Материал для исследований

«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
1
НИИ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ МИНЗДРАВА РОССИИ
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННАЯ ФИРМА “ЛИТЕХ”
Кудрявцева Л.В., Конарева Т.Н.,Горбатенко Е.В., Попова Т.И.,Говорун В.М.
ПРАВИЛА
взятия и доставки биологического материала
для лабораторных исследований
в НПФ “Литех”
(методическое пособие для врачей-клиницистов)
МОСКВА 2005 г
СОДЕРЖАНИЕ
ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ .................................................................................................................... 2
ИССЛЕДОВАНИЕ ГОРМОНОВ, АНТИГЕНОВ И АНТИТЕЛ............................................................ ...........................................................................4
ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА ИЗ ГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ
ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ НА КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ И АТИПИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ .....................................................................20
ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ПЦР ИССЛЕДОВАНИЙ.....................................................22
ВЗЯТИЕ ДОСТАВКА И ХРАНЕНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ...................26
Для получения достоверных результатов любого из существующих на сегодняшний день методов лабораторных исследований необходимо учитывать ряд факторов, оказывающих негативное влияние на его
результаты.
К этим факторам можно отнести:
I. Состояние пациента, предшествующее взятию у него биологического материала для исследования.
II. Свойства биологического материала.
III. Условия взятия, временного хранения и транспортировки биологического материала.
Первая группа факторов должна приниматься во внимание прежде всего врачом, назначающим лабораторное исследование пациенту и указываться в направлении на исследование. Все факторы, входящие в эту группу можно разделить на две категории:
1. факторы, которые должны быть указаны при любом виде лабораторного исследования – пол, возраст, основной диагноз;
2. факторы, которые указываются при некоторых видах лабораторных исследований - национальность, физиологическое состояние (беременность, наличие сопутствующих заболеваний, фаза менструального цикла), прием лекарственных препаратов, прием пищи, голодание, курение, прием алкоголя.
Ко второй и третьей группе факторов относятся - стабильность анализируемого биологического материала и его возможный метаболизм in vitro. От этого зависят необходимость использования специальных
контейнеров с консервантами и транспортных сред для временного хранения, а также условия транспортировки биологического материала в лабораторию (соблюдение температурного режима и влажности).
Так, наиболее простой и в то же время эффективной мерой служит соблюдение единого правила взятия крови натощак, утром, в положении пациента лежа или сидя. Существенную помощь при этом может
оказать применение различных устройств типа “вакутейнеров”. При использовании “вакутейнеров” сокращается время взятия крови за счет ее ускоренного всасывания в вакуумную пробирку, где кровь немедлен-
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
2
но вступает в контакт с необходимым для сохранения аналита консервантом.
При проведении цитологического исследования влагалищного отделяемого на бактериальный вагиноз
для правильного приготовления мазков полученное отделяемое наносится на предметное стекло и равномерно мягким движением, не применяя грубого втирания, равномерно распределяется на предметном
стекле. После чего, мазок фиксируют высушиванием при комнатной температуре.
При исследовании методом ПЦР взятие материала для анализа производится только одноразовыми
инструментами (иглами, тампонами, зондами, одноразовыми стерильными щетками для соскоба эпителия)
в пластиковые пробирки одноразового использования с реактивом из набора “ДНК-ЭКСПРЕСС”.
Взятие биологического материала и его транспортировка для проведения бактериологического исследования являются наиболее ответственными этапами, обеспечивающими успех микробиологических исследований по выделению микроорганизмов из различного клинического материала. При взятии биологического материала медицинский персонал должен использовать спецодежду – халаты, перчатки. При
опасности возникновения аэрозолей должны использоваться защитные очки и маски.
Нарушение правил взятия биологического материала чревато нежелательными последствиями экономического (излишняя трата расходных материалов) и медицинского характера (повторное взятие биологического материала у пациента, задержка результатов лабораторного исследования, возможность медицинских ошибок).
Общими требованиями к взятию и транспортировке биологического материала являются:
1. Соблюдение оптимальных сроков для взятия биологического материала на исследование.
2. Взятие биологического материала должно осуществляться с учетом места максимальной локализации возбудителя и возможных путей его выделения в окружающую среду.
3. Биологический материал для исследования должен быть взят в необходимом и достаточном объеме с обеспечением условий, исключающих его контаминацию резидентной микрофлорой. Недостаточное
количество материала может определять ложноотрицательный результат исследования.
4. Взятие биологического материала должно производиться строго до начала применения антибактериальных и химиотерапевтических препаратов или не ранее чем через 10-14 дней после их отмены.
5. Отобранный биологический материал должен быть промаркирован. В сопроводительном документе-направлении необходимо указать: пол, фамилию, имя, отчество, возраст пациента, предполагаемый
диагноз или показания к обследованию, дату взятия пробы, какое учреждение направляет материал. При
необходимости указывается и дополнительная информация – физиологическое состояние пациента, курение, прием алкоголя и т.д.
6. Контейнеры для транспортировки материала должны обеспечивать герметичность, стерильность,
целостность образцов, а также – исключать при открытии образование аэрозоля.
7. Материал доставляется в лабораторию с учетом правил транспортировки для различных видов исследований и лицами, получившими специальный инструктаж. При направлении материала на исследование, прежде всего, необходимо исключить вероятность контаминации собранного биологического материала.
В случае несоблюдения правил взятия и условий доставки биологического материала образцы
не подлежат лабораторному исследованию и об этом сообщается врачу, направившему биологический материал на исследование.
ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ
ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИФА И ПЦР
Подготовка обследуемых
Взятие венозной крови производится натощак, в утренние часы. При взятии венозной крови необходимо учитывать ряд факторов которые могут повлиять на результат гематологических исследований: физическое перенапряжение (бег, быстрая ходьба, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение, прием
пищи накануне исследования, купение, прием алкоголя и т.д. Для исключения этих факторов, следует соблюдать следующие условия подготовки пациентов:
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
-
взятие венозной крови осуществляется после 15-минутного отдыха обследуемого;
-
пациент во время взятия сидит, у тяжелых больных взятие крови может осуществляться лежа.
-
курение, прием алкоголя и пищи непосредственно перед исследованием исключаются;
3
Основной способ взятия венозной крови для лабораторного исследования – пунктирование вены.
Венозную кровь, как правило, забирают из локтевой вены. В случае необходимости ее можно получить из
любой вены (запястья, тыла ладони, над большим пальцем и т.д.). У новорожденных и грудных детей кровь
обычно берется из лобной, височной или яремной вены.
При взятии крови из вены необходимо избегать: мест шрамов, гематом; вен, используемых для переливания растворов; ножных вен (у больных диабетом, при нарушениях периферического кровотока, ангиопатиях).
Оборудование
Для венепункции можно использовать три варианта пункционных систем:
- одноразовые пластиковые системы (вакутейнеры), состоящие из контейнера с навинчивающейся на
него одноразовой иглой и пробирки с плотно прилегающей пробкой и вакуумом внутри;
- одноразовые шприцы с подходящим диаметром иглы;
- иглы с внутренним диаметром 0,55-0,65 мм.
Условия транспортировки венозной крови
Правильно собранная венозная кровь должна быть своевременно доставлена в лабораторию. При
комнатной температуре время доставки не должно превышать 60 мин после взятия крови. Если доставка
крови в лабораторию осуществляется в течении дня, то она хранится при температуре +40С-+60С (в холодильнике) и далее в специальных транспортных контейнерах в ледяной бане доставляется в лабораторию.
Во время транспортировки пробирки и контейнеры с кровью должны быть соответствующим образом
защищены от вредного воздействия окружающей среды и погодных условий. При транспортировке венозной крови должны строго соблюдаться правила техники безопасности, асептики и антисептики.
Пробирки должны быть промаркированы, упакованы и плотно закрыты. Упаковка должна быть удобной
для транспортировки. Сроки хранения зависят от исследуемого показателя, температуры хранения и антикоагулянта, с помощью которого осуществляется взятие крови.
Методика получения сыворотки крови
(без использования разделительных или вспомогательных средств для центрифугирования)
Оборудование
1. Центрифужные стеклянные пробирки общим объемом 10-12 мл.
2. Стеклянные палочки или Пастеровские пипетки с запаянными на конце капиллярами (для отделения
сгустка).
3. Центрифуга лабораторная (до 3000 об/мин).
Приготовление сыворотки
Венозная кровь, полученная без антикоагулянтов в центрифужную стеклянную пробирку, отстаивается
в ней при комнатной температуре (15-200С) в течение 30 минут до полного образования сгустка. По окончании образования сгустка пробирки открывают и осторожно проводят тонкой стеклянной палочкой или запаянным капилляром Пастеровской пипетки по внутренним стенкам пробирки по окружности в верхнем
слое крови для отделения столбика сгустка от стенок пробирки. Сыворотку сливают в другую центрифужную пробирку, придерживая сгусток стеклянной палочкой, и центрифугируют, либо центрифугируют в тех
же, первичных, пробирках.
Центрифугирование
После ретракции сгустка пробы центрифугируют при относительной центробежной силе RCF от 1000
до 1200 xg (максимально до 1500 xg) в течение 10 минут.
В случае использования микропробирок и центрифуги для них центрифугирование проводят при 600015000 xg в течение 1,5 минут. После центрифугирования сыворотку сливают во вторичные (транспортные)
пробирки. Сыворотка не должна быть гемолизированной.
Плазма получается из крови путем отделения клеток крови. Она представляет собой бесклеточную надосадочную жидкость, которая получается при центрифугировании крови, свертываемость которой инги-
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
4
бирована добавлением антикоагулянтов тотчас после взятия. В плазме содержатся факторы свертывания
крови. В связи с тем, что плазма и сыворотка содержат около 93% воды, в отличие от цельной крови, которая содержит около 81% воды, концентрация компонентов в плазме на 12% выше, чем в цельной крови.
Это может иметь принципиальное диагностическое значение при исследовании активности, например ЛДГ
у которого наиболее высокая концентрация наблюдается в сыворотке крови, чем в плазме.
Широко применяются коммерческие системы для получения плазмы. Они представляют собой
пробирки или устройства типа шприцев (“вакутейнер”) с вакуумом внутри, содержащие различные антикоагулянты и/или ингибиторы гликолиза. Как и в случае устройств для сыворотки, эти пробирки для плазмы
имеют разные варианты, содержащие разделительные гели и гранулят из полистирола, ускоряющие получение плазмы, облегчающие транспортировку и хранение. В них уже имеются антикоагулянты и метки до
которых следует набирать кровь.
Методика получения плазмы
Приготовление плазмы
Венозную кровь, полученную с антикоагулянтом немедленно после взятия перемешивают переворачиванием пробирок с кровью, закрытых крышками, не менее 5 раз. Перемешивание должно осуществляться
без встряхивания и пенообразования. Время между началом наложения жгута и смешиванием крови с антикоагулянтом не должно превышать 2 минут.
