Полиморфизм генов RYR 1, ESR, PRLR хряков породы ландрас

advertisement
ПЛЕМЕННОЕ ДЕЛО
Полиморфизм генов RYR�1,
ESR, PRLR хряков породы
ландрас
Андрей ТОЛОКОНЦЕВ,
кандидат сельскохозяйственных наук
Селекционно�генетический центр
«Мортадель»
ы определили генотипы у 28 хряков породы лан�
драс. Методом ПЦР амплифицировали фрагмент
гена RYR�1 длиной 134 пары нуклеотидов (п.н.).
Полученные амплификаты разрезали эндонуклеазой Hin 61.
При помощи маркера определили длину фрагментов ре�
стрикции: две полосы (84 и 50 пар нуклеотидов) представля�
ют генотип NN, три полосы (134, 84 и 50 пар нуклеотидов)
соответствуют гетерозиготному генотипу Nn (рис. 1). Ни од�
ного животного с рецессивным гомозиготным генотипом nn
не обнаружили.
Методом ПЦР амплифицировали фрагмент гена ESR дли�
ной 120 пар нуклеотидов. Полученные пробы разрезали эн�
донуклеазой Pvu II и разделили в агарозном геле. При помо�
щи маркера определили длину фрагментов рестрикции: од�
на полоса (120 пар нуклеотидов) представляет гомозиготный
генотип АА, три полосы (120, 65 и 55 пар нуклеотидов) со�
ответствуют гетерозиготному генотипу АВ (рис. 2).
Так же определены генотипы у 28 хряков специализиро�
ванной материнской линии Символа. Методом ПЦР ампли�
фицирован фрагмент гена PRLR длиной в 170 пар нуклео�
тидов. Полученные фрагменты разрезаны эндонуклеазой
AluI и разделены в агарозном геле.
В зависимости от генотипа животного получены следующие
картины фрагментов рестрикции: две четкие полосы по 170 и
127 п.н. соответствуют генотипу АА, еще две (92 и 35 п.н.) —
генотипу ВВ, четыре полосы (170, 127, 92 и 35 п.н.) — гетеро�
зиготному генотипу АВ (рис. 3).
Наличие мутантного гена RYR�1 приводит к увеличению
стрессочувствительности его носителей и в результате — к раз�
личным неблагоприятным последствиям для свиноводства:
плохой выживаемости и высокому отходу поросят, низкому
качеству мяса. Проведенные исследования хряков�произво�
дителей породы ландрас специализированной материнской
линии Символа свидетельствуют: для этой популяции ха�
рактерен гомозиготный, стрессоустойчивый генотип NN.
Рецессивных гомозигот не выявлено.
Исследования генетической структуры стада хряков спе�
циализированной линии Символа по гену ESR показали, что
в первом поколении частота встречаемости генотипа АА со�
ставляла 0,58%, генотипа АВ — 0,42%. Носителей генотипа
Нашей целью было исследование генетической
структуры стада хряков породы ландрас специа�
лизированной материнской линии Символа для
дальнейшей разработки методов определения ге�
нов RYR�1, ESR и PRLR и повышения репродуктив�
ных качеств производителей.
М
Рис. 1. ПЦР�продукт гена RYR�1 М: pUC19 DNA/MspI,
1–7 — NN�генотип (84/50 п.н.)
Рис. 2. ПЦР�продукт гена ESR М: pUC19 DNA/MspI,
1 — AB�генотип (120/65/55 п.н.), 2–5 — AA�генотип (120 п.н.)
Рис. 3. ПЦР�продукт гена PRLR М: pUC19 DNA/MspI,
1 — BB�генотип (92/35 п.н.), 3, 5, 6, 7 — AA�генотип
(170/127 п.н.) 2, 4 — AB�генотип (слабая 170, 127/92/35 п.н.)
ЖИВОТНОВОДСТВО РОССИИ СПЕЦВЫПУСК 2013
21
ПЛЕМЕННОЕ ДЕЛО
Рис. 4. Генетическая структура хряков специализированной
материнской линии Символа по гену ESR в динамике поколений
Рис. 5. Генетическая структура хряков специализированной
материнской линии Символа в динамике поколений по гену
PRLR
разом: гомозиготный генотип АА — 0,33%, гетерозиготный
АВ — 0,5, гомозиготный ВВ — 0,17%. Частота встречаемо�
сти в первом поколении аллели А — 0,58%, аллели В — 0,42%
(рис. 5).
Во втором поколении частота встречаемости генотипов
АА и АВ составила 0,37%, ВВ — 0,26, аллели А — 0,56, ал�
лели В — 0,44%.
Исследована также частота встречаемости комплексных ге�
нотипов NN/ESR/PRLR хряков�производителей породы
ландрас специализированной линии Символа. В первом по�
колении у них обнаружено шесть комплексных генотипов
(рис. 6). Наиболее часто повторяются генотипы NN/АА/АА
(25,2%) и NN/АА/АВ (33,3%), реже — NN/АВ/АВ и
NN/АВ/ВВ (16,6%) и совсем редко — NN/АВ/АА (8,3%). Ге�
нотипы NN/АА/ВВ обнаружены не были.
Полученные данные указывают на то, что во втором по�
колении существует четыре комплексных генотипа (рис. 7).
Наиболее часто встречаются генотипы NN/АА/АА (37,5%),
NN/АА/АВ (25%) и NN/AB/BB (25%). Генотипы NN/АА/ВВ
и NN/AB/AA обнаружены не были.
Итак, хряки�производители породы ландрас специали�
зированной линии Символа характеризуются гомозиготным
стрессоустойчивым генотипом NN без рецессивных гомози�
гот. Генотипирование хряков и исследования частоты встре�
чаемости комплексных генотипов RYR�1/ESR/PRLR вы�
явили отсутствие гомозиготного генотипа ESRВВ и генотипов
NN/AA/BB в динамике двух поколений.
8’2011 ЖР
Рис. 6. Частота встречаемости комплексных генотипов
RYR1/ESR/PRLR у хряков�производителей первого поколения
ВВ не выявлено. Частота повторяемости аллелей в первом
поколении распределилась следующим образом: аллель А —
0,79%, аллель В — 0,21%.
Результаты исследования второго поколения указывают на
изменения генетической структуры хряков. Так, частота встре�
чаемости генотипа АА в сравнении с первым поколением уве�
личилась на 0,05% и составила 0,63%, при этом частота гено�
типа АВ снизилась до 0,37%. Во втором поколении генотипа
ВВ также не выявлено, изменилась частота повторяемости
аллелей: аллель А — 0,82%, аллель В — 0,18% (рис. 4).
Генетическая структура этой популяции хряков по гену
PRLR в первом поколении распределилась следующим об�
22
ЖИВОТНОВОДСТВО РОССИИ СПЕЦВЫПУСК 2013
РЕКЛАМА
Рис. 7. Частота встречаемости комплексных генотипов
RYR�1/ESR/PRLR у хряков�производителей второго поколения
РЕКЛАМА
РЕКЛАМА
Download