мистерство здравоохранения и социальной политики

МИНЗДРАВСОЦРАЗВИТИЯ РОССИИ
Государственное образовательное учреждение
Высшего профессионального образования
ИРКУТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ
(ГОУ ВПО ИГМУ Минздравсоцразвития России)
Медико-профилактический факультет
Кафедра микробиологии
Методические рекомендации
к практическим занятиям для студентов
по теме: «Возбудители кишечных инфекций»
для специальности: 060101 – Лечебное дело, дневное отделение (ЛДдо)
060103 – Педиатрия (ПЕД)
060104 – Медико-профилактическое дело (МПД)
Иркутск – 2008г.
Методические рекомендации составлены:
проф. Симоновой Е.В.
Методические рекомендации составлены в соответствии с типовым учебным
планом общеобразовательного стандарта подготовки студентов высших медицинских
учебных заведений и медицинских факультетов университетов по курсу
«Микробиология с вирусологией и иммунологией» и рабочей программой кафедры
микробиологии ИГМУ.
Методические рекомендации обсуждены на заседании кафедры микробиологии
ИГМУ.
Протокол № ______ от _____________ 2008г.
Методические рекомендации рассмотрены и рекомендованы к изданию на
заседании цикловой методической комиссии кафедр медико-биологического профиля
ИГМУ.
Протокол № ___ от __________2008г.
Председатель ЦМК профессор Р.В. Киборт.
План практических занятий по теме:
«БАКТЕРИАЛЬНЫЕ ВОЗБУДИТЕЛИ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ».
Для студентов лечебного, педиатрического и медико-профилактического факультетов:
Тема занятий:
1. Энтеробактерии – возбудители кишечных инфекций бактериальной
природы.
2. Энтеробактерии – возбудители кишечных инфекций бактериальной
природы.
Пищевые токсикоинфекции и пищевые интоксикации.
3. Энтеробактерии – возбудители кишечных инфекций бактериальной
природы.
Возбудители холеры – Vibtio cholerae biovar cholerae и Vibtio cholerae
biovar eltor. Возбудители иерсинеозов и кампилобактериозов.
4. Контрольное занятие по теме: «Возбудители кишечных инфекций
бактериальной природы».
Учебные
часы:
3,0
1,5
1,5
1,5
1,5
3,0
Студент должен знать:
1)
Систематическое положение возбудителей кишечной инфекции,
2)
Роль энтеропатогенных микробов и холерных вибрионов в патологии
человека,
3)
Механизмы формирования бактерионосительства при кишечных
инфекциях,
4)
Основные биологические свойства энтеропатогенных микробов и
холерных вибрионов,
5)
Принципы лабораторной диагностики возбудителей кишечных инфекций,
6)
Методы исследования, используемые для индикации возбудителей
кишечных инфекций в объектах внешней среды,
7)
Препараты, используемые для специфической профилактики и терапии
кишечных инфекций бактериальной природы.
Студент должен уметь:
1)
Проводить бактериологический метод исследования энтеропатогенных
возбудителей кишечных инфекций,
2)
Проводить серологический метод исследования энтеропатогенных
возбудителей кишечных инфекций,
3)
Интерпретировать результаты, полученные при микробиологических
исследованиях энтеропатогенных возбудителей кишечных инфекций.
Занятие № 1.
Тема занятия: «Энтеробактерии – возбудители кишечных инфекций
бактериальной природы».
Вопросы для самостоятельной подготовки студентов к занятию:
1)
Возбудители
кишечных
инфекций
бактериальной
природы:
энтеробактерий. Таксономия. Роль в патологии человека. Общая характеристика и
эволюция их микробного паразитизма.
2)
Факторы патогенности энтеробактерий. Роль факторов инвазии в
патогенезе кишечных инфекций. Особенности патогенеза. Механизм формирования
иммунитета.
3)
Формирование бактерионосительства при кишечных инфекциях,
вызванных энтеробактериями.
4)
Специфическая профилактика и лечение.
5)
Принципы
микробиологической
диагностики.
Материал
для
микробиологического исследования в зависимости от циркуляции микроба в организме
человека.
Практическая работа:
Задание 1. Используя рисунок 1, составьте схему механизма взаимодействия
бактериальных факторов и иммунной системы человека.
Задание 2. В инфекционную больницу 27.09 поступил больной с жалобами на
частый жидкий стул, слабо выраженный болевой синдром в области живота
спастического характера, с симптомами общей интоксикации. Заболевание началось
внезапно, пациент связывает свое заболевание с приемом не доброкачественной пищи.
