцитоз активированными макрофагами может представлять собой главную причину экстраваскулярной анемии (43). Помимо этого, макрофаги являются фактором опухолевого некроза (TNF α) секреция которого наблюдалась при инфекциях T. vivax, при которых были выявлены очевидные эритрофагоцитоз и жестокая анемия (69). Доказано, что иммунные ответы клеток играют роль в устойчивости к трипанозомозу мышей, однако еще не совсем ясно, является ли их функция аналогичной при трипанозомозе крс. У зараженных трипанозомозом животных наблюдается повышение числа клеток CD8+ и γδT, в то время как число лимфоцитов CD2+ и CD4+ снижается (29). И хотя наблюдается увеличение числа лимфоцитов CD8+ при инфекциях трипанозомозом, по последним данным, полученным по проведению фагоцитации поднабора клеток, никакого модуляционного эффекта не наблюдается на уровне паразитемии и анемии. Лимфоциты производят различные цитокины, которые, когда они связаны со специфическими рецепторами на поверхности клеток, приводят к модуляции роста, дифференциации и функции клеток, несущих рецепторы. В случае инфицирования IL- 2 и IFN-γ секрецируются пролиферативными клетками лимфатических узлов (28, 67, 68). Известно, что IFN-γ стимулирует деятельность макрофагов и способствует поверхностному выражению классов I и II MHC в различных типах клеток. Роль IFN-γ в иммунитете к трипанозомозу крс остается невыясненной. - 77 - Эти наблюдения заставляют думать, что наступило время определить молекулы, которые отвечают за индукцию имуннозащитных реакций. Идентификация этих молекул помогла бы продвинуться в разработке эффективной вакцины против трипанозомоза. 3. ТЕЙЛЕРИОЗ Тейлериоз относится к группе гемопаразитарных болезней, имеющих чрезвычайную важность для животных, имеющих весьма различные клинические проявления - от субклинической формы до смертельного зооноза, что зависит, с одной стороны, от вида животного, хозяина, его возраста, а с другой стороны - типа организма. Тейлериоз очень широко распространен в тропических и субтропических зонах под названием «East Coast Fever» (Theileria parva) (восточнобережная лихорадка), или «Corridor disease» (T. lawrencei) (корридорная болезнь), или тропический тейлериоз крс (средиземноморский) (T. annulata) он же - «Mediterranean Coast Fever». Восточнобережная лихорадка наносит значительный экономический урон в странах Восточной, Центральной и Южной Африки, исчисляемый 168 млн ам.долл. в год (42). Тропический тейлериоз распространен гораздо шире - от Северной Африки до Китая. Не располагая свежими статистическими данными по потерям, вызываемым этим зоонозом, мы можем оценить их в 200 млн голов крс, находящихся под угрозой заболевания. Два паразита: T. parva и T. annulata вызывают болезнь при которой происходит пролиферация зараженной лимфы, характеризующаяся гипертермией, гипертрофией лимфатических узлов, петехиальными кровотечениями, напоминающими слизистые, наблюдается респираторная недостаточность, нередко провоцирующая смерть животного. А инфекции, вызываемые T. annulata, сопровождаются также эритродеструкцией. Паразиты Theileria передаются иксодовыми клещами (Rhipicephalus, Hyalomá и Haemophysalis), имеющими половой цикл, при котором производятся спорозоиты, инфицирующие лимфоциты жвачных. У крс спорозоиты вторгаются в лимфоциты, развиваются до шизонтов, а затем мерозоитов, которые уже инфицируют эритроциты. В острой форме смерть наступает на макрошизонтной стадии инфекции, в первую очередь, по причине уничтожения лимфоцитов. 3.1. Theileria parva: гуморальный иммунитет Иммунизация против инфекции T. parva осложняется существованием паразитов в двух типах клеток хозяев и антигенной сложностью паразита. Инфекция T. parva вызывает явную реакцию против поверхностных антигенов спорозоитов, макрошизонтов и пироплазмозов. Антитела, направленные против поверхностных антигенов и, в частности - против молекулы 67 kDa, способны нейтрализовать инфекционный характер спорозоитов, которыми становятся лимфоциты (46). Данное наблюдение позволило выбрать протеин 67 kDa (p67) в качестве исходящего для производства подунитарной вакцины против T. parva (44). Достаточно легко обнаружить антитела, направленные против шизонтов, у животных, подвергшихся вакцинации или инфицированию, эти антитела теряют эффективность на паразитарной стадии по причине ее внутриклеточного положения. Действительно, еще не доказано, что антишизонтные антитела узнают специфические антигены паразитов на поверхности инфицированных клеток (12). Представляется, что как только паразит устанавливается в лимфоцитах, гуморальные иммунные ответы не реагируют на поверхность мононуклеарных клеток, подвергшихся паразитированию (12). Данное наблюдение заставляет думать, что антитела не обязательно выполняют основную роль в фагоцитации инцифированных клеток. Помимо этого, попытки защиты крс путем переливания иммунизированного серума оказались неудачными (41). 