BIO TEST ® Referenční rozmezí je pouze orientační, doporučuje se, aby si každá laboratoř ověřila rozsah referenčního intervalu pro populaci, pro kterou zajišťuje laboratorní vyšetření. BÍLKOVINA V MOČI LIQUID 250 Kat. č. 10010222 (UP L 250) Skladovat (+2 až +8) °C Výkonnostní chrakteristiky Pracovní rozsah: 20 – 3 000 mg/l Přesnost (při 37 °C) INTRA-ASSAY n = 20 Průměr (mg/l) SD (mg/l) CV (%) Souprava pro stanovení bílkoviny v moči a mozkomíšního moku metodou s pyrogalolovou červení. Vzorek 1 178 5,23 2,94 Vzorek 2 450 5,10 1,14 Princip metody Bílkoviny tvoří s pyrogalolovou červení a molybdenanem sodným v silně kyselém prostředí červený komplex, vhodný k fotometrickému stanovení. Vzorek 3 Činidla R1Činidlo 1 Pyrogalolová červeň Molybdenan sodný R2Standard Bílkovina 5 x 50 ml 60 µmol/l 40 µmol/l 1 x 3 ml 1300 mg/l Složení reakční směsi Pyrogalolová červeň Molybdenan sodný 58,8 µmol/l 39,2 µmol/l Příprava a stabilita pracovních roztoků Činidla R1 a R2 jsou kapalná a určená k přímému použití. Skladovaná před i po otevření při (+2 až +8) °C a chráněná před světlem a kontaminací jsou stabilní do data exspirace, uvedeného na obale. Chraňte před světlem. Vzorky Moč nebo mozkomíšní mok. Stabilita proteinů ve moči je 1 den při (+20 až +25) °C a 2 dny při (+2 až +8) °C a v mozkomíšním moku 1 den při (+20 až +25) °C a 6 dní při (+2 až +8) °C. Kalibrace Ke kalibraci se doporučuje standard ze soupravy. Kontrola kvality Ke kontrole se doporučují kontrolní moče. Postup měření Vlnová délka 600 nm (580-600) nm Kyveta 1 cm Teplota (+20 až +25) °C, +37 °C Objemový poměr vzorek/reakční směs 1/51 Objem pracovních roztoků a vzorků lze měnit, pro garanci analytických parametrů však jejich vzájemný poměr musí být zachován. Reagenční Standard Vzorek blank Činidlo R1 1,000 ml 1,000 ml 1,000 ml Vzorek – – 0,020 ml Standard – 0,020 ml – Destilovaná voda 0,020 ml – – Promíchá se a inkubuje 5 minut. Poté se odečte absorbance vzorku Avz a standardu Ast proti absorbanci blanku Abl. Zbarvení je stále 30 minut. Aplikace na automatické analyzátory jsou dodávány na vyžádání. Výpočet Celková bílkovina (mg/l) = Cst = koncentrace standardu Avz – Abl Ast – Abl x Cst Přepočet jednotek 1 g/l = 1 mg/l x 1000 Referenční hodnoty fU bílkovina fCFS 24 – 141 mg/24 hodin < 500 mg/l Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 33 Brno, CZ e-mail: diagnostics@lachema.com, www.lachema.com 1564 27,6 1,77 Průměr (mg/l) SD (mg/l) CV (%) Vzorek 1 170 3,94 2,32 Vzorek 2 449 9,68 2,16 Vzorek 3 1484 42,5 2,86 INTRA-ASSAY n = 20 Srovnání: s komerčně dostupnou metodou. Lineární regrese: N = 69, r = 0,990 y = 1,02x – 2,20 mg/l Interference Chyby způsobené interferujícími složkami v moči jsou nižší než 2%. Poznámka 1. Vzorky s koncentrací bílkoviny nad 3 000 mg/l se ředí 1+1 0,9% roztokem NaCl a výsledek se násobí 2x. 2. Vzorky s koncentrací bílkoviny nižší než 20 mg/l se použijí ve větším objemu, tj. např. 0,05 ml vzorku a 1,0 ml činidla R1. Bezpečnostní charakteristiky Určeno pro in vitro diagnostické použití oprávněnou a profesionálně vyškolenou osobou. Činidla soupravy nejsou klasifikována jako nebezpečná. První pomoc Při náhodném požití vypláchnout ústa a vypít asi 0,5 l vody, při potřísnění pokožky nebo vniknutí do oka provést rychlý a důkladný výplach proudem čisté vody. Ve vážných případech poškození zdraví vyhledat lékařskou pomoc. Nakládání s odpady Na všechny zpracované vzorky je nutno pohlížet jako na potencionálně infekční a spolu s případnými zbytky činidel je likvidovat podle vlastních interních předpisů jako nebezpečný odpad v souladu se Zákonem o odpadech. Papírové a ostatní obaly se likvidují podle druhu materiálu jako tříděný odpad (papír, sklo, plasty). Literatura 1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed., Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1999, p. 477 –540. 