ПАТОГЕНЕЗ, ПАТОЛОГИЯ И ЭКОНОМИЧЕСКИЙ УЩЕРБ УДК 619:576.895.132 М И К Р О Ф Л О Р А К И Ш Е Ч Н И К А СОБАК П Р И Г Е Л Ь М И Н Т О З А Х ( Э К С П Е Р И М Е Н Т А Л Ь Н О Е ЗАРАЖЕНИЕ) А.Ю. ГУДКОВА доктор ветеринарных наук А.В. ЗУБОВ кандидат ветеринарных наук А.В. КОЗУБОВИЧ соискатель И.Е. РОГОЗИНА, В.И. РОМЕНСКИЙ кандидаты ветеринарных наук А.В. ТРУСОВА соискатель Ивановская государственная сельскохозяйственная академия При моноинвазии Toxocara canis, Toxascaris leonina, Uncinaria stenocephala, Dipylidium caninum и при микстинвазии этими гельминтами в кишечнике пло­ тоядных возникает дисбактериоз. Восстановление состава микрофлоры кишечника до нормы при моно­ инвазии происходит на 120-е сутки после дегельмин­ тизации, а при микстинвазии этот процесс более про­ должительный. Токсокароз, токсаскариоз, у н цинариоз и д и п и л и д и о з у плотояд­ ных встречаются п о в с е м е с т н о и наносят значительный ущерб слу­ жебному, охотничьему и л ю б и ­ тельскому собаководству (1-3). Эти болезни имеют и социальное зна­ чение, так к а к больные плотояд­ ные п о с т о я н н о находятся в к о н ­ такте с владельцами и членами их семей, что характерно для средних и крупных городов. Известно, что при гельминтозах в организме хо­ зяина формируется м и к р о п а р а з и тоценоз и развивается ассоциатив­ ное заболевание гельминто-бактер и й н о й этиологии (3, 4). Материалы и методы Динамику микропаразитоценозов при гельминтозах изучили 26 на 30 свободных от инвазии щенках 3-месячного возраста, которых раз­ делили на 6 групп (по 5 голов). Ж и ­ вотным первой группы однократно скормили по 300 инвазионных я и ц Toxocara canis, второй — по 300 я и ц Toxascaris leonina, третьей — перкут а н н о по 300 л и ч и н о к Uncinaria stenocephala, четвертой — скормили по 300 цистицеркоидов Dipylidium caninum. Щ е н к и пятой группы од­ нократно внутрь получали по 75 и н ­ вазионных яиц Т. canis, Т. leonina, 75 цистицеркоидов D . caninum, перкутанно — по 75 личинок U . steno­ cephala (микстинвазия). Щенки шес­ той группы были контрольными, их не заражали. Спустя 4 месяца собак дегельминтизировали фенбендазолом в дозе по 40 мг/кт по Д В двук­ ратно с интервалом в 24 часа. Российский паразитологический журнал, 2007, № 2 ПАТОГЕНЕЗ, ПАТОЛОГИЯ И ЭКОНОМИЧЕСКИЙ УЩЕРБ Бактериологические исследо­ вания проводили д о инвазии и на 60 и 120-е сутки после заражения и на 60-120-е сутки после дегельмин­ тизации. Материалом для бактери­ ологического исследования служи­ ли свежие фекалии, полученные из прямой кишки контрольных и опытных животных. М и к р о б и о л о ­ гические исследования проводили общепринятыми методами, а патогенность и з о л и р о в а н н ы х культур определяли на белых мышах, Результаты и обсуждение В кишечнике контрольных, агельминтных собак 1-12-месяч­ ного возраста общее число с т а ф и ­ л о к о к к о в колебалось в пределах 3,06±0,216-3,92±0,248 К О Э log/r, стрептококков — 3,16±0,316-3,68± 0,342, к и ш е ч н ы х палочек — 7,58± 0,249-8,18+0,216, протея - 0,08+ 0,005-0,12±0,017, к л о с т р и д и