Тема №13: «Кишечная палочка

ВВЕДЕНИЕ
Умение правильно определить характер исследуемого материала, сроки его
взятия
от
больного,
выбрать
соответствующий
метод
диагностики
для
микробиологического исследования и оценить результаты этого исследования для
постановки микробиологического диагноза должны быть сформированы в процессе
преподавания частной микробиологии.
Решение указанной задачи затруднительно без методических указаний для
студентов, помогающих им организовать процесс обучения.
Данное учебное пособие представляет собой набор методических указаний
для студентов к практическим занятиям по темам, входящим во второй и третий
модули.
В методических указаниях раскрывается актуальность темы, сформулированы
общие и конкретные цели обучения, приводится перечень теоретических вопросов,
которые необходимо усвоить студенту во время подготовки к занятию и перечень
источников информации, где можно найти ответы на поставленные вопросы.
Предлагаются вниманию студента ориентировочная основа действия, образец
протокола практического занятия, инструкции к проведению определенного
исследования. К каждой теме разработаны графы логической структуры,
позволяющие системно оценить предмет изучения и задания в виде тестов формата
А, по которым студент во время внеаудиторной подготовки может самостоятельно
проверить умение применять полученные знания для решения ситуационных задач,
реализующих конкретные цели обучения. Такие методические указания будут
способствовать повышению качества профессиональной подготовки будущих
врачей по курсу медицинской микробиологии.
1
МОДУЛЬ 2
ЗАНЯТИЕ 12
Тема №12: «Кишечная палочка. Возбудители брюшного тифа, паратифов.
Микробиологическая диагностика эшерихиозов, брюшного тифа, паратифов»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Кишечная палочка постоянно находится в кишечнике человека и приносит
организму большую пользу. Многие штаммы синтезируют антибиотические
вещества - колицины, активные в отношении патогенных микробов кишечной
группы. Кроме того, кишечная палочка синтезирует витамины Д, Е и группы В.
Подавление кишечной палочки (например, под влиянием антибиотиков) может
привести к тяжелому хроническому заболеванию – дисбактериозу.
Однако среди кишечных палочек встречаются такие, которые способны
вызывать энтерит. Особенно опасны колиэнтериты для детей первых месяцев
жизни. У взрослых кишечная палочка может вызывать перитонит, менингит,
энтерит, токсикоинфекцию, цистит, пиелит, пиелонефрит, аппендицит, отит,
послеродовый сепсис и др.
В связи с этим при обследовании больных кишечной инфекцией необходимо,
кроме поиска сальмонелл и шигелл, обращать внимание и на эшерихии. Знание
вопросов патогенеза и диагностики колиэнтеритов необходимо при изучении
многих дисциплин, особенно терапии, инфекционных болезней, педиатрии.
Одной из актуальных задач здравоохранения является снижение
заболеваемости кишечными инфекциями, в том числе – тифо-паратифозными.
В современных условиях брюшной тиф и паратифы нередко протекают
атипично, имеют одинаковые симптомы. В связи с этим важная роль в диагностике
данных заболеваний отводится микробиологическим методам.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): Уметь использовать микробиологические методы диагностики
при заболеваниях, которые вызываются кишечными палочками, возбудителями
брюшного тифа и паратифов для установления микробиологического диагноза с
последующим использованием в клинической практике.
Конкретные цели:
1.
Оценить результаты бактериологического метода диагностики
колиэнтеритов.
2.
Отобрать наиболее целесообразный метод диагностики в тот или иной
период заболевания брюшным тифом и паратифом.
3. Оценить возможности бактериологического метода диагностики брюшного тифа
и паратифов и интерпретировать его результаты.
Теоретические вопросы темы
2
1.
Морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические,
антигенные свойства возбудителей эшерихиозов и тифо-паратифозных заболеваний.
2.
Бактериологический метод диагностики колиэнтеритов.
3.
Фазы патогенеза брюшного тифа и паратифов.
4.
Бактериологический метод диагностики брюшного тифа и паратифов.
5.
Микробиологическая
диагностика
бактерионосительства
брюшнотифозных микробов.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1. Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.190-194, 199-206.
2. Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ.
Мед. навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга,
2011.-с.357-365.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология.- Санкт-Петербург: ”Специальная литература”, 1998. – С.373-381.
Во время работы с литературой для усвоения содержания обучения используйте
граф логической структуры к теме.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия по теме: «Кишечная палочка. Возбудители
брюшного тифа, паратифов. Микробиологическая диагностика эшерихиозов,
брюшного тифа, паратифов»
1. Приготовили мазки из чистой культуры кишечной палочки, окрасили по
Граму, промикроскопировали.
2. Изучили характер роста кишечной палочки, возбудителей брюшного тифа,
паратифов на средах Эндо, Плоскирева, висмут-сульфит агаре
3. Смотрели демонстрацию биохимических свойств кишечной палочки,
возбудителей брюшного тифа, паратифов в пестром ряду Гисса.
4. Изучили бактериологический метод диагностики эшерихиозов, брюшного
тифа и паратифов.
5. С целью выделения гемокультуры сделали пересев из среды Рапопорт,
засеяной кровью больного с подозрением на брюшной тиф на среду Эндо и
поместили в термостат.
3
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая
диагностика эшерихиозов»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ПОСТАНОВКА РПГА С
ЭРИТРОЦИТАРНЫМ
БАКТЕРИАЛЬНЫМ
ДИАГНОСТИКУМОМ
ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ
БАКТЕРИАЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ ИЗ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
АНТИГЕННЫЕ
БИОХИМІЧЕСКИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
МОРФОЛОГИЧЕ
СКИЕ,
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕННОЙ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА, СЕРОВАРА
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
4
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ:
«Микробиологическая диагностика брюшного тифа, паратифов»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ПОСЕВ ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА НА
ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ ДЛЯ
ВЫДЕЛЕНИЯ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
СПЕЦИФИЧЕСКИХ АНТИТЕЛ В
РЕАКЦИИ АГГЛЮТИНАЦИИ
ВІДАЛЯ І РПГА
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
АНТИГЕННЫЕ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ,
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ,
ПОДВИЖНОСТЬ
ОСОБЕННОСТИ ВЫДЕЛЕННОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
СЫВОРОТКА КРОВИ БОЛЬНОГО
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
5
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
Испражнения больного с подозрением на кишечную инфекцию были посеяны
на дифференциально-диагностическую питательную среду Эндо. Спустя сутки на
этой среде выросли колонии средних размеров, круглой формы, красного цвета с
металлическим блеском. Для каких микроорганизмов характерны указанные в
условии культуральные и биохимические свойства?
А.Escherichia coli
В. Vibrio cholerae
С. Shigella dysenteriae
D. Salmonella typhi
Е. Salmonella typhimurium
Задание 2
Для определения серовара выделенных патогенных штаммов кишечной
палочки ставят развернутую реакцию агглютинации с живой культурой для
установления К-антигена и с прогретой культурой - для установления О- антигена.
В каком титре реакция считается позитивной?
А. Реакция считается позитивной в разведении сыворотки до титра,
указанного на этикетке ампулы
В. Реакция считается позитивной в разведении сыворотки 1:100
С. Реакция считается позитивной в разведении сыворотки 1:800
D. Реакция считается позитивной в разведении сыворотки 1:50
Е. Реакция считается позитивной в разведении сыворотки 1:200
Задание 3
Смыв чистой культуры кишечной палочки для изучения антигенных свойств
исследовали в серологической реакции с диагностической неадсорбированной
агглютинирующей сывороткой, последовательно двукратно разведенной к титру.
Назовите эту реакцию.
A. Реакция агглютинации типа Видаля
B. Реакция агглютинации типа Грубера
C. Реакция пассивной гемагглютинации
D. Реакция обратной пассивной гемагглютинации
E. Реакция связывания комплемента
Задание 4
На второй день проведения бактериологического исследования испражнений
больного с острым кишечным заболеванием лаборатория выдала результат:
“патогенные штаммы кишечной палочки не выявлены”. Изучение каких свойств
выделенной бактериальной культуры позволило сделать такой вывод?
A. Морфологических
B. Тинкториальных
C. Сахаролитических
D. Протеолитических
6
E. Антигенных
Задание 5
Из испражнений больного 6-месячного ребенка, который находился на
искусственном вскармливании, была выделена культура кишечной палочки с
антигенной структурой О-55. Какое заболевание можно предположить у ребенка?
A. Холероподобное заболевание
B. Колиентерит
C. Гастроэнтерит
D. Дизентерия
E. Пищевое отравление
Задание 6
С целью изучения антигенных свойств бактериальной культуры кишечной
палочки исследовали колонию в реакции агглютинации на стекле с поливалентной
ОК сывороткой. Какое количество колоний должно быть исследовано с этой целью?
A. Достаточно 1-й колонии
B. Не меньше 2-3
C. Не меньше 4-5
D. Не меньше 6-7
E. Не меньше 10
Задание 7
Больной поступил в инфекционную клинику с диагнозом «Брюшной тиф».
Считает себя больным в течение трех суток. Какое исследование даст возможность
подтвердить диагноз?
A. Выделение гемокультуры
B. Выделение копрокультуры
C. Выделение уринокультуры
D. Выделение биликультуры
E. Выделение розеолокультуры
Задание 8
Из крови больного выделена культура микробов, которая давала на
питательной среде рост, характерный для возбудителей брюшного тифа, паратифов.
Какой из перечисленных ниже результатов позволил сделать такое предположение?
A. Образование бесцветных колоний на среде Эндо
B. Образование колоний красного цвета с металлическим блеском на среде
Эндо
C. Образование бесцветных колоний на среде висмут – сульфит агаре
D. Образование гемолиза на кровяном агаре
E. Образование нежной пленки на щелочной пептонной воде
Задание 9
Выделенная от больного с подозрением на брюшной тиф чистая культура
микробов характеризовалась тем, что представляла собой палочки средних
размеров, грамотрицательные, которые образовывали S-формы бесцветных колоний
7
на среде Эндо, ферментировали глюкозу и маннит до кислоты и газа, расщепляли
белки с образованием сероводорода. Какие свойства необходимо еще изучить у
выделенной культуры микробов для окончательной их идентификации?
A.
Культуральные
B.
Чувствительность к бактериофагу
C.
Антигенные
D.
Токсинообразование
E.
Чувствительность к антибиотикам
Задание 10
Для серологической диагностики брюшного тифа ставят реакцию при которой
к разным разведениям сыворотки больного добавляют диагностикумы трех видов
микроорганизмов и результат оценивают по образованию «хлопьев» из склеенных
бактерий. Назовите эту реакцию по автору.
A.
Борде – Жангу
B.
Видаля
C.
Вассермана
D.
Райта
E.
Асколи
Задание 11
В реакции пассивной гемагглютинации, поставленной с эритроцитарным
брюшнотифозным Vі-диагностикумом, выявлены антитела в разведении сыворотки
крови исследуемого до 1:80, что выше диагностического титра. Такой результат
свидетельствует:
A.
О возможном носительстве палочек брюшного тифа
B.
Об остром заболевании брюшным тифом
C.
О рецидиве брюшного тифа
D.
Об инкубационном периоде брюшного тифа
E.
О полном выздоровлении больного брюшным тифом
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную
работу, заполняют схемы микробиологической диагностики колиэнтеритов,
брюшного тифа и паратифов, решают ситуационные задачи из пособия
«Мікробіологія, вірусологія та імунологія /Завдання для самостійної роботи
студентам вищих медичних закладів освіти III-IV рівнів акредитації» №93-98.
В конце занятия качество усвоения материала преподаватель контролирует с
помощью тестов.
8
ЗАНЯТИЕ 13
Тема №14 : «Возбудители бруцеллеза и сибирской язвы. Микробиологическая
диагностика»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Бруцеллез принадлежит к группе опасных зооантропонозных инфекций,
поэтому необходимо в короткий срок поставить диагноз. Для этого необходимо
умение врача правильно выбрать соответствующие методы диагностики и верно
оценить их результаты. Своевременная диагностика бруцеллеза позволяет успешно
проводить мероприятия по профилактике и рациональной борьбе с этим
инфекционным заболеванием.
Сибирская язва – не менее опасная острая инфекционная болезнь, которая
поражает животных и человека. Особенно опасны легочная, кишечная и септическая
формы этой инфекции, сопровождающиеся высокой летальностью. На сегодняшний
день ситуация относительно сибирской язвы сложная. Во-первых, регистрируются
случаи заболевания в отдельных местностях, и не исключается возможность
эпидемического распространения этого заболевания. Во-вторых, не исключается
возможность использования спор этих микробов в качестве бактериологического
оружия не только во время военных действий, но и в мирное время, для
осуществления террористических актов.
Учитывая эти обстоятельства, студенты должны знать свойства этого
возбудителя, уметь оценивать результаты микробиологической диагностики с тем,
чтобы своевременно распознать это заболевание, назначить рациональное лечение и
принять меры по прекращению распространения этой опасной инфекции.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): Уметь использовать
микробиологические методы
исследования для постановки микробиологического диагноза «бруцеллез» и
«сибирская язва» с последующим применением в клинической и профилактической
практике.
Конкретные цели:
1. Определять особенности морфологических и тинкториальных свойств
возбудителей бруцеллеза и сибирской язвы для микроскопической диагностики.
2. Отличать возбудителей бруцеллеза и сибирской язвы по культуральным,
биохимическим, антигенным свойствам для проведения бактериологической
диагностики.
3. Оценивать результаты серологических исследований сыворотки крови больного
бруцеллезом.
4. Интерпретировать результаты аллергической пробы Бюрне.
Теоретические вопросы темы
1. Биологические свойства возбудителей бруцеллеза и сибирской язвы.
9
2. Источник инфекции, пути передачи инфекции, патогенез, иммунитет.
3. Методы микробиологической диагностики бруцеллеза и сибирской язвы.
4. Специфическая профилактика бруцеллеза и сибирской язвы.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации:
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.223-227, 229-237,239-243.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.372-377, 394-398, 398-401, 418-421.
3.Коротяев А.И; Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология, -Санкт-Петербург “Специальная литература”; 1998.-С.367-370, 349352.
4.Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией.
К.: Высшая школа, 1992.- С. 256-262
Во время работы с литературой для лучшего усвоения содержания обучения
используйте графы логической структуры темы.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия по теме: “Возбудители бруцеллеза и сибирской
язвы. Микробиологическая диагностика ”.