3.2. Theileria parva: опосредованно клеточный иммунитет Вышеупомянутые наблюдения заставляют думать, что антишизонтный иммунитет свидетельствует о механизме клеточного опосредствования. Эта гипотеза поддерживается исследованиями по адоптивной передаче на животных-близнецах, из которых следует, что пересаженные клетки иммунизированного крс незараженному животному защищают его от первичной инфекции T. parva (16, 36). Эксперименты, проведенные in vitro (Pearson и др.) (53), показали, что периферические мононуклеарные кровяные клетки (PBM) иммунизированного крс пролифирируют в направлении аутологичных паратизированных облученных лимфобластов, и что, к тому же, некая пропорция таких клеток, произведенных в результате реакции, посредствовала цитотоксической деятельности, интенсивно направленной скорее против аутологичных инфицированных клеток, нежели против их аллогенов. Данное первое наблюдение заставляет думать, что инфицирование лимфоцитов-хозяев T. parva вызывает изменения антигенов на поверхности клеток, вызывая клеточно опосредованные ответы. Неоднократно стимулируя иммунный PBM аутологичными инфицированными лимфобластами эффекторные клетки оказывались обогащенными специфическими лимфобластами T паразитов. Было - 78 - доказано - по результатам исследований по блокаде моноклональных антител, что все эти эффекторные клетки, и в частности - лимфобласты T CD4+ и CD8+, ограничены генетическими продуктами последовательно I и II классов (6, 19). Лимфобласты T CD8+ T содействуютцитотоксической активности, направленной на цели типа соответствующего MHC1, большинство клетокT CD4+ T являются нелитическими. Анализ штаммов лимфобластов T, полученных от вакцинированного различными штаммами паразитов крс, наталкивает на мысль о существовании специфических лимфобластов Т штаммов с проведением перекрестных реакций. (6, 19, 39). Такие перекрестные реакции могут быть индуцированы эпитопами, сохраняющимися среди штаммов паразитов, или же быть связаны с наличием других составляющих, некоторые из которых являются идентичными для разных штаммов паразитов. Theileria parva подвергает иммунную систему крс большим испытаниям, что связано со сложностью ее гетерогенных штаммов. В числе характеристик этой антигенной сложности следует отметить то, что перекрестная иммунная защита обычно не является взаимной между штаммами, и защищенными оказывается только часть животных. Исследовались основные параметры, определяющие специфичность штаммов иммунных ответов цитотоксического лимфоцита T (CTL). При этом использовались популяции паразитов, полученные клонированием, для иммунизации крс, отвечающего на различные гаплотипы (71). Эти исследования достаточно четко показали, что клетки, инфицированные T. parva, продуцируют эпитопы двух типов, являющихся специфическими для штамма, и приводят к перекрестным реакциям. Однако, одни из них являются иммунодоминантными по сравнению с другими - в зависимости от ограничительного элемента и паразита, вызывающего иммунитет. Это было очевидным у животных, давших специфические реакции CTL штамма при первичной иммунизации, в то время как их CTL давали перекрестные реакции при гетерологичной стимуляции. Выводы, которые можно сделать из этих наблюдений, важны с точки зрения концепции подунитарной вакцины против T. parva. Одно из главных препятствий при иммунитете к T. parva, требующем привлечения лимфоцита T, связано с присущей ей специфичностью к штаммам. Можно предполагать, что это препятствие будет преодолено путем отбора антигена паразитов, содержащего эпитопы, дающие перекрестные реакции. В настоящее время усилия прикладываются в основном к поиску шизонтных антигенов, выступающих как цель цитотоксических лимфоцитов T. Другое важное замечание при разработке вакцины на основе CTL касается определения основных факторов индукции CTL в антигены некоторых паразитов. Недавние исследования показали, что индукция специфических лимфоцитов T CD8+ того или иного паразита требует, чтобы специфические лимфоциты T CD4+ антигенов подавали сигналы о помощи (Taracha и McKeever, личное сообщ.). Ведутся исследования по определению точного характера такой "помощи" и разработки стратегии производства антигена, отвечающего требованиям при интродукции специфических CTL паразитов. 3.3. Theileria annulata: гуморальный иммунитет Иммунный ответ на T. annulata аналогичен вышеописанному ответу на T. parva. Иммунные гуморальные реакции продуцируются при инфицировании T. annulata. Его антитела распознают спорозоитные поверхностные эпитопы, и установлено, что они блокируют инвазию мононуклеарных клеток спорозоитами, а затем подавляют трансформацию инфицированных клеток (21, 80). Усилия по обнаружению антител, направленных на поверхностные молекулы шизонтов, пироплазмы и поверхностные клетки мононуклеарных клеток и инфицированных эритроцитов, оказались безуспешными (66). Как и в случае с T. parva, роль, которую играют антитела в иммунной защите, ограничивается, скорее всего, лишь нейтрализацией спорозоитов. 3.4. Theileria annulata: опосредованно клеточный иммунитет В отличие от T. parva, которая инфицирует в первую очередь лимфобласты T, T. annulata инифицирует клетки B. По всей вероятности этим можно объяснить ряд отличий, которые могут возникнуть при иммунном ответе клеток хозяина обоих паразитов. Проведенные к настоящему времени исследования по опосредованно клеточному иммунитету к T. annulata, с очевидностью показали производство лимфоцитов T при первичной и вторичной инфекциях (55). Кроме того, эти CTL способны лизировать инфицированные лимфоциты, снижая MHC-class1. Вторая группа цитотоксических лимфобластов неMHC class1 (ограниченно) проявляется также; однако, как полагают, это связано с натуральными фаговыми клетками (70). Более того, работы Preston и Brown (54) с очевидностью доказали профилактическую роль макрофагов при борьбе с размножением паразитов в крови, благодаря производству цитокинов, оказывающих мощное цитостатическое воздействие на штаммы инфицированных шизонтами клеток. Последние данные по опосредованному клеточному иммунитету подтверждают участие CTL и макрофагов в иммунной защите. Следует продолжать исследования в 1 Major Histocompatibility Complex - 79 - целях выяснения механизма(ов), способных принять участие в фагоцитации инфицированных шизонтами клеток. Требуется идентификация защитных антигенов, которые могут быть использованы в разработке подунитарной вакцины против T. annulata. 