ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ (А, Е) У ЛАБОРАТОРНЫХ ПРИМАТОВ. ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНФЕКЦИЙ. Корзая Л.И., Кебурия В.В., Лазарева И.Я., Лапин Б.А. Вирусные гепатиты А и Е (ГА и ГЕ) являются острыми инфекциями с фекальнооральным механизмом передачи. ГА распространен повсеместно в различных регионах мира, а ГЕ является эндемичной инфекцией, которая регистрируется в странах тропического и субтропического климата. Россия является неэндемичной по ГЕ страной. В последнее время возник повышенный интерес к гепатиту Е как зоонозной инфекции, что связано с обнаружением антител к ВГЕ (анти-ВГЕ) среди населения неэндемичных регионов, в том числе и в нашей стране. Циркуляция ВГЕ - подобного вируса обнаружена среди различных видов животных - свиней, крыс, а также кур [4, 6]. Наиболее важным в настоящее время является проведение сероэпидемиологического мониторинга, поиск случаев острого гепатита Е, возникших непосредственно на территории России, а также обнаружение и характеристика вирусов от людей и животных [4]. Известно, что маркеры вирусных ГА и ГЕ обнаруживаются у обезьян многих приматологических центров, в том числе, и у обезьян Адлерского питомника [1, 2, 3, 6]. Вопрос об эпидемиологическом значении обезьяньих штаммов ВГА для человека окончательно не решен. По данным приматологической группы европейской ассоциации по лабораторным животным, гепатит А обезьян относится к инфекциям второй группы биологической опасности для человека [8]. Однако существование различных генотипов ВГА человека (1А, 1B, 2, 3А, 3В, 7) и низших обезьян Старого Света (4, 5, 6) [5, 7], а также отсутствие сведений о случаях возникновения ГА у обслуживающего обезьян (за исключением шимпанзе) , дают основание отрицать эпидемиологическую роль штаммов ВГА обезьяньего происхождения для человека [5]. Принимают ли участие обезьяны в распространении ВГЕ - инфекции в человеческой популяции, до настоящего времени не изучено. В предлагаемой генотипической классификации штаммов ВГЕ человеческого и зоонозного происхождения [9] отсутствуют генотипические варианты штаммов ВГЕ от обезьян. В связи с этим, представляют интерес недавно полученные нами данные об обнаружении анти-ВГЕ у нескольких сотрудников, принадлежащих к обслуживающему персоналу питомника [1, 2 ]. Настоящая работа посвящена изучению частоты распространения анти-ВГА и антиВГЕ (IgG и IgM) среди обезьян в сравнительном аспекте с человеком, в частности, обслуживающим персоналом питомника и некоторыми другими категориями населения Адлерского региона. Представлялось важным проанализировать и оценить 1 эпизоотологическую и эпидемиологическую ситуацию в отношении этих двух энтеральных инфекций - ГА и ГЕ. В работе использовали коммерческие иммуноферментные диагностические тестсистемы - "ДС-ИФА-АНТИ-HEV-G" и "ДС-ИФА-АНТИ-HEV-M", а также "ДС-ИФА-АНТИ- HAV-G" и "ДС-ИФА-АНТИ-HAV-M" производства НПО "Диагностические системы" (Нижний Новгород). Представляют интерес данные о довольно высокой частоте распространения антиВГЕ среди макак Адлерского питомника в период 1999-2007 гг. Анти-ВГЕ IgG были обнаружены у 334 (50,2 %) из 665 обследованных макак резусов, у 16 (16 %) из 100 макак яванских, а также у 3 (2,8 %) из 106 зеленых мартышек. Частота выявления анти-ВГЕ широко варьировала среди обезьян в зависимости от места содержания. Следует отметить факт обнаружения анти-ВГЕ IgM, свидетельствующих о случаях «свежей» инфекции, у 3 (4,3 %) из 69 макак яванских и у 12 (2,9 %) из 418 обследованных макак резусов. Реактивность таких сывороток варьировала от 0,389 до 1,200 ОП450. Серопозитивные особи встречались во всех возрастных группах обезьян, начиная с 1 года. Подробный анализ частоты распространения анти-ВГЕ у макак резусов в зависимости от места содержания и возраста был проведен нами ранее [2]. Являлось важным проведение сравнительного изучения частоты распространения анти–ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов, содержашихся на 14 различных участках питомника (вольеры) в период 2003-2007 г.