КЛОНАЛЬНОЕ РАЗМНОЖЕНИЕ РАСТЕНИЙ КРАСНОЙ МАЛИНЫ

С.Сейфуллин атындағы ҚазАТУ-ң Ғылым жаршысы / Вестник науки КазАТУ им.
С.Сейфуллина. – 2012. - №1 (72).
КЛОНАЛЬНОЕ РАЗМНОЖЕНИЕ РАСТЕНИЙ КРАСНОЙ
МАЛИНЫ (Rubusidaeus L.) IN VITRO
Оразбаева Г.К., Майсупова И.Л.,
Хасанов В.Т., Швидченко В.К.
Аннотация
В работе рассмотрены вопросы оптимизации основных этапов
клонального размножения in vitro растений красной малины сортов – Новость
Кузьмина и Барнаульская1. При введении эксплантов in vitro предложен
эффективный способ стерилизации побегов данной культуры. Подобраны
питательные среды Мурасиге и Скуг для регенерации растений из меристем и
микроклонального размножения изучаемых сортов малины. Изучена
корнеобразующая способность микропобегов красной малины in vitro. На этапе
адаптации пробирочных растений малины к нестерильным условиям подобран
оптимальный субстрат.
Ключевые слова: малина, меристема, микроклональное размножение,
укоренение, адаптация, субстрат.
Наиболее
очевидными
преимуществами
клонального
размножения растений плодовых и
ягодных культур in vitro является
возможность
получать
высококачественный
посадочный
материал свободный от вирусных,
грибных
и
бактериальных
заболеваний.
Кроме
того,
при
использовании
данного
способа
размножения
имеется
реальная
возможность производить в больших
количествах вегетативное потомство у
трудно размножаемых в обычных
условиях видов растений [1-7]. Это
особенно актуально в отношении
ремонтантных
сортов
малины,
полученных
с
использованием
межвидовой
и
внутривидовой
гибридизации,
имеющих
низкие
коэффициенты
размножения
при
традиционном
вегетативном
размножении из-за малого образования
корневой поросли [8].
На сегодняшний день в практике
отечественного
и
зарубежного
садоводства накоплен большой опыт
культивирования in vitro ягодных
культур, в том числе и малины красной
(Rubusidaeus
L.).
При
этом
культуральные аспекты выращивания
различных сортов малины in vitro и
проблемы проведения пограничных
этапов, от введения эксплантов на
искусственную питательную среду до
адаптации растений-регенерантов ex
vitro в настоящее время изучены
достаточно широко. Список видов и
гибридных
форм
малины,
представленных
культурой
ткани
растений неуклонно увеличивается. В
промышленном
садоводстве
Северного
Казахстана
метод
клонального размножения растений
малины красной не используется. В
научно-исследовательских
учреждениях региона к решению
данной проблемы по существу еще не
преступали. В этой связи освоение на
севере
Казахстана
технологии
клонального размножения малины
красной in vitro имеет большое
значение
в
плане
создания
высококачественного
посадочного
материала
для
промышленного
садоводства.
Клональное микроразмножение
включает в себя несколько этапов:
введение эксплантов в культуру,
собственно
микроразмножение,
укоренение растений in vitro и
адаптацию размножаемых растений к
нестерильным
условиям
произрастания.
Настоящие
исследования
в
Северном
регионе
Казахстана
проводятся впервые и направлены в
основном на освоение и оптимизацию
существующих
методик
микроклонального
размножения
растений малины красной (Rubusidaeus
L.)* на искусственно питательных
средах.
Материал и методика исследований
Исходным материалом для (препаровальная
игла,
скальпель,
проведения исследований послужили пинцет).
растения сортов малины красной –
В таблице 1 приведен состав
Барнаульская и Новость Кузьмина. питательных
сред
для
Приготовление питательных сред и культивирования
и
регенерации
культивирование растений данных меристем,
микроклонального
сортов in vitro осуществляли по размножения и укоренения растений
общепринятым методикам. В качестве красной малины in vitro.
питательной
среды
использовали
Культивирование
минеральную основу по прописи изолированных
тканей
in
vitro
Мурасиге-Скуг.
растений
сортов
малины
–
Изолированные
меристемы Барнаульская и Новость Кузьмина
растений красной малины переносили осуществляли
в
факторостатной
на
стандартную
искусственную комнате при освещенности – 3-5 тыс.