2. Osronneau JL, Douet P., Massoubre C., Lustenberger P., Bernard S., An improved pyrogallol red-molybdate method for determining total urinary protein, Clin. Chem. 1989, 35:2233-6. Datum poslední revize: 21. 1. 2011 BIO TEST ® Referenčné hodnoty fU bielkovina fCFS BIELKOVINA V MOČI LIQUID 250 Kat. č. 10010222 (UP L 250) Skladovať (+2 až +8) °C Súprava na stanovenie bielkoviny v moči a mozgovomiechového moku metódou s pyrogalolovou červeňou. Princíp metódy Bielkoviny tvoria s pyrogalolovou červeňou a molybdénanom sodným v silno kyslom prostredí červený komplex, vhodný na fotometrické stanovenie. Činidlá R1Činidlo 1 Pyrogalolová červeň Molybdénan sodný R2Štandard Bielkovina 5 x 50 ml 60 µmol/l 40 µmol/l 1 x 3 ml 1300 mg/l Zloženie reakčnej zmesi Pyrogalolová červeň Molybdénan sodný 58,8 µmol/l 39,2 µmol/l Príprava a stabilita pracovných roztokov Činidlá R1 a R2 sú kvapalné a určené na priame použitie. Skladované pred i po otvorení pri (+2 až +8) °C a chránené pred svetlom a kontamináciou sú stabilné do dátumu exspirácie, uvedeného na obale. Chráňte pred svetlom. Vzorky Moč alebo mozgovomiechový mok. Stabilita proteínov v moči je 1 deň pri (+20 až +25) °C a 2 dni pri (+2 až +8) °C a v mozgovomiechovom moku 1 deň pri (+20 až +25) °C a 6 dní pri (+2 až +8) °C. Kalibrácia Na kalibráciu sa odporúča štandard zo súpravy. Kontrola kvality Na kontrolu sa odporúčajú kontrolné moče. Postup meraní Vlnová dĺžka 600 nm (580–600) nm Kyveta 1 cm Teplota (+20 až +25) °C, +37 °C Objemový pomer vzorka/reakčná zmes 1/51 Objem pracovných roztokov a vzoriek je možné meniť, pre garanciu analytických parametrov však ich vzájomný pomer musí byť zachovaný. Reagenčný Štandard Vzorka blank Činidlo R1 1,000 ml 1,000 ml 1,000 ml Vzorka – – 0,020 ml Štandard – 0,020 ml – Destilovaná voda 0,020 ml – – Premieša sa a inkubuje 5 minút. Potom sa odčíta absorbancia vzorky Avz a štandardu Ast proti absorbancii blanku Abl. Sfarbenie je stále 30 minút. Aplikácie na automatické analyzátory sú dodávané na vyžiadanie. Výpočet Celková bielkovina (mg/l) = Cst = koncentrácia štandardu Avz – Abl Ast – Abl x Cst Prepočet jednotiek 1 g/l = 1 mg/l x 1000 Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 33 Brno, CZ e-mail: diagnostics@lachema.com, www.lachema.com 24 – 141 mg/24 hodín < 500 mg/l Referenčné rozmedzie je iba orientačné, odporúča sa, aby si každé laboratórium overilo rozsah referenčného intervalu pre populáciu, pre ktorú zaisťuje laboratórne vyšetrenie. Výkonnostné charakteristiky Pracovný rozsah: 20 – 3 000 mg/l Presnosť (pri 37 °C) INTRA-ASSAY n = 20 Priemer (mg/l) SD (mg/l) CV (%) 178 5,23 2,94 Vzorka 2 450 5,10 1,14 Vzorka 3 1564 27,6 1,77 Priemer (mg/l) SD (mg/l) CV (%) Vzorka 1 170 3,94 2,32 Vzorka 2 449 9,68 2,16 Vzorka 3 1484 42,5 2,86 Vzorka 1 INTRA-ASSAY n = 20 Porovnanie: s komerčne dostupnou metódou. Lineárna regresia: N = 69, r = 0,990 y = 1,02x – 2,20 mg/l Interferencia Chyby spôsobené interferujúcimi zložkami v moči sú nižšie ako 2%. Poznámka 1. Vzorky s koncentráciou bielkoviny nad 3 000 mg/l