г. (табл. 1). Как видно, общая частота распространения анти-ВГА среди макак резусов была в 2 раза выше (83,3%), чем антиВГЕ – (42,8%). Показатели анти-ВГА и анти-ВГЕ варьировали в зависимости от места содержания обезьян (52-100 % и 10-88,9% соответственно), что говорит о различной эпизоотологической ситуации на различных участках питомника. Практически во всех вольерах, за исключением двух, были обнаружены особи с анти-ВГА IgM, что свидетельствует о наличии случаев «свежей» инфекции. Процент анти-ВГА IgM - позитивных обезьян варьировал от 3,2 до 42,1% и суммарно составил 13,2%. Наиболее высокие показатели были обнаружены в 4-х вольерах (21,9-42,1%). Что касается антиВГЕ IgM, то они были обнаружены лишь у 5 (1,7%) из 291 обследованных обезьян, причем, только в двух из 14 обследованных вольер. Как видно из табл. 1, реактивность сывороток обезьян к ВГА и ВГЕ широко варьировала от места их содержания, но в целом, оказалась практически одинаковой и достаточно высокой (значения ОП450 составили более 1.000). На фоне высокой частоты распространения анти-ВГА среди обезьян практически всех вольер отмечался высокий удельный показатель ВГЕ-позитивных обезьян лишь в 5 из 14. Таблица 1. Частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов (период 2003 -2007). 2 №№ №№ Дата п.п. вольер обследования Анти-HAV Ig G Анти-HEV Ig M * ОП450 Ig G ОП450 Ig M * ОП45 0 * * ОП450 1. 73 23.09.03 16/19* (84,2) 0.625 8/19 (42,1) 0.363 3/19 (15,8) 1.241 0/3 (0) 0 2. 66 5.11.03 32/32 (100) 1.236 7/32 (21,9) 0.456 27/33 (81,8) 1.418 0/23 (0) 0 3. 60 15.09.05 29/31 (93,5) 1.027 1/31 (3,2) 0.351 6/27 (22,2) 0.979 0/31 (0) 0 4. 74 21.09.05 24/24 (100) 1.562 7/24 (29,2) 0.599 8/16 (50) 0.773 0/13 (0) 0 5. 73-2 5.10.05 22/25 (88,0) 0.899 1/25 (4,0) 0.402 11/25 (44,0) 1.017 3/25 (12,0) 0.283 6. 29 25.10.05 13/18 (72,2) 1.119 3/18 (16,7) 0.551 16/18 (88,9) 1.505 0/25 (0) 0 7. 31 19.12.05 17/21 (81) 0.794 0/21 (0) 0.412 7/21 (33,3) 0.518 0/21 (0) 0 8. 30 1.02.06 6/6 (100) 0.942 0/10 (0) 0 11/14 (78,6) 1.460 0/14 (0) 0 9. 8 7.02.06 13/13 (100) 1.067 5/15 (33,3) 0.535 5/14 (35,7) 0.691 2/14 (14,3) 0.342 10. 63 28.02.06 26/27 (96,3) 1.173 1/27 (3,7) 0.530 14 /24 (58,3) 1.337 0/27 (0) 0 11. 25 1.12.06 11/20 (55) 0.689 2/20 (10) 0.653 2/20 (10) 1.335 0/20 (0) 0 12. 59 11.01.07 18/27 (66,7) 0.672 1/27 (3,7) 0.661 7/27 (25,9) 0.826 0/27 (0) 0 13. 42 7.02.07 20/25 (80) 0.775 1/25 (4) 0.327 7/25 (28) 1.032 0/25 (0) 0 14. 28 28.02.07 12/23 (52) 0.797 0/23 (0) 0 7/23 (30,4) 1.126 0/23 (0) 0 259/311 (83,3) 1.006 42/317 (13,2) 0.482 131/306 1.141 (42,8) 5/291 (1,7) 0.307 Итого: Примечание: * количество позитивных обезьян/число обследованных (%), ОП450 – реактивность сывороток в ИФА (средняя арифметическая), 0 – негативные сыворотки. Следует отметить, что процент серопозитивных обезьян к ВГА (83,3 %) в 2003-2007 г.г. оказался в 1,8 раза выше по сравнению с таковым (47,3 %) в 1999-2000 г.г.[1]. Повидимому, как и в человеческой популяции, среди обезьян происходит колебание стадного иммунитета и, как следствие, происходит циклический подъем заболеваемости. 