После уравновешивания пробирок с кровью, их центрифугируют при RCF 1000-1200 xg, но не более
1500 xg, в течение 10-15 минут. Плазму немедленно сливают в транспортную центрифужную или химическую пробирку. Пробирку закрывают крышкой.
Условия транспортировки плазмы крови
Правильно полученная и собранная плазма крови должна быть своевременно доставлена в лабораторию. При комнатной температуре время доставки не должно превышать 24 часа. Если доставка плазмы в
лабораторию осуществляется в течение дня, то она хранится при температуре +4...+80С (в холодильнике)
и далее в специальных транспортных контейнерах в ледяной бане доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения плазма может быть заморожена при температуре –200С.
Правила транспортировки плазмы такие же как и венозной крови.
ИССЛЕДОВАНИЕ ГОРМОНОВ, АНТИГЕНОВ И АНТИТЕЛ
ЛЮТЕИНИЗИРУЮЩИЙ ГОРМОН (лютропин, ЛГ)
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Особенности подготовки пациента
Накануне взятия крови необходимо сключить физические нагрузки, прием алкоголя, жирной пищи и
психологические стрессы. За час до взятия крови исключается курение. Во время взятия обследуемые
должны находиться в покое, сидя или лежа, натощак.
Взятие, хранение и доставка материала для исследования
Кровь берут в чистую, сухую, пластмассовую пробирку. При необходимости транспортировки отделяют
сыворотку или плазму, которые тотчас замораживают. В лабораторию доставляют не менее 1 мл сыворотки или плазмы или 2 мл крови.
У женщин до менопаузы обязательно указать в направлении день и фазу менструального цикла.
При повторных исследованиях необходимо соблюдать одно и то же время взятия.
ЛГ стабилен при хранении сыворотки или плазмы 1 день при комнатной температуре, 3 дня - при +40С+8 С и 1 год при -200С.
0
После размораживания сыворотку или плазму следует тщательно перемешать. Возможны повторные
замораживания и оттаивания (до 3 раз при хранении -700С). Уровень ЛГ в плазме подвержен суточным колебаниям: наиболее высокий он с 1 до 5 ч утра, минимальный с 15 до 17ч. Колебания в течение дня могут
составлять 100-300%. Осенью наблюдается пик секреции ЛГ. В пубертатный период во время сна секреция
ЛГ больше, чем в период бодрствования.
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
5
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня ЛГ в крови
При обследовании женщин репродуктивного возраста необходимо учитывать тот факт, что у них уровень ЛГ в крови подвержен физиологическим колебаниям и напрямую связан со стадией менструального
цикла: наибольшие величины ЛГ отмечаются в период овуляции (середина цикла), наименьшие в конце
фолликулиновой фазы.
Во время беременности происходит снижение ЛГ. В первые месяцы жизни у детей уровень гормона в
сыворотке выше, чем у подростков в препубертатном периоде. В пубертатном периоде уровень ЛГ в сыворотке одинаков у подростков обоих полов. У девушек к концу пубертатного периода ЛГ достигает максимальных величин. У юношей и мужчин ЛГ меньше, чем у женщин. В возрасте 60-90 лет средняя концентрация ЛГ нарастает как у мужчин, так и у женщин. У женщин в состоянии постменапаузы отмечаются высокие уровни ЛГ.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня ЛГ в крови
При булемии, ожогах, у мужчин с ожирением, при психологических стрессах, у курильщиков, при хирургических вмешательствах отмечается снижение ЛГ. При использовании ЭДТА, физических нагрузках и тренировках, при голодании и уремии наблюдается увеличение ЛГ.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень ЛГ в крови
Снижению ЛГ способствует прием следующих препаратов: анаболические стероиды, антиконвульсанты, будерелин, карбамазепин, конъюгированные эстрогены, ципротерон, даназол, диэтилстильбестрол, дигоксин, допамин, гозерелин, мегестрол, метандростенолон, норэтиндрон, октреотид, пероральные контрацептивы, фенотиазид, фенитоин, тимозид, правастатин, прогестерон, станозолол, тамоксифен, тиоридазин, торимефен, вальпроевая кислота.
Повышению ЛГ способствует прием таких препаратов, как: бомбезин, бромокриптин, клалифен, финастерид, газерелин (в первый месяц лечения), кетоконазол, местранол, нафаремид, налоксон, нилутамид,
окскарбазепин, фенитоин, спиронолактон, тамоксифен, тролеандомицин.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня ЛГ в крови
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Дисфункция гипофиза
Аменорея
Нарушение функции гипофизаили гипоталамуса (гипопитуитаризм)
Атрофия гонад у мужчин после воспаления яичек вледствие свинки, гонореи, бруцеллеза
Синдром галактореи-аменореи
Синдром Штейна-Левенталя
Синдром Каллмана
Первичная гипофункция гонад
Прием кломифена, спиронолакНевротическая анорексия
тона
Задержка роста и полового созревания
Прием дигоксина, мегестрола, фенотиазина, прогестерона, эстрогенов
ФОЛЛИТРОПИН (Фолликулостимулирующий гормон, ФСГ)
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Хранение и доставка материала для исследования
Стабильность ФСГ в плазме или сыворотке в закрытой пробирке сохраняется 2 недели при комнатной
температуре или при температуре +40С - +80С, 1 год при –200С.
Билирубин (концентрация 513 мкмоль/л), липемия при концентрации триглицеридов 1г/л не мешают
определению. Циклические колебания в течение дня составляют 50% и менее выражены, чем у ЛГ.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня ФСГ в крови
У подростков в препубертатном периоде ФСГ ниже, чем у взрослых людей. У женщин уровень ФСГ в
середине менструального цикла сопровождает овуляторный подъем ЛГ, в лютеиновой фазе происходит
снижение ФСГ. В постменопазуальный период уровень ФСГ почти в 10 раз превышает уровень до менопаузы, во время беременности происходит резкое снижение ФСГ, почти до неопределяемых величин. У
мужчин к 60-65 годам уровень ФСГ увеличивается. Летом уровень ФСГ у здоровых мужчин повышается.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня ФСГ в крови
Физические нагрузки у одних людей приводят к увеличению, а у других к снижению ФСГ; голодание,
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
6
ожирение, контакт со свинцом, хирургические вмешательства вызывают снижение ФСГ; курение, нарушение функции почек при уремии, воздействие рентгеновских лучей вызывают увеличение ФСГ в плазме.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень ФСГ в крови
Снижению ФСГ способствует прием следующих препаратов: анаболические стероиды, бузерелин,
карбамазепин, конъюгированные спирогены, даназол, диэтилстильбестрол, гозерелин, мегестрол, сетранол, пероральные контрацептивы, фенолиафен, фенитоин, пимозид, правастатин (при лечении в течение 2
лет), станозолол, аналоги кортикотропин-рилизинг-гормона в середину лютеиновой фазы (но не в другие
фазы) менструального цикла, тамоксифен (у женщин в менопаузе), торемифен, вальпроевая кислота; бомбезин, бромокриптин, циметидин, кломифен, гонадотропин-рилизинг-гормон, соматотропный гормон.
Повышению ФСГ способствует прием таких препаратов, как: рилизинг-гормон, кетоконазол, леводопа,
нафарелин, налоксон, нилутамид, окскарбазепин, фенитоин, правастатин (через 6 мес после лечения), тамоксифен (у мужчин с олигозооспермией и у женщин в пременопаузе) – увеличение.
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Семинома
Первичная гипофункция гипофиза
Менопауза, вызванная нарушением функции Прием лекарственных препаратов эстрогенов, прогестерона, фенояичников
тиазина
Первичная гипофункция гонад
Синдром Клайнфелтера
Синдром Шерешевского-Тернера
Кастрация
Эктопические опухоли
Ранняя фаза гиперфункции гипофиза
Прием кломифена, леводопа
ТИРЕОТРОПНЫЙ ГОРМОН (Тиреотропин, ТТГ)
Материал для исследования Сыворотка или плазма
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня ТТГ в крови
У здоровых новорожденных при рождении отмечается резкий подъем уровня ТТГ в крови, и к к концу 1й недели жизни он достигает уровня как у взрослых. У женщин концентрация ТТГ в крови выше, чем у мужчин примерно на 20%. С возрастом концентрация ТТГ незначительно повышается. Для ТТГ характерен суточный ритм: наивысших величин ТТГ в крови достигает к 2-4 ч ночи, в утренние часы наибольший уровень
в крови определяется в 6 ч утра, минимальные значения ТТГ отмечаются в 17-18 ч вечера. У женщин
среднего возраста и старых мужчин максимальный пик ТТГ в сыворотке крови приходится на декабрь.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня ТТГ в крови
Булимия, тепловой стресс, голодание, преморбидное состояние, курение, хирургические вмешательства вызывают снижение ТТГ в сыворотке; прекращение курения, электроконвульсивная терапия, упражнения на велоэргометре, контакт со свинцом, беременность (III триместр), преэклампсия, некоторые хирургические вмешательства (холецистэктомия), гемодиализ – увеличение.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень ТТГ в крови
Снижению ТТГ способствует прием следующих препаратов: амиодарон (гипертиреоидные больные),
анаболические стероиды, апоморфин, аспирин, бомбезин, клофибрат, кортикостероиды, цитостатики, диназол, добутамин, допамин, допексамин, фенолдропан, фудариковая кислота, глюкокортикоиды, соматотропин-рилизинг-гормон, гидрокортизон, интерферон-2, иодоамид и другие рентгеноконтрастные средства,
иозамицин, левотироксин, лизурид, метерголин, нифедипин, октреотид, перибедил, пимозид, пиридоксин,
соматостатин, тироксин, периорфинпронин, тролеандомицин.
Повышению ТТГ способствует прием таких препаратов, как: аминоглютетимид, амиодарон (у эутириоидных и гипотиреоидных больных), атенолол, бензеразид, кальцитонин, хлорпромазин, кломифен, домперидон, эритрозин, сульфат железа, флунаризин, фуросемид, иобензаминовая кислота, иодиды, глицерин с
йодом, иопаноевая кислота, иподейт, литий, ловастатин, метимазол, метоклопрамид, метопролол, моноиодтирозин, морфин, фенитоин, паразосин, преднизон, пропранолол, рифампин, тиротропин-рилизинггормон, тиропаноевая кислота, вальпроевая кислота.
