ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ — ГОТОВАЯ К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ СРЕДА В ЧАШКАХ PA-254016.06 Ред.: April 2013 BD Endo Agar НАЗНАЧЕНИЕ BD Endo Agar (агар Эндо) является слабоселективной и дифференциальной средой для выделения и дифференциации Enterobacteriaceae и некоторых других грамотрицательных палочек из клинических образцов. ПРИНЦИПЫ И ОПИСАНИЕ МЕТОДИКИ Микробиологический метод. В 1904 г. Эндо сообщил о разработке питательной среды для дифференцирования микроорганизмов, ферментирующих и не ферментирующих лактозу.1 Первоначальная рецептура претерпела значительные изменения с момента ее представления.2 Со временем агар Эндо стал важной средой в микробиологическом исследовании питьевой воды и сточных вод, молочных продуктов и пищи. Однако современные краткие руководства по стандартным методам исследования этих материалов рекомендуют альтернативные рецептуры сред.3–5 Среда по-прежнему используется в клинической микробиологии и некоторых других областях для изоляции и дифференцирования бактерий Enterobacteriaceae.6 Селективность агара Эндо возможна благодаря сочетанию сульфита натрия и основного фуксина, которое приводит к частичному подавлению грамположительных микроорганизмов. Кишечные палочки вызывают брожение лактозы и образуют колонии от темно-розового до красного цвета с радужным зеленоватым металлическим блеском и сходную окраску среды. Колонии микроорганизмов, которые не ферментируют лактозу, остаются бесцветными или приобретают тускло-розовую окраску по сравнению со светло-розовым фоном среды. РЕАГЕНТЫ BD Endo Agar Рецептура* на литр очищенной воды Пептический гидролизат животной ткани 10,0 Лактоза 10,0 Вторичный кислый фосфат калия 3,5 г Сульфит натрия 2,5 Основной фуксин 0,5 Агар 15,0 pH 7,4 ±0,2 * При необходимости изменяется и/или дополняется для соответствия критериям эффективности. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Только для профессионального применения. Не используйте чашки при наличии признаков бактериального заражения, изменения цвета, высыхания или других признаков разложения продукта. Прочитайте документ ОБЩИЕ ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ, в котором приведено описание асептических методов работы, биологических опасностей и утилизации использованных продуктов. ХРАНЕНИЕ И СРОК ГОДНОСТИ После получения храните чашки в темноте при температуре от 2 до 8 °C в оригинальной обертке до начала использования. Избегайте замораживания и перегрева. Чашки могут быть засеяны до даты истечения срока годности (см. этикетку на упаковке) и инкубированы в течение рекомендованного времени инкубации. PA-254016.06 -1- Чашки из открытых стопок по 10 чашек могут использоваться в течение одной недели при условии хранения с соблюдением чистоты при температуре от 2 до 8 °C. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Засейте репрезентативные образцы следующими штаммами (подробные сведения см. в документе ОБЩИЕ ИНСТРУКЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ). Инкубируйте чашки в темном месте в течение 18 – 24 ч при температуре 35 ±2 °C в аэробных условиях. Штаммы Результаты роста Escherichia coli ATCC 25922 Цвет колоний от темно-розового до розовокрасного с зеленым металлическим блеском. Возможно заметное покраснение среды Salmonella Typhimurium ATCC 14028 Цвет колоний: от бесцветных до слабо-розовых Shigella flexneri ATCC 12022 Колонии от бесцветных до слабо-розовых и более розовые по сравнению с колониями Salmonella Enterococcus faecalis ATCC 29212 Ингибируются. Возможен умеренный рост. Колонии небольшие, от розовых до розово-красных. Возможен незначительный блеск Незасеянные Светло-розовые, с легким молочным отливом МЕТОДИКА Поставляемые материалы BD Endo Agar (чашки Stacker 90 мм). Свободные от микроорганизмов. Не предоставляемые материалы Дополнительная питательная среда, реагенты и лабораторное