ИЗУЧЕНИЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ

35
17.
Кузнецов С.Г. Биологическая доступность минеральных веществ для животных из
корма, добавок и химических соединений / С.Г. Кузнецов // Сельскохоз. биология.
– 1991. – № 6. – С. 150–160.
18.
Смольянова А.П. Результаты применения комплексных кормовых добавок на
основе местного минерального сырья в кормлении молодняка животных /
А.П. Смольянова, Н.Н. Кердяшов // Вестник Алтайского государственного
аграрного университета. – 2011. – № 5 (79) . – С. 68-73
19.
Васильева Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных /
Е.А. Васильева. – М. : Россельхозиздат, 1982. – 254 с.
20.
Вишняков С.И. Межклеточный обмен в организме животных / С.И. Вишняков. –
М. : Агропромиздат, 1988. – 158 с.
21.
Базанова Н.У. Физиология сельскохозяйственных животных / Н.У. Базанова. – М.
Колос, 2004. – 520 с.
22.
Haematological studies on apparently healthy Tswana indigenous chickens (Gallus
domesticus) around Gaborone, Botswana / E.Z. Mushi, M.G. Binta, R.G. Chabo,
R.T. Ndebele // INFPD News letter. –1999. – V.9. – P. 83-88.
23.
Болотников И.А. Гематология птиц / И.А. Болотников, Ю.В. Соловьев. – Л.:
Наука, 1980. – 116 с.
24.
Лабораторные методы исследования в клинике / под ред. В.В.Меншикова. –
Медицина, 1987. – 365 с.
25.
Общие и специальные методы исследования крови птиц промышленных кроссов /
Н.В. Садовников, Н.Д. Придыбайло, Н.А. Верещак, А.С. Заслонов. –
Екатеринбург – Санкт-Петербург: Уральская ГСХА, НПП «АВИВАК», 2009. –
85 с.
УДК 597.6/599
ИЗУЧЕНИЕ ВОЗДЕЙСТВИЯ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАГРЯЗНИТЕЛЕЙ
(НЕФТИ) НА ПРОДУКТЫ ЖИЗНЕДЕЯТЕЛЬНОСТИ
МЕДОНОСНОЙ ПЧЕЛЫ (APIS MELLIFERA L. CAUCASİCA)
МЕТОДОМ ГАЗОВОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Мамедова Ф.З, к.б.н., старший научный сотрудник,
Топчиева Ш.А., д.б.н., главный научный сотрудник
Институт Зоологии Национальной Академии Наук Азербайджана
Выявлено влияние экологических загрязнителей (нефтепродуктов) на продукты
жизнедеятельности медоносной пчелы ( яд и пыльцу) Apis mellifera. L. caucasica. Методом
газовой хроматографии на газовом хроматографе фирмы Agilent Technologies 6890N в яде и
пыльце медоносной пчелы Apis mellifera L. caucasica выявлены следовые концентрации
продуктов распада нефти. Полученные нами экспериментальные данные могут быть
применены при идентификации пчелиного яда, стандартизации, качественного и
количественного определения, как в препаратах, так и в биоматериале.
Ключевые слова: яд, пыльца, Apis mellifera L. caucasica, экологический фактор,
нефтепродукты.
Мамедова Ф.З., Топчієва Ш.А. ВИВЧЕННЯ ВПЛИВУ ЕКОЛОГІЧНИХ ЗАБРУДНЮВАЧІВ
(НАФТИ)
НА
ПРОДУКТИ
ЖИТТЄДІЯЛЬНОСТІ
МЕДОНОСНОЇ
БДЖОЛИ
Біологічні науки
36
(APIS MELLIFERA L. CAUCASICA) МЕТОДОМ ГАЗОВОЇ ХРОМАТОГРАФІЇ / Інститут
Зоології Національної Академії Наук Азербайджану
Виявлено вплив екологічних забруднювачів (нафтопродуктів) на продукти життєдіяльності
медоносної бджоли (отрута й пилок) Apis mellifera. L. caucasica. Методом газової
хроматографії на газовому хроматографі фірми Agilent Technologies 6890N в отруті й пилку
медоносної бджоли Apis mellifera L. caucasica. виявлені слідові концентрації продуктів
розпаду нафти. Отримані нами експериментальні дані можуть бути застосовані при
ідентифікації бджолиної отрути, стандартизації, якісного й кількісного визначення, як у
препаратах, так і в біоматеріалі.