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Первичная гипофункция щитовидной железы
Первичная гиперфункция щитовидной железы
Подострый тиреоидит
Гипоталамно-гипофизарная недостаточность
Тиреоидит Хашимото
Опухоль гипофиза
Опухоль гипофиза
Послеродовой некроз гипофиза
Эктопическая секреция при опухолях легкого,
молочной железы
Прием гормонов щитовидной железы
Эндемический зоб
Синдром Иценко-Кушинга
Воспаление щитовидной железы
Прием ацетилсаллициловой кислоты, гепарина, кортикостероидов
7
Состояние после иодотерапии
Рак щитовидной железы
ПРОЛАКТИН (лактогенный гормон, лактотропин)
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Хранение и доставка материала для исследования
Пролактин стабилен в сыворотке 1 день при комнатной температуре, 3 дня при +4...+80С, 1 год – при –
20 С. Присутствие в сыворотке или плазме крови билирубина в концентрации 256,5 мкмоль/л может привести к снижению показателей пролактина при использовании для их определения иммунофлюорометрических методов.
0
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня пролактина в крови
В физиологических условиях наиболее высокие показатели пролактина определяя-ются в пуповинной
крови и у новорожденных (уровень более чем в 10 раз выше, чем у взрослых). К 2-12 годам пролактин достигает уровня как у взрослых. Во время пубертатного периода отмечается его повышение. У женщин пролактин в сыворотке выше, чем у мужчин. Во время менструального цикла в лютеиновую фазу уровень пролактина выше, чем в фолликулиновую. Во время беременности начиная с 8-й недели начинается повышение уровня пролактина, которое достигает максимальных цифр к концу III триместра. После родов происходит его снижение и далее увеличение в период лактации. Пролактин подвержен суточным колебаниям,
в утренние часы отклонение составляет 100%.
Максимальные уровни пролактина у мужчин отмечаются в 5 ч утра, у женщин - между 1 ч и 5 ч. В некоторых случаях у мужчин наблюдается 2 пика между 20 и 22 ч и 4 и 8 ч. Во время сна пик между 5 и 7 ч,
снижается после пробуждения и вставания.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня пролактина в крови
Снижение в плазме пролактина вызывают старение, прием алкоголя и алкогольная абстиненция, голодание, гипотермия, диета с низким содержанием жиров, вегетарианская диета, плохое питание, в некоторых случаях – физический стресс (военные учения) и физические упражнения, курение у женщин , водные
процедуры; увеличение - алкоголизм, анастезия энфлураном, электроконвульсивная терапия, велоэргометрическая нагрузка и другие физические упражнения, прием пищи, тепловая нагрузка и различные виды
стрессов (тепловой, физический, психический), курение у мужчин, нарушение функции почек (уремия).
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень пролактина в крови
Снижению пролактина способствует прием следующих препаратов: антиконвульсанты, апоморфин,
бомбензин, бромкриптин, кабеоголин, кальцитонин, карбамазепин, конъюгированные эстрогены, циклоспорин А, дексаметазон, допамин, леводопа, метоклопрамид (при пероральном приеме), морфин (обычный
ответ), нифедипин, рифампин, питансерин, ропинерол, секретин, тамоксифен, тергурид, вальпроевая кислота.
Повышению пролактина способствует прием таких препаратов, как: амитриптилин, амоксапин, аргинин, азосемид, бензеразид, бетаперазин, буторфанол, кальцитонин, карбидопа, хлорофенилперазин,
хлорпромазин, циметидин, кломипрамин, даназол, дефенфлурамин, феноидопам, флунаризин, флуфеназин, фуросемид, перидол, имипрамин, инсулин, лабетолол, локсапин, мегестрол, местранол, метилдопа,
метоклопрамид (внутривенное введение, долговременный пероральный прием больших доз), молиндон,
окись азота, пероральные контрацептивы, оксабазепин, паратиреоидный гормон, пентагастрин, перфеназин, фенитоин, пимозид, прохлорперазин, ранитидин, ремоксиприд, резерпин, салперид, салтроприд, триэтилперазин, тиоридазин, тиопиксен, тиротропин-рилизинг-гормон, тримипрамин, вералипред, верапамил,зимедин, зотепин.
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
8
Заболевания и состояния, при которых изменяется концентрация пролактина
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Пролактинпродуцирующие опухоли гипофиза
Хирургическое удаление гипофиза
Идиопатическая пролактинемия: у женщин-нарушение менсраций и бесплодие; у мужчин-импотенция
Рентгенотерапия
Гипофункция щитовидной железы
Лечение бромокриптином
Почечная недостаточность
Прием тироксина
Повреждение грудной клетки
Факторы, вызывающие гипергликемию
Травма, хирургическое вмешательство
Опоясывающий лишай
Прием производных фенотриазина, галоперидола, имизина, αметилдорфа, больших доз эстрогенов, аргинина, опиатов, постинсулиновая гипогликемия
ЭСТРАДИОЛ общий
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Хранение и доставка материала для исследования
Эстрадиол стабилен в цельной крови и сыворотке или плазме при комнатной температуре в течение 1
дня, при +4...+80С – 3 дня, при –200С – 1 год.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня эстрадиола в крови
В крови из пуповины концентрация общего эстрадиола очень высока. Далее до 10 лет происходит его
снижение. В пубертатном периоде у девочек эстрадиол прогрессивно увеличивается, у мальчиков увеличение эстрадиола происходит в меньшей степени. У женщин детородного возраста уровень эстрадиола в
сыворотке крови и плазме зависит от фазы менструального цикла. Наиболее высокий уровень эстрадиола
отмечаются в позднюю фолликулярную фазу, в середине цикла особенно, и в лютеиновую фазу. Во время
беременности концентрация эстрадиола в сыворотке и плазме нарастает к моменту родов, а после родов
она возвращается к норме на 4-й день.
С возрастом у женщин наблюдается снижение концентрации эстрадиола. В постменопаузу отмечено
снижение концентрации эстрадиола до уровня, наблюдаемого у мужчин. Суточные колебания концентрации эстрадиола в сыворотке соответствуют суточным концентрациям ЛГ: максимум приходится на период с
15 до 18 часов при снижении в это время иммунореактивного ЛГ, а минимум – между 24 и 2 ч. У мужчин
наиболее высокие уровни эстрадиола приходятся на осень.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня эстрадиола в крови
При алкоголизме у женщин в постменопаузе, при булимии, физической нагрузке у нетренированных
женщин, диете с высоким содержанием углеводов, грубо-волокнистой пищи, с низким содержанием жиров,
у курящих женщин в ранние сроки беременности, у вегетарианцев наблюдается снижение концентрации
эстрадиола в плазме. Его повышение наблюдается при приеме алкоголя, алкоголизме у женщин с циррозом печени, у женщин с ожирением, у курящих мужчин по сравнению с некурящими, при большой потере
веса у мужчин.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень эстрадиола в крови
Снижению эстрадиола способствует прием таких препаратов, как: аминоглютетимид, бузерелин, химиотерапевтические препараты, циметидин, ципротерон, даназол, дексаметазон, эпостан, фадронолгестрел, мегестрол, мекартрицин, мифепристон (при выкидыше), моклобемид, нафарелин, нандролон, октреотид, пероральные контрацептивы, правастатин, пиридоглютетимид.
Повышению эстрадиола способствует прием таких препаратов как: анаболические стероиды, карбамазепин, циметидин (у мужчин и у женщин в постменопаузу при лечении дозами 2,4 г/сут в течение 1 мес),
кломифен, постменопаузе у женщин, кетоконазол (у гиперандрогенных женщин), мифепристон (у пациентов с менингиомами), нафарелин (при подкожном введении при синдроме поликистоза яичников), фенитоин, тамоксифен, тролеандомицин, вальпроевая кислота.
9
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
Уровень эстрадиола для беременных
Срок беременности (нед)
Эстрадиол pg/ml
Срок беременности (нед)
Эстрадиол pg/ml
1-2
210-400
21-22
8260-11460
3-4
380-680
23-24
10570-13650
5-6
1060-1480
25-26
10890-14090
7-8
1380-1750
27-28
11630-14490
9-10
1650-2290
29-30
11120-16220
11-12
2280-3120
31-32
12170-15960
13-14
2760-4300
33-34
13930-18550
15-16
5020-6580
35-36
15320-21160
17-18
4560-7740
37-38
15080-22850
19-20
7440-9620
39-40
13540-26960
ТЕСТОСТЕРОН (свободный и общий)
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня тестостерона в крови
У новорожденных мальчиков концентрация общего и свободного тестостерона в крови больше, чем у
девочек. К 5-7 мес его концентрация снижается у детей обоих полов, но у мальчиков уровень тестостерона
в крови все равно остается несколько выше. Далее, к пубертатному возрасту, концентрация тестостерона
в крови несколько нарастает. В 12-14 лет и старше отмечается тенденция к резкому нарастанию концентрации тестостерона в крови. Так, у мужчин уровень общего тестостерона более чем в 1,6 раза, а свободного тестостерона более чем в 25 раз выше, чем у женщин. После 25 лет и далее происходит снижение
общего и свободного тестостерона в сыворотке у мужчин. У беременных женщин концентрация тестостерона нарастает к III триместру, превышая почти в 3 раза концентрацию у небеременных женщин.
Максимальные концентрации тестостерона в крови определяются в 2-4 ч ночи, а минимальные - в 2024 ч. Вторичный подъем концентрации тестостерона может наблюдаться после дневного сна. У женщин
концентрация тестостерона связана с менструальным циклом. Так, максимальная концентрация определяется в лютеиновой фазе и в период овуляции. У мужчин наибольший уровень тестостерона в крови определяетя осенью.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня тестостерона в крови
У мужчин алкоголизм и ожирение, голодание, вегетарианская диета, физические тренировки, психологический стресс могут привести к снижению общего и свободного тестостерона. У женщин прием алкоголя
в менопаузе, как и сама менопауза, ожоги, диета с низким содержанием жиров, плохое питание вызывают
снижение общего тестостерона. Курение может вызвать как увеличение общего и свободного тестостерона, так и снижение общего тестостерона. Потеря веса у женщин с ожирением вызывает снижение свободного тестостерона. При тепловом стрессе как у мужчин, так и у женщин происходит снижение общего тестостерона.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень тестостерона в крови
Снижению общего тестостерона способствует прием таких препаратов, как: общего даназол в низких
дозах, бузерин, карбамазепин, циметидин, циклофосфамид, ципротерон, дексаметазон, дипиридоглютетимид, гозерелин, кетоконазол, леупролид, левоноргестрел, сульфат магния, метандростенолон, метилпреднизолон, метирапон, нафарелин (у женщин), нандролон, октреотид, пероральные контрацептивы у женщин,
правастатин (у мужчин), преднизон, пиридоглютетимид, спиронолактон, станозолол, тетрациклин, тиоридазин. Снижению свободного тестостерона способствует прием таких препаратов, как: антиконвульсанты,
вальпроевая кислота.