В ходе обследования выставлен клинический диагноз «острая кишечная
инфекция». Составьте схему бактериологического исследования для определения
возбудителя заболевания, используя протокол исследования № 1 и 2.
Протокол 1
Протокол микробиологического исследования больного с диагнозом
«Острая кишечная инфекция».
Бактериологический метод исследования
1) Цель микробиологического исследования:……
2) Исследуемый материал для бактериологического исследования в период:
а) Лихорадочного состояния - ……
б) Период разгара заболевания - ……
в) В период выздоровления - ……
3) Результат микробиологического исследования, позволяющий подтвердить
клинический диагноз:
Протокол 2
Протокол микробиологического исследования больного с диагнозом
«Острая кишечная инфекция».
Серологический метод исследования
1) Цель микробиологического исследования:……
2) Исследуемый материал для бактериологического исследования в период:……
3) Результат микробиологического исследования, позволяющий подтвердить
клинический диагноз:……
Задание 3. Сделайте патогенетическое обоснование выбора вида исследуемого
материала для микробиологического подтверждения диагноза «брюшной тиф»
(таблица 1).
Таблица 1
Обоснование направления в микробиологическую лабораторию.
Исследуемый материал:
Патогенетическое
Метод
обоснование взятия
исследования:
данного вида исследуемого
материала больного
Диагностическое
значение:
Период заболевания:
сыворотка крови
Период заболевания:
Испражнения
Период заболевания:
Кровь
Период заболевания:
сыворотка крови
испражнения
моча
дуоденальное сод - мое
ликвор
биоптат костного мозга
Задание 4. В стационар инфекционной больницы поступил больной в тяжелом
состоянии: высокая температура, диспептические расстройства, боли в
эпигастральной области, больным считает себя 8 дней. Заболевание связывает с
командировкой в Чечню, где приходилось неоднократно пить сырую воду. На
основании клинических данных был поставлен диагноз «брюшной тиф». Определите
тактику врача в отношении подтверждения диагноза. Составьте план исследования
(протокол 3).
Протокол 3.
Направление на исследование
Ф. И. О. больного
____________________________________________________
Возраст
____________________________________________________________
Поступил в кишечное отделение инфекционной больницы
_________________ Диагноз
____________________________________________________________
Исследуемый материал
_______________________________________________
Исследуемый
материал забран
от больного
Используя
схему, представленную
в таблице
2 проведите серологическое исследование.
_______________________
________
Серологический метод исследования при
брюшном тифе. (укажите
Серологический метод исследования при брюшном тифе…………………………………
дату и время забора материала от
больного)
Выполните
I
Этап
I этап:
Метод исследования
забор исследуемого материала:…………… используя таблицу 2.
___________________________________________________
а) получение сыворотки крови
Врач _______________
исследования,
б) титрование сыворотки крови больного
в) постановка серологической реакции по
методу Видаля, в основе которой
лежит реакция ……, для ее проведения
необходимы
следующие
ингредиенты:..
Таблица 2.
Постановка развернутой реакции агглютинации по методу Видаля.
Ингредиенты:
Разведение сыворотки больного.
Физиологический
раствор, мл
Сыворотка
больного
1:50, мл
Диагностикум
…
1:10
0
1,0
1:20
0
1,0
1:40
0
1,0
1:80
0
1,0
К аг
К аг
-
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
1,0
-
2к
2к
2к
2к
-
2к
…
…
УИРС (самостоятельная работа студента).
Выделите и определите возбудителя острой
кишечной инфекции из
испражнений больного. Результаты исследований внесите в протокол исследования №
4. На основании полученных результатов составьте ситуационную задачу.
Протокол 4.
Направление на исследование
Ф. И. О. больного: Иванов А. М.
Возраст: 44 года.
Поступил в кишечное отделение инфекционной больницы: 2 октября
2004 года.
Диагноз: Острая кишечная инфекция.
Исследуемый материал: Испражнения.
Исследуемый материал забран от больного: 2. 10.04 в1735 , доставлен в
баклабораторию в 1755.
(укажите дату и время забора
материала от больного)
I Метод
этап: исследуемый
материал
посеян на ДДС – Эндо, висмут сульфит агар,
исследования:
Бактериологический.
Плоскирева.
Врач: Петров Ю. В.
Примечание: в исследуемом материале слизь.
II этап:
Результат:
а)
…
б)
…
в)
результаты исследования внесите в таблицу 3.
г)
Таблица 3.
