ИНСТРУКЦИЯ ПО МЕРАМ ПРОФИЛАКТИКИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПРИ РАБОТЕ В КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ Министерство здравоохранения СССР Центральный ордена Ленина Институт усовершенствования врачей ОГЛАВЛЕНИЕ Общие положения Основные правила работы в КДЛ Способы взятия крови Дезинфекция лабораторного инструментария, посуды, спецодежды, биоматериала, оборудования Предстерилизационная очистка Санитарное содержание помещений Транспортировка и хранение биоматериала Приложения Приготовление моющего раствора Предстерилизационная очистка (ручной способ) Стерилизация воздушным методом Стерилизация паровым методом Стерилизация химическим методом (растворами). ИНСТРУКЦИЯ ПО МЕРАМ ПРОФИЛАКТИКИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПРИ РАБОТЕ В КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ ЛЕЧЕБНОПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ Министерство здравоохранения СССР Центральный ордена Ленина Институт усовершенствования врачей Рекомендуемая инструкция разработана сотрудниками кафедры клинической лабораторной диагностики ЦОЛИУ врачей (зав. Кафедрой профессор В.Т. Морозова, ассистент Е.О. Смолиговец) совместно с отделом очаговой дезинфекции дезинфекционной станции ГУЗМ (Гвелесиани Г.А., Смирнова В.В.). В рецензировании принимали участие заведующий специализированной научно-исследовательской лабораторией эпидемиологии и профилактики СПИД к.м.н. Покровский В.В., заведующая Всесоюзным научно-методическим и контрольным центром по лабораторному делу д.м.н. Делекторская Л.Н., зам. Начальника госпиталя им. Бурденко Н.Н. по медицинской части Ивлиев А.С., главный специалист по лабораторной службе Москвы к.м.н. Каплан Б.С., главный специалист по лабораторной службе МЗ РСФСР Розенталь В.М. Москва, 1991 ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ С целью профилактики инфицирования медицинского персонала лечебно-профилактических учреждений особое значение имеет выполнение требований противоэпидемического режима. Сотрудники клинико-диагностических лабораторий подвергаются риску заражения СПИД, вирусным гепатитом, кишечными инфекциями и другими инфекционными заболеваниями. При этом следует иметь в виду, что в качестве главного фактора распространения выше названных заболеваний выступает кровь, мокрота, сперма, моча и другие секреты и экскреты организма человека. В клинико-диагностических лабораториях кровь и биологические жидкости должны считаться потенциально инфицированными. Ответственность за организацию и соблюдение противоэпидемического режима при работе с потенциально опасным материалом возлагается на руководителя клинико-диагностической лаборатории. Инструктаж среднего и младшего медицинского персонала проводится ответственным за технику безопасности не реже одного раза в квартал. Инструкция составлена в соответствии с ОСТ 42-21-2-85 "Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения. Методы, средства и режимы", а также приказом № 408 от 12 июля 1989 г. "О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране". Инструкция предназначена для медперсонала клинико-диагностических лабораторий. Контроль за выполнением инструкции осуществляют специалисты санитарно-эпидемиологических и дезинфекционных станций. ОСНОВНЫЕ ПРАВИЛА РАБОТЫ В КДЛ Медицинскому персоналу клинико-диагностических лабораторий следует избегать контакта кожи и слизистых оболочек с кровью и другими биологическими жидкостями, для чего необходимо: Работать в медицинских халатах, шапочках, сменной обуви, а при угрозе забразгивания кровью или другими биологическими жидкостями, в масках, очках, клеенчатых фартуках. Работать с исследуемым материалом в резиновых перчатках, все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчником. Избегать уколов и порезов. Проводить разборку, мойку, прополаскивание лабораторного инструментария, посуды после предварительной дезинфекции в резиновых перчатках. В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2-х минут тампоном, обильно смоченным 700 спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным полотенцем. При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3% раствором хлорамина, 6% раствором перекиси водорода. При подозрении попадания крови на слизистые оболочки, их немедленно обрабатывают струей воды, 1% раствором борной