Ключові слова: отрута, пилок, Apis mellifera L.caucasica, екологічний фактор, нафтопродукти.
Mammadova F.Z., Topchiyeva Sh.A. STUDY OF THE IMPACT OF ENVIRONMENTAL
POLLUTION (OIL) FOR PRODUCTS OF LIFE ACTIVITY OF HONEYBEES (APIS MELLIFERA
L. CAUCASİCA) BY METHOD OF GAS HROMATOGRAPHY / Institute of Zoology of the
National Academy of Sciences of Azerbaijan
The effect of environmental pollutants (oilproducts) on the waste products of the
honeybee (venom and pollen) Apis mellifera L.caucasica. has been revealed.
Trace concentrations of degradation products of oil have been detected by gas chromatography on
a gas chromatograph Agilent Technologies 6890N firms in the venom and the pollen of the
honeybee Apis mellifera L. caucasica. Our experimental data can be used in the identification of
bee venom, their standardization, quality and quantify, in preparations and as well as in biological
material.
Key words: venom, pollen, Apis mellifera L.caucasica, environmental factor, oil products
ВВЕДЕНИЕ
Проблема загрязнения атмосферы – одна из важнейших в современном мире. Все
прогрессирующее загрязнение биосферы Азербайджана техногенными выбросами
промышленных предприятий
приводит к катастрофическому
ухудшению
экологической ситуации в природе, к дисбалансу природных процессов, разрушению
экосистем, приводящих к значительному насыщению ее токсическими элементами.
Среди различных загрязнителей нефтепродукты и их соединения образуют обширную
группу токсикантов, во многом определяющую антропогенное воздействие на
экологическую структуру окружающей среды, и в том числе на фауну и флору
Азербайджана [1, 2] .
Нефтепродукты относятся к числу наиболее распространенных и опасных веществ,
загрязняющих поверхностные и грунтовые воды. Нефть и продукты ее переработки
представляют собой сложную и разнообразную смесь веществ. Большинство
нефтепродуктов поступают в поверхностные и грунтовые воды при транспортировании
нефти, со сточными водами предприятий, с хозяйственно-бытовыми водами. В течение
времени происходит перераспределение между основными формами миграции,
направленное в сторону повышения доли растворенных, эмульгированных,
сорбированных нефтепродуктов. Некоторые количества углеводородов образуются в
воде или поступают в нее в результате выделений растительными и животными
организмами и их посмертного разложения [3] .
В силу все возрастающих масштабов производства и применения нефтепродуктов, их
высокой токсичности, способности накапливаться в организме, оказывать вредное
влияние даже при сравнительно низких концентрациях, эти загрязнители должны быть
отнесены к числу приоритетных.
Исследование влияния экологических факторов на живые организмы имеет важное
значение при разработке концепции и стратегии рационального использования
биоресурсов, одним из составных компонентов которых в Азербайджане является
медоносная пчела Аpis mellifera L. caucasica.
Медоносная пчела с древнейших времен используется человеком для получения меда и
других продуктов пчеловодства. Своеобразие химического состава пчелиного яда
определяет широкий спектр его физиологического действия [4,5,6].
Вісник Запорізького національного університету
№ 2, 2012
37
Однако данные о влиянии экологических факторов, в том числе промышленных
загрязнителей на пчелиные семьи и продукты их жизнедеятельности, на яд, прополис,
пыльцу и другие компоненты остаётся неясным; имеющиеся сведения далеко уступают
современным данным.
Пчелиный яд входит в состав лекарственных препаратов. Практически, полное
отсутствие сведений о влиянии экологических факторов на жизнедеятельность
пчелиных семей, и, в свою очередь, на вырабатываемые ими продукты, а также
недостаток дифференциальных методов определения качественного и количественного
состава биотоксинов является основным фактором препятствующим выявлению и
устранению негативного влияния апитоксинов на организм, что обуславливает
актуальность предлагаемой работы.
Целью работы явилось изучение влияния
экологических загрязнителей
(нефтепродуктов) на яд и пыльцу Apis mellifera. L. caucasica. Исходя из этого были
поставлены следующие задачи: разработать методику определения нефтепродуктов в
яде и пыльце медоносной пчелы Apis mellifera L. caucasica.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
С помощью компьютерной системы обработки хроматографической информации нами
проведен количественный обсчет хроматограмм. Материалом исследований являлся яд
и пыльца медоносной пчелы Аpis mellifera L. caucasica. Для определения
нефтепродуктов в яде и пыльце были собраны исследуемые образцы продуктов
жизнедеятельности Apis mellifera L. caucasica у пчел, находившихся на пасеках в
сравнительно экологически незагрязненной территории Азербайджана (район Шемахи)
и экологически загрязненной (окрестности г.Сумгаита).
