Аннотация на работу «Влияние цитотоксических соединений

Аннотация
на работу «Влияние цитотоксических соединений различных классов на
активность ферментов антиоксидантной системы»
Ключевые слова: генотоксические соединения, аминонитроксильные комплексы
платины(IV), производные оксазолидинона и триазола, супероксиддисмутаза, каталаза,
антиоксидантная система, активные формы кислорода.
Известно, что активные формы кислорода (АФК) являются важными посредниками
в путях клеточной гибели. Опухолевые клетки часто продуцируют большое количество
АФК, что является следствием пониженной экспрессии антиоксидантных ферментов,
таких как каталаза и марганцевая супероксиддисмутаза (Mn-СОД). Кроме того, АФК
участвуют в пролиферации опухолевых клеток через активацию сигнальных путей
митоза. Особое место занимает изучение роли АФК, анти- и прооксидантов в механизмах
клеточной гибели, что позволит создавать новые препараты для таргетной терапии,
основанные на изменении редокс-статуса клеток опухоли.
Изучение изменений активности ферментов антиоксидантной системы в ответ на
различные цитотоксические препараты позволяет выявить роль АФК в механизмах
клеточной гибели различных линий опухолевых клеток.
Целью исследования являлось изучение влияния различных цитотоксических
соединений на активность ферментов антиоксидантной системы в различных линиях
опухолевых клеток.
Задачи исследования:
1. Получить данные по активности супероксиддисмутазы при действии комплексов
платины, а также производных оксазолидинона и триазола.
2. Изучить
влияние
соединений
различных
цитотоксических
соединений
на
активность каталазы.
3. Исследовать
экспрессию
белка
Mn-СОД
при
действии
цитотоксических
соединений разных классов.
В ходе работы были исследованы цитотоксические соединения различного типа
действия: комплекс платины(II) цисплатин, комплекс платины(IV) сатраплатин или
JM216, аминонитроксильные комплексы платины(IV) – ВС-131 и ВС-149 (синтезированы
в ИПХФ РАН в группе В.Д. Сеня), а так же производные оксазолидинона (О-1, О-2) и
триазола (М-1, М-2) (синтезированы в ИПХФ РАН в лаборатории А.Г. Корепина). Для
исследования реакции антиоксидантной системы использовали две линии опухолевых
клеток: MCF-7 (аденокарцинома молочной железа человека) и H1299 (немелкоклеточная
карцинома легкого человека). Активность супероксиддисмутазы определяли путем
измерения ингибирования фотохимического восстановления нитросинего тетразолия
(НСТ) с использованием модифицированного метода Бешамп и Фридович (Beaushamp,
Fridovich, 1971). Активность каталазы определяли согласно методике Аеби и Лестер по
снижению поглощения перекиси водорода при 240 нм (Aebi, Lester, 1984). Для изучения
экспрессии белков применялся общепринятый метод иммуноблотинга.
При действии цитотоксических соединений различных классов обнаружено
несколько типов ответов антиоксидантной системы, которые также зависели и от типа
клеточной линии.
Установлено, что комплексы платины(II) и платины(IV) различаются по своему
воздействию на активность ферментов антиоксидантной системы, что, возможно,
объясняется особенностями их накопления и биотрансформации в опухолевых клетках.
Поскольку нитроксильные радикалы обладают как про- так и антиоксидантной
активностью, то различия в ответе антиоксидантной системы можно объяснить наличием
в структуре комплексов ВС131 и ВС149 нитроксильных радикалов разного строения.
Показано, что производные триазола и оксазолидинона не оказывают существенного
влияния на активность супероксиддисмутазы и каталазы в клетках линии Н1299. В
клетках линии МCF7 наблюдали увеличение активности супероксиддисмутазы в
присутствии соединений О1, О2 и М1 при 6 ч экспозиции. Важно, что увеличение
активности супероксиддисмутазы сопровождалось отсутствием изменений, а в случае О2
– снижением активности каталазы.
Исследование экспрессии белка Mn-СОД при действии разных цитотоксических
соединений не выявило существенных изменений в содержании Mn-СОД в клетках,
независимо от линии клеток. Таким образом, наблюдаемые изменения в активности
супероксиддисмутазы не связаны с изменением экспрессии белка Mn-СОД.
Для
поддержания
баланса
АФК
изменения
в
активности
ферментов
антиоксидантной системы должны происходить скоординировано. Однако подобные
скоординированные изменения в активности этих двух ферментов при действии
исследуемых соединений практически не обнаруживаются.
Работа поддержана грантом РФФИ № 12-04-31693 мол_а