sa riedia 1+1 0,9% roztokom NaCl a výsledok sa násobí 2x. 2. Vzorky s koncentráciou bielkoviny nižšou ako 20 mg/l sa použijú vo väčšom objeme, tj. napr. 0,05 ml vzorky a 1,0 ml činidla R1. Bezpečnostné charakteristiky Určené pre in vitro diagnostické použitie oprávnenou a profesionálne vyškolenou osobou. Činidlá súpravy nie sú klasifikované ako nebezpečné. Prvá pomoc Pri náhodnom požití vypláchnuť ústa a vypiť asi 0,5 l vody, pri postriekaní pokožky alebo vniknutí do oka vykonať rýchly a dôkladný výplach prúdom čistej vody. Vo vážnych prípadoch poškodenia zdravia vyhľadať lekársku pomoc. Zaobchádzanie s odpadmi Na všetky spracované vzorky je nutné pozerať ako na potencionálne infekčné a spolu s prípadnými zvyškami činidiel ich likvidovať podľa vlastných interných predpisov ako nebezpečný odpad v súlade so Zákonom o odpadoch. Papierové a ostatné obaly sa likvidujú podľa druhu materiálu ako triedený odpad (papier, sklo, plasty). Literatúra 1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed., Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1999, p. 477 –540. 2. Osronneau JL, Douet P., Massoubre C., Lustenberger P., Bernard S., An improved pyrogallol red-molybdate method for determining total urinary protein, Clin. Chem. 1989, 35:2233-6. Dátum poslednej revízie: 21. 1. 2011 BIO TEST ® Reference values fU protein fCFS URINE PROTEIN LIQUID 250 Cat. No. 10010222 (UP L 250) Store at (+2 to +8) °C Reagent for determination of proteins in urine or cerebrospinal fluid - method with pyrogallol red. Principle Proteins together with pyrogallol red/molybdate in acid medium form a red complex, suitable for photometric determination. Reagents R1Reagent 1 Pyrogallol red Sodium molybdate R2Standard Protein 5 x 50 ml 60 µmol/l 40 µmol/l 1 x 3 ml 1300 mg/l Reaction mixture Pyrogallol red Sodium molybdate 58.8 µmol/l 39.2 µmol/l Preparation and stability of working reagents Reagents R1 and R2 are liquid, ready to use. If stored at (+2 to +8) °C, reagents are stable until expiry date, that is stated on the package. After opening, reagents are stable until expiry date at (+2 to +8) °C if stored at appropriate conditions, closed carefully and without any contamination. Protect from light. Samples Urine or cerebrospinal fluid (CSF). Stability of proteins in urine is 1 day at (+20 to +25) °C and 2 days at (+2 to +8) °C and in cerebrospinal fluid 1 day at (+20 to +25) °C and 6 days at (+2 to +8) °C. Calibration For the calibration, it is recommended to use the standard included in the set. Quality control For quality control, it is recommended to use control urines. Procedure Wavelength 600 nm (580-600) nm Cuvette 1 cm Temperature (+20 to +25) °C, +37 °C Sample/reaction mixture ratio 1/51 Reagents and sample volume can be modified, by respecting reagents/sample volume ratio Reagent Standard Sample blank Reagent 1 1.000 ml 1.000 ml 1.000 ml Sample – – 0.020 ml Standard – 0.020 ml – Distilled water 0.020 ml – – Mix and incubate for 5 minutes. Then read absorbance of sample Asam and standard Ast against blank Abl, within 30 minutes. Applications for automatic analysers will be supplied on request. Calculation Total protein (mg/l) = Cst = standard concentration Asam – Abl Ast – Abl x Cst Unit conversation 1 g/l = 1 mg/l x 1000 Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 33 Brno, CZ e-mail: diagnostics@lachema.com, www.lachema.com 24 – 141 mg/24 hours < 500 mg/l The range of