Повышению общего тестостерона способствует прием таких препаратов как: даназол при клиническом применении дегидроэпиандростерон, финастерин, флутамид, гонадотропин (у мужчин), гозерелин (в
первый месяц лечения), левоноргестрел, мифепристон, моклобемид, нафарелин (у мужчин), нилутамид,
пероральные контрацептивы У женщин), фенитоин , правастатин (у женщин), рифампин, тамоксифен.
10
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
ПРОГЕСТЕРОН
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови, свободные от гемолиза.
Хранение и доставка материала для исследования
Прогестерон стабилен в сыворотке или плазме в герметично закрытой пробирке в течение 1 дня, при
+40С - +80С- 3 дня, при -200С - 1 год, при -700С - неопределенно долгое время.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня прогестерона в крови
У новорожденных концентрация прогестерона выше, чем у детей 1-10 лет. К концу пубертатного периода происходит повышение концентрации прогестерона у девочек. У мужчин концентрация прогестерона
ниже, чем у женщин. У женщин в норме концентрация прогестерона зависит от фазы менструального цикла
и максимальна в середине лютеиновой фазы. В постменопаузе происходит снижение концентрации прогестерона до уровня концентрации у мужчин. При наступлении беременности происходит нарастание уровня прогестерона до 40 недели беременности. Снижение концентрации прогестерона в плазме наблюдается при угрозе выкидыша.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень прогестерона в крови
Снижению прогестерона в плазме способствует прием таких препаратов, как: ампициллин, карбамазепин, ципротерон, даназол, эпостан, эстриол, гозерелин, леупромид, пероральные контрацептивы, фенитоин, правастатин, простагландин F2.
Повышению прогестерона способствует прием таких препаратов как: кломифен, кортикотропин, кетоконазол, мифепристон, прогестерон и его синтетические аналоги, тамоксифен, вальпроевая кислота.
Заболевания и состояния, при которых изменяетсяконцентрация прогестерона
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Пролактинпродуцирующие опухоли гипофиза
Хирургическое удаление гипофиза
Идиопатическая пролактинемия: у женщин-нарушение менсраций и бесплодие; у мужчин-импотенция
Рентгенотерапия
Гипофункция щитовидной железы
Лечение бромокриптином
Почечная недостаточность
Прием тироксина
Повреждение грудной клетки
Факторы, вызывающие гипергликемию
Травма, хирургическое вмешательство
Опоясывающий лишай
Прием производных фенотриазина, галоперидола, имизина,αметилдорфа, больших доз эстрогенов, аргинина, опиатов, постинсулиновая гипогликемия
ТИРОКСИН СВОБОДНЫЙ (FT4) И ОБЩИЙ (Т4)
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Подготовка пациента
При взятии крови нельзя использовать дезинфицирующие средства, содержащие йод.
Взятие, хранение и доставка материала для исследования
Если взятие крови произведено в поликлинике НИИ ФХМ РФ, то пробирку с кровью немедленно доставляют в лабораторию. Если для проведения исследования необходимо получить плазму, кровь центрифугируют. После центрифугирования отделяют сыворотку от сгустка и клеток крови и помещают в холодильник при +40С - +80С или замораживают при –200С. На одно определение требуется 0,05-1,0 мл сыворотки в зависимости от методики.
Т4 стабилен в сыворотке в течение 2 дней при комнатной температуре, 7 дней – при +40С - +80С, 1 мес
– при –200С. Хранение с охлаждением предпочтительней.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня тироксина в крови
У здоровых новорожденных концентрация свободного и общего Т4 выше, чем у взрослых. У взрослых
уровень Т4 и FT4 после 40 лет снижается с возрастом. У женщин концентрация тироксина ниже, чем у
мужчин. Во время беременности концентрация тироксина нарастает, достигая максимальных величин в III
триместре.
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
11
В течение года максимальные величины Т4 наблюдаются в период между сентябрем и февралем, максимальные – в летнее время. В течение дня максимальная концентрация тироксина определяется с 8 до
12 ч , минимальная - с 23 до 3 ч.
Гемолиз, многократное оттаивание и замораживание сыворотки могут привести к снижению результаторв для Т4. Высокие концентрации билирубина в сыворотке способствуют завышению результатов. При
проведении анализа на тироксин необходимо учитывать тот факт, что наличие консерванта ЭДТА при проведении анализа дает ложнозавышенные результаты для FT4. Голодание, плохое питание с низким содержанием белка, контакт со свинцом, тяжелые мышечные упражнения и тренировки, различные виды
стрессов, потери веса у женщин при ожирении, хирургические операции, гемодиализ могут способствовать
снижению показателей Т4 и FT4. Гиперемия, ожирение, прерывание приема героина (вследствие увеличения транспортных белков) вызывают увеличение Т4, героин снижает FT4 в сыворотке крови. Курение вызывает как занижение, так и завышение результатов исследования на тироксин. Наложение жгута при взятии крови с работой и без “работы рукой” вызывает увеличение Т4 и FT4.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень тироксина в крови
При клиническом применении снижение Т4 вызывают: аминоглютетимид, аминосалициловая кислота,
аспарагиназа, аспирин, атенолол, барбитураты, бромокриптин, карбамазепин, карбимазол, хлорпропамид,
холестирамин , кортикотропин, кортизон, ко-тримоксазол, цитостатики, задазол (у женщин в постменопаузе), дегидроэриандростерон, дексаметазон, диазепам, диазокрасители, динитрофенол, этионамид, Эванс
блю, глюкокортикоиды, гидроксифенил-пировиноградная кислота, интерферон, иодиды (131I), иотиурацил
интраконазол, кетоконазол, лиотиронин, ловастатин, метил, пеницилламин, пенициллин фенотиазин, дериваты фенилуксусной кислоты, примидон пропилтиоурацил, станозолол, дериваты сульфонилмочевины,
тербутамин, тетрахлортиронин, толбутамид, трииодтиронин, вальпроевая кислота; снижение Т4 и FT4 вызывают: амиодарон, анаболические стероиды, противосудорожные средства (при длительном лечении, у
беременных женщин с эпилепсией), клофибрат, фенклофенак, фуросемид, изотретинонны, препараты лития, метимазол, фенобарбитал, фенилбутазон, фенитоин, ранитидин. Увеличению Т4 способствует прием
таких препаратов как: амиодарон, декстратироксин, эфир (при глубоком наркозе), флуороурацил, инсулин,
иобензаминовая кислота, иподат, леводопа, левоатеренол, местранол, метадон, опиаты, пероральные
контрацептивы, фенотиазин, празосин, простагландины, стильбестрол, тамоксифен, тиреолиберин, тиротропин, тиропаноевая кислота; увеличению Т4 и FT4 способствует прием таких препаратов как: амиодарон (в начале лечения и при длительном лечении), иопаноевая кислота (ингибирует превращение Т4 в
Т3), левотироксин, пропранолол, пропилтиоурацил, препараты гормонов щитовидной железы.
Кроме того, снижение FT4 вызывают левотироксин, местранол, метадон, октреотид, пероральные контрацептивы, а увеличение FT4- аспирин, даназол, фуросемид, галофенат, радиографические препараты,
тамоксифен, вальпроевая кислота.
Заболевания и состояния, при которых изменяется концентрация Т4 (общ)
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Гипертиреоз
Гипофункция щитовидной железы
Острый тиреодит
Повышенная потеря белка (почечный синдром)
Беременность
Синдром Иценко-Кушинга
Лечение тироксином
Прием андрогенов
Ожирение
Значительный дефицит иода
Гепатит
Физическая нагрузка
Прием эстрогенов (пероральных контрацептивов),
героина, тиреоидных препаратов
Пангипопитуитаризм
Потеря белка через ЖКТ
Прием кортикостероидов резерпина, сульфаниламидов, пенициллина, иодида калия
Заболевания и состояния, при которых изменяется концентрация Т4 (своб)
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
См. Т4 (общ)
Гипофукция щитовидной железы; Повышенная потеря белка (почечный синдром); Синдром Иценко-Кушинга; Прием
андрогенов; Значительный дефицит иода ; Физическая нагрузка; Пангипопитуитаризм; Потеря белка через ЖКТ; Прием кортикостероидов резерпина, сульфаниламидов, пенициллина, иодида калия; Резекция щитовидной железы; Рак
щитовидной железы; Передозировка тиреостатиками
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
12
ТРИИОДТИРОНИН СВОБОДНЫЙ (FT3) И ОБЩИЙ (Т3)
Материал для исследования Сыворотка или плазма крови.
Хранение и доставка материала для исследования
Т3 в сыворотке или плазме стабилен при комнатной температуре 2 дня, но предпочтительнее хранение
при +40С - +80С - в течение 8 дней или при -200С - в течение 3 мес. FT3: 7 дней - при комнатной температуре, предпочтительно при 40С, 30 дней - при -200С.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня триодтиронина в крови
Концентрация Т3 в сыворотке новорожденных через 2 суток после рождения составляет 1/3 от концентрации у взрослых. К 11-15 годам концентрация Т3 достигает уровня взрослых. У мужчин и женщин старше
65 лет наблюдается снижение Т3 и FT3 в сыворотке и плазме. При беременности значительного увеличения Т3 и Т4 не происходит. Незначительное увеличение Т3 и Т4 отмечается в III триместре беременности.
Через неделю после родов показатели Т3 и Т4 в сыворотке нормализуются. FT3 снижается от I к III триместру. У женщин отмечаются более низкие концентрации Т3 и FT3, чем у мужчин в среднем на 5 - 10%. Для
показателей Т3 и FT3 характерны сезонные колебания: максимальный уровень трииодтиронина приходится на период с сентября по февраль, минимальный - на летний период. При голодании плохом питании с
низким содержанием белков, низкокалорийной диете, тяжелых физических нагрузках у женщин, потере веса у пациентов Т3 снижается. Увеличение Т3 наблюдается при нарастании веса тела, физических упражнениях. При наложении жгута с целью взятия крови на 3 мин без “работы рукой“ возможно увеличение Т3
примерно на 10%. Снижение FT3 наблюдается также при большой потере веса при ожирении у женщин,
увеличение - при физических упражнениях.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня трииодтиронина в крови
После абортов, при острых заболеваниях, электроконвульсивной терапии, гемодиализе, гипертермии,
плазмоферезе, у недоношенных новорожденных, тяжелых заболеваниях, преморбидных состояниях Т3
снижается. Увеличение Т3 наблюдается при гемодиализе, героиномании, прерывании приема героина.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень рииодтиронина в крови
Снижение трииодтиронина в крови происходит при приеме таких препаратов как: алпренолол, амиодарон, анаболические стероиды, антиконвульсанты, аспарагиназа, аспирин, атенолол, карбамазепмн, карбимазол, холестирамин, циметидин, кломифен, кломипрамин, колестипол, даназол, дексаметазон, фенклофенак, фуросемид, глюкокортикоиды, гидрокортизон, интерферон-альфа-2, иобензамиковая кислота, иодиды, иопаноевая кислота, иподат, изотетионин, препараты лития, метимазол, метопролол, неомицин, нетилмицин, пероральные контрацептивы, пеницилламин, фенобарбитал, дериваты фенилуксусной кислоты,
фенилбутазон, фенитоин, преднизон, пропранолол, пропилтиоурацил, радиографические препараты дляхолецистографии, салицилаты, соматостатин, станозол, дериваты тиомочевины, тиропаноевая кислота.