4. БАБЕЗИОЗ Бабезиоз является протозоозом рогатого скота, передающимся клещами вида Babesia. Паразиты Babesia передаются такими клещами как Boophilus и Dermacentor. Клещи приобретают паразитов, жаля хозяина. У клещей гаметоциты, произведенные в эритроцитах, образуют зиготы, которые, пройдя дифференцировку, становятся оокинетами. Оокинеты проникают в висцеральный эпителиум и приводят к спорогонии, которая, в свою очередь, вызывает производство сначала спорокинет, а затем - спорозоитов в слюнных железах. Спорозоиты становятся заразными для инфективных эритроцитов жвачных, как только они проникают в кровообращение при 37oC. Проникшие в эритроциты спорозоиты образуют трофозоиты, которые затем превращаются в мерозоитов, после чего - гаметы, являющиеся заразными для клещей. Паразиты обычно имеют вид грушевидных организмов, соединенных попарно своими узкими концами в эритроцитах. Паразиты Babesia различаются своей вирулентностью по отношению к хозяину. В некоторых случаях эта вирулентность связана с географическим происхождением переносчика. Так, Babesia bigemina австралийского происхождения провоцирует доброкачественные клинические проявления, в то время как южно-африканские штаммы весьма вирулентны и провоцируют подострые и острые эпизоды. Подострые случаи вызывают тяжелую анемию, а острые - заканчиваются смертельной желтухой, острые эпизоды сопровождаются сильной гипертермией гемоглобинурией, за которой следуют анемия и желтуха (27). Таким же образом Babesia bovis вызывает вирулентную форму бабезиоза крс, которой присущи гипертермия, анемия, анорексия, кахексия, слабая паразитемия, общие нарушения циркуляции, которые нередко приводят к повышенному уровню смертности у скота, ранее не подвергавшегося заражению. В отличие от того, что провоцируется B. bigemina, паразитированные эритроциты оказываются запертыми в микрососудах мозга и легких, что приводит к церебральному бабезиозу и подавлению (81). Это связывают с перепроизводством окисла азота и воспалительных цитокинов, таких как фактор альфа опухолевого некроза (TNF-α) и гаммаинтерферон (IFN-γ) при реакции на инфекцию (82). Babesia divergens вызывает бабезиоз у крс в Европе; он сопровождается сходными с B. bovis клиническими проявлениями. Babesia equi вызывает серьезное заболевание у лошадей, характеризующееся гипертермией, анемией, желтухой, гемоглубинурией. Babesia equi, в отличие от других видов Babesia, производится в лимфоцитах, производящих шизонтов (63). На последующих стадиях инвазируются эритроциты. С этой точки зрения B. equi сходна с Theileria. 4.1. Гуморальный иммунитет Инфекция Babesia spp. стимулирует производство антител. Специфические изотипы IgM и IgG1,2 Babesia производятся одновременно, а IgG требует большего времени. Специфические антитела Babesia, направленные против поверхностных протеинов на стадии эритроцитов, принимают участие в опсонизации паратизированных эритроцитов (34). Углубленные исследования, проведенные на лошадях, у которых наблюдался комбинированный нормальный и тяжелый иммунодефицит (SCID), с очевидностью показали, что антитела принимают активное участие в борьбе с паразитемией (25). Это подтверждает наблюдения Mahoney и колл. (32), согласно которым у телят, подвергшихся ампутации селезенки, будучи инфицированными за четыре дня до этого, паразитемия оказалась заметно сниженной гипериммунным серумом B. bovis, перенесенным пассивным путем или путем смешивания IgG1 и IgG2. Реакция наблюдалась только у телят, подвергшихся воздействию гомологичных штаммов Babesia. Уменьшение паразитемии влечет опосредование опсонизацией, за которой следует уничтожение свободных паразитов и инфицированных эритроцитов с использованием при этом, механизмов цитотоксических клеток, содержащих антитела (20). 4.2. Опосредованно клеточный иммунитет К настоящему времени защитная роль специфических лимфобластов T Babesia еще не доказана в отношении крс; однако, исследования, проведенные на мышах с очевидностью показали, что лимфобласты T CD4+ и активизированные макрофаги являются основными при защите от паразитов B. microti (59, 60). Обычно инфекция B. microti уничтожается производством TNF-α, TNF-ß и IFN-α, которые активируют нейтрофилы и макрофаги, что приводит к активации фагоцитоза. Brown и коллеги показали (9) реактивность лимфоцитов T крс, взятых у животных, которые обладают иммунитетом к B. bovis, у которых наличествует антиген анти-Babesia и присутствуют сросшиеся клетки. С определенной точки зрения, это позволяет заметить схожесть между схемами реактивности лимфобластов T у мышей и крс. В заключении, укажем, что имеются данные, что лимфобласты T причастны к иммунной защите косвенным посредством вспомогательных клеток, которые включают ответ антител в анамнезе и - 80 - выступают в качестве клеток, стимулирующих фагоцитоз Babesia макрофагами. Требуется проведение новых работ в целях точного определения роли лимфобластов T и антител при бабезиозе крс и лошадей. 