МОЧЕВАЯ КИСЛОТА (812) 412-8380 www.olvex-d.ru Кат. №: 012.002 - 100 мл

advertisement
(812) 412-8380
www.olvex-d.ru
МОЧЕВАЯ КИСЛОТА
Кат. №: 012.002 - 100 мл
Кат. №: 012.012 - 200 мл
Количество определений зависит
от характеристик используемого анализатора
и минимального рабочего объема кюветы.
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор «МОЧЕВАЯ КИСЛОТА-ОЛЬВЕКС» предназначен
для количественного определения содержания мочевой
кислоты в сыворотке, плазме крови и моче человека в
клинико-диагностических и биохимических лабораториях
и научно-исследовательской практике.
Набор рассчитан для проведения 50 или 100 определений
при расходе по 2,0 мл рабочего реагента на один анализ.
перемешивании. Рабочий реагент стабилен при +2-8 °С в
защищенном от света месте в плотно закрытом флаконе не
менее 3-х недель.
Бледно-розовая окраска рабочего реагента с величиной
оптической плотности до 0,200 А, измеренной против
дистиллированной воды при длине волны 500 нм, не
влияет на правильность определения мочевой кислоты в
исследуемом образце.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Определение основано на проведении сопряженных
реакций, каптализируемых уриказой и пероксидазой.
Мочевая кислота под действием фермента уриказы
окисляется до аллантоина, перекиси водорода и двуокиси
углерода. Образующаяся в данной реакции перекись
водорода при участии фермента пероксидазы способствует
окислительному азосочетанию 3,5-дихлоргидрокси-2бензенсульфоната (DCHBS) и 4-аминоантипирина (4-ААП)
с образованием окрашенного соединения (хинонимин).
Интенсивность окраски реакционной среды пропорциональна содержанию мочевой кислоты в исследуемом
материале и определяется фотометрически при длине
волны 500 нм (490 – 540 нм).
Тщательно закрывайте флаконы с реагентами после
каждого использования!
СХЕМА РЕАКЦИИ
уриказа
мочевая кислота + 2H2O + O2 _______> аллантоин + CO2 + H2O2
пероксидаза
DCHBS + 4-ААП + H2O2 ________________> хинонимин + 2H2O
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1.
Реагент 2.
Калибратор – р-р мочевой к-ты, 357 мкмоль/л (6 мг/100 мл).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейная область определения концентрации мочевой
кислоты в диапазоне от 80 до 1200 мкмоль/л.
Отклонение от линейности не более 5%.
Чувствительность определения не более 40 мкмоль/л.
Коэффициент вариации не более 5%.
Качество набора может проверяться на отечественных или
зарубежных контрольных сыворотках с аттестованным по
данному методу показателем.
Нормальные величины мочевой кислоты в сыворотке
(плазме) крови: у мужчин 202 - 416 мкмоль/л; у женщин
142 - 339 мкмоль/л; в моче 1,49 - 4,46 ммоль/сут.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон
нормальных величин у обследуемого контингента.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Негемолизированная сыворотка или плазма крови, моча.
Перед проведением анализа свежую мочу следует
развести физиологическим раствором в 10 раз.
Аскорбиновая кислота до концентрации 570 мкмоль/л и
билирубин до концентрации 250 мкмоль/л не влияют на
правильность определений мочевой кислоты.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РЕАГЕНТА
Содержимое одного флакона с Реагентом 2 растворить в
содержимом одного флакона с Реагентом 1 при аккуратном
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Компоненты реакционной среды внести в пробирки в
соответствии с таблицей:
КОМПОНЕНТЫ
РЕАКЦИОННОЙ СРЕДЫ
ОПЫТНАЯ
ПРОБА
КАЛИБРОВОЧН.
ПРОБА
КОНТРОЛЬНАЯ
(ХОЛОСТАЯ)
ПРОБА
Рабочий реагент, мл
2.0
2.0
2.0
Исследуемый образец, мкл
50
-
-
Калибратор, мкл
-
50
-
Вода дистилл., мкл
-
-
50
Объемы исследуемого образца и рабочего реагента можно
изменить, соблюдая соотношение 1:40.
Содержимое пробирок тщательно перемешать и инкубировать 10 минут в термостате при +37 °С.
Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной
проб против контрольной (холостой) пробы при длине волны
500 (490-540) нм в кювете с длиной оптического пути 1,0 см.
Окраска растворов стабильна в течении 15 мин после
окончания инкубации, при хранении проб в защищённом от
света месте при комнатной температуре (+18-25 °С).
РАСЧЕТ
Расчет концентрации (С) мочевой кислоты в пробе:
1. Сыворотка или плазма крови:
Е пробы
С = ____________ x 357 мкмоль/л
Е калибр.
где: Е пробы – оптическая плотность опытной пробы, ед.
опт. плотн.; Е калибр. – оптическая плотность калибратора,
ед. опт. плотн.; 357 – концентрация мочевой кислоты в
калибраторе, мкмоль/л.
2. Моча:
Е пробы
С = ______________ x 0.357 х 10 х V ммоль/сутки
Е калибр.
где: Е пробы – оптическая плотность опытной пробы, ед.
опт. плотн.; Е калибр. – оптическая плотность калибратора,
ед. опт. плотн.; 0,357 – концентрация мочевой кислоты в
калибраторе, ммоль/л; V – объем суточной мочи, л;
10 – коэффициент разведения исследуемого образца.
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Набор должен храниться в упаковке предприятияизготовителя в защищенном от света месте при +2-8 °С в
течение всего срока годности. Допускается хранение набора при температуре до +25 °С не более 10 дней.
Калибратор после вскрытия флакона стабилен в течение 2
месяцев. Срок годности набора – 6 месяцев.
Download