й 0,09+0,003-0,12+0,009, грибов 0,96+0,027-1,24+0,046, лактобацилл - 7,76±0,318-8,82±0,396, б и фидобактерий - 7,96±8,94+0,128, бактероидов - 3 , 9 6 + 0 , 2 1 8 - 4 , 7 2 ± 0,106 К О Э log/r. Наименьшее ч и с ­ ло бактерий содержалось в к и ш е ч ­ нике собак 1-2-х, умеренное — 3-4месячного возраста, а у собак 5-12месячного возраста состав м и к ­ рофлоры был довольно стабиль­ ным. С о о т н о ш е н и е индигенной и факультативной м и к р о ф л о р ы (в %) у клинически здоровых собак было постоянным: 97,5:2,5. И з к и ш е ч н и к а агельминтных собак часто изолировали Staphylo­ coccus epidermidis, Staph, cereus flavus, Streptococcus cinereus, Str. faecium, Str. jodophilus, Escherichia coli. И з и з у ч е н н ы х 82 культур стрептококков 26,7% культур п р и ­ надлежали к серогруппе А, 9,8% — к В, 9,8% - к С, 34,1% - к Д, 4,9% K H , 4 , 9 % - K G , 1,2% - к L , 8 , 6 % к другим серогруппам. П а т о г е н ность и з о л и р о в а н н ы х стрептокок­ к о в для белых м ы ш е й колебалась в пределах 33,3-50, с т а ф и л о к о к к о в — 22,2-41,7, E.coli - 33,3-50%. В содержимом к и ш е ч н и к а с о ­ бак, зараженных т о к с о к а р а м и , на 60-120-е сутки и н в а з и и общее ч и с ­ л о с т а ф и л о к о к к о в б ы л о в 2,2-1,6, стрептококков — 2,1-2,05, Е. coli — 1.2- 1,3, протея — 15,3-11,6, клост­ ридий — 16,2-12,6, грибов — 1,7-1,6 больше, н о число л а к т о б а ц и л л б ы ­ л о в 1,5-1,4, б и ф и д о б а к т е р и й — 1.3- 1,4, бактероидов — 1,5-1,6 раза меньше показателей животных, свободных от гельминтов. С о о т н о ­ ш е н и е и н д и г е н н о й и факультатив­ н о й м и к р о ф л о р ы у них составило, соответственно, (в %) 96,5:3,5 и 95,5:4,5. У больных собак патоген­ н ы е с т а ф и л о к о к к и составили 37,560, стрептококки — 62,5-64,3, Е. coli — 57,1-61,5% от общего числа их. П о серогрупповой принадлежности стрептококки были представлены: А - 40,3, В - 13,9, С - 8,3, Д - 30,6, Н - 2,8, G - 1,37, L - 1,37, другие 1,36%. И з к и ш е ч н и к а больных с о ­ бак изолировали в ы с о к о п а т о г е н ­ н ы х Str. pyogenes, Str. cinereus, Staph, aureus, Staph, saprophyticum. В к и ш е ч н и к е зараженных т о к саскарисами собак общее число с т а ф и л о к о к к о в н а 60-120-е сутки инвазии по сравнению с показате­ л я м и контрольных животных уве­ личилось в 2,2-1,6, стрептококков — I, 7-1,65, Е. coli — 1,1-1,2, протея — I I , 1-9,8, к л о с т р и д и й — 10,7-8,2, грибов — 1,7-1,5 раза, о д н а к о о б ­ щее число лактобацилл у м е н ь ш и ­ лось в 1,2-1,3, б и ф и д о б а к т е р и й — в 1,2-1,3, бактероидов — 1,2-1,3 раза. У больных собак патогенные ста- Российский паразитологический журнал, 2007, № 2 27 ПАТОГЕНЕЗ, ПАТОЛОГИЯ И ЭКОНОМИЧЕСКИЙ УЩЕРБ ф и л о к о к к и с о с т а в и л и 41,7-53,8, стрептококки — 57,1-61,5, Е. coli — 46,2-46,7% от о б щ е г о числа их. Стрептококки были представлены серогруппами: А — 38,2, В — 13,2, С - 7,4, Д - 30,9, G - 2,9, L - 2,3, другие — 2,2%. В к и ш е ч н и к е собак преобладали патогенные для б е ­ л ы х м ы ш е й