Антигены тканей миокарда РНИФ Heart muscle (monkey) IIFT

Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
1
_________________________________________________________________________________________________
Регистрационное удостоверение ФС №2006/1519 от 03.10.2006 г.
Антигены тканей миокарда РНИФ
Heart muscle (monkey) IIFT
Номера по каталогу:
FA 1461-0405
FA 1461-1003
FA 1461-1005
FA 1461-1010
FA 1461-2005
FA 1461-2010
Набор на 20 определений (4 предметных стекла × 5 зон)
Набор на 30 определений (10 предметных стекол × 3 зоны)
Набор на 50 определений (10 предметных стекол × 5 зон)
Набор на 100 определений (10 предметных стекол × 10 зон)
Набор на 100 определений (20 предметных стекол × 5 зон)
Набор на 200 определений (20 предметных стекол × 10 зон)
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для качественного или полуколичественного in vitro определения человеческих
антител в сыворотке или плазме крови человека.
ПРИНЦИП МЕТОДА
В наборы Aнтигены тканей миокарда IIFT включены предметные стекла с биочиповыми реакционными
зонами, поверхность которых покрыта замороженными срезами миокарда обезьяны. Стекла инкубируют на
первой стадии реакции с образцами разведенной сыворотки или плазмы крови пациента. Имеющиеся в
положительных образцах специфические антитела классов IgA, IgG и IgM связываются с
соответствующими антигенами. На второй стадии связавшиеся антитела выявляют флуоресцентным
окрашиванием, которое происходит в результате инкубации стекол с меченными флуоресцеином
антителами к соответствующим иммуноглобулинам человека. Характер свечения оценивается с помощью
флуоресцентного микроскопа.
МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ
Необходимые реагенты и материалы, входящие в состав набора на 50 определений (IgG):
Компоненты набора
Формат
Символ
1. Предметные стекла, каждое с 5 биочипами, покрытыми замороженными
10 шт.
SLIDE
срезами миокарда приматов
2. Конъюгат
меченные флуоресцеином антитела к IgG человека (козы); готовый к
1 × 1,5 мл CONJUGATE
использованию
3. Положительный контроль
содержащий аутоантитела к поперечной мышце (HMA), человека;
POS CONTROL
1 × 0,1 мл
готовый к использованию
4. Отрицательный контроль
1 × 0,1 мл NEG CONTROL
не содержит аутоантител, человека; готовый к использованию
5. Соли для ФСБ (фосфатно-солевого буферного раствора, PBS), рН 7,2
2 шт.
PBS
6. Твин 20
TWEEN 20
2 × 2,0 мл
7. Среда для заливки; готовая к использованию
GLYCEROL
1 × 3,0 мл
8. Покровные стекла (62 мм × 23 мм)
12 шт.
COVERGLASS
1 шт.
9. Инструкция к набору
Серия
Температура хранения
Для in vitro диагностики
Невскрытый набор использовать до
Отдельные предметные стекла поставляются вместе с покровными стеклами (например, номер по каталогу
FB 1461-1005). Также можно заказать дополнительно положительный контроль (например, номер по
каталогу CА 1461-0101(HMA)) и отрицательный контроль (например, номер по каталогу CА 1000-0101 Z).
Для проведения теста необходимы шаблоны-подложки TRAY, которые не включены в состав набора. Их
можно заказать у фирмы EUROIMMUN:
номер по кат ZZ 9999-0110 для предметных стекол, включающих до 10 зон (5 х 5),
ХРАНЕНИЕ И СТАБИЛЬНОСТЬ НАБОРА
Предметные стекла должны храниться при температуре от минус 40 °С (не ниже) до 8 °С, остальные
реагенты набора - при температуре 2-8 °С. При соблюдении условий хранения стабильность набора
гарантируется в течение 18 месяцев со дня изготовления.
УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ
Обращайтесь с исследуемыми образцами, контролями и предметными стеклами как с потенциально
инфицированными материалами. Все реагенты и материалы, являющиеся отходами, должны
утилизироваться в соответствии с действующими нормативами.