Учет результатов бактериологического исследования.
Идентификационные признаки культуры:
Культуральные свойства:
Морфологические свойства:
Тинкториальные свойства:
Биохимические свойства
а) отношение к глюкозе
б) отношение к лактозе
в) наличие уреазы (фермент, разлагающий мочевину)
г)
выделение индола.
Заключение:
Набор идентификационных тестов для определения вида возбудителя
…
…
…
…
Заключение:
Занятие № 2.
Тема занятия: «Энтеробактерии – возбудители кишечных инфекций»
(продолжение). «Пищевые токсикоинфекции и пищевые интоксикации».
Вопросы для самостоятельной подготовки студентов к занятию:
1)
Возбудители пищевых токсикоинфекций и интоксикаций.
2)
Отличительные особенности токсикоинфекций и интоксикаций. Факторы
патогенности бактериальных возбудителей, участвующих в развитии токсикоинфекций
и интоксикаций. Особенности патогенеза.
3)
Микробиологические подходы к лечению токсикоинфекций и
интоксикаций.
4)
Принципы микробиологической диагностики. Исследуемый материал.
Практическая работа:
Задание 1. В инфекционную больницу поступил больной С. у которого начальный
период протекал по типу гастроэнтерита, а затем развилась картина септикопиемии
с температурой гектического характера, головной болью и мышцах ног, ознобами,
тахикардией. Определите тактику лечащего врача в отношении больного с целью
подтверждения диагноза. Ответ мотивируйте. Определите возбудителя
септического состояния больного С.
Задание 2. В инфекционную больницу поступил больной А. в тяжелом состоянии
с подозрением на дизентерию. Больным считает себя 8 дней. При появлении признаков
энтероколита начал самостоятельное лечение антибактериальными препаратами,
которые принимал 4 дня. После улучшения состояния здоровья прекратил прием
лекарств. Спустя 3 дня вновь появились боли в эпигастральной области, частый стул
с примесью крови. Бактериологическое исследование не подтвердило диагноза
«дизентерия». Можно ли предложить другие методы лабораторной диагностики для
подтверждения диагноза. Ответ мотивируйте. Какой исследуемый материал
необходимо взять у больного? Какие результаты должны быть получены, чтобы
подтвердить дианоз?
Задание 3. В инфекционную больницу поступил больной Г. в тяжелом состоянии
с диагнозом «ботулизм». Из анамнеза известно, что течение заболевания началось
остро, спустя 1 час после употребления в пищу соленой рыбы, купленной у случайного
продавца.
1) Результаты, каких исследований позволят подтвердить диагноз?
2) Составьте план специфического лечения ботулизма. Результаты, каких
исследований позволят определить тактику лечащего врача?
3) Необходимо ли выявлять источник инфекции?
4) Промикроскопируйте мазок, окрашенный метиленовой синькой с
возбудителем ботулизма, отметьте его морфологические свойства. Микроскопическую
картину зарисуйте в тетрадь.
5) Кому проводится специфическая профилактика против ботулизма?
УИРС (самостоятельная работа студента).
Выделите и определите возбудителя острой
кишечной инфекции из
испражнений больного. Результаты исследований внесите в протокол исследования №
4. На основании полученных результатов составьте ситуационную задачу. Учтите
результаты исследования – II этапа и внесите в таблицу 3, предыдущего занятия.
Протокол бактериологического исследования.
III этап.
III этап:
а) Учтите биохимические свойства у выделенной вами
Идентификация
культуры на среде Олькеницкого, результаты
микробного возбудителя:
внесите в таблицу 3.
б) Определите морфологические и тинкториальные
свойства у выделенной вами культуры, результаты
внесите в таблицу 3.
в)Определите
цитохромоксидазную
активность,
результаты внесите в таблицу 3.
г) Определите принадлежность выделенной вами
культуры к семейству (роду, используя схему
идентификации, представленную на рисунке 5).
д) В случае если выделенная вами культура относится к
Enterobacteriaceae, определите ее принадлежность к
роду на основе биохимических и антигенных
свойств, результаты внесите в таблицу 3 и сделайте
заключение.
е) Исходя из родовой принадлежности у выделенной
вами
культуры,
определите
набор
идентификационных
признаков,
позволяющих
определить его вид, воспользуйтесь для
этого
таблицей 4.
ж) На основании полученных результатов сделайте
заключение о виде, выделенной вами культуры.
з) Составьте ситуационную задачу и запишите ее в
таблицу 3.
Таблица 3.