1. Изучили морфологические и тинкториальные свойства бруцелл и
возбудителей сибирской язвы в окрашенных препаратах.
2. Изучили методы микробиологической диагностики бруцеллеза и сибирской
язвы по стендам музея и по схемам учебного пособия.
3. Учли реакцию агглютинации Райта и сделали вывод.
4. Провели учет реакции термореципитации Асколи и сделали вывод о наличии
антигена возбудителей сибирской язвы в исследуемом материале.
5. Ознакомились с биопрепаратами для диагностики и профилактики бруцеллеза
и сибирской язвы (ЖБВ, ХБВ, живая вакцина СТИ, антраксин, бруцеллин).
10
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
бруцеллеза»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕНОЙ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К
БРУЦЕЛЛЕЗНОМУ
БАКТЕРИОФАГУ
АНТИГЕННЫЕ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ТИТРА
АНТИТЕЛ К
БРУЦЕЛЛАМ В
СЫВОРОТКЕ
КРОВИ
БОЛЬНОГО
ПОСТАНОВКА РЕАКЦИИ
АГГЛЮТИНАЦИИ
ХЕДДЛЬСОНА
ВЫДЕЛЕНИЕ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ ИЗ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
РЕАКЦИИ РАЙТА
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
СЕРОЛОГИЧЕС
КИЙ
ПОСТАНОВКА
БАКТЕРИОЛО
ГИЧЕСКИЙ
РОСТ НА СРЕДАХ С
КРАСИТЕЛЯМИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
БИОЛОГИЧЕСКИЙ
ИНФИЦИРО
ВАНИЕ
ИССЛЕДУЕ
МЫМ
МАТЕРИАЛ
ОМ
МОРСКИХ
СВИНОК
ИЛИ
БЕЛЫХ
МЫШЕЙ
(ПОДКОЖНО ИЛИ
ВНУТРИКО
ЖНО)
АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКИЙ
ПОСТАНОВКА
АЛЛЕРГИЧЕ
СКОЙ
ПРОБЫ
БЮРНЕ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬ
ТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬ
ТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА И ТИПА ВОЗБУДИТЕЛЯ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
11
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
сибирской язвы »
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
БАКТЕРИО
ЛОГИЧЕСК
ИЙ
РИФ
КАПСУЛООБРАЗОВАНИЕ
ХАРАКТЕР РАСПОЛОЖЕНИЯ МИКРОБОВ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА
МИКРОБОВ
ВЫДЕЛЕНИЕ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ ИЗ
ИССЛЕДУ
ЕМОГО
МАТЕРИА
ЛА
РЕАКЦИЯ
ТЕРМОПРЕЦИП
ИТАЦИИ
АСКОЛИ
ВНУТРИКОЖНАЯ
ПРОБА С
АНТРАКСИНОМ
ВВЕДЕНИЕ
ИССЛЕДУЕМ
ОГО
МАТЕРИАЛА
ЧУВСТВИТЕ
ЛЬНЫМ
ЛАБОРАТОР
НЫМ
ЖИВОТНЫМ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕНОЙ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ПАТОГЕННОСТЬ ДЛЯ
ЛАБОРАТОРНЫХ
ЖИВОТНЫХ
ПРОБА С
ПЕНИЦИЛЛИНОМ
ЧУВСТВИТЕЛЬН
ОСТЬ К
СИБИРЕЯЗВЕННОМУ
БАКТЕРИОФАГУ
АНТИГЕННЫЕ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
КУЛЬТУРАЛЬ
НЫЕ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
АЛЛЕРГО
ЛОГИЧ
ЕСКИЙ
БИОЛО
ГИЧЕС
КИЙ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА ВОЗБУДИТЕЛЯ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
12
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
В мазках из материала больного с подозрением на кожную форму сибирской
язвы, были выявлены микроорганизмы типичные по морфологическим и
тинкториальным свойствам для возбудителя этого заболевания. Какие это
микроорганизмы?
A. Крупные грамположительные палочки с обрубленными концами,
располагающиеся цепочками
B. Грамположительные палочки, располагающиеся под углом друг к другу
C. Грамотрицательные палочки с закругленными концами, располагающиеся
в мазках хаотично
D. Грамотрицательные палочки, окрашенные биполярно
E. Грамотрицательные, слегка изогнутые палочки
Задание 2
При микроскопии мазка из органов мыши, погибшей от экспериментального
заражения, обнаружили неокрашенное обрамление вокруг окрашенных бактерий,
которое является характерным признаком для B. anthracis. Назовите этот признак.
A.
Включение
B.
Спора
C.
Капсула
D.
Клеточная стенка
E.
Слизистый слой
Задание №3
Кровь больного посеяли на мясо-пептонный агар. После инкубации в
термостате на питательной среде выросли крупные матовые колонии, серо-белого
цвета с неровным краем, которые при микроскопии напоминали «львиную гриву».
Для возбудителей какого заболевания характерны такие культуральные свойства?
А. Бруцеллеза
B.Сибирской язвы
C.Туляремии
D.Чумы
E. Возвратного тифа
Задание 4
В бактериологическую лабораторию поступил материал для исследования
(кусочки меха), который вероятно стал причиной возникновения нескольких
случаев сибирской язвы. Какую серологическую реакцию по автору необходимо
использовать в данном случае для выявления бацилл в мехе?
A. Хеддльсона
B. Видаля
C. Грубера
D. Райта
E. Асколи
13
Задание 5
При исследовании молока коз выделена чистая культура микробов – мелкие,
неподвижные, грамотрицательные коккобактерии не образующие спор и капсул. На
печеночном агаре образовывали круглые, гладкие колонии, напоминающие
капельки росы. Какие микроорганизмы вероятнее всего могли быть выделены?
A.
B. anthracis
B.
B. canis
C.
B. melitensis
D.
B. ovis
E.
B. anthracoides
Задание 6
При расследовании вспышек бруцеллеза в одном из фермерских хозяйств в
полевых условиях с помощью реакции Хеддльсона выявили положительные
результаты от 5 обследованных лиц. Какая из перечисленных ниже реакций
позволит подтвердить предполагаемый диагноз?
A.
Реакция Грубера
B.
Реакция Райта
C.
Реакция Асколи
D.
Реакция Вассермана
E.
Реакция Борде-Жангу
Задание 7
Больной К, 40 лет, ветфельдшер обратился к врачу с жалобами на боли в
суставах, периодическую лихорадку, общее недомогание, потливость в ночное
время. Болеет на протяжении двух недель. У больного была взята кровь и
поставлена реакция Райта, которая оказалась положительной в титре 1:200. О каком
заболевании можно думать в данном случае?
A.
Бруцеллезе
B.
Туберкулезе
C.
Йерсиниозе
D.
Ревматизме
E.
Гриппе
Задание 8
Массовое обследование работников фермы с помощью внутрикожной пробы с
бруцеллином позволило выявить лиц для более тщательного обследования на
бруцеллез. Как называется по автору проведенная внутрикожная проба?
A.
Бюрне
B.
Манту
C.
Коха
D.
Пирке
E.
Шика
14
Задание 9
В хозяйстве среди коров появилось заболевание, сопровождающееся
поражением суставов, снижением удоя молока, мертворожденными плодами и было
диагностировано как бруцеллез. Какое мероприятие, касающееся специфической
профилактики этого заболевания, необходимо провести среди работников данного
хозяйства?
А. Прививка живой бруцеллезной вакциной
В. Прививка убитой бруцеллезной вакциной
С. Введение бруцеллезного анатоксина
D. Введение противобруцеллезной сыворотки
Е. Введение антибиотиков после определения антибиотикограммы выделенной
культуры бруцелл
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную
работу: микроскопируют мазки из бруцелл, возбудителей сибирской язвы и из
патологического материала больного сибирской язвой; учитывают реакции
агглютинации Райта и термопреципитации Асколи, делают выводы и оформляют
протокол. В ходе занятия студенты решают ситуационные задачи из пособия:
“Задания для самостоятельной работы студентам высших медицинских учебных
заведений III- IV уровня аккредитации”. Заполняют схемы лабораторной
диагностики бруцеллеза и сибирской язвы в учебном пособии. Заканчивается
занятие итоговым тестовым контролем.
ЗАНЯТИЕ 13
Тема №14: «Возбудители чумы и туляремии. Микробиологическая
диагностика»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Чума – особо опасное инфекционное заболевание. В Украине оно не
регистрируется, однако в ряде стран Африки, Южной Америки показатель
заболеваемости еще очень значительный и нет гарантии, что вспышка этого
грозного заболевания не может возникнуть и в нашей стране. Кроме того,
возбудители чумы могут быть использованы в качестве бактериологического
оружия. Поэтому каждый врач должен хорошо знать свойства этого микроба, уметь
оценивать результаты лабораторного исследования на чуму и проводить
соответствующие мероприятия по недопущению распространения
этого
заболевания.
Туляремия – зооантропоноз, вызванный Francisella tularensis, который
сопровождается общей интоксикацией, лихорадкой, поражением лимфатических
узлов, кожи, слизистых оболочек и легких. Клиника зависит от входных ворот
инфекции. Человек инфицируется контактно, алиментарно и аэрогенно.
Минимальную инфицирующую дозу составляет одна микробная клетка.
15
Вследствие общности симптомов с сибирской язвой, гриппом, малярией,
бруцеллезом, чумой решающую роль в дифференциальной диагностике этого
заболевания играют микробиологические исследования. Работа с возбудителями
чумы и туляремии проводится с обязательным выполнением режима безопасности,
регламентированного специальными инструкциями.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): уметь использовать микробиологические методы исследования
для установления микробиологического диагноза чумы и туляремии с последующим
применением в клинической практике.
Конкретные цели:
1. Выбрать методы микробиологической диагностики чумы и туляремии.
2. Определять особенности морфологических и тинкториальных
свойств
возбудителей чумы и туляремии для микроскопической диагностики.
3. Оценивать результаты методов микробиологической диагностики чумы и
туляремии.
Теоретические вопросы темы
1. Биологические свойства возбудителей чумы и туляремии.
2. Особенности работы с исследуемым материалом при подозрении на чуму и
туляремию.
3. Методы микробиологической диагностики чумы, туляремии и оценка их
результатов.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.223-227, 229-237,239-243.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.372-377, 394-398, 398-401, 418-421.
3. Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология: СПб: Специальная литература, 1998.- С. 355-359, С. 364-367 .
4. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией.
К., Высшая школа, 1992. – С.221-226, С.237-240.
5. Лекционный материал.
16
Дополнительная литература:
1. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология: Учебник.- 2-е изд.,
перераб. и дополн.- М.: Медицина,1983.- С. 294-296, 311-314.
Во время работы с литературой для лучшего усвоения содержания обучения
используйте граф логической структуры темы.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия по теме: «Возбудители чумы и туляремии.
Микробиологическая диагностика»
1. Микроскопировали препараты из возбудителей чумы и туляремии.
2. Ознакомились с мероприятиями защиты
в лаборатории особо опасных
инфекций.
3. Заполнили схемы микробиологической диагностики чумы и туляремии в
учебном пособии.
4. Решали ситуационные задания.
17
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая
диагностика чумы»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ВЫДЕЛЕ
НИЕ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ИЗ
ИССЛЕДУЕ
МОГО
МАТЕРИАЛА
РИФ
ХАРАКТЕР РАСПОЛОЖЕНИЯ
МИКРОБОВ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ПРЕПАРАТОВ ИЗ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ВЫЯВЛЕНИЕ
АНТИТЕЛ В
СЫВОРОТКЕ
КРОВИ
БОЛЬНОГО В
РПГА, РИФ
(непрямая), ИФА
БИОЛОГИЧЕСКИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
МОРСКОЙ
СВИНКЕ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
СВОЙСТВА ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
БИОХИ
МИЧЕС
КИЕ
АНТИ
ГЕН
НЫЕ
ТОКСИ
НООБРАЗ
ОВАНИЕ
ПАТОГЕННОСТЬ ДЛЯ
ЖИВОТНЫХ
ФАГОЛИЗИС
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА ВОЗБУДИТЕЛЯ
18
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая
диагностика туляремии»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
ИСЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
БИОЛОГИЧ
ЕСКИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕ
СКИЙ
ИНФИЦИРОВ
АНИЕ
ИССЛЕДУЕМ
ЫМ
МАТЕРИАЛОМ
ЛАБОРАТОР
НЫХ
ЖИВОТНЫХ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
СПЕЦИФИЧЕСКИХ
АНТИТЕЛ В
РАЗВЕРНУТОЙ РА С
ТУЛЯРЕМИЙНЫМ
ДИАГНОСТИКУМОМ,
РПГА С
ЭРИТРОЦИТАРНЫМ
ДИАГНОСТИКУМОМ
ПРИГОТОВЛЕН
ИЕ МАЗКОВОТПЕЧАТКОВ
АЛЛЕРГОЛОГИЧЕСКИЙ
КИЙНИЙ
ПОСТАНОВ
КА КОЖНОАЛЛЕРГИЧЕ
СКОЙ
ПРОБЫ С
ТУЛЯРИНОМ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫДЕЛЕНИЕ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ИЗУЧЕНИЕ
МОРФОЛО
ГИЧЕСКИХ И
ТИНКТОРИАЛЬ
НЫХ СВОЙСТВ
МИКРОБОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ ВЫДЕЛЕННОЙ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
КУЛЬТУРАЛЬНЫХ
БИОХИМИЧЕСКИХ
АНТИГЕННЫХ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА ВОЗБУДИТЕЛЯ
19
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
При микроскопии препарата из жидкой, пенистой с примесью крови мокроты
больного человека, найдены мелкие, с нежной капсулой, грамнегативные палочки,
концы которых окрашены интенсивно. В посеве мокроты на МПА были получены
колонии R-типа, которые напоминали “смятый платочек”. Возбудителям какого
заболевания свойственны такие биологические признаки?
А. Туляремии
В. Чумы
С. Сибирской язвы
D. Микоплазмоза
Е. Легионеллеза
Задание 2
После микроскопии препарата из мокроты больного врач заподозрил чуму.
Каким методом микробиологической диагностики может быть достоверно
подтвержден этот диагноз?