5. АНАПЛАЗМОЗ Анаплазмоз является риккетсиозным зоонозом, передаваемым членистоногими, он широко распространен у крс, овец и коз. У крс болезнь вызывается Anaplasma marginale и A. centrale. Инфекцирование A. marginale характеризуется тяжелой анемией, кахексией, абортированием и смертью (1), в то время как инфекция A. centrale приводит к доброкачественной субклинической патологии. Можно различать Anaplasma marginale и A. centrale по их локализации и характеристикам организмов, оказавшихся запертыми в эритроцитах (58). Anaplasma marginale передается скоту либо циклически, либо механически клещами типа Boophilus и Dermacentor и жалящими мухами (cf.1), соответственно. Паразит содержится в эпителиальной и мускульной тканях среднего кишечника и проходит сложный путь развития, в который включается размножение бинарным делением больших сетчатых форм, порождающих плотные организмы (26). Затем паразиты проникают в слюнные железы, в которых в процессе созревания они производят формы, заразные для крс. Показано, что инфекция, установившаяся в кишечных мускулах и слюнных железах мужского Dermacentor, очень устойчива и служит резервуаром анаплазмоза. При заразной Anaplasma первичные организмы, проникнув в систему кровообращения жвачных, попадают в эритроциты путем инвагинации цитоплазмозной мембраны с последующим образованием вакуолей. Инфекционные формы размножаются бинарным делением, при котором сначала производится примерно 16 организмов, их можно часто наблюдать на острых стадиях патологии. Число паразитированных эритроцитов снижается при переходе заболевания в хроническую форму. 5.1. Гуморальный иммунитет Инициальные интраэритроцитарные организмы вызывают структурные и биохимические изменения плазменной мембраны эритроцитов. Эритроциты, модифицированные таким образом вызывают образование аутогенных антител, которые в свою очередь, стимулируют эритрофагоцитоз (18, 38). Palmer и McGuire (52) показали, что помимо аутоантител, эритроциты также продуцируют активные антитела против антигенов A. marginale; авторы идентифицировали шесть полипептидов внешней мембраны (47). Этими антигенами, в частности, являются MSP-1a, MSP-1b, MSP-2, MSP-3, MSP-4 и MSP-5. Исследования, проведенные к настоящему времени, четко доказывают, что при анаплазмозе наблюдается иммунная интервенция антител. Так, показано in vitro, что антитела анти-MSP-1 способствуют фагоцитозу A. marginale макрофагами крс (11) и что, точнее - они блокируют связь паразита с эритроцитами крс (35, 47). Механизмы действий антител могут иметь различную природу: провоцировать смерть либо напрямую, либо опосредованно, взаимодействовать со связями и внедрением в эритроциты инициальных организмов, прибегать к опсонизации антителами или же в виде клеточной цитотоксичности иммунного происхождения. Если полипептиды MSP в натуральном виде могут вызывать достаточную иммунную реакцию и обеспечить иммунную защиту крс (51), то результаты иммунной защиты рекомбинированными антигенами на основе тех же полипептидов оказались недостаточного четкими. Из этого следует, что изменения, возникающие на стадии пост-передачи для продуцирования эпитопов, являются необходимыми при иммунной защите. 6. ГИДРОПЕРИКАРДИТ Гидроперикардит является риккетсиозным зоонозом крс, овец и коз, вызываемым Cowdria ruminantium и передаваемым клещами типа Amblyomma. Гидроперикардит эндемичен в африканской Сахаре и на Антильских островах. Патология, являющаяся в ряде случаев подострой, характеризуется сильной гипертермией, асцитами, гидротораксом и проявлениями на уровне центральной нервной системы. Эволюция этих симптомов зависит от тяжести болезни. Инфицирование Cowdria ruminantium таких диких животных как busnbuck (Tragelaphus scriptus), черной гну (Connochaetes gnou) и спрингбока (Antidorcas marsupialis) часто вызывает субклиническую патологию. Недавно (в 1996 году) МЭБ опубликовал обзор по гидроперикардиту: Camus E., Barré N., Martínez D. and Uilenberg G. (1996).- Heartwater (Cowdriosis): A Review, 2-ое изд.. ISBN 92-9044-376-6. 6.1. Гуморальный иммунитет Показано, что инфекция C. ruminatium вызывает иммунный ответ - гуморальный и клеточный одновременно. Антитела возникают через две недели после инфицирования и при отсутствии новой провокации сохраняются в течение различных сроков: от восьми до тридцати недель (64). Длительность персистенции может быть связана со слабой стимуляцией, за которой следует перемежающаяся паразитемия у животных (2). Хотя антитела способны нейтрализовать инфективность C. ruminantium in - 81 - vitro, переливание иммунyого серума животным, которые никогда ранее не были больны, не дает им никакой защиты. Это может быть связано с тем фактом, что Cowdria ruminatium, являющаяся интраклеточным возбудителем и находящаяся в эндотелиальных клетках сосудов, нейтрофилы и макрофаги, требует для своего уничтожения клеточных иммунных ответов. Хотя специфические антитела, произведенные в результате иммунизации, не обеспечивают никакой иммунной защиты, они, однако, могут влиять на тяжесть инфекции путем блокирования клеток эндотелиума in vivo и инвазии этих клеток (10). 