Эксперименты по изучению влияния экологических факторов на химический состав
исследуемых продуктов, проводили методом газовой хроматографии на газовом
хроматографе фирмы Agilent Technologies 6890N. Для каждой фазы эксперимента были
отобраны пять проб.
Для определения нефтепродуктов в яде и пыльце медоносной пчелы поочередно
проводили экстракцию исследуемых образцов. Aнализы были проведены для
обнаружения в этих компонентах наличия углеводородов СnH2n+2 и их процентных
соотношений. Экстракция нефтепродуктов в исследуемых образцах происходила в
течении 7 суток. В качестве растворителя для каждого объекта применяли дисульфид
углерода-СS2. Применена колонка длиной 30 м, диаметром 0.25 мм, производитель
колонки фирма Restek, марка МХТ-1, фаза-диметилполисилоксан. Начальная
температура 350С, выдержка при этой температуре 5 минут. Далее проводили
поэтапное увеличение температуры исследования по 100 С в минуту до 3300С,
выдержка при этой температуре 20 минут. Общий прогон образца в колонке составил
56 минут. Температура пламенно-ионизационного детектора 3500С. Указанные
процентные соотношения приведены к 100% для количества массы нефтепродуктов до
10 ppm для каждого объекта.
Время удерживания каждого углеводорода определяли на основе предварительно
введенного калибровочного стандарта. Количественное определение проводили
методом абсолютной калибровки с использованием программного обеспечения.
Процентное соотношение каждого компонента определяли площадью каждого пика,
соотнесенной к общей площади всех пиков.
На хроматограммах определена суммарная площадь пиков относительно базовой линии
в диапазоне времен удерживания от С2 до С40. На основании обработанных данных
определена градуировочная зависимость площадей пиков градуировочных растворов от
концентрации нефтепродуктов в исследуемых растворах.
Біологічні науки
38
РЕЗУЛЬТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В результате проведенных экспериментальных работ в исследуемых продуктах
жизнедеятельности медоносных пчел (яде и пыльце), были определены наличие
нижеследующих компонентов – продуктов распада нефти, представленных в таблице 1.
Сравнивая полученные результаты газохроматографического разделения исследуемых
образцов, можно констатировать, что в образцах пыльцы выявлены процентные
соотношения компонентов продуктов распада нефти в пределах С14 (2.532), (3.001 , С15С31, 1.203, 2.652. 3.215. 1.271, 24.003, 19.792, 4.398, 5.562, 1.809, 18.706. 0.82, 1.663.
1.788. 1.431, 0.675, 0.621), С33-С36, (0.845, 0.964, 0.493, 2.556), а в яде обнаружены
только С13 (54.44624), С15 (36.32795), С17 (9.225812) в процентном соотношении
соответственно.
Таблица 1 – Данные распределения компонентов между собой в процентном
соотношении в исследуемых образцах продуктов жизнедеятельности пчел
С
C2
C3
C4
C5
C6
C7
C8
C9
C10
C11
C12
C13
C14
C15
C16
C17
C18
C19
C20
C21
C22
C23
C24
C25
C26
C27
C28
C29
C30
C31
C32
C33
C34
C35
C36+
Total
Продукты жизнедеятельности пчел (%)
пыльца
яд
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
2.532
54.44624
0
0
3.001
36.32795
1.203
0
2.652
9.225812
3.215
0
1.271
0
24.003
0
19.792
0
4.398
0
5.562
0
1.809
0
18.706
0
0.82
0
1.663
0
1.788
0
1.431
0
0.675
0
0.621
0
0
0
0.845
0
0.964
0
0.493
0
2.556
0
100%
100%
Вісник Запорізького національного університету
№ 2, 2012
39
Данные газохроматографического разделения яда и пыльцы медоносной пчелы
представлены на рис. 1,2.
Рис.1. Газохроматографическое разделение яда пчелы Apis mellifera L. caucasica.
Химический анализ полученных данных показал, что в апитоксине и пыльце
медоносной пчелы (район г. Шемахи и окрестности г. Сумгаита ) содержатся следовые
концентрации нефтепродуктов.
