Модели интраокулярного воспаления
реклама
Иммунопатология, аллергология, инфектология Immunopathology, allergology, infectology 2011,№2:1419` ИММУНОПАТОЛОГИЯ УДК 616:612.017.1; 617.7 Модели интраокулярного воспаления О.В. Калюжин **, З.Х. Дикинов *, И.В. Евсегнеева ** Учреждение РАМН НИИ морфологии человека РАМН, Москва, Россия; *ГОУ ВПО Кабардино'Балкарский государственный университет им. Х.М.Бербекова, Нальчик, Россия; **ГОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М.Сеченова Минздравсоцразвития России, Москва, Россия Models of intraocular inflammation O.V. Kalyuzhin, Z.H. Dikinov *, I.V. Evsegneeva ** Research Institute of Human Morphology, Russian Academy of Medical Sciences, Moscow, Russia; *Kh.M.Berbekov Kabardian'Balkar State University, Nalchik, Russia; **I.M.Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow, Russia Аннотация Summary Раскрытие ключевых клеточных и молекулярных меха низмов интраокулярного воспаления в значительной сте пени связано с исследованиями in vivo. В обзоре представ лены основные экспериментальные модели увеоретини та и аутоиммунной ретинопатии. Проанализированы пре имущества и недостатки этих моделей, указаны рацио нальные области их использования. Discovery of key cellular and molecular mechanisms underlying intraocular inflammation is strongly associated with studies in vivo. This article reviews the main experimental models of uveoretinitis and autoimmune retinopathy. The advantages and shortcomings of these models have been analyzed. The rational areas of their application have been indicated. Ключевые слова Key words Экспериментальный увеоретинит, интраокулярное воспа ление Experimental uveoretinitis, intraocular inflammation Введение Офтальмологические заболевания, свя занные с развитием интраокулярного вос паления, являются одной из основной при чин потери зрения [1, 2]. Глаз входит в чис ло иммунологически привилегированных зон организма, при этом привилегирован ность распространяется в первую очередь на переднюю камеру глаза, субретинальное пространство и стекловидное тело [3]. Су ществуют пассивные (анатомические) и ак тивные механизмы поддержания толерант ности к аутоантигенам глаза. Дефекты ге матоофтальмического барьера и/или срыв иммунной толерантности к антигенам гла за, главным образом сетчатки, ведут к инт раокулярному воспалению, в котором при нимают участие компоненты как адаптив ного, так и врожденного иммунитета. Выяв ление эффекторных и регуляторных механиз мов воспаления «забарьерных» тканей глаза стало возможным во многом благодаря экс периментальным исследованиям in vivo и со здало предпосылки для разработки методов биотерапии увеоретинитов [4]. Цель настоящего обзора – проанализиро вать основные способы моделирования инт раокулярного воспаления in vivo, выявить их преимущества, недостатки и рациональные области использования. 14 Immunopathology, Allergology, Infectology 2011 N°2 Иммунопатология: Модели интраокулярного воспаления Общие подходы к моделированию увеоретинита Разработчики экспериментальных моделей увеоретинита преследуют цель максимально точно воспроизвести либо определенную кли ническую форму заболевания с ее важнейши ми патогенетическими чертами, либо клю чевое и/или наиболее общее звено развития интраокулярного воспаления при гетеро генных заболеваниях. Одним из современ ных методологических подходов для выяс нения роли отдельных молекул в патогене зе увеоретинита является воспроизводство интраокулярного воспаления на нокаут ных по генам этих молекул животных. Раз нообразие клинических вариантов увеорети нита, механизмов их патогенеза и методоло гических подходов к исследованиям предоп ределили множественность предлагаемых эк спериментальных моделей. В зависимости от интраокулярного или системного введения триггерных агентов все модели увеоретинитов in vivo можно разделить на локально и системноиндуци рованные. В качестве индукторов воспале ния обычно используются ретинальные ан тигены в комбинации с бактериальными адъювантами [5] или патогенассоцииро ванные молекулярные паттерны, такие как липополисахарид (ЛПС) [6], пептидогли кан и мурамилпептиды [7]. Выделение как самостоятельной