кислоты или вводят несколько капель азотнокислого серебра; нос обрабатывают 1% раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 700 спиртом или 1% раствором борной кислоты или 0,05% раствором марганцево-кислого калия. Запрещается пипетирование крови ртом; следует использовать автоматические пипетки, а при их отсутствии – "груши". Запрещается принимать пищу, пить, курить и пользоваться косметикой на рабочем месте. Поверхность рабочих столов в конце каждого рабочего дня, а в случае загрязнения биологическим материалом немедленно, подвергается дезинфекции. СПОСОБЫ ВЗЯТИЯ КРОВИ Взятие крови следует проводить в резиновых перчатках, соблюдая правила асептики, обрабатывая перчатки 700 спиртом перед каждым взятием. Перед проколом кожа пальца обследуемого обрабатывается стерильным тампоном (шариком из ваты), смоченным 700 спиртом. После взятия крови к раневой поверхности прикладывается новый стерильный тампон, смоченный 700 спиртом. Извлечение скарификаторов проводится только с помощью пинцета, хранящегося в растворе дезсредства. Стерильные тампоны хранятся в упаковке из бумаги, указанной в ОСТ 42-21-2-85, в количестве не более 20 штук. Стерильные лабораторные инструменты хранятся в той же упаковке, в которой проводилась их стерилизация. Взятие крови для гематологического исследования может осуществляться: I вариант После прокола пальца несколько капель крови (не менее 3-4) спускают на индивидуальное предметное (часовое) стекло, перемешивают и используют для работы. II вариант Кровь набирается в индивидуальные, стерильные, предварительно выверенные капилляры объёмом 20 мкл и капилляра Панченко непосредственно с поверхности кожи проколотого индивидуальным копьём пальца пациента. III вариант Кровь в количестве 40 мкл набирают стерильным индивидуальным капилляром Панченко, предварительно смоченным цитратом в соотношении цитрата и крови 1:4 по объёму. IV вариант После прокола кожи пальца, 6-8 капель крови спускают в пластиковую пробирку, в которую предварительно внесено небольшое (на кончике глазной лопаточки) количество трилона Б. Пробирку с кровью тщательно перемешивают, вращая её между ладонями. Разлив крови пипетками по пробиркам осуществляется в лаборатории. ДЕЗИНФЕКЦИЯ ЛАБОРАТОРНОГО ИНСТРУМЕНТАРИЯ, ПОСУДЫ, СПЕЦОДЕЖДЫ, БИОМАТЕРИАЛА, ОБОРУДОВАНИЯ Лабораторные инструменты, иглы, капилляры, предметные стекла, пробирки, меланжеры, счетные камеры, кюветы фотоэлектрометра, пипетки, наконечники, резиновые груши, баллоны и т.д., посуда после каждого использования должны подвергаться дезинфекции. Использованные изделия промываются в ёмкости с водой. Промывные воды обеззараживаются кипячением в течение 30 минут или засыпают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, нейтральным гипохлоритом кальция (НГК) в соотношении 200 г на 1 л воды, перемешивают и обеззараживают в течение 60 минут. Промытые изделия кипят в закрытой емкости в воде в течение 30 минут, или в 2% растворе соды, дальнейшая предстерилизационная очистка не проводится. Лабораторные инструменты могут быть обеззаражены погружением в раствор с дезинфицирующим раствором. В качестве дезинфицирующих растворов используются следующие: 3% раствор хлорамина 6% раствор перекиси водорода 6% раствор перекиси водорода с 0,5% моющего средства ("Прогресс", "Астра", "Айна", "Лотос", "Лотосавтомат") 4% раствор формалина 0,5% раствор нейтрального гипохлорита кальция 0,5% раствор сульфохлорантина Время обеззараживания – 60 минут. Дезинфицирующие растворы используются однократно. Емкости для проведения дезинфекции должны быть чётко маркированы, иметь крышки. При дезинфекции изделий, имеющих внутренние каналы, растворы дезинфицирующего средства в объёме 510 мл пропускают через канал с помощью груши для удаления остатков крови, сыворотки и др., после чего изделия полностью погружают в дезинфицирующий раствор во вторую ёмкость. При погружении инструментов в горизонтальном положении полости каждого инструмента должны быть заполнены дезинфицирующим раствором. Каждая партия сухих хлорсодержащих дезинфектантов перед использованием должна подвергаться контролю на содержание активного хлора. Посуда, соприкасающаяся с кровью или сывороткой и не предназначенная для последующего контакта с обследуемым после дезинфекции промывается под проточной водой для полного удаления дезинфектанта и проходит необходимую технологическую обработку. Ёмкости кювет-анализатора ФП, кюветы измерительной аппаратуры, пластиковые пробирки и т.