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]
Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
2
_________________________________________________________________________________________________
ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ (реакционные зоны 5 × 5 мм)
Техника TITERPLANE разработана фирмой EUROIMMUN с целью стандартизации иммунологических
анализов: образцы или меченые антитела вначале наносят на реакционные зоны специального шаблонаподложки. Затем в углубления шаблона-подложки помещают предметные стекла с биочипами, так что
сразу все биочипы приходят в соприкосновение с каплями жидкости, и реакция со всеми биочипами
начинается одновременно. Расположение и высота капель точно заданы геометрией всей системы. Все
жидкости заключены в огороженное пространство, поэтому не нужна обычно используемая в таких случаях
”влажная камера”. Таким образом, можно инкубировать в идентичных условиях любое количество
образцов, размещая их один за другим.
Подготовка
Подготовка реагентов и образцов сыворотки или плазмы крови описаны на стр. 3 и 4
данной инструкции.
Нанесение
Нанесите по 25 мкл разведенного образца сыворотки или плазмы крови в каждую
реакционную зону шаблона-подложки. Избегайте образования пузырьков воздуха.
Нанесите до начала инкубации все образцы, исследуемые в данной постановке
анализа (до 200 капель). Для удобства используйте полистироловый шаблон для
нанесения.
Начните все реакции одновременно, поместив предметные стекла с биочипами в
соответствующие углубления шаблона-подложки. Следите, чтобы каждый образец
контактировал с биочипом на предметном стекле и чтобы отдельные образцы не
соприкасались друг с другом. Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной
температуре (от +18 °С до +25 °С).
Ополосните предметные стекла в течение 1 секунды под струей буфера ФСБ-Т
(используйте стакан или колбу), поместите их сразу в промывочную кювету,
содержащую ФСБ-Т, и промывайте в течение как минимум 5 минут. По возможности
используйте встряхивание на шейкере орбитального типа.
Нанесите по 20 мкл меченных флуоресцеином антител к глобулинам человека в
каждую реакционную зону чистого шаблона-подложки. Все капли реагента должны
быть нанесены до начала 2-й инкубации. Для нанесения используйте пипеткустеппер. Перед использованием меченые антитела необходимо перемешать с
помощью пипетки. Для экономии времени можно нанести конъюгат на отдельный
шаблон-подложку пока идет инкубация с разведенными образцами сыворотки или
плазмы крови.
Извлеките одно предметное стекло с биочипом из кюветы с буфером ФСБ-Т, в
течение пяти секунд бумажной салфеткой протрите только заднюю сторону и края по
длине стекла и сразу поместите предметное стекло с биочипами в углубления
шаблона-подложки. Не высушивайте области между реакционными зонами. Следите,
чтобы каждая капля конъюгата контактировала с биочипом на предметном стекле.
Затем ту же процедуру проделайте со следующими предметными стеклами. С этого
момента предохраняйте стекла от воздействия прямых солнечных лучей.
Инкубируйте в течение 30 минут при комнатной температуре (от +18 °С до +25 °С).
Ополосните предметные стекла в течение 1 секунды под струей буфера ФСБ-Т
(используйте стакан или колбу), поместите их сразу в промывочную кювету,
содержащую ФСБ-Т, и промывайте в течение как минимум 5 минут. По возможности
используйте встряхивание на шейкере орбитального типа. Для контрастного
окрашивания на каждые 150 мл фосфатного буфера можно добавить 10 капель
красителя Эванса голубого.
Нанесите среду для заливки на покровное стекло – капли объемом 10 мкл на
каждую реакционную зону. Используйте полистироловый шаблон для заливки.
Извлеките одно предметное стекло с биочипами из кюветы с буфером ФСБ-Т,
бумажной салфеткой протрите заднюю сторону, все четыре края стекла, а также всю
поверхность вокруг, но не между реакционными зонами. Положите предметное стекло
биочипами вниз на подготовленное покровное стекло. Сразу проверьте, чтобы
покровное стекло попало в прорези предметного стекла. При необходимости
скорректируйте положение стекол.