группы моделей аутоим мунного увеоретинита весьма условно, так как иммунная аутоагрессия в той или иной степени имеет место при любом варианте индукции интраокулярного воспаления, ве дущего к нарушению гематоофтальмичес кого барьера. Тем не менее, термин «экспе риментальный аутоиммунный увеит (или увеоретинит)» широко используется в ли тературе для обозначения аутоантигенин дуцированных моделей [8]. К последним близки модели, вызываемые введением аутоантигенспецифических Тлимфоци тов и дендритных клеток, нагруженных ре тинальными антигенами. Отдельную груп пу составляют модели спонтанно развиваю щегося увеоретинита у генетически моди фицированных животных. Промежуточное положение между индуцированными и спонтанными моделями занимает экспери ментальный увеоретинит, индуцированный введением сингенных гибридом, продуци рующих антитела к антигенам сетчатки. Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2011 N°2 Модели локальноиндуцированного увеоретинита Среди моделей с интраокулярным введением триггерных агентов, пожалуй, наиболее хорошо охарактеризован экспериментальный увеит, вызванный мурамилпептидами (МП) – мини мальными биологически активными структур ными субъединицами пептидогликана клеточ ной стенки бактерий [9]. В качестве локальных индукторов увеита чаще всего используют N ацетилмурамилLаланилDизоглутамин (му рамилдипептид, МДП), реже Nацетилмура милLаланилDизоглутамилLлизин (мура милтрипептид, МТП) [7]. Через несколько ча сов после интравитреальной инъекции 100 мкг МДП у мышей наблюдают инфильтрацию лей коцитами, преимущественно гранулоцитами, радужки и глазной жидкости передней камеры глаза, при этом задние отделы глаза остаются практически интактными. Установлено, что ключевым сенсором МПиндуцированного уве ита является цитозольный рецептор NOD2, так как Nod2нокаутные мыши не отвечают ин траокулярным воспалением на локальное введе ние МП. Важнейшим иммунным медиатором воспаления в этой модели является интерфе ронg (IFNg). Генетическая недостаточность этого цитокина существенно снижает выра женность двух важнейших проявлений клеточ ного воспалительного ответа на интравитреаль ное введение МП – роллинга и адгезии лейкоци тов [10]. Модель МПиндуцированного увеита вызывает интерес в свете установленной взаи мосвязи мутаций NOD2 и развитием синдро ма Блау – аутосомнодоминантного заболева ния, характеризующегося мультиорганным гранулематозным воспалением, преимуще ственно локализованным в глазах, коже и суста вах [11]. Исследования интраокулярных функ ций NOD2 в условиях вышеописанной модели может пролить свет на механизмы развития поражения тканей глаза не только при синдро ме Блау, но и при более распространённых фор мах увеоретинита. Увеоретинит также развивается в ответ на интравитреальное введение другого патогенас социированного молекулярного паттерна пептидогликана, в частности выделенного из клеточной стенки Staphylococcus aureus [7]. Ос новным сенсором пептидогликана в условиях этой модели, также как и в других ситуациях [12], является образраспознающий рецептор TLR4, через который запускается MyD88зави симый путь активации NFkB [13]. Интересно, 15 О.В. Калюжин, З.Х. Дикинов, И.В. Евсегнеева что в этом случае NOD2рецепция МП, возни кающих при биодеградации пептидогликана, играет двойственную роль при развитии интра окулярного воспаления. Так, Rosenzweig H.L. и соавторы показали, что у Nod2нокаутных мы шей в сравнении с нормальными животными практически не изменена пептидогликансти мулированная адгезия лейкоцитов и лишь не значительно снижен их роллинг [7]. В другой работе этой же научной группы продемонстри ровано, что Nod2нокаутные мыши даже более чувствительны к интравитреальному введению пептидогликана, чем животные дикого типа, что связано с повышенной продукцией IL 12p40, IL17 and IL23 [13]. Вероятно, при увео ретините NOD2опосредованные сигналы в оп ределенных условиях играют не только патоге нетическую, но и защитную роль. Сходная си туация описана при болезни Крона и воспроиз водящих ее экспериментальных моделях [14], когда мутации Nod2 срывают контроль над TLRопосредованным воспалением. Вышеуказанные модели локальноиндуци рованного увеоретинита