АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ ЛИСТЬЕВ ШЕЛКОВИЦЫ БЕЛОЙ (MORUS ALBA L.), ШЕЛКОВИЦЫ ЧЕРНОЙ (MORUS NIGRA L.) И ШЕЛКОВИЦЫ КРАСНОЙ (MORUS RUBRA L.). И.И. Селина Пятигорский медико-фармацевтический институт – филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России, г. Пятигорск Исследование качественного и количественного состава биологически активных соединений, в частности, аминокислот, является одной из важных задач при исследовании растительного сырья. Идентификацию свободных аминокислот проводили в трех образцах сырья: листья шелковицы белой (Morus alba L.) (образец №1), листья шелковицы черной (Morus nigra L.) (образец №2) и листья шелковицы красной (Morus rubra L.) (образец №3). Исследование состава свободных аминокислот проводилось методом ТСХ, с применением в качестве неподвижной фазы хроматографических пластин “Kiselgel“ размером 15х20 см, а в качестве подвижной фазы использовали смесь растворителей: нбутанол – ледяная уксусная кислота – вода в соотношении 80:40:40. Смесь растворителей помещали в стеклянную камеру для хроматографии, которую насыщали в течение 2-х часов [1,2]. В качестве исследуемых растворов использовали растворы экстрактов, полученных из образцов сырья в разведенной хлористоводородной кислоте. Для этого к 0,100 г образца. № 1,0,100 г образца №2, 0.100 г образца №3 прибавляли по 5 мл разведенной хлористоводородной кислоты, перемешивали (исследуемый раствор). В качестве растворов сравнения использовали 0,05 % растворы стандартных образцов аминокислот: аргинин, аспарагиновая кислота, глицин, серин, глутаминовая кислота, треонин, валин, метионин, триптофан, фенилаланин, тирозин, пролин, лейцин, гистидин, серин. Для приготовления растворов стандартных образцов 0,05 (точные массы) соответствующих аминокислот помещали в мерные колбы вместимостью 100 мл, прибавляли по 50 мл воды дистиллированной, перемешивали до растворения в ультразвуковой бане при температуре 50°C и доводили до метки тем же растворителем. На линию старта хроматографической пластины наносили по 20 мкл исследуемых растворов и по 5 мкл рабочих стандартных образцов аминокислот. Длина пробега растворителей 15 см. Хроматограмму высушивали при комнатной температуре в вытяжном шкафу до полного улетучивания растворителей и опрыскивали 0.2 % раствором нингидрина в 95 % этаноле (1,0 г нингидрина, 2,5 г ацетата кадмия, 10 мл уксусной кислоты ледяной растворяют в 500 мл спирта этилового) и нагревали в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С в течение 5 минут. На хроматограммах в исследуемых растворах после проявления 0,2 % раствором нингидрина обнаружены окрашенные зоны[3]. В исследуемом образце №1 и №2 обнаружено 6 окрашенных зон, из которых идентифицировано 4, в образце №3 обнаружены 5 зон, из которых идентифицированы 4. Испытание проводилось в нескольких системах растворителей. Наилучшее разделение наблюдается в системе н-бутанол-уксусная кислота-вода (80:40:40), что представлено в таблице 1. Таблица 1 Результаты хроматографического исследования аминокислотного состава экстрактов листьев шелковицы белой, черной и красной методом ТСХ-хроматографии Образец № 1 и № 2 Образец № 3 № зоны, значения Rf около 1) 0,35 (розовая) 2) 0,40 (фиолетовая) 3) 0,48 (розовая) 4) 0,56 (розовая) 5) 0,60 (розовая) 6) 0,69 (розовая) Идентифицировано Глицин Неидентифицировано Глутаминовая кислота Неидентифицировано Метионин Тирозин № зоны, значения Rf около 1) 0,35 (розовая) 2) 0,40 (фиолетовая) 3) 0,48 (розовая) 4) 0,60 (розовая) 5) 0,69 (розовая) Идентифицировано Глицин Неидентиф Глутаминовая кислота Метионин Тирозин Более точное определение аминокислотного состава в изучаемых образцах проводили на аминокислотном анализаторе АА-33. Результаты исследования представлены в таблице 2. Таблица 2 Результаты определения аминокислотного состава экстрактов листьев шелковицы белой, черной и красной № п/п 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. Аминокислоты аспарагиновая кислота треонин серин глутаминовая кислота глицин аланин валин метионин изолейцин лейцин тирозин фенилаланин гистидин лизин аргинин Всего: Шелковица черная С, г/% 1,02 0,45 0,28 2,88 1,31 0,61 0,74 1,57 0,40 0,68 1,11 0,57 0,27 0,36 0,87 13,12 Шелковица белая С, г/% 0,97 0,38 0,19 2,26 1,02 0,48 0,54 1,34 0,26 0,57 0,96 0,41 0,24 0,21 0,75 10,58 Шелковица красная С, г/% 0,98 0,34 0,12 2,01 1,12 0,43 0,52 1,18 0,18 0,19 0,84 0,37 0,21 0,17 0,68 9,34 Выводы: в результате проведенных исследований определили содержание аминокислот; наибольшее их содержание установлено в листьях шелковицы белой (13,12 С, г/%). Все три объекта исследования содержат в своем составе 15 аминокислот, из которых, в наибольшем количестве содержатся: глутаминовая кислота, глицин, метионин и тирозин. Литература: 1. Химический анализ лекарственных растений: Учеб.пособие для фарм. вузов / Ладыгина Е.Я. [и др.].- М.: Высш. шк., 1983.-176 с. 2. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / Е.А. Краснов [и др.]. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 1987.-184 c. 3. Дроздова, И.Л. Аминокислотный и микроэлементный состав листьев лопуха / И.Л. Дроздова // Фармация. – 2004.- № 3. – С.18-19.