Заболевания и состояния, при которых изменяется концентрация Т3
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Тиреотоксикоз
Послеоперационные состояния и тяжелые заболевания
Т3-тиреотоксикоз
Гипофункция щитовидной железы
Недостаток иода
Острый и подострый тиреоидит
Состояние после лечения препаратами радиоактивного
йода
Прием андрогенов, дексаметазона, пропранолола, салицилатов,
производных кумарина
Эндемический зоб
Синдром Пандреда
Прием эстрогенов, перроральных контрацептивов, метадона, героина
КОРТИЗОЛ, ОБЩИЙ
Материал для исследования Плазма или сыворотка крови.
Хранение и доставка материала для исследования
При хранении цельной крови в герметично закрытой пробирке при комнатной температуре, при хранении плазмы при комнатной температуре и при +4-80С кортизол стабилен 7 дней, при -200С - 3 мес.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня кортизола в крови
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
13
Наименьшая концентрация кортизола в плазме определяется у новорожденных на первой неделе
жизни. С возрастом она увеличивается, причем более достоверно у женщин. Суточный ритм секреции кортизола формируется приблизительно к 3-му году жизни и проявляется более высокими концентрациями
гормона в дневные часы, а более низкими ночью. Максимальный уровень кортизола в плазме и моче определяется с 4 до 8 ч (пик с 4 до 6 ч), минимальный - с 21 до 3 ч. Концентрация кортизола в сыворотке в 20 ч
отличается от концентрации в 8 ч более чем на 50% . Во время беременности концентрация кортизола может повышаться с нарушением суточного ритма. В связи с этим исследования кортизола в случайных пробах могут быть малоинформативны. Так, например, при синдроме Иценко-Кушинга изменяется не только
уровень кортизола в сыворотке, но и его суточный ритм.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня кортизола в крови
Различные виды стрессов (психологический, физический, холодовой, тепловой и др.), булемия, прием
алкоголя, алкоголизм, физические нагрузки, электрососудистая терапия, голодание, прием пищи, предменструальный синдром (приливы в менопаузе), курение хирургические операции, травмы, уремия вызывают
увеличение кортизола в плазме. Потеря веса при ожирении, ожирение, прерывание запоев, прием пищи
(как этап после повышения кортизола через 30-90 мин) сопровождаются снижением его.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень кортизола в крови
Снижение кортизола наблюдается при лечении барбитуратами, беклометазоном, бетаметадоном,
клонидином, дексаметазоном, дезоксикортикостероном, декстроамфитамином, эфедрином, этомидатом,
кетоконазолом, леводопа, сульфатом магния, метирапоном, мидазоламом, метилпреднизолоном, морфином, окисью азота, препаратами лития, триамсинолоном (при длительном лечении).
Увеличение кортизола наблюдается при приеме атропина, ангиотензина II, АКТГ, кортикотропинрилизинг-гормон, кортизон, циклический АМФ, синтетических глюкокортикоидов, эстрогенов, глюкагона, инсерлина, интерферонов (a-2, b, g), интерлейкина-6, опиатов, пероральных контрацептивов, вазопрессина.
ДЕГИДРОЭПИАНДРОСТЕРОН-СУЛЬФАТ (ДГЭА-С)
Материал для исследования Плазма (предпочтительнее) или сыворотка крови.
Подготовка пациента Накануне исследования необходимо исключить лекарства, влияющие на уровень ДЭА-С в плазме, физические нагрузки, курение, введение и прием глюкозы.
Хранение и доставка материала для исследования
В герметично закрытом сосуде ДЭА-С стабилен в плазме 1 день при комнатной температуре, 2 недели
– при 4-80С и в течение нескольких лет – при –200С.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня ДЭА-С в крови
У новорожденных, особенно недоношенных, концентрация ДЭА-С в плазме повышена, затем резко
снижается в течение первой недели жизни. За несколько лет до периода полового созревания и в этот период концентрация ДЭА-С в плазме увеличивается. Далее, с возрастом происходит прогрессированное
снижение ДЭА-С у мужчин и женщин. Определенного суточного ритма у этого гормона не выявлено. Во
время беременности его концентрация в плазме снижается.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня ДЭА-С в крови
Алкоголизм, прием 75 г глюкозы, тяжелые заболевания вызывают снижение ДЭА-С. Физические нагрузки, голодание, курение – увеличение.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень ДЭА-С в крови
Из лекарств при клиническом применении снижение ДЭА-С в плазме вызывают карбамазепин, ципротерон, дексаметазон, дипиридоглютетимид, пиридоглютетимид, кетоконазол, пероральные контрацептивы,
фенитоин, преднизолон. Увеличение ДЭА-С в плазме наблюдается при приеме таких препаратов как:
кломифен, кортикотропин, даназол, ДЭА, мифепристон, нитрендипин, вальпроевая кислота.
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
14
17-КЕТОСТЕРОИДЫ (17-КС)
Материал для исследования Моча (суточная).
Подготовка пациента За 3 недели до исследования необходимо исключить лекарства, влияющие на
определение 17-КС. Накануне исследования исключаются физические нагрузки, курение, стрессы.
Взятие, хранение и доставка материала для исследования
Мочу собирают в чистый широкогорлый сосуд с крышкой.
По окончании сбора мочи необходимо измерить объем выделенной мочи мерным цилиндром, тщательно перемешать и затем, порцию в количестве 20 мл доставить в лабораторию. В направлении на исследование необходимо указать объем мочи, время сбора, консервант, возраст и пол обследуемого.
Мочу можно хранить в холодильнике при +40С - +80С в течение 2 недель, при –200С – в течение длительного времени.
Физиологические состояния приводящие к изменению уровня 17-КС в моче
У новорожденных детей и детей в возрасте 15 лет содержание 17-КС в моче ниже, чем у взрослых. С
возрастом экскреция 17-КС увеличивается. После 30-40 лет наблюдается постепенное снижение концентрации 17-КС в моче. У мужчин экскреция 17-КС выше, чем у женщин. Во время беременности экскреция
увеличивается. Пик экскреции наблюдается в утренние часы, а минимальное выделение – ночью. Зимой
содержание 17-КС в моче выше, чем летом.
Лекарственные препараты, оказывающие влияние на уровень 17-КС в моче
Снижение 17-КС при клиническом применении вызывают аминоглютетимид, бутаметазон, кортикостероиды, кортикотропин, кортизон, флуоксиместерон, меперидин, метандростенолон, метронидазол, пероральные контрацептивы, оксиметолон, фенотиазин, фенитоин, пробенецид, пропоксифен, пиразанинамид;
Увеличение 17-КС наблюдается при приеме таких препаратов как: хлорпромазин, хлорталидон, кортикотропин, даназол, гонадотропин, нандролон, тестолактон, тестостерон.
Заболевания и состояния, при которых изменяется концентрация 17-КС в моче
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Синдром Иценко-Кушинга
Адреноенитальный синдром
Андрогенпродуцирующие опухоли коры надпочечников
Опухоли яичек
Синдром Штейна-Левенталя
Аденома и рак надпочечников
Синдром эктопической продукции АКТГ
Прием анаболитических стероидов, производных фенотиазина, мепробомата, пенициллина, производных наперстянки, спиронолактона, кортикотропина, метирапона, цефалоспоринов, тестостерона, эритромицина, кетопрофена, гонадотропина, поливитаминов
Болезнь Адиссона
Гипофункция гипофиза
Повреждение паренхимы печени
Гипопитуитаризм
Гипотиреоз
Нефроз
Кахексия
Прием резерпина, производных бензодиазепина, дексаметазона, эстрогенов, пероральных контрацептивов, кортикостероидов, глюкозы
ЭСТРИОЛ (FE3) СВОБОДНЫЙ И ОБЩИЙ
Материал для исследования Сыворотка крови.
Диагностическое значение эстриола при беременности
Эстриол – главный стероидный гормон, синтезируемый плацентой.
Во время беременности уровень эстриола постепенно возрастает до 40 недели. Пониженный уровень
эстриола или его резкое снижение свидетельствует о патологическом состоянии плода. Определение
уровня свободного или общего эстриола используют для мониторинга беременности. Изменение уровня
свободного эстриола при ухудшении состояния плода происходит быстрее, по сравнению с уровнем общего эстриола.
Заболевания и состояния при которых возможны изменения уровня эстриола в крови
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
15
Определение эстриола во время беременности необходимо для наблюдения за состоянием фетоплацентарной системы (мониторинг состояния плода в III триместре беременности), а также для диагностики нарушения сульфатазной активности плаценты, которая происходит при редком врожденном заболевании, связанном с Х-хромосомой (диагностика хромосомных аббераций). Отсутствие этого фермента блокирует синтез эстриола из предшественников, а это, в свою очередь, приводит к резкому снижению уровня
эстриола во время беременности, без каких либо признаков неблагополучия плода. Такие беременности
достаточно часто заканчиваются хирургическим вмешательством в процесс родов и рождением младенца
мужского пола с признаками ихтиоза, которые появляются вскоре после рождения.
Определение уровня свободного эстриола используют для пренатальной диагностики синдрома Дауна.
Заболевания и состояния, при которых изменяется концентрация свободного эстриола
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Резкий подъем при вероятности
преждевременных родов
При патологии беременности (выраженные пороки развития ЦНС у плода, врожденные пороки сердца, синдром Дауна, задержка роста плода, резус-конфликт,
анемия плода, пиелонефрит, недостаточность питания, гемоглобинопатии, гипоплазия надпочечников плода, внутриутробная смерть плода)
Прием пенициллина
Уровень свободного эстиола для беременных
Срок беременности (недели)
Уровень свободного эстриола в крови (нмоль/л)
Медиана, нмоль/л
Нормативные пределы, нмоль/л
6-7
1.2
0.6-2.5
8-9
1.6
0.8-3.5
10-12
4.0
2.3-8.5
13-14
8.0
5.7-15.0
15-16
10.0
5.4-21.0
17-18
12.0
6.6-25.0
19-20
15.0
7.5-28.0
21-22
24.0
12.0-41.0
23-24
28.0
18.2-51.0
25-26
31.0
20.0-60.0
27-28
32.0
21.0-63.5
29-30
35.0
20.0-68.0
31-32
38.0
19.5-70.0
33-34
43.0
23.0-81.0
35-36
52.0
25.0-101.0
37-38
64.0
30.0-112.0
39-40
65.0
35.0-111.0
17 ГИДРОКСИПРОГЕСТЕРОН (17 ОН-Р)
Материал для исследования Сыворотка крови.
