Тест на тироксин (Т4) DRI®

Тест на тироксин (Т4) DRI®
Для диагностики in vitro
0454 (объем 100 мл)
10013070 (объем 500 мл)
Назначение
Данный набор для гомогенного иммуноферментного анализа на тироксин предназначен для количественного
определения общего содержания тироксина в сыворотке или плазме крови человека.
Краткое описание и принцип теста
Тироксин (T4) синтезируется в фолликулах щитовидной железы и поступает в кровяное русло посредством сложной
системы обратных связей1. Активность щитовидной железы регулируется с помощью тиреотропного гормона
(ТТГ), который вырабатывается и секретируется гипофизом. Выработка и секреция ТТГ гипофизом стимулируется
тиреотропин-высвобождающим гормоном (тиреолиберином), который выделяется гипоталамусом.
Большая часть тироксина, содержащегося в кровяном русле, преимущественно связана с тироксинсвязывающим
глобулином (ТСГ) и в меньшей степени — с тироксиносвязывающим альбумином и преальбумином2,3. Лишь менее
1 % тироксина остается в крови в несвязанном состоянии в форме свободного тироксина (Т4). Повышение общего
уровня тироксина связано с гипертиреозом — состоянием, при котором увеличивается содержание циркулирующего
в крови гормона щитовидной железы, а понижение общего уровня тироксина связано с гипотиреозом, при котором
наблюдается пониженная концентрация тироксина. Причинами анормальной концентрации тироксина в крови могут
быть нарушения основных функций щитовидной железы или заболевания, затрагивающие систему щитовидная
железа-гипофиз-гипоталамус. Измерение общей концентрации тироксина (как в свободной, так и в связанной с белками
форме) является одним из наиболее широко распространенных методов оценки состояния щитовидной железы4.
Тест на тироксин DRI — это набор для гомогенного иммуноферментного анализа с использованием готовых жидких
реагентов. В данном тесте для отделения тироксина от связывающих белков плазмы используется 8-анилино-1нафталин-сульфонат (АНС). Диссоциированный тироксин в образце крови конкурирует с тироксином, меченым
глюкозо-6-фосфатдегидрогеназой (Г6ФД), за содержащееся в растворе фиксированное количество участков связывания
специфических антител к тироксину. При отсутствии в образце тироксина Г6ФД-меченый тироксин связывается со
специфическими антителами, и активность фермента подавляется. За счет этого явления возникает зависимость
между концентрацией тироксина в образце и активностью фермента. Активность фермента Г6ФД определяется
спектрофотометрическим методом с использованием длины волны 340 нм путем измерения его способности
преобразовывать никотинамидадениндинуклеотид (НАД) в восстановленный никотинамидадениндинуклеотид
(НАДФ).
®
Входящие в набор материалы
Реагент с содержанием антител/субстрата. Содержит моноклональные антитела к тироксину, 8-анилино1-нафталин-сульфонат (АНС), глюкозо-6-фосфат (Г6Ф) и никотинамидадениндинуклеотид (НАД) в трис-буфере с
добавлением азида натрия в качестве консерванта.
Реагент с содержанием коньюгата фермента. Содержит тироксин, меченый глюкозо-6-фосфатдегидрогеназой
(Г6ФД), в трис-буфере с добавлением азида натрия в качестве консерванта.
Калибраторы (поставляются отдельно)
Набор калибраторов для теста на тироксин (№ по каталогу 0476): содержит по 2 мл калибраторов в концентрации
0, 2, 4, 8, 12 и 20 мкг/дл на основе сыворотки человека с добавлением азида натрия в качестве консерванта.
Меры предосторожности и предупреждения
Данный тест предназначен только для диагностики in vitro. Проглатывание реагентов опасно для здоровья.
ОПАСНОСТЬ! Тест на тироксин (Т4) DRI содержит бычий сывороточный альбумин (БСА) в концентрации ≤0,1 %.
H317 — Может вызывать аллергическую кожную реакцию.
H334 — В случае вдыхания может вызывать симптомы аллергии/астмы или затруднять дыхание.
Не вдыхать пыль, взвесь, пары или аэрозоль. Ношение загрязненной рабочей одежды за пределами рабочего
места не разрешается. Следует надевать защитные перчатки и средства защиты глаз и лица. В случае недостаточной
вентиляции следует надевать средства защиты органов дыхания. В случае попадания на кожу: смойте большим
количеством мыла и воды. В СЛУЧАЕ ВДЫХАНИЯ: если дыхание затруднено, вынесите пострадавшего на свежий
воздух и оставьте в положении, удобном для дыхания. В случае раздражения кожи или сыпи: обратитесь за
медицинской помощью. В случае респираторных симптомов: позвоните в ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР или вызовите
врача. Загрязненную одежду необходимо стирать перед повторным использованием. Содержимое/контейнер
необходимо утилизировать в соответствии с местными/региональными/национальными/международными
требованиями.