могут оказаться весь ма полезными для выяснения роли бактериаль ных молекулярных паттернов и их рецепторов как в развитии интраокулярного воспаления, так и в поддержании иммунной привилегиро ванности глаза. Модели увеита, связанные с системной стимуляцией врожденного иммунитета Некоторые патогенассоциированные моле кулярные паттерны индуцируют воспаление со судистого тракта не только при локальных инъекциях. Так, системно введенный компо нент клеточной стенки грамотрицательных бактерий – липополисахарид (ЛПС) вызывает быструю и стойкую воспалительную реакцию в передних отделах сосудистой оболочки глаза [15], однако точные механизмы, за счет кото рых эндотоксин при подкожном или внутри брюшинном введении индуцирует интраоку лярное воспаление, до сих пор не раскрыты. Несмотря на то, что некоторые авторы, опи раясь на косвенные свидетельства участия ЛПС в патогенезе воспалительных заболеваний глаза, выдвигают эндотоксиновую теорию па тогенеза переднего увеита и эндофтальмита у человека [16], до сих пор точно не установлено, имеется ли человеческий эквивалент локально го воспалительного ответа в передней камере глаза на системную циркуляцию ЛПС. Также нет единого мнения, какую именно форму уве 16 ита у человека воспроизводит эта модель. Тем не менее, индуцированный эндотоксином эк спериментальный увеит широко используется для изучения воспалительного процесса в глазе, в частности для исследования патогене тической роли компонентов врожденного иммунитета. Несомненными преимущества ми данной модели является быстрота и отно сительная простота индукции, а также хоро шая воспроизводимость на инбредных и бес породных мышах и крысах. Модели системноиндуцированного аутоиммунного увеита Считается, что модели аутоиммунного увеита гораздо ближе к неинфекционным воспалительным заболеваниям сосудистой оболочки глаза человека как по клиническим проявлениям, так и по раскрытым механиз мам развития [8]. Типичным методом индукции эксперимен тального аутоиммунного увеита является им мунизация чувствительных животных, обычно мышей или крыс, одним из ретинальных анти генов, чаще всего аррестином (Sантигеном) или межфоторецепторным ретинолсвязываю щим белком (IRBP) совместно с бактериальны ми адъювантами, такими как токсин Bordetella pertussis или полный адъювант Фрейнда, содер жащий убитые нагреванием клетки Mycobacterium bovis. Эти адъюванты, стимули руя образраспознающие рецепторы, активиру ют клетки врожденного иммунитета (моноци ты/макрофаги, дендритные клетки, NK и NKT клетки, gdTлимфоциты) и тем самым в при сутствии аутоантигенов направляют адаптивный иммунный ответ по аутореактивному пути. В дей ствительности, стимуляция врожденного иммун ного ответа сама по себе вызывает воспаление со судистой оболочки глаза на моделях in vivo (что происходит, например, при переднем увеите, инду цированном эндотоксином [17]) и, возможно, у человека. Тем не менее, именно аррестин и IRBP индуцируют аутоиммунное воспаление с преиму щественно лимфоидной инфильтрацией, локали зованное в задних отделах сосудистой оболочки глаза. Ключевыми медиаторами при этом явля ются IFNg и интерлейкин17 (IL17), что может быть использовано исследователями для разра ботки биотерапевтических подходов, основан ных на блокировке функции этих провоспали тельных цитокинов. В качестве модели для доклинических иссле дований иногда используют модель индуциро Immunopathology, Allergology, Infectology 2011 N°2 Иммунопатология: Модели интраокулярного воспаления ванного аррестином воспаления увеального тракта на обезьянах. При этом клинические и гистологические проявления увеита наиболее адекватно воспроизводят таковые у человека [18]. В отличие от мышиных и крысиных моде лей, увеит у приматов характеризуется, помимо привлечения в очаг воспаления Тклеток, при током Влимфоцитов и субретинальным фиб розом. Эти особенности сближают указанную модель с синдромом ФогтаКоянагиХарады, а также с субретинальным фиброзом и увеаль ным синдромом у человека. Достаточно хорошо охарактеризована мо дель переднего аутоиммунного увеита, в кото рой как триггер интраокулярного воспаления применяют увеальный меланин [19]. Инъекция бычьего увеального меланина