6.2. Опосредованно клеточный иммунитет Первые работы Uilenberg (74) заставляют думать, что иммунная защита против C. ruminantium была исключительно клеточной. Данная гипотеза поддерживается результатами, полученными после перемещения Lyt-2+ T лимфоцитов (эквивалент лимфоцитов CD8+) иммунизированных мышей восприимчивым мышам, что привело к проявлению у них резистенции к инфекции C. ruminantium (15). Со своей стороны, Tottй и колл. (72) показали, что интерферон альфа (IFN-α), продуцируемый макрофагами, моноцитами и активированными лимфоцитами T, значительно задерживает размножение C. ruminantium в эндотелиальных клетках сосудов. Помимо этого, было установлено, что крс естественно резистентный к инфекции C. Ruminantium, производил IFN-α (72). Mahan и колл. (31) показали возможность торможения размножения C. ruminantium с помощью поверхностной жидкости, полученной на культурах, стимулированных конканавалином A. Mahan и колл. (30) показали, что блокирующие антитела, продуцированные против IFN-γ, аннулировали ингибиторное действие на размножению C. ruminantium, вызываемое поверхностной жидкостью конкавалина A. Эти результаты были еще раз доказаны Tottй и колл. (73), которые использовали IFN-γ, продукт лимфоцитов T и NKклетки в целях блокирования пролиферации C. ruminantium и придания клеткам-хозяевам невосприимчивости к репликации C. ruminantium. В отличие от того, что происходит у мышей, ингибиторное действие цитокинов не связано с продуцированием оксида азота (30). Имеется информация, что требуется проведение углубленных исследований касательно специфических иммунных ответов на C. ruminantium в целях более точного определения роли лимфоцитов T CD4+ и CD8+. Еще более важной является необходимость разработки противогидроперикардитной вакцины и идентификации антигенов/эпитопов иммунных ответов. 7. ЭРЛИХИОЗ Эрлихиоз, вызываемый риккетсиазными организмами, поражает не только разных животных - собак, лошадей, крс и овец, но и человека. Заражение человека Ehrlichia chaffeensis выражается цефалгиями, миалгиями, анорексией, тошнотой, рвотой, ознобом, иногда эритемами. Эта инфекция сопровождается нередко лейкопенией и тромбоцитопенией, при ней наблюдаются повышенные значения ACT и AST 14). E. chaffeensis очень близок E. canis, который является возбудителем собачьего эрлихиоза - болезни, представляющей важную проблему здравоохранения собак, в особенности чистопородных, например, эльзасских овчарок (48). Патология распространена в тропических и субтропических областях мира, где она переносится коричневыми клещами Rhipicephalus sanguineus. Симптомы являются очень различными: от тропической благополучной до жестокой панситопении. Наиболее часто наблюдаемыми клиническими признаками являются повышенная гипертермия, лейкопения и тромбоцитопения, гипертрофия лимфатических узлов, кахексия, пневмония, ламинит, отек лап и мошонки, рвота, коньюнктивит и помутнение роговицы. Перед смертью наблюдаются значительные кровоизлияния. Моноцитный эрлихиоз лошадей (EME) вызывается Ehrlichia risticii. Проявлениями заболевания являются: лейкопения, гипертермия, анорексия, диарея, колики, ламинит, которые у трети пораженных лошадей заканчиваются смертью (77). Эрлихиозы крс и овец являются благоприятными болезнями, вызываемыми Ehrlichia bovis (для крс), E. ovina и E. phagocytophila (для овец). Также известна петехиальная лихорадка крс - Болезнь Ондири (Bovine Petechial Fever, Ondiri Disease), возбудителем которой является Ehrlichia (Cytoecetes) ondiri, вызывающий значительные капиллярные поражения (13). Эта инфекция была обнаружена только в Кении; она проявляется в виде многочисленных петехиальных кровоизлияний и экхимозов на поверхности слизистых и на всех серозных поверхностях, повышенной гипертермией, гипертрофией лимфатических желез и гипертрофией селезенки. Данные изменения сопровождаются часто гидроперикардией. Более 50% пораженного крс погибает. 7.1. Гуморальный иммунитет Имеется очень мало сведений о природе иммунных реакций, вызываемых Ehrlichia у различных хозяев. К настоящему времени установлено, что имеет место индукция нейтрализирующих антител категории IgG, и что данные антитела действуют посредством специфической цитотоксичности антител, направленных на инфицированные макрофаги (37, 57). В случаях инфицирования лошадей E. risticii, - 82 - появление нейтрализующих циркулирующих антител совпадает с клиренсом организмов, это приводит к выводу, что гуморальные механизмы могут иметь важное значение с точки зрения иммунозашиты. Нейтрализующие антитела не замедляют абсорбцию E. risticii, однако наблюдается устойчивость паразита в макрофаге (37, 79). 7.2. Опосредованно клеточный иммунитет Было замечено, что лимфоциты, продуцируемые инфицированными E. canis собаками, являются цитотоксическими по отношению к аутологичным моноцитам; один или несколько антигенов, участвующие в этом явлении, не были определены. Присутствие опосредованно клеточного иммунитета подтверждается индукцией бластогенеза, отмеченного в спленоцитах, полученных у мышей, инфицированных E. risticii и вновь подверженных воздействию антигенов анти-Ehrlichia (78). Однако существует острая необходимость для облегчения идентификации защитных антигенов точно определить природу действий лимфобластов T. БЛАГОДАРНОСТЬ Авторы выражают признательность Докторам Duncan Mwangi, Evans Taracha, Onesmo ole MoiYoi, Phelix Majiwa и Subhash Morzaria за замечания и дополнения, которыми они дополнили настоящее сообщение, а также Lucy Thairo и Dorothy Wanjohi за техническую помощь. ССЫЛКИ 1. Alderink F.J. & R. Dietrich (1981). Anaplasmosis in Texas: Epidemiologic and economic data from a questionnaire survey. In: Proceedings of the Seventh National Anaplasmosis Conference. Hildago R.J. & Jones E.W., eds. Mississippi State University Press, Mississipi State, USA, 27-44. 2. Andrew H.R. & Norval R.A. (1989). The carrier status of sheep, cattle and African buffalo recovered from heartwater. Vet. Parasitol., 34, 261-266. 3. Authie E., Duvallet G., Robertson C. & Williams D.J.L. (1993). Antibody responses to a 33 kDa cysteine protease of Trypanosoma congolense: Relationship to trypanotolerance in cattle. Parasite Immunol., 15, 465-474. 