Реагенты, используемые в данном тестовом наборе, содержат азида натрия в концентрации ≤0,09 %. Избегайте
контакта с кожей и слизистыми оболочками. Промойте пораженные участки большим количеством воды. При
попадании в глаза или желудочно-кишечный тракт немедленно обратитесь за медицинской помощью. Азид натрия
может вступать в реакцию со свинцом и медью, из которых изготовлены канализационные трубы, с образованием
потенциально взрывоопасных азидов металлов. При утилизации подобных реагентов обязательно смывайте их
большим количеством воды во избежание скопления азидов. Очищайте открытые металлические поверхности
10-процентным раствором гидроксида натрия.
Не используйте реагенты с истекшим сроком годности.
Тироксин чувствителен к свету. Храните все содержащие тироксин реагенты (конъюгат фермента, калибраторы,
контрольные образцы или образцы, взятые у пациентов) таким образом, чтобы свести к минимуму воздействие
на них прямых солнечных лучей.
В случае обнаружения повреждения упаковки в момент доставки обратитесь к представителю службы технической
поддержки.
Подготовка и хранение реагентов
Реагенты готовы к использованию. Подготовка реагентов к использованию не требуется. Все компоненты теста в
случае надлежащего хранения при температуре от 2 до 8 °C остаются стабильными до истечения указанного на
этикетке срока годности.
Сбор образцов и порядок работы с ними
Для теста могут использоваться сыворотка или плазма. Установлено, что антикоагулянты, такие как гепарин,
цитраты, оксалаты и EDTA, не искажают результаты теста. Желательно использовать свежий образец сыворотки.
Если анализ образца нельзя провести сразу, его можно хранить в охлажденном состоянии в течение одной недели
или в замороженном состоянии в течение одного месяца. Избегайте повторной заморозки и разморозки образца.
Необходимо избегать попадания в образцы крупных инородных частиц. Рекомендуется перед проведением анализа
центрифугировать образцы с высокой мутностью.
Обращайтесь со всеми образцами сыворотки и плазмы как с инфицированным материалом5.
Аппараты
Для проведения данного гомогенного иммуноферментного анализа можно использовать клинические
биохимические анализаторы, способные поддерживать постоянную температуру образцов, дозировать
образцы, смешивать реагенты, измерять содержание ферментов с использованием длины волны 340 нм и точно
выдерживать временные параметры реакции.
Процедура анализа
Биохимические анализаторы с указанными характеристиками подходят для проведения данного гомогенного
иммуноферментного анализа. Перед началом проведения теста изучите соответствующие инструкции по каждой
процедуре анализа и измерению конкретных параметров с использованием определенной модели анализатора.
Контроль качества и калибровка
Согласно принятым нормам проведения лабораторных исследований для проверки калибровки и обеспечения
правильных результатов анализа необходимо использовать контрольные образцы. С этой целью используются
имеющиеся в продаже различные контрольные материалы разной концентрации. Убедитесь, что результаты
анализа контрольных образцов находятся в пределах установленного диапазона. При использовании новых
реагентов или если результаты анализа контрольных образцов находятся вне установленного диапазона, проведите
повторную калибровку системы. Все процедуры контроля качества должны выполняться в соответствии с
местными, региональными или федеральными нормативами или аккредитационными требованиями.
Результаты и интерпретация данных
Концентрация тироксина в образце автоматически рассчитывается клиническим биохимическим анализатором.
Дополнительная обработка данных не требуется.
Образцы с концентрацией аналита более 20 мкг/дл обозначаются соответствующим образом или разводятся
с помощью калибратора нулевой концентрации. Значение концентрации в случае разведенного образца
рассчитывается путем умножения результата анализа на коэффициент разведения.
На соотношение между концентрацией тироксина в сыворотке или плазме и клиническим ответом могут влиять
различные факторы. Среди них: возраст, пол и состояние здоровья пациента, принимаемые медицинские
препараты, наличие заболеваний, не связанных с щитовидной железой, беременность, использование препаратов
эстрогена или контрацептивов, а также генетически обусловленное увеличение или уменьшение концентрации
тироксинсвязывающего глобулина (ТСГ). В связи с этим измерение общей концентрации тироксина должно
применяться только в целях предварительного скрининга1. Для точной оценки состояния щитовидной железы
необходимо использовать дополнительные методы диагностики, такие как измерение содержания свободного
тироксина (Т4), ТТГ, трийодотиронина (T3), тиреолиберина и т. п., а также анализ клинической картины.
Ожидаемые значения
Диапазон концентрации тироксина (T4) для практически здоровых людей составляет от 4,5 до 12 мкг/дл. Поскольку
«нормальный» диапазон может зависеть от таких факторов, как возраст, пол, пищевой рацион, географическое
местоположение и т. д., то в каждой лаборатории необходимо установить собственный диапазон ожидаемых
значений для данной процедуры.