3 Эпидемиологические аспекты инфекции. С целью оценки эпидемиологической ситуации в отношении ГЕ было проведено сероэпидемиологическое обследование различных категорий сотрудников НИИ медицинской приматологии и обслуживающего персонала питомника, студентов РУДН, обучающихся на базе НИИ МП РАМН, а также жителей окружающего региона (Адлерский район) на наличие анти-ВГЕ (табл. 2). При неоднократном обследовании подтвердились данные об обнаружении анти-ВГЕ у 3 (5,3%) из 57 обследованных сотрудников Института, причем все 3 (9,1%) из 33 принадлежали к обслуживающему персоналу питомника, т.е. к группе наиболее высокого риска. Впервые факт обнаружения анти-ВГЕ у сотрудников был выявлен в 2002-2003 г. В дальнейшем, новых случаев сероконверсии среди сотрудников не наблюдалось. Таблица 2. Частота обнаружения анти-ВГЕ среди сотрудников НИИ МП РАМН и населения Адлерского региона. Группа обследованных лиц Сотрудники НИИ МП РАМН (научные сотрудники и лаборанты научных подразделений) Обслуживающий персонал питомника (рабочие по уходу за обезьянами, зоотехники, ветеринарные врачи и фельдшера, работающие с обезьянами) Студенты РУДН, обучающиеся на базе НИИ МП РАМН Пациенты городской поликлиники №2, обслуживающей Адлерский регион г. Сочи. Пациенты Адлерской районной больницы Примечание: * Анти-ВГЕ IgG 0/24* (0) Анти-ВГЕ IgM 0/24 (0) 3/33 (9,1) 0/16 (0) 1/18 0/18 (5,6) (0) 45/300 7/255 (15) (2,7) 4/17 2/17 (23,5) (11,8) количество позитивных сывороток/число исследованных (%) Наибольшее значение имеют данные о значительной частоте распространения обнаружении анти-ВГЕ среди взрослого населения Адлерского региона – пациентов лечебно-профилактических учреждений, сыворотки которых были направлены в лабораторию для биохимических исследований. Удельный вес анти-ВГЕ позитивных сывороток среди пациентов поликлиники составил 15%, а среди больных - 23,5%. Всего нами выявлено 49 (15,5%) из 317 анти-ВГЕ IgG позитивных образцов сывороток от людей, которые проживали как в городской, так и в сельской местности. Возраст серопозитивных лиц варьировал от 22 до 83 лет и в среднем составил 60 лет. Позитивные сыворотки характеризовались различной реактивностью. Высокие показатели (1.000 – 2.358 ОП450) были выявлены в 17 (38,6%) из 44 анти-ВГЕ IgG позитивных сывороток, средние (0.6001.000 ОП450) – в 8 (18,2%) и невысокие (0.280-0.600 ОП450) – в 19 (43,2%). Средняя арифметическая титра составила 0.952 ОП450. О существовании свежих случаев 4 инфекции свидетельствовало обнаружение анти-ВГЕ IgM у 9 (3,3%) из 272 обследованных лиц. У трех человек анти-ВГЕ IgM были выявлены на фоне присутствия анти-ВГЕ IgG (значения реактивности сывороток составили 0.352 и 1.748, 1.868 и 1.643, 1.573 и 0.284 ОП450 соответственно). У остальных шести человек были обнаружены только анти-ВГЕ IgM (1.010, 0.544, 0.475, 0.373, 0.352, 0.333 ОП450 соответственно). Представлялось интересным охарактеризовать анти-ВГЕ - позитивные сыворотки от человека и на присутствие маркеров ВГА. Было установлено, что анти-ВГА были обнаружены в 40 (91%) 44 исследованных сывороток. Преобладали сыворотки с высокой и средней степенью реактивности в отношении ВГА. Высокие показатели (1.000 – 1.827 ОП450) были выявлены в 21 (52,5%) из 40 анти-ВГЕ IgG позитивных сывороток, средние (0.600-1.000 ОП450) – в 12 (30%) и невысокие (0.280-0.600 ОП450) – в 7 (17,5%). Средняя арифметическая титра составила 0.952 ОП450. Следует обратить внимание, что частота распространения анти-ВГА среди обслуживающего персонала питомника обезьян составила 7 (50%) из 14, что оказалось даже ниже, чем среди сотрудников научных сотрудников и лаборантов НИИ МП РАМН 16 (76,2%) из 21, а также среди студентов – 6 (75%) из 8 обследованных. Средняя реактивность сывороток по анти-ВГА была, наоборот, выше в первой группе (0,839 ОП50) по сравнению с двумя другими группами (0.447 и 0.493 соответственно) Таким образом, в результате проведенных исследований