Учет результатов бактериологического исследования.
Идентификационные признаки культуры:
Культуральные свойства:
Морфологические свойства:
Тинкториальные свойства:
Биохимические свойства
а) отношение к глюкозе
б) отношение к лактозе
в) наличие уреазы (фермент, разлагающий мочевину)
г) выделение индола
д) цитохромоксидазная активность
е) антигенные свойства.
Заключение:
Набор идентификационных тестов для определения вида возбудителя
…
…
…
…
Заключение:
Ситуационная задача:
Занятие № 3.
Тема занятия: «Энтеробактерии – возбудители кишечных инфекций»
(продолжение). «Возбудители холеры – Vibtio cholerae biovar cholerae и Vibtio
cholerae biovar eltor». «Возбудители иерсинеозов и кампилобактериозов».
Задание 1. В инфекционную больницу поступил больной С. у которого начальный
период протекал по типу гастроэнтерита, а затем развилась картина септикопиемии
с температурой гектического характера, головной болью и мышцах ног, ознобами,
тахикардией. Определите тактику лечащего врача в отношении больного с целью
подтверждения диагноза. Ответ мотивируйте. Определите возбудителя
септического состояния больного С.
Учтите результаты и внесите их в таблицу 1.
Таблица 1
Учет результатов посева крови на двойную среду.
Задание:
Результаты:
1) просмотрите посевы и отметьте наличия
роста культуры на скошенном агаре.
2) В случае если рост культуры наблюдается, то
приготовьте из части колонии мазок,
окрасьте
по
методу
Грама,
промикроскопируйте и отметьте:
а) Морфологические свойства
б) Тинкториальные свойства.
3) В случае если выделенная культура
грамотрицательная мелкая палочка, то
проведите
сероидентификацию
с
поливалентными
сыворотками
ОВ,
поливалентной
сальмонеллезной
и
шигелезной сыворотками.
4) При положительной реакции определите вид
или серовар выделенной культуры.
5) В случае отрицательной реакции, предложите
схему ее дальнейшей идентификации.
6) На основании полученных данных сделайте
заключение.
7) В случае отсутствия роста на скошенной
части питательного агара сделайте мазок из
бульона, окрасьте по методу Грамма,
промикроскопируйте
и
на
основании
полученных данных определите дальнейшее
действие врача – бактериолога.
Задание 2. Среди работников автотранспортного предприятия отмечено
несколько случаев заболевания псевдотуберкулеза. Больные госпитализированы в
городскую клиническую больницу. Возбудителя Yersinia pseudotuberculosis удалось
выделить только у двух больных. При расследовании вспышки псевдотуберкулеза было
установлено, что все пострадавшие были связаны с одной столовой, где большинство
из них ели салат из свежей капусты. Определите:
1)
Тактику лечащего врача в отношение подтверждения диагноза
«псевдотуберкулез» для всех больных поступивших в инфекционное отделение
клинической больницы. Результаты, каких исследований позволят решить
поставленную задачу. Ответ мотивируйте.
2)
Тактику эпидемиолога в отношение выявления источника инфекции.
Составьте схему микробиологических исследований, позволяющих выполнить данную
задачу.
Задание 3.
а) Назовите возбудителей холеры:
б)
Какие факторы обуславливают развитие диареи при холере?
в)
Запишите факторы патогенности холерного вибриона.
г)
Составьте схему патогенеза холеры.
д)
Назовите природный резервуар возбудителя холеры.
е)
Определите свойства холерного вибриона, на основании которых его
можно дифференцировать.
ж)
Обоснуйте методы лабораторной диагностики при холере: на чем
основано их применение, диагностическое значение, какие результаты
исследования позволяют поставить диагноз «холера».
з)
Закончите составление ситуационной задачи: В инфекционную
больницу поступил больной Н. в тяжелом состоянии, который возвратился домой
после отдыха. На основе клинико-диагностических исследований ему был
поставлен диагноз: холера. Через три часа после госпитализации, больной
умер…………………….
Задание 4. В инфекционную больницу поступил больной М. с жалобами на боли в
животе, имитирующие острый перитонит. Диарея – водянистая, в фекалиях свежая
кровь. Больным считает себя два дня. Заболевание, которое началось внезапно,
связывает с поездкой в сельскую местность к родственникам. За обедом ели жареную
утку. На основе клинико-диагностический исследований ему был поставлен диагноз:
кампилобактериоз? Определите тактику клинициста и врача – бактериолога.
Задание 5. Составьте схему патогенеза кампилобактериоза.