УДК 537.868; 577.346; 612.014.482.4 ВЛИЯНИЕ КВЧ-ИЗЛУЧЕНИЯ НА СИСТЕМУ КРОВИ И ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЛУЧЕВОЙ БОЛЕЗНИ Л. В. Овощникова, А. С. Корягин, А. А. Елисеева Нижегородский госуниверситет Исследовано влияние низкоинтенсивного ЭМИ КВЧ с шумовым спектром на систему крови и перекисное окисление липидов (ПОЛ) лабораторных животных. КВЧ-воздействие проводилось на область тазовых костей и затылка после радиационного поражения в течение 10 дней ежедневно. Обсуждаются механизмы действия ЭМИ КВЧ на систему крови и ПОЛ на основе полученных результатов. ВВЕДЕНИЕ В настоящее время все большее количество людей сталкивается с ионизирующим излучением. Поэтому особую актуальность приобретает поиск новых средств защиты организма от его действия и, что особенно важно, терапии лучевой болезни. Использование КВЧ-излучения в терапии и профилактике целого ряда заболеваний человека является одним из активно развивающихся направлений современной клинической медицины. Электромагнитные волны миллиметрового диапазона успешно применяются для лечения болезней органов кровообращения, дыхания, пищеварения, мочеполовой, нервной и других систем [1]. Были получены первые обнадеживающие результаты по ослаблению с помощью предварительного воздействия миллиметровых волн последствий рентгеновского облучения на костный мозг [2]. Однако данные о терапевтическом применении КВЧ-излучения при лучевой болезни единичны, а влияние КВЧ-излучения на перекисное окисление липидов вообще не изучено. Настоящая работа посвящена изучению влияния КВЧ-излучения на некоторые показатели системы крови и перекисное окисление липидов (ПОЛ) при экспериментальной лучевой болезни. Целью работы явилась оценка влияния облучения затылочной области и области тазовых костей миллиметровыми волнами низкой интенсивности с последующим определением в периферической крови общего количества эритроцитов, ретикулоцитов, гемоглобина, лейкоцитов и концентрации первичных (диеновых конъюгатов), вторичных (триеновых конъюгатов) и конечных (оснований Шиффа) продуктов ПОЛ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Было использовано 28 белых беспородных крыс массой 150-180 г. Животных разделили на 4 группы: интактная, контрольная и две опытные. Животных контрольной и опытных групп подвергли однократному тотальному рентгеновскому 31 облучению в дозе 3 Гр, что вызвало развитие острой лучевой болезни. Облучение проводилось на базе городского онкодиспансера на терапевтической установке «Агат-С». Мощность облучения – 1 Гр/мин. КВЧ-терапию начинали через 1 час после облучения в области тазовых костей (1 опытная группа) и затылочной области (2 опытная группа). Животные контрольной группы лечению не подвергались. Лечение проводилось с помощью аппарата КВЧ-терапии с шумовым излучением «АМФИТ-0,2/10-01» в течение 10 дней по 20 минут ежесуточно. Аппарат разработан в НИФТИ ННГУ и производится серийно [3]. Диапазон частот составляет 53,57- 78,33 ГГц, мощность излучения шумового сигнала — 0,2-1,5 мкВт. Животные всех групп находились под эфирным наркозом в течение каждого сеанса терапии. Кровь для анализа брали из подъязычной вены на 1, 8 и 15 сутки сразу после окончания лечения, что соответствует 11, 18 и 25 суткам со дня облучения. В крови определяли общее количество эритроцитов, гемоглобина, ретикулоцитов, лейкоцитов, содержание первичных (диеновых конъюгатов), вторичных (триеновых конъюгатов) и конечных (оснований Шиффа) продуктов перекисного окисления липидов. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Системой, степень поражения которой определяет тяжесть и исход лучевой болезни при дозах облучения до 10 Гр, является система крови и кроветворения [4]. Клиническое течение острой лучевой болезни целиком определяется динамикой истощения и последующего восстановления системы крови [5]. В ходе проведенных исследований были получены следующие результаты. Спустя сутки после окончания лечения и в течение дальнейшего исследования в контрольной группе наблюдалась эритропения, анемия и ретикулопения по отношению к интактным животным, хотя эритропения была выражена в меньшей степени, что можно объяснить меньшей чувствительностью эритроцитов к ионизирующим излучениям малых доз [5]. Применение КВЧ-терапии оказало существенное влияние на течение лучевой