Показания к проведению анализа:
-врожденная гиперплазия надпочечников в результате ферментативной недостаточности;
-недостаточность 21-гидроксилазы у новорожденных;
-частичная или поздняя ферментная недостаточность (уровень 10 ОН-Р в норме или повышен);
-бесплодие.
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
16
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОНКОМАРКЕРОВ
Материал для исследования Сыворотка крови.
РЭА (раково-эмбриональный антиген)
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня РЭА:
- рак желудка
- рак толстой кишки
- рак прямой кишки
- рак легких
- рак молочных желез
- рак яичников
- рак матки
- рак простаты
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня РЭА:
- у курильщиков
- ХПН
- хронические заболевания печени, поджелудочной железы
- язвенный колит
- ХНЗЛ
- аутоимунные заболевания
АФП (альфа-фетопротеин)
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня АФП:
- первичный рак печени
- метастазы злокачественных опухолей в печень
- рак яичника
- рак яичка
- рак желудка
- рак толсттой кишки
- рак поджелудочной железы
- рак молочной железы
- бронхиальные опухоли
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня АФП:
- острый вирусный гепатит
- хронический гепатит
- ХПН
- цирроз печени
Исследование АФП проводится при наблюдении за больными с положительным анализом на НВsAg
для обнаружения рецидива заболевания и, прежде всего, для раннего выявления малигнизации.
Возможно физиологическое повышение АФП при беременности.
Средние нормы концентрации АФП для беременных:
Срок беременности (нед)
АФП мМЕ/мл
7-9
6-15
10-13
10-40
14
12-60
15
15-74
16
17-100
17
21-123
18
21-138
19
21-159
20
25-177
21
28-195
22
35-250
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
17
Наследственные заболевания, сопровождающиеся изменением концентрации АФП
Увеличение концентрации
Снижение концентрации
Пороки развития нервного канала плода
Синдром Дауна
Гидроцефалия плода
Врожденная атрезия пищевода
Тетрада Фалло
Липоидный некроз плода
ПСА (специфический антиген простаты)
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня ПСА:
- рак простаты
- рак легких
- рак прямой кишки
- гепатоцеллюлярная карцинома
- рак почек
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня ПСА:
- доброкачественная гиперплазия простаты
- простатит
- механическое раздражение простаты
В случае, если уровни ПСА находятся между 4-10 нг/мл желательно определить сПСА.
Содержание свободной фракции ПСА в сыворотке крови при раке предстательной железы значительно
ниже, чем в норме и при доброкачественном процессе. На этом основана дифференциальная диагностика
рака и гиперплазии этого органа.
Сущность исследования заключается в параллельном определении общего ПСА и свободной фракции
ПСА и расчете процента их соотношения:
Свободный ПСА
——————————- Х 100%
Общий ПСА
Определение свободной фракции ПСА показано при увеличении общего ПСА. При значениях этого соотношения ниже 15% требуется проведение УЗИ и биопсии. Если этот показатель выше 15%, необходимы
наблюдение и повторное обследование серез 6 месяцев.
ХГЧ (хорионический гонадотропин человека)
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня ХГЧ:
- рак яичек
- рак яичников
- пузырный занос
- рак желудка
- рак печени
- рак тонкой или толстой кишки
- рак почек
- рак яичников
- рак матки
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня :ХГЧ
- у женщин в менопаузе с миомой или кистой яичника
Возможно физиологическое повышение ХГЧ при беременности
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
Средние нормы концентрации ХГЧ для беременных
Срок беременности (недели)
Уровень b- ХГЧ в крови (МЕ/л)
Медиана, МЕ/л
Нормативные пределы, МЕ/л
1-2
150
50 - 300
3-4
2 000
1 500 - 5 000
4-5
20 000
10 000 - 30 000
5-6
50 000
20 000 - 100 000
6-7
100 000
50 000 - 200 000
7-8
70 000
20 000 - 200 000
8-9
65 000
20 000 - 100 000
9-10
60 000
20 000 - 95 000
10-11
55 000
20 000 - 95 000
11-12
45 000
20 000 - 90 000
13-14
35 000
15 000 - 60 000
15-25
22 000
10 000 - 35 000
26-37
28 000
10 000 - 60 000
СА 15-3
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 15-3:
- рак молочных желез
- бронхогенная карцинома
- рак желудка
- рак печени
- рак поджелудочной железы
- рак яичников
- рак эндометрия
- рак матки
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 15-3:
- доброкачественные заболевания молочных желез
- доброкачественные заболевания ЖКТ
- ХНЗЛ
Возможно физиологическое повышение СА 15-3 при беременности.
СА 125
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 125:
- рак яичников
- рак матки
- рак эндометрия
- рак молочной железы
- рак поджелудочной железы
- рак прямой кишки
- рак желудка
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 125 :
- доброкачественные заболевания яичников и эндометрия
- почечная недостаточность
- острый панкреатит, острый гепатит
- цирроз печени
Возможно физиологическое повышение СА 125 при беременности.
СА 19-9
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 19-9:
18
19
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
-
рак поджелудочной железы
рак желчного пузыря или желчных путей
первичный рак печени
рак желудка
рак прямой и сигмовидной кишки
рак молочной железы
рак яичника
рак матки
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 19-9 :
- острый, токсический и хронический гепатиты
- холецистит
- желчнокаменная болезнь
- цирроз печени
СА 72-4
Злокачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 72-4:
- рак пищевода
- рак желудка
- рак поджелудочной железы и желчевыводящих путей
- рак толстой кишки
- рак яичника, шейки матки или эндометрия
- рак молочной железы
Доброкачественные процессы при которых наблюдается повышение уровня СА 72-4:
- острый панкреатит
- хронический бронхит
- язвенная болезнь желудка
- воспалительные заболевания пищеварительного тракта
- цирроз печени
- цирроз печени
Комбинация опухолевых маркеров
Локализация опухоли
Маркер
РЭА
АФП
СА-19.9
СА-72.4
СА-125
СА-15.3
b-ХГЧ
Рак толстой кишки (прямой кишки)
Рак поджелудочной железы
Рак желудка
Рак пищевода
Гепатокарцинома
Рак билиарных протоков
Рак молочной железы
Рак яичников
Рак шейки матки
Мелкоклеточный рак легкого
Немелкоклеточный рак легкого
Рак простаты
Рак щитовидной железы
Опухоли носоглотки
Герминогенные опухоли яичка и яичника
Хорионкарцинома
Условные обозначения: степень значимости маркера для конкретной опухоли
высокая
средняя
дополнительный маркер
ПСА
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
20
ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ДОСТАВКИ МАТЕРИАЛА
ИЗ ГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ
НА КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ И АТИПИЧЕСКИЕ КЛЕТКИ
Цитологическое исследование в настоящее время – признанный полноценный метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала. Цитологическому исследованию подвергаются все женщины с выявленой патологией шейки матки, а при отсутствии таковой – цитологическому
обследованию подлежат возрастные группы женщин старше 30 лет. Профилактический осмотр женщин с
цитологическим исследованием должен проводиться не менее 1 раза в год.
Материал для исследования
Соскоб из цервикального канала и влагалищной части шейки матки, аспират или соскоб из заднего
нижнего свода влагалища, соскобы с пораженных участков вульвы, наружного зева, аспираты из полости
матки, пунктаты яичника или новообразований в стенке влагалища.
Подготовка пациентки и взятие биологического материала
В течении 24 часов перед исследованием не следует проводить спринцевание, а так же необходимо
исключить применение интравагинальной терапии. Нельзя брать материал во время менструации. Для цитологических исследований взятие материала проводит врач-гинеколог.
Для получения материала для исследования используют следующие инструменты: шпатель Эйра
(предназначен для получения экто-цервикальных мазков и мазков заднего свода), спиретте (специальное
аспирационное приспособление, предназначенное для экто- эндоцервикальной аспирации и проведения
посткоитусных тестов), скринет (предназначен для взятия эндо-цервикальных мазков), эндобраш (предназначен для взятия эндометриальных мазков), нейлоновые щеточки (Cervex-Brush), гинекологический пинцет, корнцанг, желобоватый зонд, ложечки Фолькмана, гинекологические зеркала и др. Все инструменты
должны быть стерильными и сухими.
Влагалищная часть шейки матки, наружный зев, цервикальный канал
Для получения опптимальных результатов необходимо отдельно собирать эктоцервикальные и эндоцервикальные образцы. Взятие материала осуществляется до бимануального исследования. Шейку матки
при помощи зеркал тщательно осматривают, затем без предварительной обработки слегка соскабливают
поверхность патологически измененного участка или всей влагалищной части шейки вокруг наружного зева. Из полученного соскоба делают один тонкий равномерный мазок во всю длину предметного стекла.
При взятии материала шпателем Эйра возможно получить материал одновременно с поверхности
шейки матки, из зева и нижней трети цервикального канала. Шпатель Эйра имеет на одном конце неравные тупые кончики. Один, более длинный и узкий, вставляется в наружный зев цервикального канала, другой, более низкий и широкий, прилегает к поверхности шейки матки. Вращательными движениями при легком надавливании получают соскоб. Далее, этим же шпателем с полученным материалом делают тонкие
мазки, получая на одном стекле сразу две полоски: в одной материал из нижней трети цервикального канала и наружного зева, в другой – с поверхности шейки матки. Далее мазки должны быть зафиксированы
посредством высушивания на воздухе.
Специальная конструкция для взятия эндоцервикальных мазков, скринет является обязательным
дополнением к шпателю Эйра при проведении скрининга рака шейки матки. Скринет позволяет получить
богатый клетками, хорошо сохраняющийся материал, что гарантирует улучшение качества получаемых
мазков и показателей скрининга онкологической патологии. Будучи доступным в двух размерах, скринет
может быть легко введен в любой цервикальный канал, в частности женщин постменопаузного периода.
Скринет обеспечивает абсолютно безвредный доступ к зоне перехода эпителия влагалища в призматический эпителий цервикального канала, что особенно важно при ее высоком расположении.