д. обеззараживаются только 6% раствором перекиси водорода и промываются проточной водой. С предметных стёкол с фиксированным и окрашенным мазком крови после проведения микроскопии удаляются остатки иммерсионного масла, стёкла кипятятся в мыльном растворе не менее 15 минут до полного отхождения краски, затем промываются под проточной водой, подсушиваются на воздухе и протираются. Остатки крови, мочи, спинномозговой жидкости и т.п., пробы, содержащие разведенную сыворотку без добавления кислот, щелочей сливают в специальную тару и обеззараживают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, нейтральным гипохлоритом кальция в соотношении 1:5 в течение часа. При удалении сгустков следует предварительно отделить материал металлическим шпателем, который затем обеззараживается. Посуда из-под мочи, кала обрабатывается по описанной выше методике, но может не подвергаться стерилизации. При загрязнении кровью или секретами мебели, инвентаря, приборов их следует немедленно дважды протереть ветошью, ватными или марлевыми тампонами, обильно смоченными дезинфицирующими растворами. Использованную ветошь сбрасывают в специально выделенную ёмкость с дезраствором, маркированную: "Для дезинфекции использованной ветоши". При загрязнении кровью или секретами спец. одежды, её снимают, предварительно обработав дезраствором участок загрязнения. Стирка спецодежды на дому категорически запрещается. Смена спецодежды должна осуществляться не менее 2 раз в неделю. Перчатки после окончания работы обеззараживаются погружением в 3% раствор хлорамина или 6% раствор перекиси водорода на 1 час или кипячением в течение 30 минут. Одноразовый инструментарий (плашки, наконечники автоматических пипеток и т.д.) обеззараживаются и утилизируются в паровом стерилизаторе при 2,0 кг/см2 (1320С) – 60 минут. ПРЕДСТЕРИЛИЗАЦИОННАЯ ОЧИСТКА После дезинфекции лабораторный инструментарий, соприкасающийся с раневой поверхностью или слизистыми оболочками обследуемого подлежит обязательной предстерилизационной очистке и стерилизации. Предстерилизационную очистку проводят с применением моющих растворов. Качество предстерилизационной очистки изделий оценивают на наличие крови путём постановки бензидиновой или амидопириновой проб; на наличие остаточных количеств щелочных компонентов моющего средства ставится фенолфталеиновая проба. Самоконтроль в клинико-диагностических лабораториях проводится ежедневно, контролю подвергают не менее 1% от одновременно обработанных изделий одного наименования, но не менее 3-5 единиц. При положительной пробе на кровь или моющее средство всю группу контролируемых изделий подвергают повторной обработке до получения отрицательных результатов. V. После дезинфекции и предстерилизационной очистки проводят стерилизацию игл, шприцев, пробирок, пипеток, стеклянных палочек, стекол, меланжеров и т.д. (режимы и условия стерилизации указаны в таблицах 3-5). САНИТАРНОЕ СОДЕРЖАНИЕ ПОМЕЩЕНИЙ Все помещения, оборудование, инвентарь должные содержаться в идеальной чистоте. Влажная уборка помещений должна осуществляться не менее одного раза в сутки, а при необходимости чаще с применением моющих средств и дезинфекции. Один раз в месяц в помещениях, где проводится работа с кровью, сывороткой делают генеральную уборку с использованием 3% раствора хлорамина, хлорной извести, извести белильной термостойкой. Во время генеральной уборки тщательно моются стены, оборудование, мебель, проводится очистка полов от наслоений, пятен и т.д. Генеральные уборки проводятся по утвержденному графику. ТРАНСПОРТИРОВКА И ХРАНЕНИЕ БИОМАТЕРИАЛА При транспортировке биоматериал помещают в пробирки, закрывающиеся резиновыми пробками, сопроводительную документацию – в упаковку, исключающую возможность её загрязнения биоматериалом. Бланки направлений помещать в пробирку с кровью запрещается. Транспортировка биоматериала осуществляются в закрытых контейнерах, подвергающихся дезинфекционной обработке. При открывании пробок бутылок, флаконов, пробирок с кровью, плазмой или другими секретами следует не допускать разбрызгивания содержимого. При хранении потенциально инфицированного материала в холодильнике необходимо поместить биоматериал в полиэтиленовый пакет. В случае подтверждения зараженности биоматериала размораживание холодильника совмещают с его дезинфекцией. При аварии (разбрызгивании зараженного материала и т.