некоторым инб редным и беспородным крысам вызывает вос паление главным образом в передней камере глаза и инфильтрацию лимфоцитами радужки и цилиарного тела, что в значительной степени имитирует события, разворачивающиеся при остром переднем увеите (иридоциклите) у чело века [20]. В этой связи, многие исследователь ские группы используют меланининдуцирован ный аутоиммунный увеит для изучения различ ных аспектов патогенеза острого переднего увеального воспаления, в том числе роли разных субпопуляций лейкоцитов, молекул адгезии, цитокинов, хемокинов, оксида азота, системы комплемента и апоптоза. Отдельно следует выделить «гуманизирован ную» модель индуцированного аутоиммунного увеита, которая воспроизводится у мышей, трансфецированных одним из аллелей генов HLA II класса, включая HLADR3, HLADR4, HLADQ6 и HLADR8. Такие трансгенные жи вотные в отличие от мышей дикого типа отве чают интраокулярной воспалительной реакци ей на введение ретинальных антигенов, в част ности аррестина [21]. «Гуманизированный» эк периментальный аутоиммунного увеит пред ставляется адекватной моделью для выявления антигенных участков, функционально вовле ченных в патологический процесс, и разработ ки методов антигенспецифической иммуноте рапии воспалительных заболеваний сосудистой оболочки глаза у человека. Клеточноиндуцированные модели аутоиммунного увеоретинита Экспериментальный аутоиммунный увеоре тинит также вызывается адоптивным перено сом Тклеток от иммунизированного животно Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2011 N°2 го в интактный организм, генетически совме стимый с донорским [22]. Перед переносом реципиенту Тклетки культивируются ex vivo в присутствии ретинальных антигенов. Этот метод позволяет избежать использования адъювантов и представляет собой модель эф ферентной стадии заболевания. При этом воспроизводится клиническая ситуация, ког да пациент уже имеет циркулирующие Тлим фоциты, которые уже контактировали с целе вым антигеном. Недавно описана возможность использо вания в качестве индукторов аутоиммунного интраокулярного воспаления зрелых денд ритных клеток, нагруженных ретинальными антигенами [23]. В этом случае развитие экс периментального увеоретинита сопровожда ется преимущественно гранулоцитарной ин фильтрацией и связано с Th1 и Th2типами иммунного ответа в противоположность традиционным аутоантигениндуцирован ным моделям, в которых патогенетические события в тканях глаза ассоциированы с лимфоидной инфильтрацией и продуктами Th1 и Th17клеток. Модели спонтанно развивающегося аутоиммунного увеита у трансгенных животных Кроме того, существует ряд моделей спон танно возникающего аутоиммунного увеита у генетически модифицированных мышей. На пример, у мышей, трансфецированных геном HLAA29, в возрасте 812 месяцев спонтанно развивается увеит [24]. У человека указанный ген ассоциирован с развитием ретинохориои допатии Бердшота, механизмы которой полно стью не раскрыты. Моделирование спонтанно го увеита на HLAA29трансфецированных мы шах поможет пролить свет на неизученные ас пекты этиологии и патогенеза этого достаточ но редкого заболевания человека. Другой пример спонтанного эксперимен тального заболевания – это модель аутоим мунного увеита у мышей, лишенных гена ауто иммунного регулятора AIRE [25]. Дефицит Aire приводит к нарушению экспрессии собствен ных антигенов, в частности IRBP, в тимусе и, как следствие, блокирует ключевой центральный механизм толерантности – удаление аутореак тивных, в данном случае IRBPспецифических, клонов Тклеток в процессе негативной селек ции. В результате у этих мышей развивается ан тительный и Тклеточный иммунный ответ на 17 О.В. Калюжин, З.Х. Дикинов, И.