агаризованную питательную среду лк., фотопериоде – 16/8 ч, температуре
Мурасиге и Скуг (МС), в состав – 24-26˚С, относительной влажности
которой были включены 0,1 мг/л 6- воздуха – 60-80%.
БАП и 0,2 мг/л ГК.
Выращивание
Апексы побегов размером 0,1- акклиматизированных растений
в
0,2 мм изолировали из асептических нестерильных условиях проводили в
почек
растений
с
помощью соответствии
с
общепринятой
бинокулярного микроскопа МС-2 методикой.
ZOOM при увеличении × 20 и
специального набора инструментов
Таблица 1 – Состав питательных сред по Мурасиге и Скуг для культивирования
и регенерации меристем, клонального размножения и укоренения растенийрегенерантов красной малины in vitro
Компоненты
питательной
среды
Макросоли I
Макросоли II
Микросоли
Fe-хелат
Глицин
Мезо-инозит
В1
В6
РР
С
6-БАП
ИМК
ГК
Сахароза
Глюкоза
Для
введения
эксплантов
in vitro
50,0
50,0
1,0
5,0
2,0
100,0
0,1
0,5
0,5
1,0
0,5
0,1
0,2
30 000,0
-
Концентрация, мг/л
Для регенерации
Для
меристем
микроклонального
размножения
В-1
В-2
15,0
15,0
1,0
5,0
2,0
100,0
0,05
0,25
0,25
50,0
0,1
0,2
20 000,0
50,0
50,0
50,0
50,0
1,0
1,0
10,0
5,0
2,0
2,0
100,0
100,0
0,1
1,0
0,5
0,5
0,5
0,5
1,0
0,5
0,1
30 000,0 30 000,0
-
50,0
50,0
1,0
5,0
2,0
100,0
1,0
0,5
0,5
1,0
0,1
30 000,0
-
Для
укоренения
25,0
25,0
0,5
5,0
2,0
100,0
0,1
0,5
0,5
50,0
0,01
20 000,0
10 000,0
Основные результаты исследований НИР. Обсуждение полученных
данных
Первый этап – выбор растениядонора, изолирование эксплантов
(введение in vitro)
и получение
хорошо
растущей
стерильной
культуры.
Из литературных источников
известно, что для введения в культуру
ткани растений многие исследователи
на начальном этапе у представителей
рода Rubus в качестве исходного
экспланта используют апикальные и
латеральные почки. При этом в
качестве первичного экспланта в
основном
используются
почки
неодревесневших (в июле) или
одревесневших (август – сентябрь)
побегов. Следует отметить, что для
стерилизации вводимых эксплантов in
vitro применяются различные способы
их обработки.
В
проводимых
нами
исследованиях почки одревесневших
побегов растений сортов красной
малины – Барнаульская и Новость
Кузьмина в течение 15-20 минут
промывали
проточной
водой
с
добавлением моющих средств. Далее
почки освобождали от листьев и
кроющих
чешуй.
Стерилизацию
проводили тремя способами (таблица
2). После стерилизации материала его
высаживали
на
искусственную
питательную среду МС для введения
эксплантов (таблица 1). Результаты
проведенных
исследований
по
стерилизации эксплантов растений
красной
малины
различными
способами показали их различную
эффективность.
Так, в первом и
втором
варианте
опыта
выход
стерильных эксплантов in vitro у
растений
сорта
смородины
Барнаульская находился в пределах 15
и 5 процентов. В третьем же варианте
опыта выход стерильных эксплантов у
данного сорта составлял 80 процентов.
Аналогичная ситуация наблюдалась и
при стерилизации эксплантов и у
растений сорта красной смородины
Новость Кузьмина. В данном случае
выход стерильных эксплантов в
первом и втором варианте опыта
составлял 58 и 60 процентов. В
третьем
варианте опыта
выход
стерильных эксплантов находился в
пределах 91 процента (таблица 2).
С целью снижения вредного
влияния продуктов окисления фенолов
на экспланты в настоящее время
отдельные
исследователи
рекомендуют добавлять в питательную
среду
Мурасиге
и
Скуга
аскорбиновую кислоту (750 –100 мкМ)
или глутатион восстановленный (100 –
250 мкМ).
