Vagicult - Вагикульт

Pribori Oy
Vagicult (Вагикульт - кат. № 67693)
Селективный обогащенный бульон для первичного выделения и
выращивания Trichmonas vaginalis и дрожжей из урогенитальных образцов.
(T. vaginalis и дрожжи являются наиболее общей причиной развития вагинитов.
T. Vaginalis также может присутствовать в урогенитальной флоре у мужчин.)
Производство
Форма выпуска
Селективный бульон - 20 пробирок
Стикеры -10 штук
Инструкция
Принцип метода
Бульон Вагикульт – представляет триптиказо – основной питательный бульон (4 мл) и является
модифицированной средой Диаманд («алмазная» среда Diamonds) в пробирках.
Материалы, требуемые для проведения исследования, но не включенные в набор:
Лабораторное оборудование для выращивания микробов и микроскоп с х 40 кратным
наведением и/или различная интерференсная контрастная оптика.
Обычный состав:
Триптиказный пептон
22,0 г/л
Дрожжевой экстракт
11,0 г/л
Мальтоза
5,5 г/л
Цистеин
1,1 г/л
Аскорбиновая кислота
0,2
Дигидрострептомицин сульфат
0,03 г/л
Пенициллин G
Овечья сыворотка
г/л
0,6 г/л
100 мл/л
Предостережения
Вагикульт предназначается только для использования in vitro.
Не используйте набор после истечения срока его годности.
Не используйте набор при обнаружении бактериального роста и роста дрожжей и грибов, а
также помутнения среды или каких-либо других дефектов.
Из-за того, что некоторые виды микроорганизмов, растущие на Вагикульте являются
патогенными, не прикасайтесь непосредственно к использованному селективному бульону.
Хранение
Урикульт следует хранить в холодильнике при температуре от 2 до 8 0С в закрытом виде,
избегая температурных колебаний.
Срок годности указан на коробке.
В течение срока хранения на дне пробирки может образовываться осадок (фибриноподобный
осадок, хлопья). Это не ухудшает исполнение теста.
Выполнение теста.
Перед выполнением исследования необходимо, чтобы температура пробирки дошла до
комнатной температуры (+ 25-37 0С).
1.
Инокуляция пробирки исследуемым образцом.
Женщины:
a) Возьмите свабом образец из вагинальных выделений или с задней стенки.
b) Немедленно перенесите данный сваб с образцом в пробирку Вагикульт и интенсивно
перемешайте свабом бульон (вращательными движениями).
c) Не оставляйте сваб в бульоне.
Мужчины:
А) Инокулируйте пробирку Вагикульт каплей спермы, жидкостью из простаты,
уретральным свабом или концентрированной мочой.
B)
Немедленно перенесите данный сваб с образцом в пробирку Вагикульт и интенсивно
перемешайте свабом бульон (вращательными движениями).
2. Заполните сопроводительные документы и прикрепите к флакончику.
3. Поместите флакончик в вертикальном положении в термостат при температуре 36±2 0С
4. Инкубируйте пробирки до 72 часов (результаты начинают рассматривать через 24 часа).
Интерпретация результатов.
Рост трихомонад и дрожжей после посева образца вызывает помутнение бульона Вагикульт.
Капля образца помещается на предметное стекло, накрывается покровным стеклом и
исследуется под микроскопом, имеющим 40-кратное увеличение (оптические параметры 1,2 х 6
х 45) в трех полях зрения.
Трихомонады имеют грушевидную форму и подвижны (двигаются с помощью жгутиков)
Дрожжевые клетки имеют округлую или овальную форму, бесцветные (по размеру похожи на
эритроциты). Для определения количества трихомонад и дрожжевых клеток в 24- часовой
культуре необходимо сосчитать их количество в 3-х полях зрения при указанных оптических
параметрах. В случае отсутствия роста необходимо повторить ту же процедуру исследования на
2 и 3 сутки.
1 – 5 трихомонад или элементов гриба в поле зрения
+
6 – 30 трихомонад или элементов гриба в поле зрения
++
более 30 трихомонад или элементов гриба в поле зрения
+++
Как правило, после 24-часовой инкубации количество возбудителей на ++ больше характерно
для грибов. Для того, чтобы идентифицировать Candida albicans от других видов Candida
можно использовать среду Mackenzies или анализ отвезти в специализированную лабораторию.
Для трихомонад более характерно количество на + при тех же условиях.
Ожидаемые уровни методики
Trichmonas vaginalis - патогенный микроорганизм, который может жить в урогенитальной
системе мужчин и женщин. Течение инфекционного процесса у мужчин типично протекает без
явной симптоматики, тогда, как у 25 – 50 % женщин имеют симптоматику, такую, как дизурия,
вагинальный зуд или жжение. Симптоматические вагинальные кандидозы наблюдаются у 40-75
% сексуально активных женщин.
Характеристики методики
Методика культурального посева с дальнейшим микроскопированием
является наиболее
чувствительным методом диагностики трихомонад.
Trichmonas vaginalis
Процентное сравнение исследований при диагностике Trichmonas vaginalis
с помощью
обычного мазка, посева на питательный бульон и комбинированного исследования.
Общее кол-во
образцов
Влажный
мазок
Культуральный
посев
Комбинация
мазок + посев
100
107
175
198
54
74
48
86
88
52
83
86
78
79
89
91
100
100
98
93
Данные: McMillan A Laboratory diagnostic methods and cryopreservation of Trichomonads In BM
Honigberg (ed.)
Candida
Соотношения позитивных вагинальных мазков при вагинитах при исследовании с помощью
микроскопии и Вагикульта с выборкой – обычные пациенты и контрольные объекты.
Группа образцов
Общее кол-во
образцов
Микроскопия
Вагикульт
Пациенты
Контроли
124
50
14 (11 %)
2 (4 %)
21 (17 %)
11 (22 %)
Литература: Karlson P, Richardson M, Clin. Micr. 38 (3): 1063 -1065, 2000
Ограничения в пределах исследования
C помощью бульона Вагикульт нельзя производить дифференциацию между пациентами с
кандидозами и носителями инфекции (у кого заболевание протекает без симптоматики). Так как
методика с использованием Вагикульта занимает 3 дня, а мазок пациента может содержать не
жизнеспособные культуры, важно также сразу делать микроскопирование влажного мазка.
Контроль качества.
Контроль качества проводится для каждой новой партии
Вагикульт (лота). Для этого
используется следующая процедура.
Candida albicans
1. Согреть пробирки до 35-37 0С (оставить в комнате на 20 мин)
2. Инокулировать образец стерильной петлей содержащей одну небольшую колонию C.
Albicans АТСС 8014
3. Оценить мазок под микроскопом и подсчитать количество клеток в 3 полях зрения
4. Инкубировать пробирки при 35-37 0С в течение 48 часов.
T. Vaginalis
5.
6.
7.
8.
Инокулировать образец 5-8 каплями 48-часовой культурой T. Vaginalis АТСС 30001
Инкубировать пробирки при 35-37 0С в течение 48 часов.
Оценить мазок под микроскопом и подсчитать количество клеток в 3 полях зрения
После инкубации повторить шаги 3 и 7 для подтверждения увеличения числа клеток в
обеих пробирках.
Утилизация используемых слайдов
Поскольку на инкубированных слайдах находятся бактериальные культуры, следует относиться
к ним с осторожностью. Посев и утилизация должна производится в строго отведенных для
этого местах.
Pribori Oy
Россия, 115035 г. Москва
Климентовский пер. 12, стр.1
Тел.: +7 495 937 45 94
Факс: +7 495 937 45 92
www.pribori.com