Флуоресценцию оценивают с помощью микроскопа.
Объектив: для срезов органов 20х, для инфицированных клеток 20х, для клеточных
субстратов 40х.
Фильтр возбуждения: 488 нм, цветоделительное устройство: 510 нм, блокирующий
фильтр: 520 нм.
Источник света: ртутная лампа, 100 ватт, EUROIMMUN LED, EUROStar Bluelight.
Инкубация
образцов
(1-я стадия)
Промывка
Нанесение
Инкубация
конъюгата
(2-я стадия)
Промывка
Заливка
Учет результатов
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]
Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
3
_________________________________________________________________________________________________
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ РЕАГЕНТОВ
Примечание. Реагенты каждой серии подобраны друг к другу, поэтому не следует смешивать в одном
анализе реагенты разных серий. После первого использования все реагенты стабильны до истечения
указанного срока годности при хранении при температуре 2-8°С и предохранении от микробной
контаминации, если ниже не оговорены особые условия хранения.
- Предметные стекла с биочипами
Предметные стекла готовы к использованию. Снимите предохраняющую упаковку со стекла только
после того, как стекло прогреется до комнатной температуры во избежание конденсации влаги и
повреждения субстрата. Промаркируйте стекла фломастером с мягким стержнем. Не дотрагивайтесь до
биочипов. После вскрытия упаковки предметные стекла с биочипами должны быть проинкубированы в
течение 15 минут. Если предохраняющая упаковка повреждена, стекло нельзя использовать для
диагностики.
- Меченные флуоресцеином вторичные антитела (ФИТЦ)
Меченые антитела готовы к использованию. Перед использованием меченые антитела необходимо
тщательно перемешать с помощью пипетки. Конъюгат чувствителен к свету. Предохранять от
воздействия солнечных лучей.
- Положительный и отрицательный контроли
Контроли готовы к использованию. Перед использованием контроли необходимо тщательно перемешать
с помощью пипетки.
- ФСБ-Т
1 упаковку «Соли для ФСБ» следует растворить в 1 л дистиллированной воды (оптимальной является
вода для вливаний, вода для инъекций) и смешать с 2 мл твина 20. Приготовленный ФСБ-Т стабилен в
течение 1 недели при хранении при температуре 2-8 °С и соблюдении правил использования. Если
раствор ФСБ-Т помутнел или в нем появился пророст, использовать его нельзя.
- Среда для заливки
Готова к использованию.
- Шаблоны-подложки
Поверхность реакционных зон шаблона-подложки должна быть гидрофильна, а поверхность вокруг этих
зон - гидрофобна. Если необходимо, протрите их обезжиривающим реагентом (например, Extran MA 01,
“Merck”) и промойте большим количеством воды. Для дезинфицирования погрузите шаблон-подложку на
1 час в дезинфицирующий раствор (например, в 3% раствор Sekusept Extra, “Henkel”). После
дезинфицирования промойте шаблон-подложку большим количеством воды и протрите ее
фильтровальной бумагой.
Внимание! Биочипы, покрытые антигенным субстратом, обработаны дезинфицирующим фиксирующим
реагентом. Контроли были проверены на отсутствие антигена гепатита В, а также антител к вирусу гепатита
С, ВИЧ-1 и ВИЧ-2 с помощью методов иммуноферментного анализа и непрямой иммунофлуоресценции.
Однако, все компоненты тест-системы следует считать потенциально инфекционно опасными
материалами и обращаться с ними, соблюдая необходимые меры предосторожности. Часть
реагентов содержит токсичный азид натрия. Избегайте контакта реагентов с кожей.
ПОДГОТОВКА И СТАБИЛЬНОСТЬ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ
Исследуемые образцы
Сыворотка или плазма (ЭДТА, гепарин или цитрат) крови человека.