4. Authie E., Muteti D.K. & Williams D.J.L. (1993). Antibody responses to invariant antigens of Trypanosoma congolense in cattle of differing susceptibility to trypanosomiasis. Parasite Immunol., 15, 101-111. 5. Bajyana-Songa E., Hamers-Casterman C., Hamers R., Pholpark M., Pholpark S., Leidl K., Tangchaitrong S., Chaichanopoonpol I.I., Vitorakool C. & Thirapatsakum T. (1987). The use of the card aggultination test (Testryp Catt) for the detection of T. evansi infection: Tests under field conditions in Thailand. Ann. Soc. Belge Med. Trop., 67,137-148. 6. Baldwin C., Goddeeris B. & Morrison W. (1987). Bovine helper T cell clones specific for lymphocytes infected with Theileria parva (Muguga). Parasite Immunol., 9, 499-513. 7. Barbet A.F. & McGuire T.C. (1982). Purification of Trypanosoma brucei variable surface glycoproteins: analysis of degradation occurring during isolation. Parasitol., 85, 511-522. 8. Borowy N.K., Sternberg J.M., Schreiber D., Nonnengasser C. & Overath P. (1990). Suppressive macrophages occurring in murine Trypanosoma brucei infection inhibit T cell responses in vivo and in vitro. Parasite Immunol. 12, 233-246. 9. Brown W.C., Logan K.S., Wagner G.G. & Tetzlaff C.L. (1991). Cell-mediated immune responses to Babesia bovis merozoite antigens in cattle following infection with tick-derived or cultured parasites. Infect. Immun., 59, 2418-2426. 10. Byrom B., Mahan S.M. & Barbet A.F. (1993). The development of antibody to Cowdria ruminantium in mice and its role in heartwater disease. Rev. Elev. Med. Vet. Pays. Trop., 46, 197-201. 11. Cantor G.H., Pontzer C.H. & Palmer G.H. (1993). Opsonization of Anaplasma marginale mediated by bovine antibody against surface protein MSP-1. Vet. Immunol. Immunopathol., 37, 343-350. 12. Creemers P. (1982). Lack of reactivity of sera from Theileria parva-infected and recovered cattle against cell membrane antigens of Theileria parva transformed cell lines. Vet. Immunol. Immunopathol., 3, 427-438. - 83 - 13. Davies G. (1993). Bovine petechial fever (Ondiri disease). Vet. Microbiol., 34, 103-121. 14. Dawson J.E., Anderson B.E., Fishbein D.B., Sanchez J.L., Goldsmith C.S., Wilson K.H. & Duntley C.W. (1991). Isolation and characterization of an Ehrlichia sp. from a patient diagnosed with human ehrlichiosis. J. Clin. Microbiol., 29, 2741-2745. 15. Du-Plessis J.L., Berche P. & Van-Gas L. (1991). T cell-mediated immunity to Cowdria ruminantium in mice: the protective role of Lyt-2+ T cells. Onderstepoort J. Vet. Res., 58, 171-179. 16. Emery D.L. (1981). Adoptive transfer of immunity to infection with Theileria parva (East Coast Fever) between cattle twins. Res. Vet. Sci., 30, 364-367. 17. Ferguson M., Low M. & Cross G. (1985). Glycosyl-sn-1,2-dimyristylphosphatidylinositol is covalently linked to Trypanosoma brucei variant surface glycoprotein. J. Biol. Chem., 260, 14547-14555. 18. Giardina S., Aso P.M. & Bretana A. (1993). Antigen recognition on Anaplasma marginale and bovine erythrocytes: An electron microscopy study. Vet. Immunol. Immunopathol., 38, 183-191. 19. Goddeeris B., Morrison W., Teale A., Bensaid A. & Baldwin C. (1986). Bovine cytotoxic T cell clones specific for cells infected with protozoan parasite Theileria parva: Parasite strain specificity and class I major histocompatibility complex restriction. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 83, 5238-5242. 20. Goff W.L., Wagner G.G. & Craig T.M. (1984). Increased activity of bovine ADCC effector cells during acute Babesia bovis infection. Vet. Parasitol., 16, 5-15. 21. Gray M.A. & Brown C.G.D. (1981). In vitro neutralisation of theilerial sporozoite infectivity with immune serum. In: Advances in the Control of Theileriosis. Irvin A.D., Cunnigham M.P. & Young A.S., eds. Martinus Nijhoff, The Hague, The Netherlands, 127-129. 22. Grosskinsky C.M. & Askonas B.A. (1981). Macrophages as primary target cells and mediators of immune dysfunction in African trypanosomiasis. Infect. Immun., 33, 149-155. 23. Grosskinsky C.M., Ezekowitz R.A., Berton G., Gordon S. & Askonas B.A. (1983). Macrophage activation in murine African trypanosomiasis. Infect. Immun., 39, 1080-1086. 24. Hudson K.M., Byner C., Freeman J. & Terry R.J. (1976). Immunodepression, high IgM levels and evasion of the immune response in murine trypanosomiasis. Nature, 264, 256-258. 25. Knowles D.P.J., Kappmeyer L.S. & Perryman L.E. (1994). Specific immune responses are required to control parasitemia in Babesia equi infection. Infect. Immun., 62, 1909-1913. 26. Kocan K.M., Stiller D., Goff W. L., Edwards W.E., Wickwire K.B., Stick R.W., Yellin T.N., Ewing S.A., Palmer G.H., Barron S.J., Hair J.A. & McGuire T.C. (1989). The developmental cycle of Anaplasma marginale in Dermacentor spp. In: Proceedings of the 8th National Veterinary Hemoparasite Disease Conference, 10-12 April 1989, St. Louis, MO, USA, 149-160. 27. Kuttler K. (1988). World-wide impact of babesiosis. In: Babesiosis of Domestic Animals and Man. Ristic M., ed., Boca, FL 33431, USA, 1-22; 196 ref. 28. Lutje V., Mertens B., Boulange A., Williams D.J.L. & Authie E. (1995). Trypanosoma congolense: Proliferative responses and interleukin production in lymph node cells of infected cattle. Exp. Parasitol., 81, 154-164. 29. Lutje V., Taylor K.A., Kennedy D., Authie E., Boulange A. & Cettinby G. (1996). Trypanosoma congolense: A comparison of T cell-mediated responses in lymphnodes of trypanotolerant and trypanosusceptible catle during primary infection. Exp. Parasitol., 84, 320-329. 