reference values is only approximate; it is recommended that each laboratory verify the extent of the reference interval for their particular examined population. Performance data Working range: 20 – 3 000 mg/l Precision (at 37 °C) INTRA-ASSAY n = 20 Mean (mg/l) SD (mg/l) CV (%) 178 5.23 2.94 Sample 2 450 5.10 1.14 Sample 3 1564 27.6 1.77 INTRA-ASSAY n = 20 Mean (mg/l) SD (mg/l) CV (%) Sample 1 170 3.94 2.32 Sample 2 449 9.68 2.16 Sample 3 1484 42.5 2.86 Sample 1 Correlation: with commercial available method. Linear regression N = 69, r = 0.990 y = 1.02x – 2.20 mg/l Interference Errors due to interfering components in urine are < 2%. Note 1. If the concentration of protein exceeds 3 000 mg/l, samples should be diluted 1+1 with 0.9% NaCl and the results multiplied by 2. 2. Samples with concentration lower then 20 mg/l should be used with higher volumes (for example 0.05 ml of sample and 1.0 ml of reagent). Health protection For in vitro diagnostic use. To be handled by entitled and ­professionally educated person. Reagents of the kit are not classified like dangerous. First aid In case of an accidental ingestion, wash up the mouth and drink about 0,5 l of water. On eye contact rinse the eye quickly and thoroughly with the jet of tap of water. Contaminated skin should be washed with warm water and soap. In all serious cases of health damage consult a physician. Waste disposal All tested samples should be treated as potentially infectious and with an eventual rest of reagents should be disposed in accordance with the internal regulations for dangerous waste, in compliance with local and national regulations relating to the safe handling of dangerous materials. Paper packing and others should be handed over for recycling or discarded as sorted waste (paper, glass, plastic). References 1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed., Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1999, p. 477 –540. 2. Osronneau JL, Douet P., Massoubre C., Lustenberger P., Bernard S., An improved pyrogallol red-molybdate method for determining total urinary protein, Clin. Chem. 1989, 35:2233-6. Date of last revision: 21. 1. 2011 BIO TEST ® Нормальные величины белок: в моче в спинномозговой жидкосте БЕЛОК В МОЧЕ LIQUID 250 Кат. No. 10010222 (UP L 250) Хранить при (+2 – +8) °C Набор реагентов для определения общего белка в моче и спинномозговой жидкости методом с пирогалловым красным. Метод Белок образует с пирогалловым красным/молибдатом в кислой среде комплекс красного цвета. Интенсивность окраски которого пропорциональна концентрации белка в образце и измеряется фотометрически. Реагенты R1 Реагент 1 Пирогалловый красный Натрия молибдат R2 Стандарт белок 5 x 50 мл 60 мкмоль/л 40 мкмоль/л 1 x 3 мл 1 300 мг/л Состав реакционной смеси Пирогалловый красный Натрия молибдат 58,8 мкмоль/л 39,2 мкмоль/л Приготовление и стабильность рабочих реагентов Реагенты R1 и R2 жидкие, готовые к использованию. Реагенты стабильны до достижения указанного срока годности, если хранятся при (+2 – +8) °C. После вскрытия, реагенты стабильны до указанного срока годности, если хранятся при (+2 – +8) °C, в тщательно закрытых флаконах, избегая испарения или контаминации реагентов. Предохранять от действия прямого света Образцы Моча, спинномозговая жидкость Стабильность белка: в моче 1 день при (+20 – +25) °C и 2 дня при (+2 – +8) °C, в спинномозговой жидкости 1 день при (+20 – +25) °C и 6 дней при (+2 – +8) °C. Калибровка Для калибровки рекомендуется использовать стандарт, включенный в набор Контроль качества Для проведения контроля качества рекомендуется контрольнaя мочa. Проведение анализа Длина волны 600 нм (580-600) нм Оптический путь 1 см Температура (+20 – +25) °C, +37 °C Образец/реакционная смесь 1/51 Объемы образца и реагентов могут быть изменены при сохранении соотношения реагент/образец Бланк по Стандарт Образец реагенту Реагент 1 1,000 мл 1,000 мл 1,000 мл Образец – – 0,020 мл Стандарт – 0,020 мл – Дистил. вода 0,020 мл – – Перемешать, инкубировать 5 мин. Измерить оптическую плотность стандарта Aст и образца Aобр, против бланка Aбл. в течение 30 мин Протоколы для работы на автоматических анализаторах могут быть получены по запросу. Расчеты Общий белок (мг/л) = Сст. – концентрация стандарта Aобр – Aбл Aст – Aбл 24 – 141 мг/24 часа < 500 мг/л Приведенные величины следует рассматривать как ориентировочные. Каждой лаборатории необходимо определять свои диапазоны. Рабочие характеристики Диапазон измерений: 20 – 3 000 мг/л Воспроизводимость (при 37 °C) Внутрисерийная (число измерений n =20) Среднеарифметическое значение (мг/л) SD (мг/л) CV (%) 178 5,23 2,94 Образец 2 450 5,10 1,14 Образец 3 1564 27,6 1,77 Среднеарифметическое значение (мг/л) SD (мг/л) CV (%) Образец 1 170 3,94 2,32 Образец 2 449 9,68 2,16 Образец 3 1484 42,5 2,86 Образец 1 Внутрисерийная (число измерений n =20) Сравнение методов Сравнение было проведено на 69 образцах с использованием реагентов Erba Lachema (у) и имеющихся в продаже реагентов с коммерчески доступной методикой (х). N = 69, r = 0,990 y = 1,02x – 2,20 мг/л Специфичность/Влияющие вещества: Влияние компонентов мочи на результаты < 2%. Примечание 1. Образцы с концентрацией общего белка выше 3 000 мг/л, развести физиологическим раствором в соотношении 1:1. Полученный результат умножить на 2. 2. Образцы с концентрацией ниже 20 мг/л следует исследовать с увеличенным объемом образца (объем образца 0,05 мл, объем реагента 1,0 мл). Меры предосторожности Набор реагентов предназначен для in vitro диагностики профессионально обученным лаборантом. Набор реагентов не относится к категории опасных. Первая помощь При приеме внутрь следует прополоскать рот водой, выпить 0,5 л воды и вызвать рвоту. При попадании в глаза быстро промыть их проточной водой. При попадании на кожу необходимо промыть теплой водой с мылом. Во всех серьезных случаях обратиться к врачу. Утилизация использованных материалов Все образцы теста должны рассматриваться как потенциально инфицированные и вместе с остальными реагентами должны быть уничтожены в соответствии с существующими в каждой стране правилами для данного вида материалов. Бумажная упаковка и другое (бумага, стекло, пластик) должны быть рассортированы для выброса с мусором или отправления на переработку. Литература 1. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed., Philadelphia: W.B. Saunders Company, 1999, p. 477–540. 2. Osronneau JL, Douet P., Massoubre C., Lustenberger P., Bernard S., An improved pyrogallol red-molybdate method for determining total urinary protein, Clin. Chem. 1989, 35:2233-6. Дата проведения последнего контроля: 21. 1. 2011 x Cст Пересчет единиц 1 г/л = 1 мг/л x 1000 Erba Lachema s.r.o., Karásek 1d, 621 33 Brno, CZ e-mail: diagnostics@lachema.com, www.lachema.com В случае любых вопросов обращайтесь в Представи­тельство Erba Lachema s.r.o. в Москве. Tел/факс: 095-755 78 51, 095-755 55 80.