д.) помещение, где произошла авария, тщательно дезинфицируют. Объём и вид дезинфекции определяются руководителем клинико-диагностической лаборатории. Если авария произошла на центрифуге, то дезинфекционные мероприятия начинают проводить не ранее, чем через 30-40 минут, т.е. после осаждения аэрозоли. Все случаи аварий и принятые в связи с этим меры подлежат обязательной регистрации во внутрибольничном журнале по технике безопасности. Для ликвидации последствий аварии в лаборатории необходимо наличие аптечки, включающей: стерильные ватные и марлевые тампоны; 70% спирт; 1% раствор азотнокислого серебра; 1% раствор протаргола; 0,05% раствор марганцево-кислого калия; раствор йода спиртовой 1%; лейкопластырь. Таблица 1. ПРИГОТОВЛЕНИЕ МОЮЩЕГО РАСТВОРА № Наименование Количество п/п компонентов компонентов для приготовления 1 л моющего раствора 1. Моющее средство 3 "Биолот", г Вода питьевая, мл 997,0 2. Моющее средство 5 "Биолот", г Вода питьевая, мл 995,0 3. Раствор перекиси водорода/вода питьевая 27,5% 30,0% 33,0% H2O2 H2O 17 16 14 978 979 981 3,0% Моющее средство "Прогресс", "Айна", "Астра", "Лотос", "Лотос- 160 5 835 Применяемость Применяется при механизированной очистке (струйный метод). Применяется при ручной очистке. Применяется при механизированной очистке (струйный метод, использование ультразвука) и ручной очистке. автомат", "Маричка" и др., г 4. Моющее средство 5 Применяется при механизированной очистке "Прогресс", с использованием ультразвука. "Астра", "Лотос" и др., г Вода питьевая, мл 995,0 (см3) Примечание: При использовании моющего средства, содержащего 0,5% перекиси водорода и 0,5% синтетически моющего средства и "Лотос" и "Лотос-автомат" применяют ингибитор коррозии – 0,14% олеата натрия (1,4 г на 1 литр раствора). Таблица 2. ПРЕДСТЕРИЛИЗАЦИОННАЯ ОЧИСТКА (ручной способ) Замачивание в моющем растворе при полном погружении изделия при применении моющего средства "Биолот" средств: "Прогресс", "Астра", "Лотос", "Лотос-автомат", "Айна", "Маричка" Мойка каждого изделия в моющем растворе при помощи ерша и ватно-марлевого тампона Ополаски- При применении вание под моющего средства проточной "Биолот" водой При применении моющего средства "Маричка", "Прогресс" При применении средств "Астра", "Лотос", "Айна", "Лотос-автомат" Ополаскивание дистиллированной водой Сушка горячим воздухом Режим очистки Первоначальная Время выдержки (мин) температура раствора, 0С Нормаль- ное Предельное Нормальное Предельное значение отклонение значение отклонение 40 +5 15,0 1,0 50 +5 15,0 +1,0 0,5 +0,1 3,0 5,0 Применяе- мое оборудо- вание Бачок, ванна. раковина Ванна, раковина с устройст- вом для струйной подачи воды 10,0 0,5 85 +2-10 до исчезновения влаги +0,1 Бачок, ванна Сушиль- ный шкаф Примечание: 1. Температура раствора в процессе мойки не поддерживается 2. Моющий раствор перекиси водорода с синтетическим моющими средствами, в т.ч. "Лотос", "Лотосавтомат", с ингибитором коррозии можно использовать в течение суток с момента изготовления, если цвет раствора не изменился. Неизменный раствор можно подогревать до 6 раз, в процессе подогрева концентрация перекиси водорода существенно не изменяется 3. Раствор моющего средства "Биолот", применяемый как при ручном, так и при механическом способе, используется однократно, т.к. при повторном использовании фермент, входящий в состав моющего средства, разрушается в процессе очистки Таблица 3. СТЕРИЛИЗАЦИЯ РЕЖИМ И УСЛОВИЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ ВОЗДУШНЫМ МЕТОДОМ. Стерилизацию проводят после дезинфекции и предстерилизационной очистки. Режим стерилизации Применяемость Условия проведения Срок сохранения Применястерилизации стерильности емое Рабочая Время оборудотемпература в выдержки, мин вание стерилизационной камере, 0С Номи- Предель- Номи- Предельнальное нальное ное отклоное отклозначе- нение значе- нение ние ние 180 +2 60 +5 Рекомендуется Стерилизации Изделия, Воздушный -10 для изделий из подвергают сухие простерилизованные в стерилизатор металла, изделия. Стерилизацию бумаге, могут 160 +2 150 стекла, проводят в упаковке из храниться 3 суток. -10 силиконовой бумаги меточной – Изделия резины непропитанной и простерилизованные бумаги