Стабильность
Исследуемые образцы сыворотки или плазмы крови могут храниться до 14 дней при температуре 2-8 °С.
Разведенные образцы следует исследовать в течение одного рабочего дня.
Рекомендуемые разведения образцов для качественного анализа
Образцы сыворотки или плазмы крови пациентов разводят 1:100 буфером ФСБ-Т. Например, разведите
10,1 мкл исследуемого образца в 1000 мкл ФСБ-Т и тщательно перемешайте (например, на вортексе в
течение 4 секунд).
Рекомендуемые разведения образцов для полуколичественного анализа
Образцы сыворотки или плазмы крови пациентов разводят буфером ФСБ-Т. При разведении каждого из
образцов в пробирку вносят 100 мкл ФСБ-Т и 11,1 мкл предыдущего более концентрированного
разведения, затем смесь перемешивают (например, на вортексе в течение 2 секунд). Для анализа фирма
EUROIMMUN рекомендует использовать образцы, начиная с разведения 1:100.
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]
Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
4
_________________________________________________________________________________________________
Разведение
Схема разведения
1:10
100 мкл ФСБ-Т (в качестве альтернативы: буфера
для образцов*) + 11,1 мкл неразведенного образца
1:100
100 мкл ФСБ-Т (в качестве альтернативы: буфера
для образцов*) + 11,1 мкл образца, разведенного
1:10
1:1000
100 мкл ФСБ-Т(в качестве альтернативы: буфера
для образцов*) + 11,1 мкл образца, разведенного
1:100
11.1 мкл
11.1 мкл
После каждых двух
шагов разведения
следует
сменить
наконечники
на
новые
для
предотвращения
переноса
...
...
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ
Образец положительной реакции флуоресценции
Для прицельного определения антител к миокарду (поперечной мышце) используются замороженные срезы
миокарда приматов. Цитоплазма клеток миокарда показывает типичную исчерченность. Если в сыворотке
присутствуют редкие антитела к вставочным дискам, они проявляются в виде равномерного
флуоресцентного свечения этих структур.
В основном такая же картина видна на положительной контрольной сыворотке. Если окрашены ядра клеток
или цитоплазма всех клеток, в образце присутствуют антинуклеарные антитела и антитела к митохондриям.
Если положительный контроль не дает четкого флуоресцентного свечения или наблюдается явное
флуоресцентное свечение отрицательного контроля, результаты анализа не учитывают, тест следует
повторить.
На сайте фирмы EUROIMMUN (www.euroimmun.com) можно найти множество примеров картин
флуоресцентного свечения.
Качественный анализ
Реактивность к миокарду
Оценка
Отсутствие
реакции
при Отрицательная. В сыворотке пациента антитела к миокарду
разведении 1:100
отсутствуют.
Положительная
реакция
при Положительная. Указывает на миастению или другую миопатию.
разведении 1:100
Полуколичественный анализ
Титр определяют как последнее разведение образца, при котором специфическая флуоресценция еще
вполне отчетлива. При этом следует проводить сравнение с реакцией, полученной при эквивалентном
разведении отрицательной сыворотки.
Титр антител можно оценить по результатам флуоресценции, полученным при различных разведениях
образца, используя следующую таблицу.
1:10
слабая
умеренная
сильная
сильная
сильная
сильная
сильная
.
.
.
Флуоресценция при разведении образца
1:100
1:1000
отсутствует
отсутствует
отсутствует
отсутствует
слабая
отсутствует
умеренная
отсутствует
сильная
слабая
сильная
умеренная
сильная
сильная
.
.
.
.
.
.
1:10 000
отсутствует
отсутствует
отсутствует
отсутствует
отсутствует
отсутствует
слабая
.
.
.
Титр антител
1:10
1:32
1:100
1:320
1:1000
1:3200
1:10 000
.
.
.
При постановке диагноза наряду с серологическими результатами следует всегда учитывать и клинические
симптомы.
