Иммуноферментный анализ картофеля

Метод иммуноферментного анализа картофеля
Важным этапом семеноводства картофеля в Республике Беларусь
является оценка качества семенного материала, которое в значительной мере
определяется наличием или отсутствием вирусных патогенов. Сильное
поражение растений вирусными болезнями изменяет его сортовые
характеристики, приводит к значительному снижению урожая или полной его
потере при дальнейшем воспроизводстве. Потери урожая происходят главным
образом за счет уменьшения размера клубней и их числа с 1 растения. У
больных растений нарушается углеводный обмен, снижается содержание
сахаров, крахмала, падает активность ферментов углеводного комплекса.
Основные вирусные заболевания картофеля в Республике Беларусь:
вирус L (скручивание листьев картофеля, potato leaf roll virus L), вирус X
(обыкновенная мозаика или крапчатость листьев картофеля, potato virus X),
вирус М (мозаичное закручивание листьев картофеля, leaf-rolling, potato virus
M), вирус S (морщинистость картофеля, potato virus S) , вирус A (складчатая
мозаика картофеля, potato virus A) ,вирус Y (полосчатая мозаика картофеля,
potato virus Y).
Ежегодно специалисты всех областных государственных инспекций
по семеноводству, карантину и защите растений проводят отбор листового
и клубневого материала различных сортов для анализа на скрытую
вирусную инфекцию.
Оценка картофеля на скрытую вирусную инфекцию методом
иммуноферментного анализа (далее – ИФА) позволяет в течение нескольких
часов получить надежный, быстрый и достоверный результат.
Из всех лабораторных методов диагностики метод ИФА является
наиболее технологичным и адаптированным для проведения массового
тестирования на скрытую зараженность картофеля вирусными патогенами.
Определение зараженности семенного материала вирусными патогенами
методами ИФА регламентируется нормативными документами и является
обязательным при сертификации семенного картофеля.
В соответствии с утвержденным 11 июня 2012 года Национальной
академией наук Беларуси и согласованным с Минсельхозпродом Положением
«О семеноводстве картофеля в Республике Беларусь» проведение
лабораторного исследования методом ИФА на наличие вирусной инфекции в
скрытой форме для всех категорий семеноводства является обязательным.
Показатели качества клубней и посадок для различных категорий семенного
картофеля в Республике Беларусь регламентированы СТБ 1224-2000.
В соответствии с Законом Республики Беларусь «О семеноводстве» от 2
мая 2013 г. № 20-З (Статья 16. Основные требования к производству,
реализации и использованию семян растений) запрещается производство,
реализация и использование семян растений, сортовые и посевные качества
которых не подтверждены удостоверением о качестве семян растений.
Нормы и методы лабораторного тестирования листовых и
клубневых проб картофеля методом ИФА
Наименование семенного
Класс/
Нормы тестирования
материала
поколение
Базовые клоны для введения в
ИМ
100% растений
культуру in vitro
Исходные микрорастения для
клонального размножения в
ИМ
100% растений
культуре in vitro
Первое клубневое поколение
ИМ
200 растений по сорту
Питомник предварительного
ОС
200 растений по сорту
размножения
Супер-супер элита
ОС
200 клубней от партии1
Супер элита,элита
ЭС
Отдельные растения 2
Примечание: 1 Анализ проводят по растениям-индексам
2 Проверка в поле отдельных растений с недостаточно четким
проявлением симпотомов болезней, определяемых визуально
* Допуск на наличие растений или клубней в образце с положительной
реакцией на фитопатогены согласно изменению №2 в СТБ 1224-2000
Для недопущения распространения вирусной инфекции картофеля в
сезоне 2014 года специалистами по защите растений был проведен ИФА 73
сортов картофеля по клубням репродукции супер-суперэлита (ССЭ) и 102
сортов картофеля листового материала репродукции ППР (высаженное первое
клубневое поколение).
Результаты проведенного анализа по клубням показали, что из 73 сортов
33 сорта или 45% от проанализированных содержали вирусную инфекцию
(2013г. – 72% от проанализированных).
По результатам лабораторных исследований листового материала
установлено, что из 102 сортов превышение допустимых СТБ 1224-2000 норм
выявлено в 38 сортах, что составляет 37% от обследованных (2013г. – 77%).
На основании полученных результатов семенной картофель категории
ССЭ не соответствующий СТБ 1224-2000 по зараженности скрытой вирусной
инфекцией переведен в категорию - элита.
Данные листовой диагностики были учтены при проведении апробации
посадок картофеля - сорта картофеля не соответствующие требованиям СТБ
1224-2000 так же были переведены в категорию элитного семенного картофеля.