«УМНИК» - 2015 ИЗУЧЕНИЕ РЕМОДЕЛИРОВАНИЯ САРКОПЛАЗМАТИЧЕСКОГО РЕТИКУЛУМА КАРДИОМИОЦИТОВ ПАЦИЕНТОВ С ИШЕМИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СЕРДЦА, АССОЦИИРОВАННОЙ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА Канев А.Ф., студент 6 курса СибГМУ Актуальность • Прогрессирование ишемической болезни сердца при сахарном диабете 2 типа обусловлено тяжёлыми метаболическими нарушениями, приводящими к значительному угнетению диастолической функции левого желудочка. •Причиной развития диастолической дисфункции у таких больных может быть патология кальций-транспортирующих систем саркоплазматического ретикулума (СР) кардиомиоцитов. • Экспериментально показано, что депрессия функций СР в значительной степени может быть связана со снижением экспрессии белка Са2+-АТФ-азы (SERCA2a), который осуществляет обратный захват кальция в просвет саркоплазматического ретикулума в диастолу. Cardiovascular biology: Heart fails without pump partner. Sudha K. Shenoy & Howard A. Rockman Цель: • Изучение ремоделирования саркоплазматического ретикулума кардиомиоцитов пациентов с ишемической болезнью сердца, ассоциированной с сахарным диабетом 2 типа. Задачи: • Сравнение функции СР пациентов с ИБС и больных ИБС, ассоциированной с СД 2 типа; • Сравнение содержания SERCA2a в миокарде больных ИБС и пациентов с ИБС, ассоциированной с сахарным диабетом 2 типа. Материалы: • Биопсийный материал пациентов ушка правого предсердия, иссекаемого при подключении аппарата искусственного кровообращения во время операции аортокоронарного шунтирования • 1 группа - 14 пациентов с диагнозом: • хроническая ишемическая болезнь сердца, • стенокардия напряжения III-IV функциональных классов, • ХСН III-IV по NYHA • 2 группа - 13 пациентов с диагнозом: • хроническая ишемическая болезнь сердца, • стенокардия напряжения III-IV функциональных классов, • ХСН III-IV по NYHA • сахарный диабет 2 типа • Средний возраст пациентов - 50.6 ± 2.7 лет. • Фракция выброса - 49,0±17,3% Методы: оценка функции СР Определение содержания SERCA2a •Выделение белков производилось посредством гомогенизации в лизирующем буфере и центрифугировании при 16000 об/мин •Для определения уровня SERCA2a в материале использовали метод вестернблоттинга. •Мембрану сканировали, затем оценивали интенсивность окраски полос в программе ImageJ •Общее содержание белка в пробах оценивали спектрофотометрически Вестерн-блоттинг •Рассчитывали количество исследуемого белка относительно общего содержания белка (ед/мг) Результаты электрофизиологического исследования I тип post-rest сокращений II тип post-rest сокращений contraction ИБС+СД ИБС 180 140 * * 120 * * * * * * Амплитуда сокращений, % Амплитуда 160 ИБС+СД 110 ИБС 100 100 80 - 10 20 30 40 50 60 Периоды покоя, сек * - р<0.01 достоверность различий между группами 90 80 70 60 50 40 - 10 20 30 40 Периоды покоя, сек 50 60 Содержание SERCA2a содержание белка, ед/мг 25 20 *# *& 15 # 10 & 5 0 СД1 ИБС1 СД2 ИБС2 1, 3 – пациенты, больные ИБС, ассоциированной с сахарным диабетом; 2, 4 – пациенты, больные ИБС *- достоверное различие между подгруппами, p < 0,01 # - достоверное различие между подгруппами, р < 0,01 & - достоверное различие между подгруппами, р < 0,05 Корелляция уровней SERCA2a и post-rest сокращения ИБС+СД 140 * ** * * 120 100 ** * 80 - 10 20 30 40 50 60 Периоды покоя, сек Gregory KN, Kranias EG. Hellenic/J Cardiol. 2006 ТИП l ТИП II 110 100 90 80 70 60 50 40 ИБС+СД ИБС Амплитуда 160 ИБС - 10 20 30 40 50 Периоды покоя, сек # Амплитуда 180 * * # - p<0.01 достоверность различий между группами, * - p<0.01 достоверность различий между I и II типом 60 Выводы • Ремоделирование на уровне кардиомиоцитов при ишемической болезни сердца может происходить с сохранением или с нарушением функций кальций – транспортирующих систем СР. • Сохранность функции СР коррелирует с уровнем SERCA2a • У больных, ИБС которых ассоциирована с сахарным диабетом, уровень SERCA2a, а также функция СР сохраняется в большей степени, чем у пациентов с изолированной ИБС. Перспективы • SERCA2a – цель для генотерапии ХСН (MYDICAR™, первая фаза клинических испытаний); • Истароксим™ - активатор Са2+-АТФ-азы саркоплазматического ретикулума (вторая фаза клинических испытаний). Нерешённые проблемы Финансовая сторона вопроса Благодарю за внимание Канев А., НИИ кардиологии, лаборатория молекулярноклеточной патологии и генодиагностики