В. Евсегнеева IRBP, что приводит к аутоиммунному воспале нию сосудистой оболочки глаза. Остается спорным вопрос о том, имеют ли преимущества модели спонтанного аутоиммун ного увеита над моделями индуцированного заболевания в плане более точного воспроизве дения патогенеза аутоиммунного воспаления увеального тракта и сетчатки у человека [8]. Веским аргументом исследователей, привержен ных аутоантигениндуцированным моделям, является то, что спонтанный эксперименталь ный увеит возникает в генетически измененном организме, который иммунологически суще ственно отличается от нормального. Модели с введением аутоантиген продуцирующих гибридомных клеток Рациональным и перспективным методом моделирования аутоиммунного интраоку лярного воспаления представляется введение экспериментальным животным не самих ре тинальных антигенов, а аутоантигенпроду цирующих гибридомных клеток. Такой спо соб занимает промежуточное положение между моделями индуцированного и спон танного аутоиммунного воспаления. Приме ром использования гибридомной технологии может служить недавно описанная модель ре коверинассоциированой аутоиммунной ре тинопатии [26]. Ca 2+связывающий протеин рековерин, обнаруживаемый в фоторецеп торах и ретинальных биполярных клетках, ингибирует родопсинкиназу и тем самым ре гулирует фототрансдукцию. Антирековерино вые иммуноглобулины обнаруживаются в сы воротке крови больных канцерассоцирован ной ретинопатией [27] и меланомаассоции рованной ретинопатией [28]. Кроме того, ин травитреальное введение этих антител обезь янам, крысам и кроликам вызывает повреж дение сетчатки в результате апоптоза рети нальных клеток. Внутрибрюшинное введение антирековеринпродуцирующих гибридом ных клеток мышам вызывало у последних вы раженный глиоз и инфильтрацию лейкоцита ми сетчатки без значимых проявлений увеита, что воспроизводит патоморфологическую картину при аутоиммунной ретинопатии у человека [26]. В целом модели аутоиммунного увеорети нита в сравнении с эндотоксининдуцирован ными моделями более дорогие, многие из них требуют больше времени и предварительных процедур для воспроизводства, однако они незаменимы для изучения фундаментальных аспектов аутоиммунного воспаления в тка нях глаза, а также разработки новых терапев тических подходов. Заключение Полученные в условиях экспериментального увеоретинита данные позволили существенно приблизиться к пониманию не только сути ин фекционного и аутоиммунного интраокуляр ного воспаления, но и механизмов поддержания иммунной привилегированности глаза и толе рантности к аутоантигенам в целом. Кроме того, вышеописанные экспериментальные мо дели служат незаменимым инструментом для создания новых методов лечения различных форм увеоретинита. С использованием этих моделей разрабатываются различные биотера певтические подходы, в частности, основанные на специфическом и неспецифическом подав лении активности аутоантигенспецифических клонов Tлимфоцитов, индукции толерантнос ти к антигенам сетчатки, нейтрализации TNFa и IL17, блокировке молекул адгезии, хемоки нов и хемокиновых рецепторов [8]. Некоторые экспериментальные разработки уже находятся на этапах клинических испытаний, положитель ные результаты которых являются свидетель ством адекватности использованных моделей интраокулярного воспаления in vivo. Работа выполнена в рамках гранта Совета по грантам Президента РФ (НШ% 3482.2010.7) Литература 1. Сенченко Н.Я., Щуко А.Г., Малышев В.В. Увеиты: ру ководство. М.: ГЭОТАРМедиа; 2010. 4. Rosenbaum JT. Future for biological therapy for uveitis. Сurr Opin Ophthalmol 2010; 21 (6): 473437. 2. Nussenblatt RB, Whitcup SM. Uveitis: Fundamentals and Clinical Practice. 4th ed. Mosbi; 2010. 5. Caspi RR. Animal models of autoimmune and immune mediated uveitis. Drug discovery today: disease models 2006; 3 (1): 3–9. 3. Masli S, Vega JL. Ocular Immune Privilege Sites. In: Suppression and Regulation of Immune Responses: Methods and Protocols (Ed. Cuturi MC and Anegon I). Series: Methods in Molecular Biology 2011; 677 (Part 3): 449458. 18 6. Rosenbaum JT, McDevitt HO, Guss RB, Egbert PR. Endotoxininduced uveitis in rats as a model for human disease. Nature 1980; 286 (5773): 611–613. Immunopathology, Allergology, Infectology 2011 N°2 Иммунопатология: Модели интраокулярного воспаления 7. Rosenzweig HL, Martin TM, Jann MM et al. NOD2, the gene responsible for familial granulomatous uveitis, in a mouse model of uveitis. Invest Ophthalmol Vis Sci 2008; 49 (4): 1518– 1524 8. Caspi RR. A look at autoimmunity and inflammation in the eye. J Clin Invest 2010; 120 (9): 3073–3083. 9. Калюжин О.В. Производные мурамилдипептида в эксперименте и клинике. Журн. микробиол. 1998; 1: 104108. 