30. Mahan S.M., Sileghem M., Smith G.E. & Byrom B. (1996). Neutralization of bovine Concanavalin-A T cell supernatant-mediated anti-Cowdria ruminantium activity with antibodies specific to interferon gamma but not to tumor necrosis factor. Parasite Immunol., 18, 317-324. 31. Mahan S.M., Smith G.E. & Byrom B. (1994). Conconavalin A-stimulated bovine T cell supernatants inhibit growth of Cowdria ruminantium in bovine endothelial cells in vitro. Infect. Immun., 62, 747-750. 32. Mahoney D., Kerr J., Goodger B. & Wright I. (1979). The immune response of cattle to Babesia bovis (syn. B. argentina). Studies on the nature and specificity of protection. Parasitology, 9, 297-306. 33. Masake R.A. & Morrison W.I. (1981). Evaluation of the structural and functional changes in the lymphoid organs of Boran cattle infected with Trypanosoma vivax. Am. J. Vet. Res., 42, 1738-1746. - 84 - 34. McElwain T., Perryman L., Davis W. & McGuire T. (1987). Antibodies define multiple proteins with epitopes exposed on the surface of live Babesia bigemina merozoites. Immunology, 138, 2298-2304. 35. McGarey D.J. & Allred D.R. (1994). Characterization of hemagglutinating components on the Anaplasma marginale initial body surface and identification of possible adhesins. Infect. Immun., 62, 4587-4593. 36. McKeever D.J., Taracha E.L.N., Innes E.L., MacHugh N.D., Awino E., Goddeeris B.M. & Morrison W.I. (1994). Adoptive transfer of immunity to Theileria parva in the CD8+ fraction of responding efferent lymph. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 91, 1959-1963. 37. Messick J.B. & Rikihisa Y. (1992). Presence of parasite antigen on the surface of P388D1 cells infected with Ehrlichia risticii. Infect. Immun., 60, 3079-3086. 38. Morris H., Ristic M. & Lykins J. (1971). Characterization of opsonins eluted from erythrocytes of cattle infected with Anaplasma marginale. Am. J. Vet. Res., 32, 1221-1228. 39. Morrison, W.I., Lalor, P.A., Goddeerisb. M. & Teale A.J. (1986). Theileriosis: Antigens and host-parasite interactions. In: Parasite Antigens. Towards New Strategies for Vaccines. Pearson T.W., ed. Marcel Dekker New York, USA and Basel, Switzerland, 167-213. 40. Morrison W.I., Murray M. & McIntyre W.I.M. (1981). Bovine trypanosomiasis. In: Disease of Cattle in the Tropics. Ristic M.. & Mcintyre W.I.M., eds. Martinus Nijhott Publishers, The Hague, The Netherlands, p. 499. 41. Muhammed S.I., Lauerman, L.H. & Johnson L.W. (1975). Effect of humoral antibodies on the course of Theileria parva infection (East Coast Fever) of cattle. Am. J. Vet. Res., 36, 399-402. 42. Mukhebi A.W., Perry B.D. & Krusk R. (1992). Estimated economics of theileriosis control in Africa. Prev. Vet. Med., 12, 73-85. 43. Murray M. & Dexter T. (1988). Anaemia in bovine African trypanosomiasis. A review. Acta Trop., 45, 389-432. 44. Musoke A.J., Morzaria, S.P., Nkonge C.G., Jones E. & Nene V. (1992). A recombinant aporozoite surface antigen of Theileria parva induces protection in cattle. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 89, 514-518. 45. Musoke A.J., Nantulya V.M., Barbet A.F., Kironde F. & McGuire T.C. (1981). Bovine immune response to African trypanosomes: Specific antibodies to variable surface glycoproteins of Trypanosoma brucei. Parasite Immunol., 3, 97-104. 46. Musoke A.J. Nantulya V.M., Buscher G., Masake R.A. & Otim B. (1982). Lack of reactivity of sera from Theileria parva-infected and recovered cattle against cell membrane antigens of Theileria parva transformed cell lines. Vet. Immunol. Immnopathol., 3, 427-438. 47. Musoke A.J., Palmer G.H., McElwain T.F., Nene V. & McKeever D.(1996). Prospects subunits vaccines against tick-borne diseases. Br. Vet. J. 152, 621-639. 48. Nyindo M. (1992). In: Animal Diseases due to Protozoa and Rickettsia. English Press, Nairobi, Kenya. 49. Olsson T., Bakhiet M., Edlund C., Hojeberg B., Van der Meide P.H. & Kristensson K. (1991). Bidirectional activating signals between Trypanosoma brucei and CD8+ T cells: A trypanosome-released factor triggers interferon-gamma production that stimulates parasite growth. Eur. J. Immunol., 21, 2447-2454. 50. Olsson T., Bakhiet M. & Kristensson K. (1992). Interactions between Trypanosoma brucei and CD8+ T cells. Parasitol. Today, 8, 237-239. 51. Palmer G.H., Barbet A.F., Cantor G.H. & McGuire T.C. (1989). Immunization of the cattle with the MSP-1 surface protein complex induces protection against a structurally variant Anaplasma marginale isolate. Infect. Immun., 57, 3666-3669. 52. Palmer G. & McGuire T. (1984). Immune serum against Anaplasma marginale initial bodies neutralizes infectivity for cattle. Immunology, 133, 1010-1015. 53. Pearson T.W., Lundin L.B., Dolan T.T. & Stagg D.A. (1979). Cell mediated immunity to Theileria-transformed cell lines. Nature, 281, 678-680. 54. Preston P.M. & Brown C.G.D. (1988). Macrophage-mediated cytostasis and lymphocyte cytotoxicity in cattle immunised with Theileria annulata sporozoites or macroschizont-infected cell lines. Parasite Immunol., 10, 631647. - 85 - 55. Preston P.M., Brown C.G.D. & Spooner R.L. (1983). Cell-mediated cytotoxicity in Theileria annulata infections of cattle with evidence for BoLA restriction. Clin. Exp. Immunol., 53, 88-100. 56. Rice-Ficht A., Chen K. & Donelson J. (1981). Sequence homologies near the C-termini of the variable surface of glycoproteins of Trypanosoma brucei. Nature, 294, 53-57. 