А. Бактериологическим
В. Серологическим
С. Биологическим
D. Аллергологическим
Е. Экспресс – методом ( РИФ)
Задание 3
У охотника появились головная боль, слабость, температура 39°С. На коже шеи
образовалась не глубокая язва. Из содержимого язвы приготовлен мазок и окрашен
по Граму. В препарате обнаружены грамнегативные микробы палочковидной
формы, не имеющие спор. О каком возбудителе можно думать в данной ситуации?
А. Туляремии
В. Сибирской язвы
С. Чумы
D. Бруцеллеза
Е. Лейшманиоза
Задание 4
Врач заподозрил у больного бубонную форму туляремии и отправил материал
для проведения бактериологического метода диагностики. В чем особенности этого
метода в данном случае?
А. Выделяют чистую культуру бактерий предварительно инфицировав
лабораторных животных
В. Выделяют чистую культуру бактерий на плотных питательных средах
С. Выделяют чистую культуру бактерий с использованием сред обогащения
D. Идентифицируют выделенную культуру бактерий по антигенной структуре
Е. Выделяют чистую культуру бактерий на жидких питательных средах
20
Задание 5
В инфекционную больницу поступил пациент с симптомами характерными
для туляремии. Какой метод микробиологической диагностики является наиболее
ранним и приемлемым в клинических условиях?
А. Биологический
В. Серологический
С. Аллергологический
D. Микроскопический
Е. Бактериологический
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную
работу по микроскопии мазков из патологического материала,
решают
ситуационные задачи из пособия “ Задания для самостоятельной работы студентам
высших медицинских учебных заведений III-IV уровней аккредитации ” № 148153,166-170; заполняют схемы микробиологической диагностики в учебном пособии
по специальной микробиологии и вирусологии.
Преподаватель проверяет правильность заполнения схем, рисунки
микроскопической картины. В конце занятия преподаватель контролирует качество
усвоения материала с помощью тестов.
21
ЗАНЯТИЕ 14
Тема №15: «Возбудители сифилиса, возвратных тифов, лептоспироза.
Микробиологическая диагностика спирохетозов»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Заболевания, которые вызываются патогенными спирохетами, встречаются
достаточно широко, поэтому знание методов лабораторной диагностики этих
инфекций необходимо врачу любой специальности. За последние годы резко
увеличилась заболеваемость сифилисом. Регистрируются нередко случаи
лептоспирозной инфекции, в том числе и в Донецкой области. Источником
лептоспирозной инфекции являются животные, особенно крысы, мыши, полевки,
хомяки, которые выделяют возбудителя во внешнюю среду. Путь передачи
лептоспирозной инфекции преимущественно водный, и реализуется он часто на
шахтах Донбасса. Заболеваемость вшивым возвратным тифом может принимать
эпидемический характер в связи с народными бедствиями (войны, разруха),
скоплениями беженцев. Клещевой возвратный тиф встречается в Средней Азии,
Херсонской области.
Знание методов микробиологической диагностики спирохетозов, правильная
оценка их результатов поможет определить тактику врача при проведении
противоэпидемических мероприятий и лечении больных в очаге инфекции.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): Уметь использовать микробиологические методы исследования
для постановки микробиологического диагноза с последующим использованием в
клинической практике.
Конкретные цели:
1.
Определять особенности морфологических и тинкториальных свойств
возбудителей спирохетозов для микроскопической диагностики.
2.
Интерпретировать результаты серологических реакций (Вассермана, РИБТ,
Закс-Витебского, агглютинации) для проведения серологической диагностики.
Теоретические вопросы темы
1.
Микроскопический метод лабораторной диагностики сифилиса, возвратных
тифов, лептоспироза.
2.
Серологический метод лабораторной диагностики сифилиса (реакция
Вассермана, реакция иммобилизации трепонем), возвратных тифов (реакция
Риккенберга-Брусина), лептоспироза (реакция микроагглютинации и лизиса).
3.
Биологический метод диагностики возвратных тифов, лептоспироза.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
22
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.284-290, 292-298.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.458-463.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А., Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология; СПб: «Спецлитература», 1998.-С.481-491
4. Лекционный материал.
5.Кривошеин Ю.С. Руководство к практическим занятиям по медицинской
микробиологии. 1986.-С.171-180.
Дополнительная литература:
1. Медицинская микробиология. Часть первая /Под ред. А.М.Королюка и
В.Б.Сбойчакова.- СПб, 2002.-С.242-249
При работе с литературой для лучшего усвоения содержания
воспользуйтесь графом логической структуры темы.
обучения
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия по теме: «Возбудители сифилиса, возвратных
тифов, лептоспироза. Микробиологическая диагностика спирохетозов»
1.
Микроскопировали мазки из возбудителей сифилиса и возвратных тифов,
окрашенных по Романовскому.
2.
Изучили схему постановки реакции Вассермана с тремя антигенами и
сывороткой больного сифилисом.
3.
Микроскопировали мазки из возбудителей лептоспироза, окрашенных по
Бурри.
4.
Ознакомились с препаратами для диагностики сифилиса, возвратных тифов,
лептоспироза.
23
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
сифилиса»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
РНГА
РИП
РИБТ
ИФА
(НЕ ПРЯМАЯ)
РИФ
РЕАКЦИЯ МИКРОПРЕЦИПИТАЦИИ
РЕАКЦИЯ ВАССЕРМАНА
РИФ ПРЯМАЯ
ИССЛЕДОВАНИЕ В ТЕМНОМ ПОЛЕ (ПОДВИЖНОСТЬ)
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СПИРОХЕТ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
24
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
возвратных тифов»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
ИЗГОТОВ
ЛЕНИЕ
МАЗКА
КРОВИ И
ПРЕПАРАТА
«ТОЛСТАЯ
КАПЛЯ»
ИЗГОТОВ
ЛЕНИЕ
ПРЕПА
РАТА
«ВИСЯЧАЯ
КАПЛЯ”
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
СПЕЦИФИЧЕСКИХ
АНТИТЕЛ В
СЫВОРАТКЕ КРОВИ
БОЛЬНОГО В РСК,
НЕПРЯМОЙ РИФ, ИФА,
РИКкЕНБЕРГАБРУСИНА
БИОЛОГИЧЕСКИЙ
Инфицирование
морской свинки
исследуемым
материалом
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ПОДВИЖНОСТЬ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
НЫНІ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ
МИКРОБОВ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО
ДИАГНОЗА
25
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
лептоспироза»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
ПОСЕВ
ИССЛЕДУЕМО
ГО
МАТЕРИАЛА
НА
ПИТАТЕЛЬНЫЕ
СРЕДЫ ДЛЯ
ВЫДЕЛЕНИЯ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
ОСОБЕННОСТИ
ВЫДЕЛЕННОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
БИОЛОГИЧЕСКИЕ
ПОДВИЖНОСТЬ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
БИОЛОГИ
ЧЕСКИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ВНУТРИБРЮШИННОЕ
ИНФИЦИРО
ВАНИЕ
ЖИВОТНЫХ
ИССЛЕДУЕМЫМ
МАТЕРИАЛОМ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
АНТИГЕННЫЕ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
СЕРОЛОГИ
ЧЕСКИЙ
СЫВОРОТКА
КРОВИ
БОЛЬНОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
АНТИТЕЛ К
ЛЕПТОСПИРАМ
В СЫВОРОТКЕ
КРОВИ
БОЛЬНОГО В
РЕАКЦИЯХ
МИКРОАГГЛЮТИНАЦИИЛИЗИСА
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
26
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
У умершего от острого инфекционного заболевания, которое сопровождалось
лихорадкой, желтухой, гемморагическими высыпаниями на коже и слизистых
оболочках, а также острой почечной недостаточностью, при гистологическом
исследовании ткани почки (окраска по Романовскому-Гимзе) выявлены извитые
бактерии, которые имеют вид букв С и S. Какие бактерии могли вызвать такое
заболевание?
A. Лептоспиры
B. Трепонемы
C. Спириллы
D. Боррелии
E. Кампилобактерии
Задание 2
При микроскопическом исследовании препарата крови, окрашенного по
Романовскому-Гимзе, врач выявил микроорганизмы в виде тонких нитей синефиолетового цвета с несколькими большими завитками, длинной от 10 до 30 мкм.
Для возбудителей какого инфекционного заболевания характерны такие
морфологические и тинкториальные свойства?
A. Возвратного тифа
B. Сифилиса
C. Лептоспироза
D. Трипаносомоза
E. Лейшманиоза
Задание 3
В микропрепарате, приготовленном из пунктата регионарного лимфоузла
больного и окрашенного по Романовскому, врач выявил тонкие бледно-розового
цвета микроорганизмы с 12-14 равномерными завитками, длиной 10-13 мкм. О
возбудителе какого инфекционного заболевания может идти речь в данном случае?
A. Сифилиса
B. Трипаносомоза
C. Лептоспироза
D. Возвратного тифа
E. Лейшманиоза
Задание 4
Для серологической диагностики сифилиса в реакции Вассермана врач-лаборант
подготовил такие реактивы: кардиолипидный антиген, спиртовой экстракт липидов
из сердечной мышцы быка с холестерином, антиген из обезвреженных ультразвуком
трепонем, гемолитическую систему, физиологический раствор, исследуемую
сыворотку. Какой еще компонент необходим для постановки РСК?
A. Комплемент
B. Живые трепонемы
C. Эритроциты барана
D. Диагностическая преципитирующая сыворотка
E. Антиглобулиновая сыворотка
27
Задание 5
У пациента с предварительным диагнозом «сифилис» лаборант взял сыворотку
крови для постановки иммунной реакции, которая основана на выявлении антител,
которые останавливают движение трепонем и приводят к их гибели. Какая реакция
была использована для диагностики?
A. Реакция иммобилизации
B. Реакция связывания комплемента
C. Реакция агглютинации
D. Реакция преципитации
E. Реакция нейтрализации
Задание 6
Для подтверждения диагноза «клещевой возвратный тиф» цитратную кровь
больного ввели подкожно животным. Через 5-6дней в крови у них обнаружили
большое количество боррелий. Каких животных использовали для этой цели?
A. Морских свинок
B. Кроликов
C. Собак
D. Крыс
E. Белых мышей
Задание 7
Для подтверждения диагноза «лептоспироз» кроликам подкожно ввели осадок
мочи больного. У животных через 5-7дней появилась лихорадка, желтушность
слизистой оболочки, что подтвердило диагноз. Какой метод лабораторной
диагностики использовали в данном случае?
A. Биологический
B. Микроскопический
C. Серологический
D. Аллергологический
E. Бактериологический
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию уровня
подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную работу:
изучают окрашенные по Романовскому и Бурри препараты больных сифилисом,
возвратным тифом и лептоспирозом, изучают схему постановки реакции
Вассермана. Решают задания по интерпретации
результатов реакции
иммобилизации бледных трепонем, знакомятся с препаратами для диагностики и
профилактики спирохетозов, в конце занятия преподаватель проводит итоговый
тестовый контроль, подписывает протоколы.
28
29
ЗАНЯТИЕ 15
Тема № 16 «Патогенные микобактерии. Микробиологическая диагностика
туберкулеза и лепры»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Прогноз экспертов ВОЗ, сделанный в 1960 году о возможности полного
освобождения от туберкулеза в ближайшем будущем, к сожалению не оправдался.
Уже в 1991 году Генеральная Ассамблея ВОЗ объявила туберкулез проблемой
всемирной опасности на нашей планете. Современный уровень заболеваемости
туберкулезом характеризуется как пандемия. До 1/3 населения мира инфицировано
возбудителями туберкулеза.
Значительно повысилось число больных с распространенными, атипичными и
осложненными формами туберкулезного процесса в легких и других органах.
Установлена высокая резистентность микобактерий туберкулеза к антимикробным
препаратам. В Украине подписан «Закон Украины о борьбе с заболеваемостью
туберкулезом »( 2001 г.). Этот закон определяет правовые, организационные и
финансовые основы деятельности органов исполнительной власти, направленные на
предупреждение возникновения и распространения заболеваемости туберкулезом.
Важной медицинской и социальной проблемой продолжает оставаться также
лепра, возбудители которой очень стойки к химическим агентам и факторам
окружающей среды.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): уметь выбрать необходимые микробиологические методы
исследования для постановки микробиологического диагноза «туберкулез», «лепра»
с последующим применением в клинической практике.
Конкретные цели:
1. Путем микроскопии препаратов определять возбудителей туберкулеза по
морфологическими и тинкториальным свойствам и отличать их от M.leprаe.
2. Отличать микобактерии туберкулеза и лепры по культуральным свойствам,
кордфактору при проведении бактериологической диагностики.
3. Интерпретировать результаты микроскопического, бактериологического,
биологического, аллергологического методов диагностики.
4. Выбрать препараты для микробиологической диагностики и специфической
профилактики туберкулеза.
Теоретические вопросы темы
1. Морфологические и тинкториальные свойства возбудителей туберкулеза и
лепры.
2. Культуральные и другие биологические свойства патогенных микобактерий.
3. Патогенез заболевания туберкулезом и лепрой.
4. Методы микробиологической диагностики туберкулеза и лепры
30
5. Препараты, которые используются для микробиологической диагностики и
специфической профилактики.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.272-279.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.446-451.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология. Учебник. «Специальная литература», 1998. - С. 437-448.
4.Кривошеин Ю.С., Пяткин К.Д. и др. Руководство к практическим занятиям по
медицинской микробиологии и лабораторной диагностике инфекционних
заболеваний.-1986. -С. 160-168.
5.Лекционный материал.
Дополнительная литература:
1. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология.-1980.-С.343-353.
2. Пяткин К.Д., Кривошеїн Ю.С. «Мікробіологія з вірусологією та імунологією
К.»Вища школа»1992 С.125-130.
При работе с литературой лучше усвоить материал Вам поможет граф логической
структуры.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Инструкция для проведения самостоятельной работы на практическом занятии по
теме «Патогенные микобактерии.Микробиологическая диагностика туберкулеза и
лепры». Внимательно прочитайте инструкцию, в которой последовательно показан
ход окраски мазков из микобактерий по методу Циля-Нильсена.
Окраска мазков по методу Циля-Нильсена
1. Фиксированный мазок покрыть полоской фильтровальной бумаги и налить на
неѐ карболовый фуксин Циля.
2. Мазок подогреть над пламенем горелки до появления паров, потом отвести в
сторону для охлаждения.
3. Прибавить новую порцию красителя.
4. Подогревание повторить 2-3 раза.
5. После охлаждения препарата снять фильтровальную бумагу и промыть препарат
водой.