10. Rosenzweig HL, Kawaguchi T, Martin TM et al. Nucleotide oligomerization domain2 (NOD2)induced uveitis: dependence on IFNг. Invest Ophthalmol Vis Sci 2009; 50 (4): 17391745. 18. Fujino Y, Li Q, Chung H et al. Immunopathology of experimental autoimmune uveoretinitis in primates. Autoimmunity 1992; 13 (4): 303–309. 19. Broekhuyse RM, Kuhlmann ED, Winkens HJ. Experimental autoimmune anterior uveitis (EAAU). III. Induction by immunization with purified uveal and skin melanins. Exp Eye Res 1993; 56: 575–583. 20. Smith JR, Rosenbaum JT, Williams KA. Experimental melanininduced uveitis: experimental model of human acute anterior uveitis. Ophthalmic Res 2008; 40: 136–140. 21. Pennesi G, Mattapallil MJ, Sun SH. A humanized model of experimental autoimmune uveitis in HLA class II transgenic mice. J Clin Invest 2003; 111 (8): 1171–1180. 11. van Duist MM, Albrecht M, Podswiadek M et al. A new CARD15 mutation in Blau syndrome. Eur J Hum Genet 2005; 13: 742–747. 22. Caspi RR. Th1 and Th2 responses in pathogenesis and regulation of experimental autoimmune uveoretinitis. Int Rev Immunol 2002; 21 (23): 197–208. 12. Takeda K, Kaisho T, Akira S. Tolllike receptors. Annu Rev Immunol. 2003; 21: 335376. 23. Tang J, Zhu W, Silver PB et al. Autoimmune uveitis elicited with antigenpulsed dendritic cells has a distinct clinical signature and is driven by unique effector mechanisms: initial encounter with autoantigen defines disease phenotype. J Immunol 2007; 178 (9): 5578–5587. 13. Rosenzweig HL, Galster K, Vance EE et al. NOD2 deficiency results in increased susceptibility to peptidoglycaninduced uveitis in Mice. Invest Ophthalmol Vis Sci 2011; doi: 10.1167/ iovs.106263 [Epub ahead of print]. 14. Scharl M, Rogler G. Microbial sensing by the intestinal epithelium in the pathogenesis of inflammatory bowel disease. Int J Inflam 2010; Article ID 671258; doi: 10.4061/2010/ 671258. 15. Smith JR, Hart PH, Williams KA. Basic pathogenic mechanisms operating in experimental models of acute anterior uveitis. Immmunol Cell Biol 1998; 76: 497–512. 16. Вышегуров Я.Х., Закирова Д.З., Расческов А.Ю., Яков лев М.Ю. Кишечный эндотоксин как облигатный фактор патогенеза эндогенных иридоциклитов и эндофтальмитов неясной этиологии. М.: Московские учебники – СиДиП ресс; 2006. 17. Li Q, Peng B, Whitcup SM et al. Endotoxin induced uveitis in the mouse: susceptibility and genetic control. Exp Eye Res 1995; 61 (5): 629–632. 24. de Kozak Y, Camelo S, Pla M. Pathological aspects of spontaneous uveitis and retinopathy in HLAA29 transgenic mice and in animal models of retinal autoimmunity: relevance to human pathologies. Ophthalmic Res 2008; 40 (3–4): 175–180. 25. DeVoss J, Hou Y, Johannes K et al. Spontaneous autoimmunity prevented by thymic expression of a single self antigen. J Exp Med 2006; 203 (12): 2727–2735. 26. Lu Y, He S, Jia L et al. Two mouse models for recoverin associated autoimmune retinopathy. Mol Vis 2010; 16: 1936–1948. 27. Adamus G, Ren G, Weleber RG. Autoantibodies against retinal proteins in paraneoplastic and autoimmune retinopathy. BMC Ophthalmol 2004; 4: P/record No. 5. 28. Lu Y, Jia L, He S, Hurley MC et al. Melanomaassociated retinopathy: a paraneoplastic autoimmune complication. Arch Ophthalmol 2009; 127: 1572–1580. Сведения об авторах Калюжин Олег Витальевич, доктор мед. наук, профессор Ведущий научный сотрудник лаборатории клеточной иммунопатологии и биотехнологии Учреждения РАМН НИИ морфологии человека РАМН, г. Москва, Россия Адрес: 117418, Россия, г. Москва, ул. Цюрупы, д. 3 Дикинов Залим Хасабиевич, кандидат мед. наук Доцент кафедры общей хирургии с курсом глазных болезней Медицинского факультета ГОУ ВПО Кабардино'Балкарского государственного университета им. Х.М.Бербекова Адрес: 360000, Россия, г. Нальчик, ул. Инессы Арманд, д. 1 Евсегнеева Ирина Валентиновна, доктор мед. наук Профессор кафедры клинической иммунологии и аллергологии ГОУ ВПО Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М.Се' ченова Минздравсоцразвития России Адрес: 119991, Россия, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2 Поступила 18.03.2011 г. Иммунопатология, Аллергология, Инфектология 2011 N°2 19