57. Rikihisa Y., Wada R., Reed S.M. & Yamamoto S. (1993). Development of neutralizing antibody in horses infected with Ehrlichia risticii. Vet. Microbiol., 36, 139-147. 58. Ristic M. & Kreier J.P., (1984). Family III. Anapasmataceae Phillip 1957. In: Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, Vol. I., Kreig J.G. & Hoh J.G., eds. Williams & Wilkins, Baltimore, USA, 719-729. 59. Ruebush M.J. & Hanson W.L. (1980). Thymus dependence of resistance to infection with Babesia microti of human origin in mice. Am. J. Trop. Med. Hyg., 29, 507-515. 60. Ruebush M.J. & Hanson W.L. (1980). Transfer of immunity to Babesia microti of human origin using T lymphocytes in mice. Cell Immunol., 52, 255-265. 61. Rurangirwa F.R., Musoke A.J., Nantulya V.M. & Tabel H. (1983). Immune depression in bovine trypanosomiasis: Effects of acute and chronic Trypanosoma congolense and chronic Trypanosoma vivax infections on antibody response to Brucella abortus vaccine. Parasite Immunol., 5, 267-276. 62. Rurangirwa F.R., Tabel H., Losos G.J., & Tizard I.R. (1979). Suppression of antibody response to Leptospira biflexa and Brucella abortus and recovery from immunosuppression after berenil treatment. Infect. Immun., 26, 822-826. 63. Schein E., Rehbein G., Voigt W.P. & Zweygarth E. (1981). Babesia equi (Laveran 1901) 1. Development in horses and in lymphocyte culture. Tropenmed Parasitol., 32, 223-227. 64. Semu S.M., Mahan S.M., Yunker C.E. & Burridge M.J. (1992). Development and persistence of Cowdria ruminantium specific antibodies following experimental infection of cattle, as detected by the indirect fluorescent antibody test. Vet. Immunol. Immunopathol., 33, 339-352. 65. Shak S., Davitz M.A., Wolinsky M.L., Nussenzweig V., Turner M.J. & Gurnett, A. (1988). Partial characterization of the cross-reacting determinant, a carbohydrate epitope shared by decay accelerating factor and the variant surface glycoprotein of the African Trypanosoma brucei. J. Immunol., 140, 2046-2050. 66. Shiels B., Hall R., Glascodine J., McDougall C., Harrison C., Taracha E., Brown D. & Tait A. (1989). Characterization of surface polypeptides on different life-cycle stages of Theileria annulata. Mol. Biochem. Parasitol., 34, 209-220. 67. Sileghem M. & Flynn J.N. (1992). Suppression of T cell responsiveness during tsetse-transmitted trypanosomiasis in cattle. Scand. J. Immunol., 36, 37-40. 68. Sileghem M., Flynn J.N., Darji A., Baetselier P., De Naessens J., De-Baetselier P. & Kierszenbaum F. (1994). African Trypanosomiasis. Parasitic Infections and the Immune System. Academic Press, New York, USA, 1-51; 15. 69. Sileghem M.R., Flynn J.N., Saya R. & Williams D.J.L. (1993). Secretion of co-stimulatory cytokines by monocytes and macrophages during infection with Trypanosoma (Nannomonas) congolense in susceptible and tolerant cattle. Vet. Immunol. Immunopathol., 37, 123-134. 70. Tait A. & Hall F.R. (1990). Theileria annulata: control measures, diagnosis and the potential use of subunit vaccines. Rev. sci. tech. Off. Epiz., 9 (2), 387-403. 71. Taracha E.L.N., Goddeeris B.M., Teale A.J., Kemp S.J. & Morrison W.I. (1995). Parasite strain specificity of bovine cytotoxic T cell responses to Theileria parva is determined primarily by immunodominance. J. Immunol., 155, 4854-4860. 72. Totté P., Jongejan F., De-Gee A.L.W. & Werenne J. (1994). Production of alpha interferon in Cowdria ruminantium-infected cattle and its effect on infected endothelial cell cultures. Infect. Immun. 62, 2600-2604. 73. Totté P.H., Vachie’ry N., Martinez D., Trap I., Ballingal K-T., MacHugh N.D., Bensaid A. & Werenne J. (1996). Recombinant bovine interferon gamma inhibits the growth of Cowdria ruminantium but fails to induce MHC Class II following infection of endothelial cells. Vet. Immunol. Immunopathol., 53, 61-71. 74. Uilenberg G. (1983). Heartwater (Cowdria ruminantium infection): current status. Adv. Vet. Sci. Comp. Med., 27, 427-480. - 86 - 75. Urquhart G. & Holmes P. (1987). African trypanosomiasis. In: Immune Responses in Parasitic Infections, Immunology, Immunopathoogy and Immunoprophylaxis, Vol. 3. Soulsby E.J.L, ed. CRC Press, Boca Raton, Florida, USA, 1-22. 76. Vickerman K. (1978). Antigenic variation in trypanosomes. Nature, 273, 613-617. 77. Whitlock R.H., Palmer J.E., Benson C.E. Azland H.M., Jenny A. & Ristic M. (1984). Potomac horse fever: clinical characteristics and diagnostic features. Proceedings of Annual meeting of the American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians, 103-124. 78. Williams N.M., Cross R.J. & Timoney P.J. (1994). Respiratory burst activity associated with phagocytosis of Ehrlichia risticii by mouse peritoneal macrophages. Res. Vet. Sci., 57, 194-199. 79. Williams N.M. & Timoney P.J. (1993). In vitro killing of Ehrlichia risticii by activated and immune mouse peritoneal macrophages. Infect. Immun., 61, 861-867. 80. Williams S., Tait A., Brown D., Walker A., Beck P., Shiels B., Fletcher J. & Hall R. (1989). Theileria annulata sporozoite surface antigen expressed in Escherichia coli elicits neutralising antibody. Proc. Natl Acad. Sci. USA, 86, 4639-4643. 81. Wright I.G., Goodger B.V., Buffington G.D., Clark I.A., Parrodi F. & Waltisbuhl D.J. (1989). Immunopathophysiology of babesial infections. Trans. Trop. Med. Hyg., 83, 11-13. 82. Wright I.G., Goodger B.V. & Clark I.A. (1988). Immunopathophysiology of Babesia bovis and Plasmodium falciparum infections. Parasitol. Today, 4, 214-218. - 87 -