болезни. Так, у животных опытных групп содержание гемоглобина уже на первые сутки после окончания лечения было значительно выше, чем в контроле (таб.1). Можно сделать вывод, что КВЧ-излучение стимулирует образование предшественников эритроцитов и способствует белковому обмену в них. В течение исследования количество ретикулоцитов также возрастало в опытных группах уже с 11 суток после облучения, но только на 18 сутки в опытных группах их количество было больше, чем в контрольной. Вероятно, что в результате воздействия КВЧ-излучением в области головного мозга повышается секреция гормонов передней доли гипофиза, оказывающих стимулирующее влияние на эритропоэз и синтез гемоглобина. При действии КВЧ-излучением на тазовую область мы воздействовали непосредственно на почки, половые железы и кору надпочечников, в результате чего наблюдалось увеличение количества гемоглобина и ретикулоцитов, вероятно, за счет увеличения синтеза эритропоэтина и стероидных гормонов. Нельзя исключать опосредованного влияния на эти процессы гипоталамо-гипофизарной системы. 32 Таблица 1 Динамика изменения содержания гемоглобина (г/л) при КВЧ-терапии облученных животных Условие опыта 1 Интактные животные M±m Контроль M±m р2 КВЧ-терапия в области мозга M±m р1 p2 КВЧ-терапия в области таза M±m р1 p2 Сутки после лечения 8 15 90,5±18,22 105,9±3,36 103±11,27 72,4±13,66 >0,05 84,5±10,43 <0,05 77,33±3,84 <0,05 158,6±17,4 <0,05 <0,05 116,8±16,68 <0,05 >0,05 106,7±10,41 <0,05 >0,05 136±22,38 <0,05 <0,05 108±11,15 <0,05 >0,05 100±8,16 <0,05 >0,05 р1<0,05 — достоверно по отношению к контролю p2<0,05 — достоверно по отношению к интактным животным В ходе эксперимента также было установлено, что γ-излучение снижало количественные показатели белой крови. Общее количество лейкоцитов в контрольной группе в течение всего эксперимента было на 69-72% меньше, чем у интактных животных (таб.2). Основная причина катастрофического опустошения костного мозга, происходящего в самые ранние сроки после облучения, состоит в резком торможении процессов клеточного деления при продолжающемся с неизменной скоростью поступлении зрелых элементов на периферию [6]. Таблица 2 Динамика изменения общего количества лейкоцитов при КВЧ-терапии облученных животных Условие опыта 1 Интактные животные M±m Контроль M±m p2 КВЧ-терапия в области мозга M±m р1 p2 КВЧ-терапия в области таза M±m р1 p2 Сутки после лечения 8 15 6,43±0,44 8,56±0,25 9,46±0,46 1,90±0,03 <0,05 1,90±0,26 <0,05 2,46±0,29 <0,05 4,13±0,13 <0,05 >0,05 4,60±0,26 <0,05 >0,05 4,44±0,22 <0,05 >0,05 4,15±0,28 <0,05 >0,05 4,5±0,29 <0,05 >0,05 4,65±0,17 <0,05 >0,05 р1<0,05 — достоверно по отношению к контролю p2<0,05 — достоверно по отношению к интактным животным Общее количество лейкоцитов у животных в опытных группах на протяжении всего эксперимента превышало показатели контрольной группы на 20-35%. Это 33 можно объяснить тем, что КВЧ-излучение оказывает стимулирующее влияние на лейкопоэз и таким образом повышает защитные иммунологические реакции организма. Облучение контрольных животных вызвало увеличение продуктов перекисного окисления липидов. Содержание диеновых конъюгатов выросло примерно на 30% по сравнению с интактными животными, триеновых — увеличивается постепенно и к 18 суткам после облучения превышает норму почти в 3 раза. Накопление продуктов ПОЛ связано с развитием пострадиационных свободно-радикальных реакций [7]. Конечный результат поражающего действия радиации мы можем наблюдать по изменению содержания оснований Шиффа (таб. 3). Их количество на 11 сутки после облучения возросло в 3,5 раза по сравнению с нормой. Это говорит об истощении антиоксидантной системы. Но к 18 суткам, а еще более к 25 суткам замечено снижение концентрации оснований Шиффа, что свидетельствует о начале репарационного процесса и восстановлении антиоксидантной системы. Таблица 3 Динамика изменения содержания оснований Шиффа при КВЧ-терапии облученных животных Условие опыта 1 Интактные животные M±m Контроль M±m р2 КВЧ-терапия в области мозга M±m р1 p2 КВЧ-терапия в области таза M±m р1 p2 Сутки после лечения 8 15 218,3±61,7 293±5,8 268±38,7 690±11,8 <0,05 493±9,8 <0,05 333±19,9 <0,05 622±27,8 >0,05 <0,05 613±31,2 <0,05 <0,05 533±24,4 <0,05 <0,05 229±12,9 <0,05 >0,05 219±21,4 <0,05 <0,05 282±12,5 <0,05 >0,05 р1<0,05 — достоверно