Таблица 2 – Эффективность способов стерилизации при введении почек малины
красной сортов Барнаульская и Новость Кузьмина in vitro
Вариант стерилизации эксплантов
N
п/п
Продолжение таблицы 2
1
1.
2.
3.
1.
Исходное
Кол-во
кол-во
стерильных
высаженн эксплантов,
ыхinvitro
шт.
эксплантов, шт.
Барнаульская
2
3
1«Доместос в разведении 1:9 в экспозиции
100
10 мин. Трезкратная промывка в
стерильной воде.
2
30%
перекись водорода, + 96% этанол (1:1)
100
в экспозиции 6 минут. Трехкратная
промывка в стерильной воде.
3
Промывка
проточной
водой
с
100
хозяйственным мылом, предвари-тельная
стерилизация побегов 3%-м раствором
хлорамина - 5 мин., промывка в стерильной
воде 3 р., основная стерилизация побегов
0,025% раствором мертиолята Na в
сочетании с 7% белизной в экспозиции
10минут, трех кратная промывка
в
стерильной воде.
Новость Кузьмина
1«Доместос в разведении 1:9 в экспозиции 10
мин.
230% перекись водорода, + 96% этанол (1:1)
Выход
стерильных
эксплантов, %
4
5
15
15
5
5
16
80
100
58
58
100
69
69
2.
3.
в экспозиции 6 минут
3
Промывка
проточной
водой
с
хозяйственным мылом, предва-рительная
стерилизация побегов 3%-м раствором
хлорамина - 5 мин., промывка в стерильной
воде 3 р., основная стерилизация побегов
0,025% раствором мертиолята Na в
сочетании с 7% белизной в экспозиции
10минут, трехкратная промывка
в
стерильной воде.
Согласно
литературным
источникам
добавление
данных
веществ
в
питательную
среду
повышает выход побегов малины in
vitro на 34%. В проводимых нами
исследованиях для снижения действия
фенолов в качестве антиоксиданта
использовалась аскорбиновая кислота
в концентрации 1мг/л.
Для освобождения красной
малины от вирусной инфекции, у
тронувшихся
in
vitro
в
рост
стерильных
почек
вычленяли
экспланты,
состоящие
из
меристематического купола, одного
или двух листовых примордиев и
некоторого количества субапикальной
ткани. Меристемы вычленяли на 2030-е сутки после помещения почек на
100
91
91
искусственную питательную среду. За
данный период времени растения in
vitro достигают высоты высотой 3-5
см.
Изолированные
меристемы
переносили
на
агаризованные
питательные среды для регенерации
меристем in vitro (таблица 1). Согласно
данным таблицы 3, приживаемость
меристем in vitro у сортов малины
красной Новость Кузьмина в первом
варианте опыта (В-1) составляла
34,1%, у сорта Барнаульская данный
показатель находился в пределах
31,0%. Во втором варианте опыта (В-2)
приживаемость меристем у сорта
красной малины Новость Кузьмина
находилась в пределах 73,8%, у сорта
Барнаульская
57,0%.
Таблица 3 – Приживаемость меристем растений красной малины 15-е сутки
после помещения их на различные питательные среды
Приживаемость меристем, %
Название
В-1
В-2
сорта
Количество
Количество
Количество
Количество
изолирован- прижившихся изолированприжившихся
ных
меристем
ных
меристем
меристем,
меристем,
шт.
%
шт.
%
шт.
шт.
Новость
120
42
34,1
88
65
73,8
Кузьмина
Барнаульская
100
31
31,0
100
57
57,0
Таким
образом,
согласно
данным таблицы 3, приживаемость
меристемных эксплантов растений
красной малины сорта Новость
Кузьмина на питательной среде,
содержащей 1,0 мг/л 6-БАП + 30 000
мг/л сахарозы была более чем в 2 раза
выше, чем приживаемость меристем
на питательной среде, содержащей 0,1
мг/л 6-БАП + 0,2 мг/л ГК + 30 000 мг/л
сахарозы.
У
сорта
малины
Барнаульская отмечалось несколько
меньшее значение данного показателя.
Второй этап – собственно
микроразмножение. На данном этапе
различные исследователи для лучшего
роста микропобегов малины in vitro
рекомендуют различные концентрации
6-БАП – в пределах 0,5 – 1,0 мг/л.