6. Обесцветить препарат путем погружения его в 5% раствор серной кислоты
7. Несколько раз промыть препарат водой.
31
8. Окрасить препарат на протяжении 3-5 минут водно-спиртовым раствором
метиленового синего.
9. Препарат промыть водой и высушить.
Протокол практического занятия по теме: «Патогенные микобактерии.
Микробиологическая диагностика туберкулеза и лепры»
1. Промикроскопировали мазок из мокроты больного туберкулезом, окрашенный по
методу Циля-Нильсена. Зарисовали препарат.
2. Приготовили мазок из обезвреженной мокроты больного туберкулезом, окрасили
по методу Циля-Нильсена, промикроскопировали.
3. Изучили состав современных питательных сред для культивирования
туберкулезных палочек: среда Левенштейна-Йенсена, среда Финн-2.
4. Зарисовали препарат из патологического материала больных лепрой.
5. Изучили микробиологическую диагностику туберкулеза и лепры по учебному
пособию и стендам музея.
6. Изучили биологические препараты для диагностики и специфической
профилактики туберкулеза и лепры.
32
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
туберкулеза»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
БИОЛОГИЧ
ЕСКИЙ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
ЗАРАЖЕНИЕ
МОРСКОЙ
СВИНКИ
ПОЛУЧЕНИЕ
МИКРОКУЛЬТУР НА
ПРЕДМЕТНОМ
СТЕКЛЕ
ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОСК
ОПИЯ
ПРЕПАРА
ТА
СВОЙСТВА ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
МЕТОДЫ
НАКОПЛЕН
ИЯ
(ГОМОГЕНИ
ЗАЦИЯ,
ФЛОТАЦИЯ)
КУЛЬТУ
РАЛЬНЫЕ
СЕРОЛОГИЧЕ
СКИЙ
АЛЛЕРГОЛО
ГИЧЕСКИЙ
ПРОБА
МАНТУ
ПОСТАНОВКА
РПГА, РСК
ВСКРЫТИЕ
ТРУПА
МИКРО
СКОПИЯ
ПРЕПАРАТА
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
МИКРОСКО
ПИЧЕСКИЙ
МИКРОСКОП
ИЯ МАЗКОВОТПЕЧАТКОВ ИЗ
ОРГАНОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
МОРФОЛОГИ
ЧЕСКИЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА МИКРОБОВ
УСТАНОВЛЕНИЕ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
33
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
При исследовании мокроты бактериоскопическим методом выявлены тонкие,
длинные, слегка изогнутые палочки, окрашенные в рубиновый цвет и
расположенные небольшими скоплениями. О каком возбудителе можно думать на
основании этого исследования?
А. M. tuberculosis
В. S. pneumoniae
С. M. hominis
Д. M. smegmatis
Е. К. рneumoniae
Задание 2
При исследовании мокроты выявлены тонкие, длинные, слегка изогнутые
палочки, окрашенные в рубиновый цвет и расположенные небольшими
скоплениями. Каким методом в этом случае выявлен возбудитель?
А. Бактериоскопическим
В. Серологическим
С. Методом флотации
D. Методом Прайса
Е. Методом гомогенизации
Задание 3
При исследовании мокроты микроскопическим методом у больного
туберкулезом выявлены тонкие, длинные, слегка изогнутые палочки, окрашенные в
рубиновый цвет и расположенные небольшими скоплениями. Какой метод окраски
препарата использовался в данном исследовании?
А. По Граму
В. По Бурри
С. По Цилю-Нильсену
D. По Романовскому
Е. По Нейссеру
Задание 4
Осадок мочи, взятой у больного с подозрением на туберкулез посеяли на
питательные среды. Какие питательные среды использовали в данном случае?
А. Эндо
В. Желточно-солевой агар
С. Желчный бульон
D. Левенштейна-Йенсена
Е. Нови, Нилль и Николь (NNN)
Задание 5
Осадок мочи, взятой у больного с подозрением на туберкулез посеяли на
плотные питательные среды. Какие колонии образуются на питательной среде в
случае подтверждения данного диагноза?
А. В виде львиной гривы
34
В. В виде кружевных платочков
С. Бородавчатый рост
D. Шагреневый рост
Е. В виде капелек росы
Задание 6
Ученикам второго класса сделали пробу Манту и через 24 часа учли
результаты этой реакции.С какой целью ученикам была поставлена эта проба?
А. Диагностики заболевания
В Выявления степени интоксикации
С. Выявления срока заболевания
D. Отбора учеников для ревакцинации
Е. Определения иммунного статуса
Задание 7
Ученикам второго класса сделали пробу Манту и через 24 часа учли
результаты этой реакции. Какой препарат используется для постановки этой пробы
в современных условиях?
А. Альт-туберкулин
В. БЦЖ
С. Новый туберкулин
D. РРД
Е. Разведенный туберкулин
Задание 8
Младенцам в роддоме на 5-й день после рождения проведена прививка против
туберкулеза. Какой препарат использовался в данном случае?
А. Вакцина - EV
В. Вакцина - БЦЖ
С. Вакцина - ТABte
D. Вакцина - HBVax
Е. Альт-туберкулин
Задание 9
Младенцам в роддоме на 5-й день после рождения проведена прививка против
туберкулеза. Из какого вида бактерий приготовлена вакцина для прививки в
данном случае?
А. M. bovis
В. M. avium
С. M. tuberculosis
D. M. leprae
Е. M. africanum
Задание 10
У студента из Индии, который приехал учиться в Украину, заподозрена лепра,
которая проявилась в виде обширного повреждения участков кожи лица.
35
Какой метод микробиологической диагностики следует применить, чтобы
подтвердить этот диагноз?
А. Серологический
В. Биологический
С. Иммуноблотинг
D. Микроскопический
Е. Аллергологический
Задание 11
У студента из Индии, который приехал учиться в Украину, с помощью
микроскопического метода диагностики заподозрена лепра. На основании какой
микроскопической картины можно определить возбудителя лепры в этом случае?
А. Извитые бактерии
В. Кокковые формы микробов
С. Стрептобациллы
D. Бактерии, которые располагаются под углом
Е. Бактерии, которые располагаются параллельно
Задание 12
У студента из Индии, который приехал учиться в Украину, с помощью
микроскопического метода диагностики заподозрена лепра. Каким способом
окрашивают приготовленный препарат в этих случаях?
А. По Морозову
В. По Граму
С. По Леффлеру
D. По Цилю-Нильсену
Е. По Романовскому
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты микроскопируют мазки
приготовленные из мокроты больного туберкулезом легких. Самостоятельно
готовят мазок из обезвреженной мокроты больного туберкулезом легких, осваивают
новый метод окраски по Цилю-Нильсену. Студенты изучают разновидности
туберкулинов, вакцину БЦЖ, знакомятся со средами для культивирования
микобактерий туберкулеза. На протяжении занятия студенты решают задачи №180184 из «Задания для самостоятельной работы студентов по курсу общей и частной
микробиологии».
Студенты рисуют возбудителей лепры с таблиц. Преподаватель проверяет
правильность заполнения схем, рисунков микроскопической картины при изучении
препаратов с возбудителями туберкулеза, лепры. В конце занятия проводится
тестовый контроль и подписываются протоколы.
36
ЗАНЯТИЕ 16
Тема №17: «Стафилококки, стрептококки. Микробиологическая диагностика
стафилококковых и стрептококковых заболеваний»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Проблема стафилококковой и стрептококковой инфекций уже на протяжении
многих лет является одной из наиболее важных для
практического
здравоохранения.
Стафилококки представляют собой широко распространенную в природе
группу микроорганизмов, объединяющую в себе микробы с различно выраженной
степенью их патогенности.
Стафилококки являются возбудителями гнойничковых заболеваний кожи,
фурункулов, абсцессов, флегмон. Способны вызывать сепсис, септикопиемии. Часто
стафилококковые заболевания наблюдаются у роженец
и новорожденных.
Стафилококки могут быть причиной пищевых отравлений, госпитальных инфекций.
Стрептококки вызывают поражения дыхательных путей (пневмония,
скарлатина, фарингит и др.), ЛОР органов, сердечно-сосудистой системы, гнойновоспалительные заболевания кожи
и подкожной клетчатки, воспалительные
заболевания полости рта, сепсис и др.
Важная роль в диагностике этих заболеваний отводится микробиологическим
исследованиям.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): использовать микробиологические методы исследования для
постановки микробиологического диагноза стафилококковых и стрептококковых
инфекций с последующим применением в клинической практике.
Конкретные цели:
1. Определять стафилококки и стрептококки по морфологическим и
биологическим свойствам.
2. Выбрать адекватные методы микробиологической диагностики стафилококковых
и стрептококковых инфекций.
3. Оценить результаты методов микробиологической диагностики заболеваний
стафилококковой и стрептококковой этиологии.
Теоретические вопросы
1. Роль стафилококков и стрептококков в патологии человека. Особенности
патогенеза при стафилококковых и стрептококковых инфекциях.
2. Морфологические, тинкториальные, культуральные, биохимические, антигенные
свойства стафилококков и стрептококков.
3. Методы лабораторной диагностики заболеваний стафилококковой и
стрептококковой этиологии
37
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.172-190.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.332-344, 348-356.
3.А.И. Коротяев, С.А. Бабичев “Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология” Учебник СПБ: “Специальная литература” 1998.С.330-342.
4.Ю.С. Кривошеин “Руководство к практическим занятиям по медицинской
микробиологии”, Киев. Высшая школа. Главное издательство. 1996.С. 125-136.
5.К.Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин “Микробиология с вирусологией и иммунологией”
Киев, Высшая школа, 1992-С.115-137
6.Лекционный материал.
Дополнительная литература
1. К.Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин “Микробиология”, Г., “Медицина”, 1980, С.227244.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Во время работы с учебной литературой используйте граф логической
структуры темы. Подготовку к практическому занятию необходимо начать с
усвоения материала учебника и лекционного материала по данной теме.
Протокол практического занятия по теме: «Стафилококки, стрептококки.
Микробиологическая диагностика стафилококковых и стрептококковых
заболеваний»
1. Изучение морфологических и тинкториальных свойств стафилококков,
стрептококков путем микроскопии окрашенных мазков из чистой культуры
данных видов микробов.
2. Изучение культуральных, биохимических свойств стафилококков и
стрептококков. Демонстрация особенностей роста этих микробов на питательных
средах: МПА, МПБ, ЖСА, кровяном агаре, средах Гисса.
3. Разбор по учебному пособию и стендам учебного музея кафедры
микробиологической диагностики стафилококковых и стрептококковых
заболеваний
4. Демонстрация диагностических, лечебных и профилактических препаратов.
38
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
стафилококковых инфекций»
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
ПОСЕВ НА ПИТАТЕЛЬНЫЕ
СРЕДЫ ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ
ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ХАРАКТЕР
РАСПОЛОЖЕНИЯ
МИКРОБОВ
ТОКСИНООБРАЗОВАН
ИЕ
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ К
АНТИБИОТИКАМ
БИОЛОГИЧЕСКИЕ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
СВОЙСТВА ВЫДЕЛЕННОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
39
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая
диагностика стрептококковых заболеваний»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
СЫВОРОТКА КРОВИ
ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
РЕАКЦИЯ
НЕЙТРАЛИЗАЦИИ
СТРЕПТОЛИЗИНА- О
АНТИГЕННЫЕ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
РИФ
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕННОЙ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
ХАРАКТЕР РАСПОЛОЖЕНИЯ
МИКРОБОВ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТ
Ь К БАЦИТРАЦИНУ
И
СУЛЬФАНИЛАМИДУ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ДИАГНОСТИЧЕСКОГО
ТИТРА
АНТИСТРЕПТОЛИЗИНАО В ДИНАМИКЕ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
40
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
В больницу поступил ребенок с диагнозом «Стафилококковый сепсис». На
какую питательную среду необходимо посеять кровь больного с целью выделения
возбудителя?
A. Плоскирева
B. Мясо-пептонный агар
C. Для контроля стерильности
D. Бучина
E. Желточно-солевой агар
Задание 2
Больной жалуется на частое появление фурункулов на лице, шее, плечах. В
посеве гноя выявлены шаровидной формы микробы, располагающиеся скоплениями
в виде гроздьев винограда и образующие на желточно-солевом агаре колонии,
окруженные радужным венчиком. Какие микроорганизмы присутствовали в
исследуемом материале?
A. Диплококки
B. Микрококки
C. Стрептококки
D. Тетракокки
E. Стафилококки
Задание 3
В городе зарегистрирована вспышка пищевой токсикоинфекции, возникшая
после употребления заварных пирожных, из остатков которых выделены
патогенные микроорганизмы. Какие из перечисленных ниже микроорганизмов
могли быть наиболее вероятными возбудителями в данном случае?
A. Cl. perfringens
B. S. aureus
C. E. coli
D. S. typhimurium
E. S. enteritidis
Задание 4
При обследовании медицинского персонала хирургического отделения из зева
операционной сестры выделены грамположительные кокки, располагающиеся в
мазках в виде гроздьев винограда, образующие на желточно- солевом агаре колонии
S-формы с радужным венчиком, расщепляющие до кислоты маннит в анаэробных
условиях.
41
Какой из приведенных ниже тестов в совокупности с перечисленными выше
признаками позволит отнести выделенные стафилококки к S. aureus?
A. Способность коагулировать плазму крови
B. Способность расщеплять мочевину
C. Способность расщеплять цистин
D. Способность расщеплять пенициллин
E. Способность продуцировать каталазу
Задание 5
В детском саду после употребления в пищу творога у детей возникло
заболевание, характеризующееся острым началом, тошнотой, рвотой, поносом. При
микроскопии мазков, приготовленных из оставшегося творога и рвотных масс
больных, обнаружены грамположительные микроорганизмы, располагающиеся в
мазках в виде скоплений, напоминающих «гроздья винограда». Какие
микробиологические исследования необходимо провести для установления
этиологии этой пищевой инфекции?
A.
Провести бактериологический метод исследования рвотных масс,
испражнений
B.
Сделать заключение о том, что причиной заболеваний стал стафилококк
C.
Дополнительно поставить аллергическую пробу
D.
Дополнительно определить антитела в сыворотке крови
E.