Ограничения
Чувствительность, определяемая как наименьшая концентрация, которая может быть измерена относительно
образца сыворотки нулевой концентрации с достоверностью 95 %, составляет 0,7 мкг/дл. Данный тест разработан
специально для измерения уровня тироксина в сыворотке или плазме, но не в образце цельной крови. В редких
случаях в крови пациентов могут содержаться аутоиммунные антитела, занижающие результаты теста.
Библиография
Стандартные рабочие характеристики
1. Ingbar SH, Woeber KA. The Thyroid Gland. In: Text Book of Endocrinology. Williams RH. ed. Philadelphia, PA; WB
Saunders Company, 95 (1974).
2. Robbins J. “Thyroxine-Binding Protein in Serum” In: Laborator Diagnosis of Endocrine Disease. Saunderman and
Saunderman eds., St. Louis, MO; Warren H. Green, Inc., 221 (1971).
3. Larsen PR, et al. “Immunoassay of Thyroxine in Unextracted Human Serum”, J. Clin. Endocrinol. Metal., 37, 177
(1973).
4. Penney M, O’Sullivan J. Total or Free Thyroxine as a Primary Test of Thyroid Function. Clin. Chem., 33, 170 (1987).
5. Centers for Disease Control/National Institutes of Health manual “Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories”. 1988.
Представленные ниже стандартные рабочие показатели были получены с использованием биохимического
анализатора Hitachi 717.
Погрешность измерения
Внутрисерийная и общая погрешности измерений содержания тироксина (T4) в сыворотке оценивались с
использованием контроля трех уровней. Согласно модифицированному протоколу определения погрешности
измерений Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) анализировалось по 6 образцов в каждой
серии дважды в день на протяжении 5 дней, за которые было проанализировано шестьдесят образцов (N = 60).
Уровень
n=60
В пределах серии
Общая
Среднее (мкг/дл)
SD (мкг/дл)
CV %
SD (мкг/дл)
CV %
1
4,1
0,14
3,4
0,28
6,9
2
11,0
0,41
3,7
0,81
7,4
3
16,2
0,62
3,8
1,05
6,5
Чувствительность
Чувствительность, определяемая как наименьшая концентрация, которая может быть измерена относительно
образца сыворотки нулевой концентрации с достоверностью 95 %, составляет 0,7 мкг/дл.
Точность
Анализ 108 клинических образцов с концентрацией T4 от 1,3 до 87,1 мкг/дл проводился с использованием тестового
набора DRI для иммуноферментного анализа на тироксин и имеющегося в продаже теста на Т4. Была показана
корреляция с регрессионным уравнением DRI (y) = 1,02 (x) - 0,63 и получен коэффициент корреляции (r), равный 0,993.
Специфичность
Вещества с аналогичной тироксину химической структурой и некоторые параллельно используемые вещества были
проверены на возможную перекрестную реактивность при проведении теста на тироксин. Процентный показатель
перекрестной реактивности определялся как эквивалентная концентрация T4 в процентах, получаемая в результате
измерения после добавления вещества с перекрестной реактивностью в изучаемой концентрации в сыворотку с
нулевой концентрацией Т4.
Вещество
Изучаемая конц. (мкг/мл)
Перекрестная реактивность (%)
Трийодтиронин (T3)
10
3,2*
Трийодтироуксусная кислота
10
0,5*
Тетрайодтироуксусная кислота
10 000
25,3*
3,5-дийодтиронин
10 000
0,0
3,5-дийодтирозин
10 000
0,0
Йодтирозин
10 000
0,0
Метимазол
10 000
0,0
Фенилбутазон
10 000
0,0
Фенитоин
10 000
0,0
Пропилтиоурацил
10 000
0,0
Тирозин
10 000
0,0
Ацетаминофен
100 000
0,0
Ацетилсалициловая кислота
100 000
0,0
* Изучаемые концентрации существенно превышают нормальное содержание этих веществ в сыворотке. Таким образом, перекрестная
реактивность оказалась клинически незначимой.
Гемолизированные (до 800 мг/дл гемоглобина), липемические (до 1000 мг/дл триглицеридов или 400 мг/дл
холестерина) и иктеричные (до 30 мг/дл билирубина) образцы не оказывают клинически значимого влияния на
результаты теста.
Microgenics Corporation
46500 Kato Road
Fremont, CA 94538 USA
Поддержка пользователей и
техническая поддержка в США:
1-800-232-3342
Изменения информации на вкладыше см. на веб-сайте:
www.thermoscientific.com/diagnostics
В других странах:
обратитесь к региональному представителю Thermo Fisher Scientific.
0475-7
09/2015
2
Microgenics GmbH
Spitalhofstrasse 94
D-94032 Passau, Germany
Тел.: +49 (0) 851 886 89 0
Факс: +49 (0) 851 886 89 10