В
проводимых
нами
экспериментах через 7-10 дней
введенные в культуру in vitro растения,
начавшие рост пересаживали на
питательные
среды
для
микроклонального размножения с
минеральным составом, сахарозой и
витаминами
по
прописи
MС.
Используемые среды содержали 3%
сахарозы,
0,1
мг/л
ИМК,
но
отличались
различными
дозами
внесения 6-БАП (0,5 мг/л и 1,0 мг/л).
Результаты действия концентраций
цитокинина
на
коэффициент
размножения микропобегов in vitro у
изучаемых
сортов
малины
представлены в таблице 4.
Таблица 4 – Коэффициент размножения растений красной малины на
питательной среде МС с различным соотношением фитогормонов
№
Коэффициент размножения на среде с внесением:
п/п Название сорта
0,5 мг/л 6-БАП;
1,0 мг/л 6-БАП;
0,1 мг/л ИМК
0,1 мг/л ИМК
1
Барнаульская
5,3
4,8
2
Новость
6,1
4,7
Кузьмина
В проводимых исследованиях vitro с последующей адаптацией их к
оптимальным
для
увеличения почвенным условиям искусственного
коэффициента размножения малины in климата.
vitro был вариант среды, включающий
На этапе укоренения растений in
6-БАП в концентрации 0,5 мг/л в vitro, согласно литературным данным,
комбинации с 0,1 мг/л ИМК. эффективность корнеобразования у
Использование
указанных микропобегов малины зависит от типа
концентраций
обеспечивало и
концентрации
используемого
образование достаточно крупных (1,5– ауксина. Одни исследователи считают,
3 см) микропобегов. Увеличение же что индукция ризогенеза у изучаемых
содержания в среде 6-БАП до 1,0 мг/л сортов малины наилучшим образом
приводило
к
увеличению удается на среде MС, содержащей
коэффициента
размножения,
но уменьшенное
вдвое
количество
растения становились более мелкими, макросолей, 20 г/л сахарозы и 0,5 – 1,0
и на этапе укоренения снижалась мг/л β-индолил - 3-масляной кислоты
интенсивность их ризогенеза. Кроме (ИМК). Другие исследователи с целью
того,
через
2-3
недели укоренения предлагают применять
культивирования растений на данной питательные среды с половинным
питательной
среде
отмечались составом солей по МС, дополненные 1
признаки хлороза.
мг/л ИУК.
Третий – четвертый этапы –
В проводимых исследованиях
укоренение размноженных побегов in при культивировании пробирочных
растений
красной
малины
на
питательной среде для укоренения,
включающей половинное содержание
макро- и микросолей (таблица 2) у
сорта Барнаульская лишь на 40-е сутки
наблюдался единичный рост корней
(таблица 5). Однако предварительная
16-часовая экспозиция микропобегов в
растворе ИМК в концентрации 25 мг/л
приводила к успешному ризогенезу
культивируемых
пробирочных
растений.
Корнеобразующая
способность
изучаемых
сортов
красной малины с применением
данного
способа
находилось
в
пределах
75-92%.
Аналогичные
результаты
были
получены
в
исследованиях
Турдиева
Т.Д.,
В.Borkowska (2010) и R.Zajac (1985).
Согласно
данным,
представленным в таблице 5, побеги
сорта Барнаульская укоренялись в
среднем более чем на 90%.
Таблица 5 – Процент укоренения растений красной малины in vitro
№
Процент укоренения на 30 сутки
п/п
Культивирование
Предварительная
16Название сорта
микро-побегов
без часовая обработка микрообработки на среде для побегов в растворе ИМК в
укоренения с 1 мг/л концентрации 25 м/л
ИМК
1
Барнаульская
17,0
75,0
2
Новость Кузьмина
29,0
92,0
Побеги сорта Новость Кузьмина применяют искусственный субстрат,
отличались
несколько
меньшим содержащий
свежие
процентом
укоренения
побегов. стабилизированные осадки городских
Побеги изучаемых сортов красной сточных
вод
(ОГСВ)
и
малины на этапе укоренения заметно нейтрализованный верховой торф
увеличивались в высоту, что в (1:4). Благодаря оптимальным физикодальнейшем облегчало перевод их на химическим, асептическим свойствам
адаптацию к почвенному грунту.
и высокой гормональной активности
В
настоящее
время
при субстрат оказывает положительное
адаптации растений к условиям in vivo, влияние
на
приживаемость
исследователи используют различные микрорастений, их рост и развитие.