Дополнительно определить фаготип стафилококка
Задание 6
После суточной инкубации посева крови в сахарном бульоне образовался
мелкозернистый осадок с сохранением прозрачности среды, а на кровяном агаре
выросли мелкие прозрачные круглые колонии, окруженные зоной β-гемолиза. В
мазках, приготовленных из выросших микробов обнаружили грамположительные
кокки расположенные цепочками. Предположительно какие микроорганизмы
выделены из исследуемого материала?
A. Стафилококки
B. Стрептококки
C. Микрококки
D. Гонококки
E. Сарцины
Задание 7
Из гнойной раны больного выделены грамположительные микроорганизмы
шаровидной формы, располагающиеся в мазках короткими цепочками, попарно,
образующие на кровяном агаре мелкие колонии серо-белого цвета с зоной гемолиза.
К какому виду принадлежат микробы, обнаруженные в ране?
A. S. pyogenes
B. S. agalactiae
C. S. bovis
42
D. S. salivarius
E. Установить видовую принадлежность микробов по перечисленным свойствам не
представляется возможным
Задание 8
С целью изучения антигенной структуры стрептококка, экстракт чистой
бактериальной культуры с помощью пипетки наслоили на группоспецифическую
сыворотку в пробирке. Через 5 минут на границе двух жидкостей появилось белое
кольцо, что свидетельствовало о положительной реакции. Назовите эту реакцию.
A. Реакция агглютинации
B. Реакция преципитации
C. Реакция встречного иммуноэлектрофореза
D. Реакция гемагглютинации
E. Реакция связывания комплемента
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную
работу по приготовлению мазков из гноя и путем микроскопии окрашенных
препаратов изучают морфологические и тинкториальные свойства микробов. Для
выделения чистой бактериальной культуры выполняют посев гноя на питательную
среду. В ходе занятия студенты заполняют схемы лабораторной диагностики
стафилококковых и стрептококковых заболеваний, которые имеются в учебном
пособии по частной микробиологии и вирусологии. На занятии решают
ситуационные задачи из пособия “Задания для самостоятельной работы студентам
высших медицинских учебных заведений III- IV уровней аккредитации”
ЗАНЯТИЕ 16
Тема №18: «Грамотрицательные кокки: гонококки, менингококки.
Микробиологическая диагностика заболеваний, вызываемых гонококками,
менингококками»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Особенностью менингококковой инфекции является широкое распространение
носительства менингококков практически здоровыми людьми, которое
поддерживает циркуляцию менингококков среди населения и является постоянной
угрозой вспышек этой инфекции, в частности самой тяжелой ее формы –
эпидемического цереброспинального менингита. Летальность при менингите до
применения антибиотиков составляла 70 %, однако и сейчас она остается высокой.
Поэтому умения применять методы микробиологической диагностики этого
заболевания необходимы врачу для подтверждения диагноза и своевременного
назначения рациональной антибиотикотерапии.
Гонорея является не только одним из самых частых заболеваний, которое
передается половым путем, но и одной из самых распространенных инфекций
43
мочеполового тракта. По данным группы экспертов ВОЗ ежегодно в мире болеют
гонореей около 200 млн. людей. Микробиологическая диагностика гонореи дает
возможность назначить этиотропную и потому эффективную терапию и обнаружить
источники инфекции.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): уметь использовать микробиологические методы исследования
для постановки микробиологического диагноза гонококковой и менингококковой
инфекций с последующим применением в клинической практике.
Конкретные цели:
1. Определять гонококки и менингококки по морфологическим и биологическим
свойствам.
2. Выбрать адекватные методы микробиологической диагностики гонококковой
и менингококковой инфекций.
3. Оценивать
результаты
методов
микробиологической
диагностики
гонококковой и менингококковой инфекций.
Теоретические вопросы темы
1.
2.
3.
4.
Биологические признаки гонококков.
Методы микробиологической диагностики гонореи.
Биологические свойства и классификация менингококков.
Методы микробиологической диагностики менингококковой инфекции.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендованная литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.172-190.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.332-344, 348-356.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология: Учебник.- Спб: Специальная литература, 1998.- С. 342-346.
4.Лекционный материал.
Дополнительная литература:
1. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Д. Микробиология: Учебник.- 2-у изд.,
перераб. и доп.М: Медицина, 1983.- С.266-273.
Во время работы с литературой для лучшего усвоения содержания обучения
используйте граф логической структуры темы. Заполните схемы
44
микробиологической диагностики в „ Учебном пособии по
микробиологии и вирусологии ” ( Донецк, 2008 ) на страницах 14, 15.
частной
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия темы: «Грамотрицательные кокки:
гонококки, менингококки. Микробиологическая диагностика заболеваний,
вызываемых гонококками, менингококками»
1. Микроскопировали препараты из гноя при острой гонорее (окраска
метиленовой синькой).
2. Учли результат оксидазной реакции (демонстрация).
3. Микроскопировали препараты из спинномозговой жидкости больного
эпидемическим менингококковым менингитом ( окраска по Граму).
4. Изучили микробиологическую диагностику гонококковой и менингкокковой
инфекций по схемам учебного пособия и стендам музея.
5. Ознакомились с биологическими препаратами для диагностики, лечения и
профилактики гонококковой и менингококковой инфекций.
45
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: “Микробиологическая диагностика
гонококковой инфекции ”
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
ВЫСЕВ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
НА
ПИТАТЕЛЬНЫЕ
СРЕДЫ ДЛЯ
ВЫДЕЛЕНИЯ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
РИФ
ХАРАКТЕР РАСПОЛОЖЕНИЯ МИКРОБОВ
ГОГОДОСЛІДН
ОГО
МАТЕРІАЛУ
СЫВОРОТКА
КРОВИ
АНТИГЕННЫЕ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ВЫЯВЛЕНИЕ
СПЕЦИФИЧЕСКИХ
АНТИТЕЛ В РЕАКЦИИ
СВЯЗЫВАНИЯ
КОМПЛЕМЕНТА
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕННОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТА МИКРОБОВ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
46
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
менингококковой инфекции»
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
ЭКСПРЕСС-МЕТОД
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА
МИКРОБОВ
ХАРАКТЕР РАСПОЛОЖЕНИЯ
МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
МИКРОБОВ
РИФ
МИКРОСКОПИЧЕС
КИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕС
КИЙ
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
ИССЛЕДУЕМЫ
Й МАТЕРИАЛ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
АНТИТЕЛ
В РПГА, РИФ
(непрямая), ИФА
ВЫДЕЛЕНИЕ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СВОЙСТВ
ВЫДЕЛЕННОЙ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
АНТИГЕННЫЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
РРЕРЕЗУЛЬТАТІВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
47
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
Из гноя, полученного у больного с подозрением на острую гонорею, был
приготовлен мазок и окрашен по Граму. При микроскопии обнаружено большое
количество кокков. Какие тинкториальные свойства увиденных микробов и какой
характер их расположения в препарате будут свидетельствовать в пользу данного
диагноза?
А. Грамнегативные диплококки, расположенные как в лейкоцитах, так и вне их
В. Грампозитивные диплококки, расположенные как в лейкоцитах, так и вне их
С. Грампозитивные тетракокки, расположенные как в лейкоцитах, так и вне их
D. Грамнегативные кокки, расположенные в виде цепочек
Е. Грампозитивные кокки, расположенные в лейкоцитах
Задание 2
К врачу обратился мужчина с симптомами острой гонореи. Какой метод
микробиологической диагностики прежде всего назначит врач в данном случае ?
А. Бактериологический
В. Серологический
С. Аллергологический
D. Микроскопический
Е. Биологический
Задание 3
После посева ликвора на сывороточном агаре выросли нежные колонии с
голубоватым оттенком. Микроорганизмы, которые образовали эти колонии, были
идентифицированы как патогенные нейссерии с помощью биохимического теста.
Какой тест был использован?
А. Каталазный
В. Лецитовителлазный
С. Оксидазный
D. Реакция плазмокоагуляции
Е. Ферментация маннита в анаэробных условиях
Задание 4
Больному
с
подозрением
на
хроническую
гонорею
назначена
серодиагностика. Какой материал необходимо взять от больного на исследование?
А. Мочу
В. Выделения из уретры
С. Кровь
D. Мокроту
Е. Пунктат регионарного лимфоузла
Задание 5
В препарате, приготовленном из спинномозговой жидкости больного,
обнаружены грамнегативные диплококки, которые расположены как в лейкоцитах,
так и вне их. Возбудителям какого заболевания свойственны эти признаки?
А. Бруцеллеза
48
В. Туляремии
С. Менингококковой инфекции
D. Туберкулезного менингита
Е. Токсоплазмозного менингита
Задание 6
Больному с клинической картиной менингита врач сделал спинномозговую
пункцию и получил жидкость, которая вытекала струей. На какую питательную
среду необходимо посеять этот материал?
А. Сывороточный агар
В. Печеночный агар
С. МПА
D. Щелочной агар
Е. Сахарный агар
Задание № 7
От больного ребенка с клинической картиной цереброспинального менингита
получена спинномозговая жидкость для исследования. Какие методы
микробиологической диагностики необходимо применить в данном случае?
А. Бактериоскопический и бактериологический
В. Бактериологический и аллергологический
С. Биологический и микроскопический
D. Бактериологический и биологический
Е. Серологический и биологический
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты микроскопируют окрашенные
препараты, учитывают результат оксидазной реакции, знакомятся с биопрепаратами
для диагностики, лечения и профилактики гонококковой и менингококковой
инфекций.
В ходе занятия студенты решают задачи из „ Заданий для
самостоятельной работы студентов с курсом общей и специальной микробиологии ”
№ 50, 110-116, заполняют схемы микробиологической диагностики гонококковой и
менингококковой инфекций в „ Учебном пособии по специальной микробиологии и
вирусологии„ (Донецк, 2008), С.14-15. Преподаватель проверяет правильность
заполнения схем микробиологической диагностики, рисунки микроскопической
картины. В конце занятия качество усвоения материала преподаватель контролирует
с помощью тестов.
49
ЗАНЯТИЕ 17
Тема № 19 «Возбудители дифтерии. Микробиологическая диагностика
дифтерии»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Актуальность изучения возбудителей дифтерии связана с тем, что кривая
заболеваемости дифтерией с начала 80-х годов медленно, но упорно поползла
вверх. Болеют не только дети, но и взрослые. Тенденция очень тревожная и
необходимы срочные меры, направленные на профилактику этого заболевания,
разработку более эффективных способов лечения.
Чтобы правильно поставить диагноз, назначить лечение, разработать меры
профилактики этой инфекции нужно знать свойства возбудителя (морфологические,
тинкториальные, культуральные, биохимические и другие). Кроме того, уметь
проводить микробиологические исследования и оценивать их результаты.
Полученные знания и умения будут необходимы при изучении инфекционных
болезней и эпидемиологии.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): Уметь применять микробиологические методы исследования
для постановки микробиологического диагноза с последующим использованием в
клинической практике.
Конкретные цели:
1. Определять особенности морфологических
и тинкториальных свойств
коринебактерий дифтерии при микроскопической диагностике.
2. Отличать патогенные коринебактерии от непатогенных по культуральным и
биохимическим свойствам при проведении бактериологической диагностики.
3. Оценивать результаты определения способности патогенных коринебактерий
продуцировать экзотоксин.
4. Оценивать полученные результаты бактериологического метода диагностики
дифтерии.
Теоретические вопросы темы
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Морфологические и тинкториальные свойства возбудителей дифтерии
Культуральные свойства коринебактерий
Биохимические свойства коринебактерий
Определение токсигенности дифтерийных палочек.
Методы микробиологической диагностики дифтерии
Специфическая профилактика и лечение дифтерии (АКДС, дифтерийный
анатоксин, противодифтерийная антитоксическая сыворотка).
50
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.257-263.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.440-444.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология.- Санкт-Петербург: «Специальная литература», 1998.-С.406-412.
4.Широбоков В.П., Тишко О.Г., Салата О.В.та ін. Мікробіологія, вірусологія та
імунологія (Завдання для самостійної роботи студентам вищих медичних закладів
освіти III-IV рівнів акредитації. Київ-Донецьк, 1999.-С.44-46.
5.Лекционный материал.
Дополнительная литература:
1. Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. «Микробиология», 1980 335-341с.
2. Борисов Л.Б. «Медицинская микробиология, вирусология, иммунология».
Москва,2002 с.432-436.
При работе с литературой для лучшего усвоения содержания
воспользуйтесь графом логической структурой темы.
обучения
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Инструкция
к проведению самостоятельной работы на практическом занятии по теме:
«Возбудители дифтерии. Микробиологическая диагностика дифтерии»
Внимательно прочтите инструкции, в которых последовательно показан ход
постановки опытов по окрашиванию мазков из дифтерийных палочек по Нейссеру
для выявления волютиновой зернистости и определению токсигенности культур
коринебактерий.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Окраска мазков по Нейссеру.
На фиксированный мазок, приготовленный из дифтерийных палочек нанести 2-3
капли уксусно-кислого синего (1-2 мин)
Промыть водой
Нанести раствор Люголя на 20 сек.
Промыть водой
Докрасить раствором везувина (1-3 мин)
Промыть водой
Высушить фильтровальной бумагой
51
Определение токсигенности чистой культуры дифтерийной палочки
1. По центру поверхности плотной питательной среды в чашке Петри положить
полоску фильтровальной бумаги, смоченной антитоксической дифтерийной
сывороткой (500 АЕ в 1 мл)
2. Произвести посев исследуемой культуры бляшками по 2-3 с каждой стороны, а
между ними засеять контрольный токсигенный штамм.
3. Чашку Петри закрыть и поставить в термостат
4. Произвести учет через 48-72 часа.
Токсин, выделяемый культурой дифтерийной палочки, диффундирует в среду и
взаимодействует с антитоксической сывороткой. На месте встречи токсина и
антитоксина образуется белый преципитат, располагающийся в виде изогнутых
сливающихся линий.
Протокол к практическому занятию
по теме: «Возбудители дифтерии. Микробиологическая диагностика дифтерии»
1. Микроскопия окрашенных мазков возбудителей дифтерии, зарисовка в
протоколы.
2. Изучение особенностей роста дифтерийных бактерий на специальных
питательных средах.
3. Приготовление мазков из культуры коринебактерий, окраска по Леффлеру,
микроскопия.
4. Изучение схемы микробиологической диагностики дифтерии по учебному
пособию и стенду в музее.
5. Изучение препаратов для специфической профилактики и серотерапии
дифтерии.