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]
Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
5
_________________________________________________________________________________________________
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Антиген
При миастении стандартным серологическим тестом является определение антител к ацетилхолиновым
рецепторам, которые могут быть найдены у 90% пациентов. Есть возможность показать наличие антител к
поперечным мышцам с использованием непрямой иммунофлуоресценции. В основном, эти антитела
реагируют и со скелетными мышцами и с миокардом. Определение этих антител обеспечивает
дополнительную диагностику когда есть подозрение на миастению или когда есть соответствующие
симптомы , особенно если результаты теста на ацетилхолиновые рецепторы отрицательны.
Стабильность
При соблюдении условий хранения стабильность набора гарантируется в течение 18 месяцев со дня
изготовления.
Диапазон определения
Начальным для данной тест-системы является разведение 1:100. Далее образцы можно разводить с шагом
10, так что получается серия разведений 1:1000, 1:10000 и т.д. Верхнего предела определения нет.
Воспроизводимость в пределах одной постановки
Воспроизводимость в пределах одной постановки оценивали по 10 определениям двух
охарактеризованных образцов, инкубируемых параллельно. При полуколичественном анализе отклонения
интенсивности флуоресценции отсутствовали. Интенсивность специфической флуоресценции в числовом
выражении фирмой EUROIMMUN называется уровнем интенсивности флуоресценции. Эта величина может
измеряться числами от «0» (отсутствие специфической флуоресценции) до «5» (чрезвычайно высокая
степень специфической флуоресценции).
Воспроизводимость между постановками
Воспроизводимость между постановками оценивали более чем по пяти двойным определениям каждой их
двух охарактеризованных образцов, инкубируемых в параллели в два разных дня. При полуколичественном
анализе отклонения интенсивности флуоресценции отсутствовали.
Воспроизводимость между сериями
Воспроизводимость между сериями оценивали более чем по различным сериям с помощью
охарактеризованного образца. При полуколичественном анализе отклонения составляли не более + 1
уровня интенсивности флуоресценции.
Перекрестная реактивность
Не известна.
Влияние гемоглобина, триглицеридов и билирубина
Не отмечено искажения результатов при исследовании данным набором гемолизированных, липемических
или желтушных образцов сывороток.
Референтный диапазон
Титр 1: < 100
Чувствительность
Чувствительность тест-системы составляет 100 %. Референс: национальные референтные центры (n=5;
происхождение: Германия).
Специфичность
Специфичность тест-системы составляет 100 %. Референс: национальные референтные центры (n=5;
происхождение: Германия).
КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Антитела к поперечной мускулатуре могут указывать на миастению. Однако, только высокий титр имеет
диагностическое значение.
Миастения – генерализированное аутоиммунное заболевание, которое в основном вызывается
расстройством в передаче нервно-мышечных импульсов в результате обратимого блокирования
ацетилхолиновых рецепторов на концевых пластинках двигательных нервов. Антитела к ацетилхолиновым
рецепторам могут быть обнаружены у 90% пациентов.
Типичным симптомом этого заболевания является повышенная усталость поперечных мышц, особенно
глаз, лица, шеи и конечностей. Осложнения могут вырасти до глотательного и дыхательного паралича.
В большинстве случаев заболевание поражает женщин в возрасте 20-40 лет. Мужчины часто не
подвержены заболеванию до возраста 50 лет и выше. Аномалии в вилочковой железе выявляются у 75%
всех пациентов (гиперплазия тимуса, тимома).
У пациентов с миастенией была найдена связь с другими аутоиммунными заболеваниями. В половине этих
случаев были найдены более одного вида аутоантител (например антинуклеарные антитела).
Антитела к поперечной мускулатуре могут быть найдены при исследовании пациентов с различными
миопатиями. Кроме того, эти антитела могут быть найдены у пациентов с болезнью Шагаса в хронической
стадии.
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]
Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
6
_________________________________________________________________________________________________
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Список литературы приведен в оригинале инструкции на английском языке.