выявлена высокая частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов - 83,3% и 42,8% соответственно, что свидетельствует о широкой циркуляции этих вирусов в питомнике. Наличие IgM позитивных особей, как по анти-ВГА (13,2%), так и по анти-ВГЕ (1,7%), является показателем активности эпизоотологического процесса среди обезьян, особенно в отношении ГА (среди отдельных групп обезьян этот показатель достигал 42%). В этот же самый период частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди сотрудников НИИ МП РАМН составила 65,7% и 5,3% соответственно. Не наблюдалось существенных различий в частоте распространения анти-ВГА среди сотрудников отдельных групп, как и не выявлено существенной разницы в уровне гуморального иммунитета. В каждой из профессиональных было обнаружено лишь по 1-2 человека, имеющих высокую реактивность сывороток к ВГА, у остальных были выявлены, в основном, низкие показатели. Следует подчеркнуть, что все серопозитивные по анти-ВГЕ индивидуумы (9,1%) находились в группе наиболее высокого риска и имели прямой контакт с обезьянами. Случаев заболевания ГА и ГЕ у обслуживающего персонала питомника не отмечалось, однако выявлены единичные факты выраженной сероконверсии как к ВГА, так и к ВГЕ при динамическом наблюдении. Установлен значительный уровень выявления анти-ВГЕ IgG (15,5 %) взрослого населения Адлерского региона, являющихся пациентами среди лечебно- 5 профилактических учреждений и территориально не связанных с местом расположения питомника обезьян. Возраст серопозитивных лиц варьировал от 22 до 83 лет. Особый интерес представляют данные по выявлению анти-ВГЕ IgM в 9 (2,9%) из 313 исследуемых сывороток человека, что свидетельствует о наличии случаев острого ГЕ, обнаруженных непосредственно на территории южного региона нашей страны. Дальнейшие исследования, возможно, позволят выявить и охарактеризовать штаммы ВГЕ, циркулирующие как среди населения Адлерского региона, так и среди обезьян приматологического центра. Настоящее исследование поддержано РФФИ (№ проекта 06-04-96794) Литература 1. Корзая Л.И., Лапин Б.А., Кебурия В.В., Лазарева И.Я., Крылова Р.И. Вирусные гепатиты у лабораторных приматов. // В кн.: Перспективные направления использования приматов в медико-биологических исследованиях. Материалы Российской научной конференции (Сочи-Адлер, 8-10 августа 2006 г.). - С. 43-48. 2. Корзая Л.И., Лапин Б.А., Кебурия В.В., Лазарева И.Я. Частота выявления антител к вирусу гепатита Е у обслуживающего персонала и у макак Адлерского питомника. // Вопр. вирусол. – 2007. - С. 36-40. 3. Лапин Б.А., Шевцова З.В., Корзая Л.И., Крылова Р.И. Спонтанный и экспериментальный гепатит А у низших обезьян Старого Света и их использование для изучения этой инфекции. // Мир вирусных гепатитов. - 2006. - №6. - С. 3-9. 4. Михайлов М.И., Замятина М.А., Полещук В.Ф. Вирусный гепатит Е. Проблемы изучения. // Вопр. вирусол. – 2005. - № 3. – С. 20-22. 5. Полещук В.Ф., Михайлов М.И., Замятина Н.А. Приматные модели вирусных гепатитов человека. . // Вопр. вирусол. – 2006. - № 4. – С. 6-13. 6. Purcell R.H. and Emerson S.U. Animal models of hepatitis A and E. // ILAR. - 2001 - Vol. 42. - No 2. –P. 161 – 177. 7. Robertson B.H. Viral hepatitis and primates: historical and molecular analyses of human and non-human primate hepatitis A, B and GB-related viruses. // J. Viral. Hepatit. – 2001. – Vol. 8. – P. 233-242. 8. Weber H., Berge E., Finch J. Health monitoring of non-human primate colonies. // Lab. Anim. - 1999. - Vol. 33, Suppl. - P. S1-S18. 9. Wang.Y., Ling R., Erker J.C. et al. A divergent genotype of hepatitis E virus in Chinese patients with acute hepatitis. // J. Gen. Virol. – 99. – Vol. 80. – P. 169-177. 