52
АЛГОРИТМ ПРАКТИЧЕСКОГО ЗАНЯТИЯ К ТЕМЕ “Микробиологическая
диагностика дифтерии”
ВЗЯТИЕ ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
ПРИГОТОВЛЕНИЕ МАЗКА, ОКРАСКА ПО
НЕЙССЕРУ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ЗЕРЕН
ВОЛЮТИНА
МИКРОСКОПИЯ МАЗКА
ОТСУТСТВИЕ ЗЕРЕН
ВОЛЮТИНА,РАСПОЛОЖЕНИЕ МИКРОБОВ В ВИДЕ
«ЧАСТОКОЛА»
НАЛИЧИЕ ПОЛЯРНО РАСПОЛОЖЕННЫХ ЗЕРЕН
ВОЛЮТИНА, РАСПОЛОЖЕНИЕ МИКРОБОВ
В ВИДЕ «V»ИЛИ «X»
ПСЕВДОДИФТЕРИЙНАЯ
ПАЛОЧКА
ДИФТЕРИЙНАЯ
ПАЛОЧКА
КОЛОНИИ СЕРОВАТО-ЧЕРНОГО ЦВЕТА
С РАДИАЛЬНОЙ ИСЧЕРЧЕННОСТЬЮ
БИОВАР GRAVIS
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИГЕННОСТИ
ТОКСИГЕННЫЕ
НЕТОКСИГЕННЫЕ
ПОСЕВ НА ЭЛЕКТИВНУЮ
ПИТАТЕЛЬНУЮ СРЕДУ
КЛАУБЕРГА
КОЛОНИИ КРУГЛЫЕ ВЫПУКЛЫЕ
ЧЕРНОГО ЦВЕТА
БИОВАР MITIS
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ТОКСИГЕННОСТИ
ТОКСИГЕННЫЕ
НЕТОКСИГЕННЫЕ
53
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
дифтерии»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МИКРОСКОПИЧЕС
КИЙ
БАКТЕРИОЛОГИ
ЧЕСКИЙ
СЕРОЛОГИЧЕС
КИЙ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
ВЫДЕЛЕНИЕ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ ИЗ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИЛА
СЫВОРОТКА
БОЛЬНОГО
ПОСТАНОВКА РА И
РПГА С
ЭРИТРОЦИТАРНЫМ
БАКТЕРИАЛЬНЫМ
ДИАГНОСТИКУМОМ
ХАРАКТЕР
РАСПОЛОЖЕНИЯ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
СВОЙСТВА ВЫДЕЛЕНОЙ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
КУЛЬТУРАЛЬ
НЫЕ
БИОХИМИЧ
ЕСКИЕ
АНТИГЕННЫЕ
ТОКСИНООБРА
ЗОВАНИЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА, БИОВАРА И ПАТОГЕННОСТИ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
54
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
При бактериоскопическом исследовании мазков из зева, окрашенных по
Нейссеру, обнаружены палочки, расположенные под углом друг к другу с
волютиновыми зернами на концах. К какому виду могут быть отнесены увиденные
микроорганизмы?
A. Corynebacterium diphtheriae
B. Legionella pneumophila
C. Bordetella pertussis
D. Treponema pallidum
E. Yersinia pestis
Задание 2
На кровяном теллуритовом агаре выросли колонии мелкие черного цвета
блестящие (S-формы). Какому биовару дифтерийных палочек присущи такие
культуральные и биохимические свойства?
A. С. gravis
B. В. melitensis
C. С. mitis
D. В. bovis
E. С. intermedius
Задание 3
Для определения токсигенности дифтерийных палочек на плотную
питательную среду положили полоску фильтровальной бумаги, пропитанную
антитоксической дифтерийной сывороткой, а рядом с ней подсеяли в виде бляшек
изучаемую культуру микробов и заведомо токсигенный штамм. Если изучаемая
культура микробов продуцирует экзотоксин, то образуются:
A. Сливающиеся линии преципитации
B. Перекрещивающиеся линии преципитации
C. Зоны диффузного помутнения
D. Отсутствие линий преципитации
E. Кольцо преципитации
Задание 4
Обследуя больного ребенка, у которого отмечалось повышение температуры до
38˚С, боли в горле при глотании, одутловатость лица, адинамия, грязно-белые
пленки на миндалинах, врач заподозрил дифтерию и госпитализировал его. Какими
микробиологическими
методами
можно
подтвердить
или
отвергнуть
предполагаемый диагноз?
A. Микроскопическим + бактериологическим
B. Микроскопическим + аллергическим
C. Микроскопическим + серологическим
D. Аллергологическим + серологическим
E. Биологическим + серологическим
55
Задание 5
От пациента с подозрением на дифтерию зева исследуемый материал отправлен
в баклабораторию для проведения бактериологического исследования. Какую из
перечисленных ниже сред следует выбрать для выделения чистой культуры
предположительно дифтерийной палочки?
A. Эндо
B. Желточно-солевой агар
C. Левенштейна – Йенсена
D. Кровяной теллуритовый агар
E. Плоскирева
Задание 6
Среди детей школы появились случаи заболевания ангиной. При микроскопии
мазков, приготовленных из материала, взятого тампоном с миндалин и окрашенных
по Нейссеру, обнаружены тонкие палочки желтого цвета, с темно-синими зернами
на концах. Палочки располагались в виде римской пятерки. Какую инфекцию
можно заподозрить в данном случае?
А. Дифтерию
В. Инфекционный мононуклеоз
С. Листериоз
D. Тонзиллит
Е. Скарлатину
Задание 7
Для решения вопроса о необходимости ревакцинации против дифтерии у
ученика 9-го класса определено состояние специфического иммунитета и сделан
вывод об отсутствии необходимости еѐ проведения. Какая реакция при этом была
использована?
А. Агглютинации Видаля
В. Агглютинации Грубера
С. Гемолиза
D. Пассивной гемагглютинации
Е. Связывания комплемента
Задание 8
В больницу поступил ребенок с диагнозом «дифтерия». Какими препаратами
для специфической терапии необходимо воспользоваться?
А. Противодифтерийной антитоксической сывороткой
В. Дифтерийным анатоксином
С. Вакциной «Кодивак»
D. Дифтерийными вакцинами: АКДС, АДС, АД
Е. Дифтерийным бактериофагом
Задание 9
56
Для определения уровня противотифтерийного иммунитета у ребенка решено
было поставить реакцию пассивной гемагглютинации. Чем необходимо
сенсибилизировать эритроциты, чтобы решить поставленную задачу?
A. Дифтерийным анатоксином
B. Дифтерийным антитоксином
C. Антигенами дифтерийной палочки
D. Противодифтерийной сывороткой
E. Гемолитической сывороткой
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную
работу по окрашиванию мазков из
дифтерийных палочек, определению
токсигенности выделенной культуры. В ходе занятия студенты решают
ситуационные задачи из пособия «Завдання для самостійної роботи студентам
вищих медичних закладів освіти III- IV рівнів акредитації»(1999р.).
57
ЗАНЯТИЕ17
Тема №20. «Патогенные анаэробы: клостридии столбняка, ботулизма,
газовой анаэробной инфекции. Микробиологическая диагностика»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Столбняк – острое инфекционное заболевание. Часто возникает после
военных, профессиональных и бытовых травм. В мирное время столбняк чаще
регистрируется среди лиц, занятых в сельском хозяйстве. Возможны случаи
заболевания у родильниц и новорожденных, если роды проходят в антисанитарных
условиях. Летальность при столбняке достаточно высокая.
Ботулизм- острая, тяжелая пищевая токсикоинфекция, связанная с
употреблением инфицированных C. botulinum продуктов. Особое значение в этом
плане имеют консервированные продукты растительного происхождения,
домашнего приготовления. Заболевание характеризуется проявлениями тяжелого
поражения нервной системы. Летальность при ботулизме колеблется в пределах 2040%.
Газовая анаэробная инфекция (газовая гангрена, злокачественный отек) –
острое, полимикробное, сапронозное заболевание, осложняющее течение травм.
Характеризуется общей
интоксикацией организма и прогрессирующим
омертвлением тканей, их отеком и газообразованием. Раневая анаэробная инфекция
встречается как в мирное, так и в военное время. Протекает тяжело, не редко со
смертельным исходом. Важное место в диагностике инфекций, вызываемых
патогенными анаэробами, отводится микробиологическим методам.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): Уметь использовать микробиологические методы диагностики
столбняка, ботулизма и газовой анаэробной инфекции для постановки
микробиологического диагноза с последующим использованием в клинической
практике.
Конкретные цели:
Правильно собрать исследуемый материал для микробиологической
диагностики клостридиальной инфекции.
2.
Выбрать методы микробиологической диагностики столбняка, ботулизма и
газовой анаэробной инфекции.
3.
Оценить
результаты
микроскопического,
бактериологического,
серологического, биологического методов микробиологической диагностики.
1.
Теоретические вопросы темы
Какой материал необходимо исследовать при подозрении на газовую
анаэробную инфекцию, столбняк и ботулизм?
2.
Какие морфологические и тинкториальные свойства имеют возбудители
столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции.
1.
58
Какие
методы
микробиологической
диагностики
клостридиальных
заболеваний используются?
4.
Какие тесты для идентификации выделенной культуры возбудителей газовой
анаэробной инфекции используются?
5.
В чем заключается биологический метод диагностики газовой анаэробной
инфекции, столбняка и ботулизма?
3.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.71-75, 243-254.
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ. Мед.
навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга, 2011.с.426-433.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология.-Санкт-Петербург:Специальная литература, 1998.-С.421-435.
При работе с литературой пользуйтесь графом логической структуры к данной теме.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия темы «Патогенные анаэробы: клостридии
столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции. Микробиологическая
диагностика»
1.
Ознакомились с питательными средами, используемыми для культивирования
анаэробов и характером роста возбудителей на этих средах.
2.
Приготовили мазок из проросшей питательной среды Китта-Тароцци,
окрасили по Граму, промикроскопировали.
3.
Изучили по учебному пособию, стендам учебного музея методы
микробиологической диагностики столбняка, ботулизма, газовой анаэробной
инфекции.
4.
Микроскопировали окрашенные по Граму мазки из возбудителей столбняка и
ботулизма.
5.
Изучили биологические препараты, используемые для диагностики,
профилактики и лечения столбняка, ботулизма, газовой анаэробной инфекции.
59
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая
диагностика газовой анаэробной инфекции »
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ИССЛЕДУЕМЫЙ
МАТЕРИАЛ
ИССЛЕДУЕМЫЙ
МАТЕРИАЛ
ЗАРАЖЕНИЕ
ЛАБОРАТОРНЫХ
ЖИВОТНЫХ
АЭРОТОЛЕРАНТНОСТЬ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТА
ТОКСИНООБРАЗОВАНИЕ
(БИОПРОБА НА МЫШАХ)
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕННОЙ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
РИФ
ПОДВИЖНОСТЬ
ПОСЕВ НА
ПИТАТЕЛЬНЫЕ
СРЕДЫ ДЛЯ
ВЫДЕЛЕНИЯ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
БИОЛОГИЧЕСКИЙ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
60
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
столбняка»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
БИОЛОГИЧЕСКИЙ
ЗАРАЖЕНИЕ
БЕЛЫХ МЫШЕЙ
ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ
БАКТЕРИАЛЬНОЙ
КУЛЬТУРЫ ИЗ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
РИФ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА МИКРОБОВ
МИКРОСКОПИЯ
ИССЛЕДУЕМОГО
МАТЕРИАЛА
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
СВОЙСТВА
ВЫДЕЛЕННОЙ
ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТА
ТОКСИНООБРАЗОВАНИЕ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА МИКРОБА
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
61
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Микробиологическая диагностика
ботулизма»
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
БИОЛОГИЧЕСКИЙ
ИССЛЕДУЕМЫЙ
МАТЕРИАЛ
(ФИЛЬТРАТ
ИЛИ
ЦЕНТРИФУГАТ)
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
ПОСЕВ НА ПИТАТЕЛЬНЫЕ
СРЕДЫ И ИНКУБАЦИЯ В
АНАЕРОБНЫХ УСЛОВИЯХ
ПОСТАНОВКА
РЕАКЦИИ
НЕЙТРАЛИЗАЦИИ
НА ЖИВОТНЫХ
ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ
БОТУЛИНИЧЕСКО
ГО ТОКСИНА
ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
ВЫЯВЛЕНИЕ ТОКСИНА
ПУТЕМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ФАГОЦИТАРНОГО
ПОКАЗАТЕЛЯ ИЛИ В РОПГА
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ТОКСИГЕННЫХ
БИОХИМИЧЕСКИХ
КУЛЬТУРАЛЬНЫХ
МОРФОЛОГИЧЕСКИХ
ИЗУЧЕНИЕ СВОЙСТВ
ВЫДЕЛЕННОЙ КУЛЬТУРЫ
МИКРОБОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТА
ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРОБОВ
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО ДИАГНОЗА
62
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
Из хирургического отделения в лабораторию доставлены кусочки ткани из
раны. Рана длительное время не заживает, отек ткани и газообразование. При
микроскопии исследуемого материала выявлены грамположительные палочки.
Какая инфекция могла осложнить течение раневого процесса?
А. Газовая анаэробная инфекция
В. Столбняк
С. Дифтерия кожи
D. Сибирская язва
Е. Бешенство
Задание 2
У человека после употребления консервированного в домашних условиях
мяса появились признаки пищевого отравления. Врач предположил, что у
больного ботулизм. Какой материал следует взять для микробиологического
исследования в данном случае?
А. Остатки еды, рвотные массы
В. Остатки еды, пунктат л/узлов
С. Остатки еды, костный мозг
D. Остатки еды, кровь
Е. Пунктат л/узлов
Задание 3
После подкожного введения белой мыши фильтрата эмульсии пораженных
тканей раны у животного через 2 суток появились характерные признаки
столбняка – «хвост трубой», взъерошенная шерсть и спазм мышц. Какой метод
микробиологической диагностики был использован в этом случае?
А. Биологический
В. Микроскопический
С. Бактериологический
D. Серологический
Е. Аллергологический
A.
B.
C.
D.
E.