типы субстратов, состоящие из торфа,
В проводимых исследованиях
песка, перлита в соотношении 1:1:1; после развития корневой системы
торфа и песка в отношении 31; смесь пробирочные растения изучаемых
торфа, дерновой почвы, перлита в сортов красной малины пересаживали
соотношении 1:1:1; торф, коры сосны в горшочки с различными типами
субстрата для адаптации к условиям in
и песка в соотношении 3:1:1.
Отдельные исследователи на vivo. Стерильные растения вынимали
этапе
адаптации
микрорастений из колб или пробирок пинцетом с
малины используют пропаренные в длинным концом или специальным
сушильном
шкафу
и крючком и высаживали в субстрат. В
проавтоклавированные
стерильные качестве субстрата использовались:
субстраты.
Другие исследователи почвогрунт (контроль); торф, песок в
соотношении (3:1); торф, дерновая
почва, перлит (1:1:1); готовый к
применению
универсальный
питательный
грунт
«Садовник».
Укорененные
в
субстрате
пробирочные
растений
красной
малины культивировались в камере
искусственного климата (таблица 6).
Согласно данным таблицы 6, все
изучаемые
типы
субстрата
по
приживаемости
растений
малины
превышали
контрольный
вариант
опыта.
При
этом
лучшая
приживаемость пробирочных растений
малины сорта Новость Кузьмина и
Барнаульская наблюдалась на варианте
с торфогрунтом «Садовник».
Следует
отметить,
что
приживаемость растений малины сорта
Новость
Кузьмина
несколько
превышала
значение
данного
показателя сорта Барнаульская.
Таблица 6 – Результаты приживаемости пробирочных растений малины,
выращиваемых на различных типах субстрата на 30-е сутки
№
п/п
1
2
Название
сорта
Новость
Кузьмина
Барнаульская
Почвогрунт
(контроль)
58
54
Заключение
В
результате
проведенных
исследований изучены оптимальные
параметры клонального размножения
in vitro растений красной малины
сортов
Новость
Кузьмина
и
Барнаульская. На этапе введения
эксплантов в культуру ткани растений
наиболее
эффективным
способом
основной
стерилизации
побегов
являлся вариант, содержащий 0,025%
раствор мертиолята Na в сочетании с
7% белизной в экспозиции 10 минут.
Выход стерильных растений на данном
варианте варьировал от 80% до 91%.
Оптимальной питательной средой, для
малины красной in vitro была среда
МС, включающая 1 мг/л 6-БАП и 3%
сахарозы. Приживаемость меристем на
данной питательной среде у изучаемых
сортов красной малины находилась в
Тип субстрата
Торф
Торф,
песок
дерновая
(3:1)
почва, перлит
(1:1:1)
63
71
57
65
Торфогрунт
«Садовник»
93
86
пределах от 57,0 до 73,8%. Для
увеличения
коэффициента
размножения малины красной in vitro
наилучшим был вариант среды,
включающий 6-БАП в концентрации
0,5 мг/л в комбинации с 0,1 мг/л ИМК.
Культивируемые
пробирочные
растения после предварительной 16часовой экспозиции микропобегов в
растворе ИМК в концентрации 25 мг/л
в течение 16 часов показали
наибольший процент ризогенеза (7592%) .
Максимальная приживаемость
пробирочных растений (86-93%) у
изучаемых сортов красной малины в
почвенном
грунте
(камера
искусственного климата) отмечена на
варианте опыта, который содержал
торфогрунт «Садовник».
Примечание
1
Настоящая публикация сделана в рамках подпроекта, финансируемого в
рамках СКГ, поддерживаемого Всемирным Банком и Правительством
Республики Казахстан. Заявления авторов могут не отражать официальной
позиции Всемирного Банка и Правительства Республики Казахстан.
Список литературы
1 Бутенко Р.Г. Клеточная технология в сельскохозяйственной науке /
Основы сельскохозяйственной биологии. – М.: Агропромиздат, 1990. – Гл. 2. –
С. 154-235.
2 Вовк, В.В. Оптимизация селекционного процесса и ускоренное
размножение межвидовых ремонтантных форм малины методом in vitro:
автореф. дис. …канд. с.-х. наук: 06.01.05. – Брянск, 2000. – 20 с.
