Методология диагностики дисплазии соединительной ткани

НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Методология диагностики
дисплазии соединительной ткани.
Сизикова Анастасия Евгеньевна
Студентка МБФ, 5 курс
ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России
Научные руководители:
Дворниченко Марина Владимировна - к.м.н., доцент кафедры морфологии и общей
патологии
Хлусов Игорь Альбертович – д.м.н., профессор кафедры морфологии и общей
патологии
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Актуальность
Мутации de novo в генах - 5-6% случаев
Развитие полисистемной патологии
Патология скелета
57%
Патологии ССС
42%
Патология мышечной системы
20%
Развитие миопии
38%
Посимптомная диагностика и терапия
Цель исследования - обосновать использование модели 3D культуры в
диагностике патологии соединительной ткани
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Дизайн исследования
Показатели ремоделирования костной ткани
(остекальцин, CrossLaps, костный изофермент
щелочной фосфатазы. Тартарат-резистетная
кислая фосфатаза, Са Р)
Периферическая кровь
Культура мононуклеаров
периферической крови 2D и 3D
Дети и подростки в посттравматическом периоде
Дети и подростки с диагностированным сколиозом
Контроль
Показатели ремоделирования костной ткани
(остекальцин, CrossLaps)
Микроскопия, морфометрия, цитохимия
Цитогенетический анализ
Дети и подростки с ДСТ
Контроль
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Показатели ремоделирования костной ткани в
периферической крови
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Методология культивирования
Периферическая
кровь
Культуральная
среда
Взвесь
мононуклеаров
Контроль
Взвесь
мононуклеаров
Опыт
3D
матрица
Подложка
3D покрытие
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Морфология мононуклеаров в 2 D культуре
Б
А
Б
Морфология мононуклеарных лейкоцитов
периферической крови человека через 4 суток
культивирования на пластиковой поверхности
культуральных планшетов в остеогенной среде.
Окраска прилипающих клеток на щелочную
фосфатазу с докрашиванием азуром II-эозином
(А) Увеличение 750.
Морфофункциональное состояние
мононуклеарных лейкоцитов крови,
прилипающих к пластику и
окрашивающихся на кислую фосфатазу (Б) у
больных несовершенным остеогенезом.
Увеличение 400.
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Цитологические и цитогенетические показатели в 2D и 3D
культурах
Одиночный
разрыв
Двойной разрыв
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Показатели ремоделирования костной ткани в 2D и 3D
культурах
CrossLaps
КФ
Хромосомные
аберрации
ЩФ
Фибробластоподобная клетка
2D культура
CD34
Коллаген I
Неправильный
Коллаген I
CD 44
Моноцит
3D культура
Компенсаторно
0,5 %
Normal
Displaziia
Выводы
• При краткосрочном культивировании мононуклеаров
в присутствии 3D матриц выявлено изменение
фенотипа мононуклеарами до
фибробластоподобного в значительной степени у
пациентов с ДСТ, что позволяет сформулировать
методологию диагностики патологии соединительной
ткани.
• Зафиксированные изменения цитогенетических
показателей и параметров ремоделирования 3D
культуре у пациентов с ДСТ возможно рассматривать
как прогностический критерий дооперационного
применения имплантируемого материала.
НОЦ «Биосовместимые
материалы и биоинженерия»
Преимущества методологии
Простой, малоинвазивный метод
Не трубует дорогостоящих реактивов и специализированного оборудования
Достаточная специфичность и информативность
min стоимость, тыс. руб
ПСТ-диагностикум
Клинико-лабораторные
Генетические
0
10
20
30
40
50
60
Срок исполнения, дни
ПСТ-диагностикум
Клинико-лабораторные
Генетические
0
50
100
150
200
250
300
350
400
Благодарю за внимание!!!