Задание 4
Вид выделенного возбудителя газовой анаэробной инфекции определяют с
помощью биопробы на мышах. Для выполнения этой пробы необходимо иметь:
Агглютинирующие видовые сыворотки
Преципитирующие видовые сыворотки
Гемолитические сыворотки
Антитоксические специфические сыворотки
Сыворотки, которые содержат вируснейтрализующие антитела
Задание 5
В мазках-отпечатках из кусочков некротизированной ткани обнаружены
грамположительные крупные палочки. Окрашивание по Бурри-Гинсу позволило
63
найти вокруг них капсулу. Культивирование посева гомогената этой ткани на
кровяном агаре при 37°С в аеробних условиях не привело к появлению роста
микробов. В данном случае можно предположить о присутствии в
патологическом материале возбудителей:
А. Газовой анаэробной инфекции
B. Столбняка
С. Ботулизма
D. Сибирской язвы
Е. Чумы
Задание 6
После употребления в пищу грибов домашнего консервирования, в семье
зарегистрировано отравление с неврологическими симптомами: затрудненное
глотание, двоение в глазах, афония. Для какого заболевания характерны такие
симптомы?
A.
Брюшной тиф
B.
Столбняк
C.
Грипп
D.
Ботулизм
E.
Дизентерия
Задание 7
Больной госпитализирован с жалобами на рвоту, головокружение, двоение в
глазах, затрудненное глотание. Врач заподозрил ботулизм. Какие методы
микробиологической
диагностики
целесообразно
использовать
для
подтверждения диагноза?
A.
Микроскопический, серологический
B.
Биологический, бактериологический
C.
Аллергологический, микроскопический
D.
Микроскопический, серологический
E.
Аллергологический, серологический
Задание 8
При микроскопии окрашенного по Граму мазка нашли грамположительные
беспорядочно расположенные короткие палочки с округленными концами,
которые имели терминально расположенные споры овальной формы в виде
«теннисной ракетки». Каким бактериям присущи такие морфологические и
тинкториальные свойства?
A. Clostridium perfringens
B. Clostridium botulinum
C. Clostridium tetani
D. Proteus vulgaris
E. Bacillus anthracis
64
Задание 9
У больного, поступившего в инфекционное отделение с жалобами на
судороги мышц лица, из раны нижней конечности были выделены
грамположительные бактерии с терминально расположенными спорами округлой
формы, напоминающие «барабанные палочки». Каким микроорганизмам присущи
такие свойства?
А. Clostridium botulinum
B. Clostridium perfringens
C. Clostridium tetani
D. Bacillus anthracis
E. Bacillus cereus
Задание 10
После инкубации посева уколом культуры бактерий в столбик агара
появились нежные колонии, напоминающие комочки ваты. Для микроорганизмов
какого рода характерные такие культуральные свойства?
A.
Clostridium
B.
Salmonella
C.
Proteus
D.
Staphylococcus
E.
Escherichia
Задание 11
После инкубации посева отделяемого из пупочного канатика младенца с
подозрением на столбняк в питательной среде выявили диффузный рост
микроорганизмов с образованием газа с запахом «выгребной ямы». Назовите эту
питательную среду
А. Среда Рапопорта
В. Среда Кауфмана
С. Среда Китта-Тароцци
D. Сахарный бульон
Е. Среда для контроля стерильности
Задание 12
Для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате применяют
реакцию in vitro с использованием эритроцитов. Назовите эту реакцию.
А. Реакция гемагглютинации
В. Реакция пассивной гемагглютинации
С. Реакция обратной пассивной гемагглютинации
D. Реакция торможения пассивной гемагглютинации
Е. Реакция гемолиза
65
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты выполняют самостоятельную
работу, микроскопируют мазки из возбудителей столбняка, ботулизма, газовой
анаэробной инфекции. Оформляют протокол. В ходе занятия студенты решают
ситуационные задачи из пособия: “Мікробіологія, вірусологія та імунологія» /
Завдання для самостійної роботи студентам вищих медичних закладів освіти IIIIV рівнів акредитації”, №115-119. Заканчивается занятие итоговым тестовым
контролем.
ЗАНЯТИЕ 18.
Тема №21: «Экология микроорганизмов. Микрофлора организма человека.
Основы санитарной микробиологии»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Микроорганизмы повсюду распространены в окружающей среде. Они
находятся в почве, воде, воздухе, на растениях, пищевых продуктах, предметах, в
организме человека и животных. Сложные взаимосвязи микроорганизмов со
средой, которые предопределяют их размножение, развитие и выживание,
изучает – экология.
Изучение экологии микроорганизмов служит основой для понимания
явлений паразитизма, механизма возникновения зоонозных заболеваний, в
особенности тех, которые характеризуются природной очаговостью, а также для
разработки практических
мероприятий в борьбе с разными инфекционными
заболеваниями.
Микрофлора организма человека - результат взаимного приспособления
микроорганизмов и макроорганизма в процессе эволюции. Большая часть
бактерий постоянной микрофлоры организма человека приспособилась к жизни в
определенных его отделах. Кроме того, существуют микроорганизмы, которые
составляют непостоянную (случайную) микрофлору. Микрофлора организма
человека непостоянна, ее видовой состав варьируется, в зависимости от возраста,
питания и состояния макроорганизма. Глубокие изменения испытывает
микрофлора организма человека при разных заболеваниях. Нарушение видового
состава нормальной микрофлоры под влиянием инфекционных и соматических
заболеваний, а также в результате нерационального использования антибиотиков
66
приводит к состоянию дисбактериоза, который характеризуется изменением
соотношения разных видов бактерий.
Микрофлору окружающей среды изучает санитарная микробиология,
заданиями которой являются: разработка методов микробиологических и
вирусологических исследований почвы, воды, воздуха, предметов быта, пищевых
продуктов и др;
изучение источников загрязнения окружающей среды
микрофлорой, которая представляет опасность для человека; исследование
жизнедеятельности микроорганизмов в окружающей среде; определение
нормативов для гигиеничной оценки объектов окружающей среды, в том числе
пищевых продуктов (по микробиологическим показателям); обоснование мер по
оздоровлению объектов окружающей среды и контроль за эффективностью их
выполнения.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): Уметь оценить уровень бактериального загрязнения
объектов
окружающей
среды
патогенными
и
условно-патогенными
микроорганизмами и определить их опасность для человека.
Конкретные цели:
1. Выбрать санитарно-показательные микроорганизмы для определения
бактериального загрязнения воды, почвы, воздуха, пищевых продуктов и
др.
2. Собрать исследуемый материал для
проведения санитарномикробиологических исследований среды пребывания микроорганизмов.
3. Оценить результаты санитарно-бактериологических исследований:
воды (микробное число, коли-титр, коли-индекс)
почвы (микробное число, коли-титр, перфрингенс-титр)
воздух (микробное число, качественный состав его
микрофлоры)
пищевых продуктов (микробное число, наличие протея,
сальмонелл, анаэробов).
4. Оценить меру эпидопасности
микроорганизмов, выявленных при
обследовании объектов окружающей среды, для человека.
Теоретические вопросы темы
Распространение микробов в окружающей среде.
Микрофлора человека и его значение. Дисбиоз.
Санитарная микробиология и ее значение.
Санитарно-показательные микроорганизмы.
Санитарно-микробиологическое исследование почвы, воды, воздуха,
продуктов питания и др.
6. Вода, почва, воздух как факторы и путь распространения инфекционных
заболеваний.
1.
2.
3.
4.
5.
67
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендованная литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.78=90,91-94, 94-100, 379-387..
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ.
Мед. навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга,
2011.-с.753-775, 837-846.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология.-Учебник.-Спб:»Специальная литература», 1998.-С.107-126.
4.Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология. Киев - «Высшая школа» 1992.С.71-89.
5.Лекция.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Протокол практического занятия по теме: «Экология микроорганизмов.
Микрофлора организма человека. Основы санитарной микробиологии»
1. Ознакомились с характером распространения микробов в окружающей
среде и их значением в обеспечении динамического равновесия биосферы.
2. Изучили санитарно-показательные микроорганизмы воды, почвы, воздуха,
пищевых продуктов.
3. Ознакомились с методами взятия проб воды, почвы, воздуха, пищевых
продуктов на исследование.
4. Произвели посев воздуха в учебной лаборатории методом осаждения по
Туржецкому.
5. Провели количественный учет микроорганизмов на МПА (посев воздуха в
учебной лаборатории).
6. Приготовили мазки-отпечатки колбасных изделий, окрасили по Граму,
промикроскопировали.
7. Решали ситуационные задачи №№219-223 из пособия.
68
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Экология микроорганизмов.
Микрофлора организма человека. Основы санитарной микробиологии»
Санитарно-микробиологическое исследование воды
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МИКРОБНОЕ
ЧИСЛО ВОДЫ
КОЛИ-ТИТР И
КОЛИ -ИНДЕКС
ИНДЕКС
ЭНТЕРОКОККА
ВЫЯВЛЕНИЕ ПАТОГЕННЫХ
БАКТЕРИЙ КИШЕЧНОЙ ГРУППЫ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ИССЛЕДОВАНИЯ
Санитарно-бактериологическое исследование воздуха
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (воздух
закрытого помещения)
ОБЩЕЕ КОЛИЧЕСТВО
БАТЕРИЙ ВОЗДУХА
ПОМЕЩЕНИЯ
КАЧЕСТВЕННЫЙ СОСТАВ
МИКРОФЛОРЫ ВОЗДУХА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
МИКРОБНОГО
ЧИСЛА,КОТОРЫЕ
НАХОДЯТСЯ В 1м3
ВОЗДУХА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
САНИТАРНОПОКАЗАТЕЛЬНЫХ
МИКРОБОВ
СТАФИЛОКОККОВ,
СТРЕПТОКОККОВ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
69
Санитарно-микробиологическое исследование почвы
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
(образец почвы)
МИКРОБНОЕ ЧИСЛО ПОЧВЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИ-ТИТРА
ПОЧВЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПАТОГЕННЫХ
МИКРОБОВ ПОЛУЧЕННЫХ В
ПОЧВЕ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПЕРФРИНГЕНСТИТРА ПОЧВЫ
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
Санитарно-бактериологическое исследование пищевых продуктов
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЯСО, МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ОБЩЕГО
КОЛИЧЕСТВА
МИКРООРГАНИЗМОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
НАЛИЧИЯ
КИШЕЧНОЙ
ПАЛОЧКИ,
ПРОТЕЯ,
САЛЬМОНЕЛЛ,
АНАЭРОБОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
МОЛОКО
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
МИКРОБНОГО
ЧИСЛА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ
КОЛИ-ТИТРА
ОЦЕНКА
РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
70
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
Для оценки санитарно-гигиенических показателей микробиологической
безопасности воды, почвы, воздуха, пищевых продуктов предусмотрены
нормативные документы. Каким требованиям должны отвечать санитарнопоказательные микроорганизмы?
A. В незначительных количествах находятся в испражнениях человека и
теплокровных животных
B. Не находятся в испражнениях человека, а только в испражнениях
теплокровных животных
C. Не находятся в испражнениях теплокровных животных, а только в
испражнениях человека в небольших количествах
D. Не размножаются, владеют стойкостью к разнообразным факторам
окружающей среды, легко идентифицируются, постоянно находятся в
больших количествах в испражнениях человека и теплокровных
животных.
E. Должны владеть рано наступающей изменчивостью.
Задание 2
Для оценки санитарно-гигиенических показателей микробиологической
безопасности воды, почвы, воздуха, пищевых продуктов предусмотрены
нормативные документы. Какие санитарно-показательные микроорганизмы
определяют для оценки фекального загрязнения питьевой воды?
A. Стафилококки
B. Энтерококки, кишечную палочку
C. Стрептококки
D. Стрептобациллы
E. Диплококки
Задание 3
Для оценки санитарно-гигиенических показателей микробиологической
безопасности воды, почвы, воздуха, пищевых продуктов предусмотрены
нормативные документы. Определение, каких санитарно-показательных
микроорганизмов используют для оценки степени бактериального загрязнения
почвы?
A. БГКП, энтерококки, клостридии, термофилы
B. Возбудители ботулизма, холеры
C. Возбудители сибирской язвы, стафилококки
D. Возбудители брюшного тифа, дизентерии
E. Энтеропатогенные кишечные палочки
Задание 4
Для оценки санитарно-гигиенических показателей микробиологической
безопасности воды, почвы, воздуха, пищевых продуктов предусмотрены
71
нормативные документы. Какие санитарно-показательные микроорганизмы
служат для оценки бактериального загрязнения пищевых продуктов?
A. Стрептококки, стафилококки
B. Актиномицеты
C. Клостридии, анаэробы
D. Энтерококки, стафилококки, протей, БГКП
E. Микобактерии
Задание 5
По эпидпоказаниям для санитарно-бактериологического исследования в
лабораторию направленная питьевая вода. Надо определить
соответствие
предоставленного образца воды требованиям, предъявляемым к питьевой воде.
Какие показатели характеризуют чистоту питьевой воды?
A. Перфрингенс-титр
B. Энтеропатогенные кишечные палочки
C. Микробное число, коли-титр, коли-индекс
D. Бактерии группы протея
E. Яйца гельминтов
Задание 6
По эпидпоказаниям для санитарно-бактериологического исследования (на
патогенную группу бактерий) направлена питьевая вода. Какие заболевания
бактериальной этиологии передаются через воду?
A. Дифтерия, корь
B. Столбняк, ботулизм
C. Лептоспироз, холера
D. Чума, бруцеллез
E. Сибирская язва, туберкулез
Задание 7
При плановом обследовании родильного дома провели посев воздуха
аспирационным методом. Через сутки суммарное количество колоний на 1м 3
воздуха – 2000. Врач СЭС сделал вывод о значительной загрязненности воздуха
родильного дома и необходимости провести быстрые профилактические
мероприятия. Какие заболевания микробной природы могут передаваться
воздушно-капельным путем?
A. Брюшной тиф
B. Дизентерия
C. Грипп
D. Внутрибольничные инфекции
E. Лептоспирозы
Задание 8
В бактериологическую лабораторию на исследование направлена проба
пастеризованого молока. Надо определить санитарно – бактериологические
показатели для оценки качества молока. С этой целью проводят определение:
72
A.
В.
С.
D.
Э.
общего количества белка
комплекса витаминов
коли-титра, микробного числа, патогенной флоры
перфрингенс-титра
энтеровирусов
Задание 9
Некоторые инфекции легко передаются через молоко. Какие заболевания
микробной природы могут возникать после употребления в пищу
инфицированного молока и молочных продуктов?