непропитанной без упаковки должны и влагопрочной, бумаге быть использованы для упаковки непосредственно продуктов на автоматах после стерилизации. Е, бумаги упаковочной высокопрочной, бумаги двухслойной крепированной или без упаковки в открытых емкостях. Примечания: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Капилляры, микропипетки, иглы-копья, предметные стекла помещают в бумажную упаковку в количестве не более 5-10 штук. Бумажная упаковка может быть использована не более 5 раз. Иглы-копья можно стерилизовать в конических пробирках в количестве 5-10 штук. Копья укладываются острием вниз, пробирка закрывается сверху упаковочной бумагой. Эффективность воздушной стерилизации зависит от равномерного распределения горячего воздуха в стерилизационной камере. При стерилизации изделий в воздушных стерилизаторах, не имеющих побудительной вентиляции (СС-200, СС-200М, ШСС-80) плотность загрузки не должна превышать 50% площади полок. Стерилизуемые изделия необходимо укладывать горизонтально, поперек пазов кассет, полок, равномерно их распределяя. Загрузка стерилизаторов навалом запрещена. Режим работы стерилизатора контролируется ежедневно одним из химических индикаторов (винная кислота, гидрохинон, тиомочевина), индикаторы размещаются на каждой полке в 5 точках. 1 - в центре, остальные – слева и справа у двери и задней стенки. Таблица 4. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ПАРОВЫМ МЕТОДОМ Давление пара в Рабочая температура в стерилизационной камере, стерилизационной камере, Мпа, кгс/см2 0С Номналь- Предель- ное Номналь- Предель- ное ное отклонение ное отклонение Время стерилизационной выдержки, мин При ручном и При автоматическом полуавтоматическом управлении управлении Номналь- Предель- ное ное отклонение значение 0,20 (2,0) 0,11 (1,1) значение +0,02 (+0,2) +0,02 (+0,2) значение 132 +2,0 20 20 +2 120 +2 45 45 +3 Применение. Рекомендации для изделий из коррозионностойкого металла, стекла, изделий из текстильных материалов, резины Условия проведения стерилизации. Стерилизацию проводят в стерилизационных коробках без фильтров или с фильтрами в двойной мягкой упаковке из бязи, пергамента, бумаги мешочной не пропитанной, бумаги мешочной влагопрочной, бумаги для упаковки продукции на автоматах марки Е, бумаги упаковочной высокопрочной, бумаги двухслойной крепированной. Срок сохранения стерильности. Стерилизацию проводят в стерилизационных коробках без –фильтров или с фильтрами в двойной мягкой упаковке из бязи, пергамента, бумаги мешочной не пропитанной, бумаги мешочной влагопрочной, бумаги для упаковки продукции на автоматах марки Е, бумаги упаковочной высокопрочной, бумаги двухслойной крепированной Применяемое оборудование. Паровой стерилизатор. Примечание: Режим работы стерилизатора контролируется химическими индикаторами (Д–маноза, никотиамид, бензойная кислота), запаянные в трубочки индикаторы укладываются в каждый бикс Таблица 5. СТЕРИЛИЗАЦИЯ ХИМИЧЕСКИМ МЕТОДОМ (растворами) Стерилизующий агент Перекись водорода (по активно действующему веществу Дезоксон № 1 раствор (по надуксусной кислоте) Глютаровый альдегид фирмы "Reanal" (ВНР), 2,5% (по активно действующему веществу), pH 7,0-8,5 Режим стерилизации Температура, 0С Время выдержки, мин. Номинальное Предельное Номинальное Предельное значение отклонение значение отклонение Не менее 18 360 +5 +2 180 +5 50 (см. примечание 2) Не менее 18 - 45 21 +1 360 +5 Применение. Рекомендуется для изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозийностойких металлов. Условия проведения стерилизации. Стерилизация должна проводится при полном погружении изделия в раствор на время стерилизационной выдержки, после чего изделие промывают –стерильной водой двукратно. Срок хранения простерилизованного изделия в стерильной ёмкости (стерилизационная коробка), выложенной стерильной простыней – 3 суток. Применяемое оборудование. Для химической стерилизации применяют закрытые ёмкости из стеклопластмассы или покрытые эмалью (эмаль без повреждений). Примечание: 1. 2. 3. 6% раствор перекиси водорода и 1% раствор "Дезоксон-1" повторно использовать для стерилизации изделий медицинского назначения НЕЛЬЗЯ. Температура в процессе стерилизации не поддерживается. Стерилизацию и промывание проводят в асептических условиях, соответствующих требованиям, предъявляемым к чистым операционным.