Внимание! Перевод сделан с английского оригинала инструкции. Перед постановкой исследования
сверьте номер и дату издания вложенного в набор оригинала с указанными в настоящем переводе (см.
внизу справа). При несовпадении номеров или дат обратитесь в «Аналитику» за новым переводом, либо
руководствуйтесь оригиналом инструкции.
Heart muscle (monkey)_FA1461.doc
9/1/2009 3:57:00 PM
Оригинал: FA_1461_A_UK_C03.doc
Version:11.09.06
Техника TITERPLANE
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]
Heart muscle (monkey) IIFT, EUROIMMUN
7
_________________________________________________________________________________________________
Слайды для непрямой иммунофлуоресценции могут быть изготовлены как с одним субстратом, так
и с мозаикой Биочипов (до 45 различных субстратов в соответствии с Вашими требованиями).
Щитовидная железа, околощитовидная железа, поджелудочная железа, надпочечная железа, яичник,
плацента, яички, сперматозоиды, гипофиз, гипоталамус*, головной мозг, мозжечок, варолиев мост*, черная
субстанция*, периферические нервы, спинной мозг, глаз*, гранулоциты (фиксированные этанолом или
формальдегидом), лимфоциты*, тромбоциты, почка, легкое*, печень, слизистая рта, тело желудка, полость
желудка, тонкая кишка, прямая кишка, пупочный канатик, молочная железа*, слезная железа*, околоушная
железа, простата*, семенные пузырьки, скелетная мускулатура, миокард, тимус*, липоциты*, хрящ*,
эпидермис, пищевод, язык, губы*, меланоциты*, клетки НЕр-2, клетки НЕр-20-10, почка крысы, почка мыши,
желудок крысы, желудок мыши, печень крысы, печень мыши, пищевод крысы, мочевой пузырь крысы,
Crithidia luciliae и другие.
Аденовирусы, Afipia felis*, Bartonella clarridgeiae, Bartonella henselae, Bartonella quintana, Bordetella
parapertussis, Bordetella pertussis, Borrelia afzelii, Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia garinii, Candida
albicans, Candida glabrata*, Candida krusei*, Candida tropicalis*, Candida parapsilosis*, Campylobacter coli*,
Campylobacter jejuni, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia trachomatis, Chlamydia psitacci*, ЦМВ, вирусы
Коксаки (А7, А9, А16, А24, от В1 до В6), EBV-CA, EBNA, EBV-EA, Echinococcus granulosus, эховирусы, вирус
клещевого энцефалита, Haemophilus influenzae*, Helicobacter pylori, ВИЧ-1*, ВИЧ-2*, HHV-6, ВПГ-1, ВПГ-2,
HUVEC, вирус гриппа А (штамм Шэнгдонг, Сингапур и Пекин), вирус гриппа В (штамм Панама), Klebsiella
pneumoniae*, Legionella bozemanii*, Legionella dumoffii*, Legionella gormanii*, Legionella jordanis*, Legionella
longbeachae*, Legionella micdadei*, Legionella pneumophila от 1 до 14, Leishmania donovani, Listeria
monocytogenes (1/2a и 4b)*, корь, паротит, Mycoplasma hominis, Mycoplasma pneumoniae, парагрипп типов 14, вирус краснухи, респираторно-синцитальный вирус, вирус тяжелого острого респираторного синдрома,
Saccharomyces cerevisiae, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Treponema phagedaenis*, Ureaplasma
urealiticum, вирус опоясывающего герпеса, Yersinia enterocolitica (O:3, О:4, О:6 и О:9)*.
EUROPLUS®: почка крысы плюс АМА М2, желудок примата (париетальные клетки) плюс внутренний фактор,
кишечный тракт примата (эндомизий) плюс глиадин.
* На данный момент не могут быть использованы в Евросоюзе
___________________________________________________________________________________________
© Перевод на русский язык ЗАО «АНАЛИТИКА», Москва, 2009
тел.: 737-0363, факс: 737-0365, e-mail: [email protected]