6 В кн.: Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии в опытах на обезьянах. Материалы международной научной конференции. 19-22 сентября 2007 года, Сочи-Адлер. – 2007. -С. 94-103. ВИРУСНЫЕ ГЕПАТИТЫ (А, Е) У ЛАБОРАТОРНЫХ ПРИМАТОВ. ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ИНФЕКЦИЙ. Корзая Л.И., Кебурия В.В., Лазарева И.Я., Лапин Б.А. РЕЗЮМЕ Настоящая работа посвящена изучению частоты распространения анти-ВГА и антиВГЕ (IgG и IgM) среди обезьян в сравнительном аспекте с человеком, в частности, обслуживающим персоналом питомника и некоторыми другими категориями населения Адлерского региона. Представлялось важным проанализировать и оценить эпизоотологическую и эпидемиологическую ситуацию в отношении двух энтеральных инфекций - ГА и ГЕ. По материалам 1999-2007 г.г. получены данные о довольно высокой частоте распространения анти-ВГЕ среди обезьян Адлерского питомника. Анти-ВГЕ IgG были обнаружены у 334 (50,2 %) из 665 обследованных макак резусов, у 16 (16 %) из 100 макак яванских, а также у 3 (2,8 %) из 106 зеленых мартышек. Частота выявления анти-ВГЕ широко варьировала среди обезьян в зависимости от места содержания. Следует отметить факт обнаружения анти-ВГЕ IgM, свидетельствующих о случаях «свежей» инфекции, у 3 (4,3 %) из 69 макак яванских и у 12 (2,9 %) из 418 обследованных макак резусов. Реактивность таких сывороток варьировала от 0,389 до 1,200 ОП450. Серопозитивные особи встречались во всех возрастных группах обезьян, начиная с 1 года. Представлялось важным провести сравнительное изучение частоты распространения анти–ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов, содержащихся на 14 различных участках питомника (вольеры). Выявлена высокая частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди макак резусов - 83,3% и 42,8% соответственно, что свидетельствует о широкой циркуляции этих вирусов в питомнике. Наличие IgM позитивных особей, как по анти-ВГА (13,2%), так и по анти-ВГЕ (1,7%), является показателем активности эпизоотологического процесса среди обезьян, особенно в отношении ГА (среди отдельных групп обезьян этот показатель достигал 42%). В этот же самый период частота распространения анти-ВГА и анти-ВГЕ среди сотрудников НИИ МП РАМН составила 65,7% и 5,3% соответственно. Не наблюдалось существенных различий в частоте распространения анти-ВГА среди обслуживающего персонала питомника и других категорий сотрудников института, как и не выявлено 7 существенной разницы в уровне гуморального иммунитета. В каждой из профессиональных групп обнаружено лишь по 1-2 человека, имеющих высокую реактивность сывороток к ВГА, у остальных были выявлены, в основном, низкие показатели. Следует подчеркнуть, что все серопозитивные по анти-ВГЕ индивидуумы (9,1%) находились в группе наиболее высокого риска и имели прямой контакт с обезьянами. Случаев заболевания ГА и ГЕ у обслуживающего персонала питомника не отмечалось, однако при динамическом наблюдении выявлены единичные факты выраженной сероконверсии как к ВГА, так и к ВГЕ. Установлен значительный уровень выявления анти-ВГЕ IgG (15,5 %) среди взрослого населения Адлерского региона, являющихся пациентами лечебно-профилактических учреждений и территориально не связанных с местом расположения питомника обезьян. Возраст серопозитивных лиц варьировал от 22 до 83 лет. Особый интерес представляют данные по выявлению анти-ВГЕ IgM в 9 (3,3%) из 272 исследуемых сывороток человека, что свидетельствует о наличии случаев острого ГЕ, Дальнейшие исследования, возможно, позволят выявить и охарактеризовать штаммы ВГЕ, циркулирующие как среди населения Адлерского региона, так и среди обезьян приматологического центра. 8