Для взятия биологического материала скринет плавно вводится в цервикальный канал. Далее, для получения мазка необходимо сделать только одно вращение (слишком большое количество оборотов может
отрицательно сказаться на целостности клеток). После взятия биологического материала скринет, без совершения дополнительных вращательных движений, плавно выводится из шейки матки. Взятый биологический материал наносится на чистое обезжиренное стекло одним вращательным движением (по анологии
с получением материала) и затем высушивается на воздухе.
При взятии биологического материала с помощью спиретте возможно проведение экто- и эндоцервикальной аспирации. После введения инструмента в шейку матки его дистальный конец подводится к
месту, откуда необходимо взять образец ткани (эндо- или эктоцервикс). Аспирационный эффект достигает-
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
21
ся передвижением внутреннего поршня. После взятия образца биологического материала спиретте извлекается из шейки матки. Затем обратным движением поршня полученный образец биологического материала наносится на предметное стекло и фиксируется, высушиванием на воздухе.
Кроме того, слущенные клетки можно получить с помощью мазков отпечатков со слизистой оболочки
влагалища и шейки матки. В этом случае мазки готовят из соскобов шпателем, содержимое которых наносчятся на предметное стекло в виде отпечатков.
Материал отдельно из цервикального канала можно получить при помощи гинекологического пинцета,
желобоватого зонда, ложечки Фолькмана и др. или путем аспирации содержимого цервикального канала.
Взятие материала из цервикального канала проводят только после удаления цервикальной слизистой
пробки. Исследуемый материал, нанесенный на сухое, обезжиренное предметное стекло должен быть обязательно высушен на воздухе. Подсушенное стекло (мазок) маркируется.
К каждому стеклу должен прилагаться бланк-направление на цитологическое исследование, номер которого должен соосветствовать номеру (маркировке) мазка. В бланке указывается: учреждение, проводившее взятие биологического материала и дата его взятия; фамилия, имя, отчество обследуемой женщины;
ее возраст, дата последней менструации, место взятия биологического материала, клинический диагноз;
при отсутствии патологии необходимо указать, что шейка матки без изменений.
Влагалище
Взятие образцов проводится путем аспирации содержимого заднего свода или соскоба со слизистой
оболочки. Аспирация содержимого из заднего свода должна проводиться под визуальным контролем при
исследовании зеркалами, при этом необходимо использовать несмазанные зеркала и получать материал
до пальцевого исследования. При осмотре с использованием влагалищных зеркал вводят свободный конец канюли до заднего свода, содержимое насасывают в канюлю резиновой грушей, аспират выдувают на
сухое обезжиренное предметное стекло и делают тонкий мазок краем шлифованного стекла.
Содержимое заднего свода представляет собой случайно накопленный пул из разных отделов генитального тракта, поэтому его исследование целесообразно проводить только как ориентировочное. При
патологических находках необходимо тщательное исследование материала из отдельных мест.
Материал из заднего свода может быть использован также для оценки микробиоценоза влагалища. Образцы материала из влагалища берут до манипуляций в шейке. Соскабливание проводится сверху вниз в передней, задней и боковых стенках влагалища.
При наличии опухоли в стенке влагалища производят пункцию тонкой иглой.
Эндометрий
Использование эндобраш позволяет легко и безболезненно брать эндометриальные цитологические
мазки при отсутствии необходимости тракции или расширения цервикального канала. Перед взятием мазков эндометрия необходимо исключить возможность наличия беременности, вагинита или цервицита. Все
манипуляции на эндометрии могут проводиться только при условии полного излечения инфекций слизистой влагалища и шейки матки.
При обследовании ряда женщин менопаузного периода, использование эндобраш может оказаться неоправданным, ввиду наличия стенотических изменений цервикального канала.
После наложения зеркал и обработки шейки матки антисептическим раствором мандрен эндобраш вытягивается так, чтобы его щетка полностью исчезла внутри внешней части инструмента, а его колпачек,
расположенный на дистальном конце закрыл дистальную часть внешнего контура эндоброш. Затем, инструмент плавно вводится в полость матки до тех пор, пока дистальный колпачек не достигнет дна матки
(нанесенные на инструменте метки помогают определить размеры полости матки). Перед началом взятия
мазков наружная часть инструмента смещается вниз, освобождая находящуюся внутри щетку. Далее делается одно или два вращательных движения мандреном вправо или влево для получения соскобов со
стенок матки. После этого, наружная часть инструмента смещается в исходное положение для сохранения
полученного биологического материала и эндобраш полностью извлекается из полости матки. Полученный
материал наносится на предметное стекло и фиксируется на воздухе.
Вульва
С вульвы материал берут при подозрении на рак. Область поражения тщательно обрабатывают изотоническим раствором хлорида натрия или слабым дезинфицирующим раствором для удаления элементов
воспаления и некротических масс. Промокают салфеткой и делают соскоб шпателем или каким-либо другим инструментом с несколько заостренными краями.
22
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
ВЗЯТИЕ, УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ
ПРОВЕДЕНИЯ ПЦР ИССЛЕДОВАНИЙ
И
ДОСТАВКИ
МАТЕРИАЛА
ДЛЯ
УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ ХЛАМИДИОЗ
Материал для исследования Соскоб из уретры или цервикального канала, секрет предстательной
железы, осадок мочи. У новорожденных в качестве материала для исследования используют соскоб с
конъюктивы глаз и задней стенки глотки. У девочек в качестве материала для исследования используют
соскоб из вульвы, у мальчиков - мочу.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки За 10
дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные
процедуры.
В связи с тем, что Clamydia trachomatis является внутриклеточным паразитом и размножается только
внутри клеток циллиндрического эпителия уретры или цервикального канала для получения адекватного
результата необходимо, чтобы исследуемый материал содержал возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи и примеси крови. Присутствие в исследуемом материале
большого количества слизи и примеси крови могут привести как к ложноположительным, так и ложноотрицательным результатам.
Особенности взятия материала из уретры
- перед взятием материала пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,52 часов;
- непосредственно перед взятием материала наружное отверстие уретры необходимо обработать
тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором;
- при наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала;
-
у женщин перед введением зонда в уретру проводится ее массаж о лобковое сочленение;
- в уретру у женщин зонд вводится на глубину 1,0-1,5 см, у мужчин – на 3-4 см и затем делается несколько вращательных движений; у детей материал для исследования берут только с наружного отверстия
уретры;
После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После
внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до
момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –200С.
Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
Особенности взятия материала из цервикального канала
- перед взятием материала необходимо удалить ватным тампоном слизь и затем обработать шейку
матки стерильным физиологическим раствором;
-
зонд вводится в цервикальный канал на глубину 0,5-1,5 см;
- при наличии эрозий цервикального канала необходимо их обработать стерильным физиологическим раствором, и материал следует брать на границе здоровой и измененной ткани;
-
при извлечении зонда необходимо полностью исключить его касание со стенками влагалища;
После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После
внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –
200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В
замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
Особенности взятия секрета предстательной железы
Перед взятием секрета простаты головка полового члена обрабатывается стерильным ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором. Секрет простаты берется после предварительного массажа
простаты через прямую кишку. Врач проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными движе-
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
23
ниями от основания к верхушке. Затем из кавернозной части выдавливается простатитческий секрет.
Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике.
Особенности взятия (сбора) мочи
Мочу собирают утром натощак после сна или не ранее чем через 2-3 часа после последнего мочеиспускания. Утренняя моча отстаивается в течение 1 часа, затем осторожно сливается, оставляя только придонную часть – около 10 мл. Этот остаток сливают в центрифужную пробирку и центрифугируют. Затем
надосадочную жидкость вновь сливают, а осадок (без жидкости ) зондом переносят в пробирку для ПЦР.
До получения осадка мочу нельзя охлаждать или замораживать.
Особенности взятия материала с задней стенки глотки
Одноразовый зонд вводят за мягкое небо в носоглотку и проводят по задней стенке глотки. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента
его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном
виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
Особенности взятия материала с конъюктивы глаз
При наличии обильного гнойного отделяемого его убирают стерильным ватным тампоном, смоченным
физиологическим раствором. Соскоб берут с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. При взятии соскоба необходимо придерживать веко руками, чтобы при моргании
ресницы не касались зонда.
После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После
внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка плотно закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до
момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –200С.
Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
УРОГЕНИТАЛЬНЫЙ МИКОПЛАЗМОЗ
Материал для исследования Отделяемое уретры, влагалища, цервикального канала, моча (центрифугат утренней первой и средней порций), секрет простаты, сперма.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки См. урогенитальный хламидиоз.
Особенности взятия материала из влагалища
Материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед манипуляцией
можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано. Влагалищное отделяемое собирают стерильным одноразовым зондом из заднего нижнего свода или с патологически измененных участков слизистой и помещают в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСТПЕСС”. У
девочек взятие материала производят со слизистой оболочки преддверия влагалища, а в отдельных случаях – из заднего свода влагалища через гименальные кольца. После внесения зонда в транспортную среду он несколоко раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается и маркируется. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –200С. Транспортировка биологического
материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
ГОНОРЕЯ
Материал для исследования Отделяемое уретры, цервикального канала, секрет предстательной железы, осадок мочи.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки См.
урогенитальный хламидиоз.
За 10 дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и
лечебные процедуры. Материал для исследования у женщин следует брать перед менструацией или через
1-2 дня после ее окончания. Перед взятием материала необходимо воздержаться от мочеиспускания в течение 3-4 часов и половых сношений. Женщины накануне обследования не должны проводить туалет на-
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
24
ружных половых органов и спринцевание. Исследуемый материал должен быть без примесей крови. Не
следует для исследования брать свободно стекающие уретральные выделения. Секрет простаты следует
брать только после окончания острых явлений простатита. При вялотекущей и хронической гонорее перед
исследованием необходимо провести провокацию.
Методы провокации при гонорее:
- биологическая: введение гоновакцины (500 млн. микробных тел) взрослым однократно, внутримышечно, детям старше 3-х лет – 100-200 млн. микробных тел; детям до 3-х лет введение гоновакцины не
рекомендовано;
- термическая: применение в течение 3-х дней диатермии с абдоминально-вагинально-сакральным
расположением электродов по 30, 40, 50 мин или индуктотермии по 10, 15, 20 мин; взятие материала лучше всего провводить из уретры, цервикального канала через 1 час после каждого прогревания;
- механическая: наложение металлического колпачка на шейку матки женщин на 4 часа, проведение
массажа уретры у мужчин на буже в течение 10 мин;
-
алиментарная: употребление соленой, острой пищи и алкоголя за 24 часа до исследования.
Взятие материала производится после провокации и через 24-48-72 часа.
Для получения наиболее достоверных результатов необходимо проведение повторных исследований.