Staph, epidermidis, Staph, cereus flavus, Staph, saprophyticum, Staph, albus, Staph, pyo­ genes, Str. jodophilus, E . coli ceporpynn 063, 02, 06. И н д и г е н н а я м и к ­ р о ф л о р а с о с т а в и л а 96,5-95, ф а ­ культативная — 4,5-5%. У собак, получивших перкутанно по 300 л и ч и н о к U . stenocephala, на 60-120-е сутки болезни в содер­ ж и м о м к и ш е ч н и к а о б щ е е число с т а ф и л о к о к к о в б ы л о в 2,5-1,7, стрептококков — 2,1-1,7, Е. coli — 1,1-1,15, протея — 17,8-12, клостридий — 17,1-12,4, грибов — 1,8-1,7 раза больше, количество лактобацилл было в 1,4-1,5, бифидобактер и й — 1,4-1,3, б а к т е р о и д о в — в 1,35-1,4 раза м е н ь ш е показателей контрольных плотоядных. Ч и с л о патогенных с т а ф и л о к о к к о в соста­ вило 64,3-66,7, с т р е п т о к о к к о в — 61,5-63,6, Е. coli - 50-53,8% от о б ­ щего количества их. Стрептококки были представлены серогруппами: А - 45,6, В - 14, С - 7, Д - 28,1, Н и G - no 1,8, L - 1 , 7 , Е. coli - 063, 02, 06. С о о т н о ш е н и е индигенной и факультативной м и к р о ф л о р ы сос­ тавило 96-94,5 на 4-5,5%. В к и ш е ч н и к е больных д и п и л и диозом собак преобладали стафи­ л о к о к к и (в 1,9-1,6 раза выше пока­ зателей к о н т р о л ь н ы х ) , с т р е п т о ­ к о к к и (в 2-1,9), Е. coli (в 1,1-1,2), протей (в 15,4-15,5), клостридий (в 12,4-11,2), г р и б ы (в 1,2-1,3), н о снизилось содержание лактобацилл (ниже показателей контроль­ 28 ных в 1 , 5 - 1 , 4 раза), бифидобактерий (в 1 , 3 - 1 , 4 ) и бактероидов (в 1,3-1,6). Количество патогенных стафилококков составило 5 8 , 3 63,6, стрептококков — 66,7-72,7, Е. coli — 5 3 , 8 - 6 6 , 7 % от общего числа их. Стрептококки были представле­ н ы серогруппами: А — 4 5 , 8 , В — 13.6, С - 8,5, Д - 23,7, Н, G и L по 1,7, другие — 3 , 3 % ; Е. coli — 0 2 , 06 и 0 6 3 . Соотношение индиген­ ной и факультативной м и к р о ф л о ­ ры было 9 6 , 5 - 9 4 , 5 % : 3 , 5 - 5 , 5 % . Более глубоким было и з м е н е ­ ние состава м и к р о ф л о р ы к и ш е ч ­ ника собак п р и микстинвазии н е ­ матодами и цестодами. Так, в к и ­ ш е ч н и к е этих собак общее число стафилококков увеличилось в 2 , 5 2 , 2 , стрептококков — 2 , 3 - 2 , 2 , Е. coli — 1 , 3 - 1 , 4 , протея — 2 2 , 5 - 2 2 , 9 , клост­ ридий — 2 1 , 1 - 2 2 , 3 , грибов — 2 , 1 2 раза, но уменьшилось количество лактобацилл в 1 , 5 - 1 , 4 , б и ф и д о б а к терий — 1 , 4 - 1 , 5 , бактероидов — 1,51,6 раза по сравнению с показате­ л я м и контрольных, агельминтных плотоядных. В к и ш е ч н и к е боль­ ных собак п а т о г е н н ы е с т а ф и л о ­ к о к к и составили 6 1 , 5 - 6 6 , 7 , стреп­ т о к о к к и — 7 5 - 8 1 , 8 , Е. coli — 6 3 , 6 7 5 % от общего числа их. Стрепто­ к о к к и были представлены серог­ руппами А — 4 3 , 3 , В — 1 6 , 7 , С — 16.7, Д - 15, H , G H L - n o 1,7, дру­ гие - 3 , 2 % , Е. coli - 0 2 , 0 6 и 0 6 3 . Соотношение индигенной и фа­ культативной м и к р о ф л о р ы соста­ вило 9 5 , 5 - 9 4 , 0 % : 4 , 5 - 6 % . Выделенные из кишечника контрольных, агельминтных собак Е. coli на М П А