Рис.2. Газохроматографическое разделение яда пчелы Apis mellifera L. caucasica.
Таким образом, можно констатировать влияние абиотических, биотических факторов, в
том числе промышленных загрязнителей (нефти) как на продукты жизнедеятельности
пчел, яд, прополис, пыльцу и другие компоненты, так и на пчелиные семьи. В то же
время наши исследования дают возможность создания представления о системе
устойчивости к экологическим факторам и механизме её функционирования, что
позволит более полно представить патогенез, разработать новые способы диагностики,
терапии и профилактики болезней с позиций защитной реакции организма пчел.
Глобальные загрязнения биосферы земного шара настоятельно требуют повышения
уровня знаний о резистентности пчел к экологическим факторам и использования их в
практическом пчеловодстве. Полученные нами данные позволяют внести ясность в
создание представления о системе устойчивости к экологическим факторам.
Біологічні науки
40
Полученные нами экспериментальные данные могут быть применены при
идентификации пчелиного яда, стандартизации, качественного и количественного
определения их как в нативном виде, так и в препаратах и биоматериале.
Перспективой дальнейшего исследования является получение экологически чистых
продуктов жизнедеятельности пчел.
ВЫВОДЫ
1.
Выявлено влияние промышленных загрязнителей (нефтепродуктов) на продукты
жизнедеятельности пчел, яд и пыльцу.
2.
Методом газовой хроматографии в яде и пыльце медоносной пчелы Apis mellifera
L. caucasica определены следовые концентрации продуктов распада нефти.
ЛИТЕРАТУРА
1.
Влияние экологических факторов (тяжелых металлов) на химический состав яда
медоносной пчелы Apis Mellifera К / Ш.А. Топчиева, Ф.З. Мамедова,
Р.Ю. Юсифов // Сборник трудов Института Зоологии Национальной Академии
Наук Азербайджана. – Баку: Эльм. – 2011. – Т. XXIX. – С.469-473.
2.
Influence of radiation on products of tu live of melliferous bee Apis Mellifere K. /
Sh.A. Topchieva, F.Z. Mammadova, R.Y. Yusifov, M.A. Mehrabova // WSEAS
International Conf. Recent researches in Chemistry, Biology,Environmental and Culture
Montreux, Switzerland, (December 29-31). – 2011. – P.99-103.
3.
www.bee-hexagon.net , Bee Product Science, 1.February 2011
4.
Орлов Б.Н. Зоотоксинология. Ядовитые животные и их яды / Б.Н. Орлов,
Д.Б. Гелашвили. –М.: Высшая школа. – 1985. – 280 с.
5.
Münstedt K. Bee products and their potential use in modern medicine / K. Münstedt,
S. Bogdanov // Journal of ApiProduct and ApiMedical Science. – 2009. – V. 1. –
P. 57-63.
6.
Antimetastatic ability of honey bee products / N. Orsolic, F. Sacases, P.P. Du Sert,
I. Basic // Periodicum Biologorum . – 2007. – V. 109. – P. 173-180.
УДК 565.143.6 : 591.557.61
ОРГАНОТРОПНІСТЬ ДО КИШЕЧНИКУ МЕДИЧНОЇ П'ЯВКИ
AEROMONAS HYDROPHILA – БАКТЕРІЇ-ЕНДОСИМБІОНТУ
Фролов О. К., д. м. н., професор, Копійка В. В., к. б. н., доцент,
Федотов Є. Р., к. б. н., доцент, Литвиненко Р. О., аспірант,
Процько Ю. С., старший лаборант
Запорізький національний університет
Встановлено, що в травному тракті медичної п’явки домінує один вид мікроорганізмів бактерія-ендосимбіонт Aeromonas hydrophila, яка проявляє високу цитофільність до
кишечного епітелію і розміщується у вигляді пристінкової біоплівки без потрапляння в
порожнинну кров годувальника. Після годування медичної п’явки в її шлунково-кишковому
тракті значно підвищується кількість популяції Aeromonas hydrophila, чисельність якої у
передньому, середньому та задньому відділах шлункової кишки медичної п’явки однакова.
Морфологічні особливості бактерії-ендосимбіонту медичної п’явки Aeromonas hydrophila –
це поліморфні паличкоподібні грамнегативні бактерії (овальні та більш видовжені форми
Вісник Запорізького національного університету
№ 2, 2012