ТРИХОМОНИАЗ
Материал для исследования Отделяемое из уретры (у мужчин), влагалища, секрет простаты.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки См.
урогенитальный хламидиоз, урогенитальный микоплазмоз.
ТУБЕРКУЛЕЗ (внелегочные локализации)
Материал для исследования Моча, мазки из цервикального канала, уретры.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки За 10
дней до взятия материала на исследование необходимо прекратить прием химиопрепаратов и лечебные
процедуры. См. урогенитальный хламидиоз.
ЗАБОЛЕВАНИЯ ОРГАНОВ ДЫХАНИЯ АССОЦИИРОВАННЫЕ С Mycoplasma pneumoniae
Материал для исследования Мазок из носоглотки.
Особенности взятия мазка из носоглотки Взятие мазка проводится натощак или не ранее, чем через 2-4 часа после еды. При взятии материала необходимо хорошее освещение, пациент сидит против источника света, корень языка придавливают шпателем, материал берут стерильным зондом, не касаясь
языка, слизистой щек и зубов и опускают в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После взятия материала зонд опускается в пробирку с транспортной средой “ДНК-ЭКСПРЕСС”. После внесения зонда в транспортную среду он несколько раз ротируется, а затем удаляется из пробирки. Пробирка закрывается. Если время транспортировки биологического материала с момента взятия до момента его доставки в
лабораторию более 2-х часов, то пробирку необходимо заморозить при –200С. Транспортировка биологического материала должна производиться только в сумке-холодильнике. В замороженном виде биологический материал может храниться не более 2-х недель.
ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ (гастрит, язвенная болезнь желудка или двенадцатиперстной кишки), АССОЦИИРОВАННЫЕ С Helicobacter pylori
Материал для исследования Биоптаты антрального отдела желудка, биоптаты двенадцатиперстной
кишки, биоптаты десен, мазки из зубодесневого кармана.
Особенности взятия биопсийного материала
Взятие биопсийного материала проводится во время эндоскопического исследования. Перед началом
противохеликобактерной терапии биопсийный образец берется из антрального отдела желудка. При контроле лечения взятие биопсийного образца проводится не ранее чем через 4 недели после проведения
противохеликобактерной терапии из тела желудка. Взятый биопсийный образец опускается в стерильную
сухую пробирку (эппендорф) и немедленно доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения
возможна заморозка взятиго биопсийного материала при температуре -200С.
Особенности взятия биоптатов десен, мазков из зубодесневого кармана и слюны
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
25
Биопсийный материал из десен, мазки из зубодесневого кармана и слюна берутся у пациентов с гастродуоденальной патологией в анамнезе при наличии у них гингивитов и парадонтоза.
Взятый биопсийный образец опускается в стерильную сухую пробирку (эппендорф) и немедленно доставляется в лабораторию. Для более длительного хранения возможна заморозка взятиго биопсийного материала при температуре -200С.
Мазки из зубодесневого кармана собираются в стерильную пробирку (эппендорф) с физиологическим
раствором. В этом случае пробирки могут храниться в холодильнике (+40С- +60С) не более 12 часов, а их
транспортировка осуществляется в сумке-холодильнике.
ВИРУСНЫЕ ИНФЕКЦИИ
Herpes Simplex virus II; Citomegalovirus; H. papiloma virus 16, 18
Исследуемый материал- мазки
При герпетической инфекции соскобы лучше всего брать с генитальных поражений (везикул, язвочек). При отсутствии генитальных поражений соскоб берется из цервикального канала. При диагностике
цитомегаловирусной инфекции материалом для исследования могут быть , мазок из задней стенки глотки, соскобы из влагалища, уретры и цервикального канала, слюна, спиномозговая жидкость. При диагностике папилломавирусной инфекции материалом для исследования могут быть мазок из носоглотки, с
конъюктивы глаза, соскоб из цервикального канала, шейки матки, т.е. слизистых (неороговевабщий эпителий).
Взятие биологического материала Взятие биологического материала по-возможности должно проводиться в период обострения инфекции. См. урогенитальный хламидиоз, урогенитальный микоплазмоз.
Herpes Simplex virus I; Herpes Simplex virus II; Herpes Simplex virus VI
Citomegalovirus; Epstein Barr virus
Исследуемый материал Нативная кровь.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки Кровь на
исследование желательно брать натощак.
Венозная кровь в количестве 1-1,5 мл отбирается в стерильную пробирку (эппендорф) объемом 1,5 мл
с раствором ЭДТА. Пробирка с кровью может храниться в холодильнике (+40С- +60С) не более 24 часов.
Пробирку не замораживать. Исследование будет проводиться из плазмы и форменных элементов крови.
HBV-ДНК; Определение концентрации HBV-ДНК методом конкурентной ПЦР
HCV-РНК (полуколич. оценка) + anti-HCV; HCV-РНК с определением генотипа HCV+ anti-HCV;
Hepatitis G; TTV-ДНК
Исследуемый материал Сыворотка крови.
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки Взятие
венозной крови и приготовление сыворотки см. в разделе определение концентрации гомонов методом
ИФА.
Исследованию подлежит cыворотка, не содержащая примеси эритроцитов. В случае необходимости длительного хранения исследуемого образца крови (только для гепатитов B, C, G) необходимо отобрать 1 мл сыворотки или плазмы крови и хранить ее при температуре –200С не более 2-х недель.
КОМПЛЕКСНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ВАГИНОЗ
Исследуемый материал Мазки из заднего нижнего свода влагалища.
Для комплексной диагностики бактериального вагиноза необходимо:
Взять соскоб эпителиальных клеток из заднего или бокового свода влагалища на отдельное одноразоаое предметное стекло, подписать и высушить его. Хранить стекло при комнатной температуре.
Удалить слизь и взять соскоб эпителиальных клеток из заднего или бокового свода влагалища одноразовым зондом-щеткой типа цервикс-браш в ПЦР-пробирку с реактивом “ДНК-ЭКСПРЕСС”. Хранить
пробирку в морозильной камере при температуре минус 20оС до 10 дней.
Предметное стекло и ПЦР-пробирку отправить в лабораторию “Литех” с полностью заполненным на-
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
26
правлением.
Взятие биологического материала и условия его транспортировки
См. особенности взятия материала из влагалища для цитологического и ПЦР исследований.
ВЗЯТИЕ ДОСТАВКА И ХРАНЕНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ
ДЛЯ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Исследование
· Посев Clamydia trachomatis на клеточной культуре McCoy с последующим выявлением возбудителя методом ПИФ
· Посев Clamydia trachomatis на клеточной культуре McCoy с определением устойчивости к антибактериальным препаратам (эритромицин (макролиды), доксициклин, ципробай)
Исследуемый материал
Мазки из уретры, секрет простаты (у мужчин), мазки из уретры, влагалища, шейки матки (у женщин);
мазки из влагалища (у девочек).
Подготовка пациента, взятие биологического материала и условия его транспортировки
Рекомендуется прекращение применения антибактериальных препаратов за 7-10 дней до взятия материала.
При необходимости проведения бактериологического исследования на C.trachomatis пациенты не
должны принимать антибиотикотерапию в течении 1 месяца. У женщин взятие биологического материала
лучше всего проводить не ранее чем через 14 дней после менструации. Перед взятием материала пациентам рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов. При наличии гнойных выделений соскоб рекомендуется брать через 15-20 мин после мочеиспускания, при отсутствии выделений необходимо провести массаж уретры с помощью зонда для взятия материала.
У мужчин исследование проводится утром до мочеиспускания или пациентам рекомендуется не мочитья в течение 4-5 часов до взятия пробы. Головку полового члена в области наружного отверстия уретры
протирают стерильным ватным тампоном, смоченным стерильным физраствором. Для взятия биологического материала применяют специальные стерильные одноразовые тампоны (исследование условнопатогенной микрофлоры) или зонды (исследование на урогенитальный хламидиоз), прилагаемые к пробирке с транспортной средой.
Свободно стекающие выделения могут быть собраны тампоном непосредственно после удаления первой свободно стекающей капли.
Для получения материала при соскобе со слизистой уретры дистальная часть полового члена берется между третьим и четвертым пальцами левой руки, указательным и большим пальцами той же руки
раздвигаются губки наружного отверстия уретры. Стерильный одноразовый зонд или тампон вводят в
уретру на глубину 3-4 см. Материал собирают вращательным движением, если это тампон, или производят
соскоб со слизистой уретры с помощью зонда. При очень скудных выделениях пациентам можно провести
легкий массаж мочеиспускательного канала, а затем производить сбор материала. При обильных гнойных
выделениях сбор материала рекомендуется производить после мочеиспускания. Соскоб с поверхности
уретры берут бескровно, так как наличие крови в мазке влияет на выделение чистой культуры
C.trachomatis. Полученный материал переносится в специальные транспортные среды.
Секрет предстательной железы берут после соответствующей обработки головки полового члена
(см. урогенитальный хламидиоз) посредством массажа через прямую кишку. Врач проводит массаж с надавливанием несколькими энергичными движениями от основания к верхушке. Затем из кавернозной части
выдавливается простатический секрет, который собирается в стерильную пробирку.
При обследовании женщин материал из уретры берут с помощью одноразового стерильного зонда
(исследование на урогенитальный хламидиоз) или тампона, обладающего повышенной адсорбцией (исследование условно-патогенной микрофлоры). Уретру массируют пальцем со стороны влагалища, прижимая ее со стороны лобковой кости. Зонд или тампон вводится на глубину 1,5-2 см и легким поскабливанием
передней и боковых стенок уретры получают отделяемое. Немедленно после взятия зонд или тампон опускается с специальную транспортную среду.
Из влагалища материал должен быть взят до проведения мануального исследования. Зеркало перед
манипуляцией можно смочить горячей водой, применение антисептиков для обработки зеркала противопоказано. Влагалищное выделяемое собирают стерильным ватным тампоном из заднего свода и помещают в
«Правила взятия и доставки биоматериала для лабораторных исследований»
27
пробирку с транспортной средой.
Взятие материала из цервикального канала шейки матки производится только после того, как шейку
матки открывают при помощи зеркал. После того, как шейка матки открыта в зеркалах, влагалищная часть
ее протирается сухим ватным тампоном. Материал может быть взят ватным тампоном или зондом. Тонкий
ватный тампон или зонд вводят в цервикальный канал на 1-1,5 см и осторожно поворачивая вынимают, не
прикасаясь к стенкам влагалища и помещают в транспортную среду.
Взятие материала у девочек производится со слизистой оболочки преддверия влагалища, иногда из
заднего свода влагалища, путем введения зонда через гименальные кольца, как при вагиноскопии.
После взятия материала пробирки с транспортной средой могут храниться в холодильнике (не замораживать) при температуре +40С- +60С в течение 48 часов.