давали гладкие, в ы ­ пуклые, блестящие с р о в н ы м и кра­ я м и (S-форма) и плоские, сухие с неправильными к р а я м и (R-форма) колонии. На агаре Эндо — бесцвет­ ные колонии. У непатогенных Российский паразитологический журнал, 2007, № 2 ПАТОГЕНЕЗ, ПАТОЛОГИЯ И ЭКОНОМИЧЕСКИЙ Е. coli хорошо выражена биохими­ ческая активность, в первые сутки они ферментировали с выделением кислот и газа лактозу, рамнозу, дульцит, сахарозу, арабинозу, к с и ­ лозу, маннит, раффинозу, образо­ вывали индол, свертывали молоко. Большинство культур Е. coli, выде­ ленных из к и ш е ч н и к а больных с о ­ бак, на МГЛА давали такой же рост, как сапрофитные, н о на среде Э н до они чаще формировали розовые колонии с м е т а л л и ч е с к и м блес­ ком, обладали меньшей биологи­ ческой а к т и в н о с т ь ю , м н о г и е из них не образовывали газа на глю­ козе, замедленно ферментировали сахарозу, лактозу, мальтозу, сорбит. Культуры стафилококков и стреп­ тококков, изолированные из к и ­ шечника агельминтных собак, на МПА давали круглые с ровными краями к о л о н и и , ферментировали глюкозу, сахарозу, манит, разжижа­ УЩЕРБ л и желатину. Патогенные к о к к и , выделенные из к и ш е ч н и к а боль­ ных собак, на яичных средах выде­ ляли лецитиназу, на кровяном агаре давали гемолиз. Патогенные Staph, albus выделяли пигмент белого цве­ та, Staph, aureus — золотистого, Staph, citreus — лимонного цвета. После освобождения от нема­ тод и цестод микрофлора к и ш е ч ­ ника переболевших собак посте­ пенно улучшалась. У собак, пере­ болевших моноинвазией (токсокароз, токсаскариоз, у н ц и н а р и о з или дипилидиоз), на 120-е сутки лече­ н и я состав м и к р о ф л о р ы сущест­ венно не отличался от показателей контрольных, агельминтных п л о ­ тоядных. Однако у животных при микстинвазии на 120-е сутки лече­ н и я состав м и к р о ф л о р ы сущест­ венно (Р<0,05) отличался от пока­ зателей интактных плотоядных. Литература 1. Акимова С.А. Токсокароз и токсаскариоз плотоядных в Нижнем Поволжье (эпизоотология, патогенез, лечение): Автореф. дис. ... канд. вет. наук. - Иваново, 2006. - 24 с. 2. Беспалова Н.С. Патогенез и иммунологическая реактивность собак, спон­ танно зараженных токсокарозом, на фоне комплексной иммунотерапии. — Воро­ неж, 2003. - 281 с. 3. Шинкаренко А.Н. Экология паразитов собак и меры борьбы с вызываемыми ими заболеваниями в Нижнем Поволжье: Автореф. дис. ... докт. вет. наук. — Ива­ ново, 2005. — 53 с. 4. Субботин В.В., Данилевская Н.В. //Ветеринар.-М., 2002.-№ 4 . - С. 14. Microflora of intestines of dogs at helminthosis (experimental infection) A.J. Gudkova, A.V. Zubov, A.V. Kozubovich, I.E. Rogozina, V.I. Romensky, A.V. Trusova The dysbacteriosis appears in dog intestine at mono- and mixed infection with Toxocara canis, Toxascaris leonina, Uncinaria stenocephala, Dipilidium caninum. Restoration of microflora structure of intestines up to norm at monoinfection occurs for 120 day after dehelminthization and at mixed infection this process more long. Российский паразитологический журнал, 2007, № 2 29