3 Высоцкий В.А. Использование биотехнологических методов при
оздоровлении посадочного материала / Актуальные вопросы теории и практики
защиты плодовых и ягодных культур от вредных организмов в условиях
многоукладности сельского хозяйства: тезисы докладов Всероссийского
совещания. - Москва, 1998. – С. 74-76.
4 Джигадло М.И. Микроклональное размножение и производство
посадочного материала плодовых и ягодных культур высших категорий
качества. - Саратов, 2003. – С. 108-109.
5 Кашин В.И. Перспективы использования биотехнологических приемов в
создании новых высокоадаптивных форм плодовых и ягодных растений /
Использование биотехнологических методов для решения генетикоселекционных проблем: сборник докладов и сообщений XVIII Мичуринских
чтений. - Мичуринск, 1998. – С. 8 – 14.
6 Семина Н.П., Лукьянова Е.А., Цуканова Е.М. Вирусные болезни
плодовых и ягодных культур в ЦЧО и методы их идентификации // Современные
проблемы плодоводства: тез. докл. междунар. научн. конф. - Самохваловичи,
1995. - С. 40 - 41.
7
Тюленев
В.М.
Состояние
и
перспективы
применения
биотехнологических методов в селекции плодовых растений // Использование
биотехнологических методов для решения генетико-селекционных проблем:
сборник докладов и сообщений XVIII Мичуринских чтений. - Мичуринск, 1998.
– С. 3 - 8.
8 Казаков И.В., Заякин В.В., Нам Казаков И.Я. Оптимизация метода
клонального микроразмножения для ускоренной селекции ремонтантных форм
малины // Использование биотехнологических методов для решения генетикоселекционных проблем: сборник докладов и сообщений XVIII Мичуринских
чтений. - Мичуринск, 1998. – С. 16 – 19.
Түйін
Жүргізілген жұмыста қызыл таңқурайдың «Новость Кузьмина» және
«Барнаульская» сорттарының микроклоналды көбеюін оңтайландыру мәселелері
қарастырылды. Экспланттарды өсімдік ұлпасы дақылына енгізгенде негізгі
жүргізген стерилдеудің барынша тиімді нұсқасы болып 10 минут түзілген, 7%
ақтықпен үйлескен Na мертиолят 0,025% ерітіндісі табылады. Қызыл таңқурай
сортының in vitro мерижүйесінің өміршеңдігі 1 мг/л 6-БАП және 3% сахарозадан
тұратын МС қоректендіргіш ортада оңтайлы болып табылды. in vitro таңқурай
өсімдік-регенерантын өсіру және дамыту үшін ең оңтайлы орта болып 16 сағат
бойғы 0,5 мг/л концентрациядағы 6-БАП пен 0,1 мг/л концентрациядағы ИМК
қосылған қоректендіргіш орта табылады. Өсірілетін сынамалы өсімдіктің
ризогенезі 25 мг/л концентрациядағы ИМК ерітіндісінде 16-сағаттық болжалды
микропобег экспозициясы кезінде сәтті өткізілді. Жүргізілген зерттеулерде
стерилдемеген жағдайда таңқурайдың зерттеліп отырған сортының сынамалы
өсімдігінің өміршеңдігіне «Садовник» шымтезек топырағы ең қолайлы болды.
Summary
The issues of phases optimization of micro clone breeding of red raspberries of
“Novost’ Kusmina” (Kuzmin’s news) and “Bayanaul’skaya” variety were considered
in conducted work. In explants’ introducing into sort’s tissue the most effective
variant of the main sprouts’ sterilization was Na mertiolyat solution 0,025% in
combination with 7% of whiteness in exposition of 10 minutes. Survival of red
raspberries’ meristems in-vitro was optimal in nutrition environment MS including
1mg/l 6-BAP and 3% of saccharose. The optimal variant for increasing coefficient of
red raspberries reproduction in vitro was the variant of environment including 6-BAP
in concentration of 0,5 mg/l in combination with 0,1 mg/l IMK. Risogene of
cultivated vitro plants was successful at preliminary 16 hours exposition of micro
sprouts in IMK solution in concentration with 25 mg/l during 16 hours. Studied
varieties of raspberries showed the highest survival in peat soils “Sadovnik” at the
phase of vitro plants adaptation in unsterile conditions.