оборудование по мере необходимости. Типы образцов Это селективная среда для грамотрицательных палочек, которая может использоваться для клинических образцов всех типов (см. также РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ И ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ). Методика тестирования Выполните посев образца как можно скорее после поступления в лабораторию. Чашка для посева используется, главным образом, для отделения чистых культур от образцов, содержащих смешанную флору. В качестве альтернативы, если материал засевается непосредственно с тампона, проверните тампон над небольшим участком поверхности возле края, а затем сделайте штрихи с этого засеянного участка. Неселективная среда, такая как колумбийский агар с 5 % овечьей крови Columbia Agar with 5% Sheep Blood, должна быть также посеяна для индикации других микроорганизмов, присутствующих в образце. Инкубируйте чашки в защищенных от света условиях при температуре 35 ±2 °C в течение 18 – 24 ч. Результаты Типичная морфология колоний выглядит следующим образом: Микроорганизмы E. coli Enterobacter/Klebsiella Proteus Salmonella Shigella Pseudomonas Грамположительные бактерии PA-254016.06 BD Endo Agar От темно-розовых до розово-красных с зеленым металлическим блеском Большие, слизеподобные, розовые От бесцветных до очень бледных розовых; рост бактерий От бесцветных до очень бледных розовых От бесцветных до бледно-розовых Неравномерные, бесцветные От отсутствия роста до умеренного роста -2- ЭФФЕКТИВНОСТЬ И ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДИКИ В этой среде микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae и множество других грамотрицательных палочек, таких как Pseudomonas и Aeromonas, будут расти.6 В среде BD Endo Agar рост бактерий Proteus не ингибируется. Агар Эндо неполностью ингибирует грамположительные бактерии, такие как энтерококки или стафилококки, и не ингибирует дрожжевые грибки. Несмотря на то, что определенные диагностические тесты можно выполнять непосредственно в этой среде, для полной идентификации необходимо провести биохимическое и, если показано, иммунологическое тестирование с использованием чистых культур. См. соответствующие справочные материалы. 3 Среда крайне чувствительна к воздействию света. Длительное воздействие света может разрушить систему индикатора и сделать среду непригодной для использования. СПРАВОЧНЫЕ МАТЕРИАЛЫ 1. Endo, S. 1904. Über ein Verfahren zum Nachweis der Typhusbacillen. Centr. f. Bakt. 35:109-110. 2. Levin, M., and H.W. Schoenlein. 1930. A compilation of culture media for the cultivation of microorganisms. The Williams & Wilkins Company, Baltimore. 3. Marshall, R.T. (ed.). 1992. Standard methods for the examination of dairy products, 16th ed. American Public Health Association, Washington, D.C. 4. Vanderzant, C., and D.F. Splittstoesser (ed.). 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 3rd ed. American Public Health Association, Washington, D.C. 5. Eaton, A.D., L.S. Clesceri, and A.E. Greenberg (ed.). 1995. Standard methods for the examination of water and wastewater, 19th ed. American Public Health Association, Washington, D.C. 6. Bockemühl, J. 1992. Enterobacteriaceae. In: Burkhardt, F. (ed.). Mikrobiologische Diagnostik. Thieme Verlag. Stuttgart, New York. УПАКОВКА И НАЛИЧИЕ BD Endo Agar № по каталогу 254016 № по каталогу 254074 Готовая к использованию среда в чашках; 20 чашек Готовая к использованию среда в чашках; 120 чашек ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ Для получения дополнительной информации обратитесь к местному представителю компании BD. Becton Dickinson GmbH Tullastrasse 8 – 12 D-69126 Heidelberg/Germany Phone: +49-62 21-30 50 Fax: +49-62 21-30 52 16 [email protected] http://www.bd.com http://www.bd.com/europe/regulatory/ ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company. PA-254016.06 -3- © 2013 BD