A. Дифтерия
B. Столбняк
C. Дизентерия
D. Лепра
E. Энцефалит
Задание 10
Больной А., 20 лет страдает дисфункцией кишечника. Врач предположил,
что у больного – дисбиоз кишечника. Какие факторы чаще всего могут оказывать
влияние на развитие дисбиоза кишечника?
A. Не рациональное питание
B. Авитаминоз
C. Антибиотикотерапия
D. Острые кишечные инфекции
E. Острые вирусные инфекции
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку и коррекцию
уровня подготовки студентов к занятию. Студенты решают ситуационные задачи
№№219-223 из „ Задач для самостоятельной работы студентов с курсом общей и
специальной микробиологии ” Студенты выполняют самостоятельную работу:
изучают принцип действия аппарата Кротова; проводят посев воздуха учебной
лаборатории методом осаждения по Туржецкому; проводят количественный учет
микроорганизмов на МПА; готовят мазки-отпечатки колбасных изделий,
окрашивают по Граму, микроскопируют. Студенты оформляют протокол
практического занятия, делают зарисовки микроскопической картины. В конце
занятия преподаватель проверяет качество усвоения учебного материала с
помощью набора тестов формата А.
73
ЗАНЯТИЕ 18
Тема №22: «Клиническая микробиология. Госпитальная инфекция»
АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ
Подготовка врача на медицинских факультетах требует от кафедры
микробиологии решения разноплановых задач. Наряду с необходимостью дать
студентам глубокие фундаментальные знания по проблемам микробиологии,
вирусологии и иммунологии, кафедра должна вооружить будущего врача знанием
тех возможностей, которые дает наша специальность для решения конкретных
лечебно-диагностических задач. В этой связи традиционно сложившийся принцип
преподавания «от возбудителя» не отвечает основной целевой установке. Ведь в
практической деятельности чаще приходится решать не задачу выделения того
или иного конкретного возбудителя, а исследовать патологический материал,
который может содержать возбудителей, относящихся к самым разным видам.
Важность подобного рода задач неуклонно возрастает по мере расширения круга
вопросов микробиологической диагностики в неинфекционной клинике. Этому
способствует
значительная
распространенность
гнойно-воспалительных
заболеваний (ГВЗ), в том числе внутрибольничных инфекций, изменение
этиологической структуры и чувствительности выделяемых микробов к
антибиотикам. Вот почему одной их актуальных проблем преподавания
микробиологии является сегодня проблема преподавания «от патологического
материала». Именно в этом, на наш взгляд, состоит основная задание
преподавания клинической микробиологии. По такому принципу и построено
практическое занятие. Решение конкретной диагностической задачи создает
положительную мотивационную ситуацию, повышает ответственность за
правильность решения, стимулирует активную самостоятельную работу.
ЦЕЛИ ОБУЧЕНИЯ
Цель (общая): уметь использовать микробиологические методы исследования
для постановки микробиологического диагноза гнойно-воспалительных
заболеваний с последующим применением в клинической практике.
Конкретные цели:
1. произвести отбор и доставку в бактериологическую лабораторию
патологического материала от больных с ГВЗ;
2. оценить результаты определения количества микроорганизмов в 1г ткани
или в 1мл исследуемого материала;
3. оценить результаты выделения чистой культуры микробов из
клинического образца с определением их видовой принадлежности;
4. оценить результаты определения чувствительности к антибиотикам.
Теоретические вопросы
1.
Правила взятия проб на исследование от больного с ГВЗ и доставки
материала в бактериологическую лабораторию.
74
2.
3.
4.
5.
6.
Определение количества микроорганизмов в 1г ткани.
Этапы выделения чистой культуры микробов- инфектантов.
Принципы определения видовой принадлежности микробов-инфектантов.
Методы определения чувствительности микробов-инфектантов к
антибиотикам.
Госпитальные штаммы микроорганизмов, их характеристика.
СОДЕРЖАНИЕ ОБУЧЕНИЯ
Источники информации
Рекомендуемая литература:
1.Климнюк С.І., Ситник І.О., Творко М.С., Широбоков В.П. Практична
мікробіологія.-Тернопіль: Укрмедкнига, 2004.-с.78=90,91-94, 94-100, 379-387..
2.Медична мікробіологія, вірусологія та імунологія:підручник ждля студ. вищ.
Мед. навч. закл.\ За редакцією В.П. Широбокова\Видан. 2-е. Вінниця:Нова книга,
2011.-с.753-775, 837-846.
3.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и
вирусология.-Учебник.-СПб:»специальная литература», 1998.-С.348-354; 435-437;
524-528.
4.Микробиологическая диагностика бактериальных инфекций: Учебное пособие/
под ред. Н.В. Жадинского, И.Н. Щукина, А.А. Слюсарева. Донецк.:ДонНУЭТ,
2007.-С.3-6; 11-14;37-38;64-65; 70-72; 187-189; 201-203.
5.Маянский А.Н. Микробиология для врачей.-Н.Новгород.:НГМА,1999
6.Лекция
Дополнительная литература:
1. Скала Л.З., Сидоренко С.В., Нехорошева А.Г. и др. Практические аспекты
современной клинической микробиологии.-Тверь:ООО «издательство
Триада», 2004.
Во время работы с литературой для лучшего усвоения содержания обучения
используйте граф логической структуры темы.
ОРИЕНТИРОВОЧНАЯ ОСНОВА ДЕЙСТВИЯ
Для реализации поставленной цели выполните задания, которые
предложены в учебном пособии «Микробиологическая
диагностика
бактериальных инфекций» 2007г. к темам: микробиологическая диагностика
стафилококковых, стрептококковых инфекций, эшерихиозов, клебсиеллезов,
заболеваний вызываемых протеями, синегнойной палочкой, неклостридиальными
анаэробными микробами.
При подготовке к занятию используйте граф логической структуры, лекционный
материал. Внимательно прочитайте методику определения количества
микроорганизмов в пересчете на 1 г ткани, инструкцию к практическому занятию.
Определение количества микроорганизмов
75
Перед забором материала полость раны обрабатывают изотоническим
раствором натрия хлорида и после обезболивания раневой поверхности иссекают
участок ткани на всю глубину раны. Полученный биоптат в стерильном
флакончике, содержащем 1 мл изотонического раствора натрия хлорида,
транспортируют в баклабораторию в течение 1 часа. Биоптат взвешивают,
вычисляют коэффициент пересчета на 1г ткани (К). Затем биоптат растирают в
стерильной ступке и суспензируют в изотоническом растворе натрия хлорида из
расчета 1:10, учитывая и 1 мл транспортного раствора, который выливают в
ступку. Далее делают десятикратные разведения суспензии в изотоническом
растворе натрия хлорида до 10 -3 , а при необходимости и более. Из каждого
разведения производят посев 0,1 мл суспензии на поверхность плотной
питательной среды, разлитой по чашкам Петри. Посевы инкубируют в термостате
при t 37ºС в течение 24 часов, затем 1 сутки выдерживают при комнатной
температуре. После этого производят подсчет колоний, выросших на чашке и
делают соответствующий пересчет на 1 г ткани. Подсчет колоний производят на
той чашке, где колонии растут изолированно и количество их не превышает 300.
Количество микробов на 1г ткани вычисляют по формуле: N= n х 10 х 10 х К, где
N – количество микробов в 1 г биоптата: n – количество микробов, выросших на
чашке; 10 – пересчет на 1 г суспензии; 10,100 или 1000 – разведение материала,
засеянного на чашку, с которой ведут подсчет колоний; К – коэффициент
пересчета навески на 1г биоптата (например, если биоптат массой 0,2 г, то К = 1г :
0,2г =5).
Инструкция
В лабораторию доставлен биоптат массой 0,2 г. Его растерли в стерильной
ступке и суспензировали в изотоническом растворе натрия хлорида из расчета
1:10. Для этого к растертому материалу прибавили 1,8 мл изотонического
раствора натрия хлорида. Далее Вам необходимо приготовить разведения 1:100,
1:1000 и по 0,1 мл суспензии из каждого разведения высеять на поверхность
плотной питательной среды, разлитой в чашки Петри. Чашки поставьте в
термостат. На следующем занятии посчитайте число выросших колоний и, сделав
соответствующий пересчет определите количество микробов в 1г ткани раны.
Протокол практического занятия по теме «Клиническая микробиология.
Госпитальная инфекция»
1. Изучили правила отбора патологического материала от больных гнойновоспалительными заболеваниями.
2. Приготовили
мазок
из
гноя
раны.
Окрасили
по
Граму,
промикроскопировали, выполнили зарисовку.
3. Освоили методику определения количества микробов в пересчете на 1г
ткани.
4. Произвели посев исследуемого материала (гноя) на МПА, ЖСА и среду
Эндо с целью выделения чистой культуры микробов возбудителей ГВЗ.
76
5. Оформили схемы микробиологической диагностики ГВЗ, вызываемых
стафилококками, стрептококками, протеями, кишечными палочками,
синегнойной палочкой, клебсиеллами.
77
ГРАФ ЛОГИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ТЕМЫ: «Клиническая микробиология.
Госпитальная инфекция»
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ
ВЫЯВЛЕНИЕ АНТИТЕЛ
В ДИНАМИКЕ
ЗАБОЛЕВАНИЯ
ПОДВИЖНОСТЬ
ВЫДЕЛЕНИЕ ЧИСТОЙ
КУЛЬТУРЫ МИКРОБОВ
АНТИГЕННЫЕ
СВОЙСТВА
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ
БИОХИМИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛ-ВА МИКРОБОВ В
1Г ТКАНИ ИЛИ В 1 МЛ
ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ
СВОЙСТВА
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА
МИКРОСКОПИЧЕСКИЙ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА МИКРОБОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЕ КРИТЕРИЕВ
ГОСПИТАЛЬНОГО ШТАММА
МИКРОБОВ
(АНТИБИОТИКОГРАММА,
ПРИНАДЛЕЖНОСТЬ К
ФАГОГРУППЕ, ДРУГИЕ
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА)
ПОСТАНОВКА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО
ДИАГНОЗА
78
Задания для проверки достижения конкретных целей обучения
Задание 1
После взятия материала со слизистой оболочки задней стенки глотки и зева
больного фарингитом ватный тампон поместили в пробирку с транспортной
питательной средой для доставки в бактериологическую лабораторию. Выберите
из перечисленных ниже необходимую для этого питательную среду.
A. Ресселя
B. Для контроля стерильности
C. Вильсона-Блера
D. Сабуро
E. Олькеницкого
Задание 2
Исследования показали, что в пересчете на 1 г ткани раны содержание
микробов в ней составило 105 . При таком количестве микроорганизмов можно
предположить, что:
A. Рана станет гнойной
B. Рана инфицирована
C. Рана бактериально загрязнена
D. Заживление будет длительным
E. Заживление будет быстрым
Задание 3
При микроскопии мазков, приготовленных из гноя постинъекционного
абсцесса выявлены грамположительные микроорганизмы, которые располагались
в мазках в виде скоплений, напоминающих гроздья винограда. Какие
микробиологические исследования необходимо провести для установления
этиологии этого осложнения?
A. Определить фаготип стафилококка
B. Определить антитела сыворотки крови
C. Провести бактериологическое исследование гноя
D. Поставить аллергическую пробу
E. Поставить реакцию преципитации
Задание 4
В отделении интенсивной терапии зарегистрированы случаи госпитальной
пневмонии, вызываемой короткими толстыми грамотрицательными палочками с
закругленными концами, окруженные капсулой. К какому роду могут относиться
указанные микробы?
A. Shigella
B. Vibrio
C. Salmonella
D. Klesiella
E. Esherichia
79
Задание 5
Из инфицированной раны больного выделена чистая анаэробная культура. В
мазках обнаружили грамотрицательные палочки без спор, которые
ферментировали глюкозу, эскулин и были устойчивыми к желчи. К какому из
возбудителей анаэробной неклостридиальной инфекции присущи такие свойства?
A. Prevotella melaninogenica
B. Fusobacterium nucleatum
C. Porphyromonas asaccharolitica
D. Bacteroides fragilis
E. Peptostreptococcus anaerobius
Задание 6
В абдоминальной хирургии из длительно незаживающей раны выделили
микроорганизмы палочковидной формы средних размеров грамотрицательные,
которые на плотных питательных средах образовывали колонии с
концентричными зонами роста («феномен роения») и имели специфический
гнилостный запах. Этими микробами могут быть представители рода
A. Salmonella
B. Proteus
C. Esherichia
D. Klesiella
E. Shigella
Задание 7
При культивировании посевов содержимого ожоговой раны на мясопептонном
агаре выросли колонии сине-зеленого цвета. Микроскопическое исследование
материала из таких колоний позволило обнаружить грамотрицательные
микроорганизмы палочковидной формы. Каким из перечисленных ниже
микроорганизмам присущи такие морфологические, тинкториальные и
культуральные свойства?
A. E. coli
B. S. aureus
C. S. epidermidis
D. P. aeruginosa
E. P. vulgaris
Задание 8
Из гнойной раны больного выделен патогенный стафилококк и определена
чувствительность его к антибиотикам: пенициллин – зона задержки роста 8 мм;
оксациллин – 9 мм; ампициллин – 10 мм; линкомицин – 11 мм; гентамицин – 22
мм. Какой из перечисленных антибиотиков может быть выбран для лечения
больного?
A. Гентамицин
B. Оксациллин
C. Ампициллин
D. Пенициллин
E. Линкомицин
Задание 9
Из смыва носоглотки хирурга, операционной сестры, объектов внешней среды
палаты и операционной, гноя ран больных выделены полирезистентные штаммы
80
S. aureus, антибиотикограммы которых оказались идентичными. В данном случае
можно думать о том, что эти штаммы
A. Госпитальные
B. Аттенуированные
C. Патогенные
D. Вирулентные
E. Авирулентные
МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ ЗАНЯТИЯ
Практическое занятие. Преподаватель проводит проверку уровня
подготовки студентов к занятию, выполнение задания – заполнения схем
диагностики ГВЗ. Студенты выполняют самостоятельную работу по
приготовлению мазка из гноя раны, микроскопируют его. Определяют количество
микроорганизмов в биоптате, взятом из раны. Преподаватель контролирует
правильность выполнения работы. Студенты заполняют протокол практического
занятия, зарисовывают микроскопическую картину. В конце занятия
преподаватель проверяет качество усвоения материала по данной теме с
помощью набора тестов формата А.
81