по отношению к контролю p2<0,05 — достоверно по отношению к интактным животным У животных, прошедших КВЧ-терапию в затылочной области, содержание диеновых конъюгатов возрастает в 2,5 раза по сравнению с контролем. Следовательно, КВЧ-излучение усиливает уже идущий процесс ПОЛ. Головной мозг является органом с высокой предрасположенностью к индукции свободнорадикальных реакций. На 18 сутки количество диеновых конъюгатов возрастает в 5 раз. К 25 суткам их количество снижается, оставаясь выше уровня интактных животных. В содержании триеновых конъюгатов снижения не было замечено даже к 25 суткам после облучения. Оно возросло по сравнению с контролем в 5 раз. Повидимому, это обусловлено спецификой ПОЛ в головном мозге [8]. Содержание оснований Шиффа постепенно уменьшается к концу периода наблюдений, но остается выше контроля. Это говорит о неэффективности КВЧ-терапии на затылочную область. У животных, прошедших КВЧ-терапию в области таза, наблюдался подъем уровня первичных продуктов пероксидации. На 11 сутки после облучения содер34 жание диеновых конъюгатов в 4 раза превышало значение у интактных животных. На 18 сутки их концентрация возросла до 512%, а через неделю снизилась до 270%. Миллиметровое воздействие на тазовую область сопровождалось увеличением содержания триеновых конъюгатов до 285% на 11 и до 590% на 18 сутки. К концу эксперимента их концентрация снизилась до 378% по сравнению с интактными животными. Содержание оснований Шиффа в опытной группе на протяжении всего эксперимента оставалось близким к значениям интактных животных (74-105%). Увеличение содержания диеновых и триеновых конъюгатов связано, повидимому, с усилением пролиферации клеток в кроветворных органах, на что также указывает и динамика изменения ретикулоцитов. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Проведенные исследования показали, что КВЧ-излучение при терапии острой лучевой болезни усиливает процессы пролиферации клеток, различные энергетические процессы и биосинтез белка. На это указывает более высокое содержание гемоглобина, ретикулоцитов и лейкоцитов по сравнению с контролем. Данное излучение практически не оказывает влияние на содержание эритроцитов. Действие КВЧ-излучения на затылочную область стимулирует активность свободно-радикальных процессов, увеличивая содержание первичных, вторичных и конечных продуктов ПОЛ. Поэтому применение КВЧ-излучения в области головы не рекомендуется. Действие КВЧ-излучения на область тазовых костей сопровождается увеличением содержания диеновых и триеновых конъюгатов в течение первых двух недель после окончания лечения и снижением их концентрации к концу эксперимента. Уровень оснований Шиффа, свидетельствующий о тяжести поражающего действия радиации на биологические мембраны, остается близким к уровню интактных животных в течение всего периода наблюдений. Полученные результаты указывают на перспективность применения миллиметровых волн в качестве неспецифического терапевтического средства при лечении острой лучевой болезни, однако для достижения максимального лечебного эффекта проведения одного курса КВЧ-терапии недостаточно. ЛИТЕРАТУРА 1. Корнаухов А. В., Анисимов С. И., Алябина Н. А. и др. Аппарат КВЧтерапии с шумовым излучением "АМФИТ 0,2/10-0,1" и некоторые аспекты его применения в медицине // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1999. №2 (14). С. 49-52. 2. Лебедева Н. Н., Котровская Т. И. Экспериментально-клинические исследования в области биологических эффектов миллиметровых волн // Миллиметровые волны в биологии и медицине. 1999. №3 (15). С. 3-12. 3. Корнаухов А. В. и др. Аппарат КВЧ-терапии шумовым излучением "АМФИТ-0,2/10-01" // Материалы III Международной научно-технической конференции "Физика и радиоэлектроника в медицине и биотехнологии". Владимир: ВГУ, 1998. С. 75-76. 4. Хансон К. П., Когнар В. Е. Молекулярные механизмы радиационной гибели клеток. М.: Энергоиздат, 1985. 35 5. Жербин Е. А., Чухлович А. Б. Радиационная гематология. М.: Медицина, 1989. 6. Ярмоненко С. П. Радиобиология человека и животных. М.: Высшая школа, 1988. 7. Барабой В. А., Орел В. Э., Карнаухов И. М. Перекисное окисление и радиация. Киев, 1991. 8. Halliwell B. Free radicals, oxygen toxity and aging. In age pigments / Еd. by R.S. Cohan. Amsterdam: Elsevier Nosta, 1981. P. 1−50. 36