ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧЕРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «БЕЛГОРОДСКАЯ
advertisement
1 ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧЕРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «БЕЛГОРОДСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ В.Я. ГОРИНА» На правах рукописи Писаренко Виктор Федорович РАЗРАБОТКА И АПРОБАЦИЯ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ПРИ РАЗВИТИИ ИНФЕКЦИОННОГО ПАЛЬЦЕВОГО ДЕРМАТИТА У КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 06.02.02 – Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Научный руководитель: доктор ветеринарных наук Коваленко Анатолий Михайлович Белгород – 2014 2 Оглавление Введение 4 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8 1.1 Распространенность инфекционного пальцевого дерматита 8 1.2 Возбудители ИПД 9 1.3 Эпизоотологические исследования 18 1.4 Клинические, гистологические исследования и классификация инфекционного пальцевого дерматита 1.5 Диагностические исследования и терапевтические подходы 19 22 1.6 Иммунологические и биохимические изменения при развитии инфекционного пальцевого дерматита 28 1.7 Использование активной иммунизации для предупреждения развития инфекционного пальцевого дерматита 29 1.8 Экономический ущерб 29 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 31 2.1 Материалы и методы 31 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 38 3.1 Изучение распространенности инфекционного пальцевого дерматита у крупного рогатого скота молочного комплекса ООО "Нива" "Маячки 1" Прохоровского р-на, Белгородской области 38 3.2 Изучение сезонной динамики возникновения инфекционного пальцевого дерматита 51 3.3 Разработка и апробация препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита 56 3.4 Изучение эффективности препаратов для лечения крупного рогатого скота, пораженного инфекционным пальцевым дерматитом 59 3.4.1 Сравнительная оценка эффективности лечебных и профилактических свойств препаратов для лечения крупного рогатого скота, пораженного инфекционным пальцевым дерматитом 3.5 Изучение иммунологических, биохимических и гематологических 78 3 показателей сыворотки крови коров пораженных инфекционным пальцевым дерматитом 83 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ 93 5. ВЫВОДЫ 103 6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 105 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 106 ПРИЛОЖЕНИЕ 124 4 Введение Актуальность темы. В последние годы наблюдается рост интенсивности ведения молочного животноводства с целью увеличения производства его продукции. При этом одной из важнейших задач является увеличение молочной продуктивности животноводческих комплексов. Повышение молочной продуктивности отечественных молочных пород требует длительных временных затрат, поэтому многие хозяйства стали все чаще прибегать к закупке импортного высокопродуктивного скота, завоз которого в РФ в последние годы существенно возрос. Закупка племенных высокопродуктивных животных осуществляется в большей степени из стран Европы, США, Австралии, где развито интенсивное молочное животноводство. Наряду с потребностью в импорте высокопродуктивного молочного скота стоит задача недопущения попадания на территорию РФ различных инфекционных патогенов, для чего при ввозе проводятся карантинные мероприятия. Но, некоторые инфекционные заболевания, такие как инфекционный пальцевый дерматит (ИПД), не входят в список карантинных, а следовательно, могут беспрепятственно попадать на территорию РФ с завозимыми животными. Поскольку по данным многих авторов [27, 79, 46] ИПД распространен во многих странах Европы и США, то вероятность заноса его в нашу страну возрастает. Данное инфекционное заболевание не является контагиозным но, тем не менее, способно поражать до 70% животных стада по данным Cheli R. e. Mortellaro C. причиняя, таким образом, огромный экономический ущерб всему мировому молочному животноводству, который исчисляется сотнями миллионов долларов ежегодно [34, 81]. С момента обнаружения данного заболевания исследователи всего мира не оставляют попыток разработки высокоэффективного средства для профилактики и лечения ИПД [27, 62, 16, 69, 146]. Однако же, до настоящего момента у исследователей нет однозначного мнения о существовании общепризнанного 5 средства и схемы для профилактики и лечения ИПД, а данные об эффективности существующих препаратов варьируют. Ограниченность сведений о регистрации инфекционного пальцевого дерматита на территории РФ и способах его профилактики и лечения натолкнула нас на проведение исследований в данном направлении. Исходя из выше изложенного, возникла необходимость проведения мониторинговых исследований распространенности инфекционного пальцевого дерматит в животноводческих хозяйствах Белгородской области РФ и разработки средств профилактики и лечения. Цель работы. Целью работы является разработка и апробация лечебно- профилактического средства для борьбы с инфекционным пальцевым дерматитом крупного рогатого скота, для достижения которой были поставлены следующие задачи: 1. Изучить распространенность инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Белгородской области. 2. Установить сезонную динамику развития инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота на примере МК "Маячки 1" Прохоровского района, Белгородской области. 3. Разработать препарат и способ его применения для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота. 4. Изучить сравнительную эффективность препаратов для лечения и профилактики инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота. 5. Изучить иммунологические, биохимические и гематологические показатели сыворотки крови коров при развитии инфекционного пальцевого дерматита и при проведении лечебно-профилактических разработанного нами препарата. мероприятий с использованием 6 Научная новизна. Впервые проведены мониторинговые исследования по изучению распространенности инфекционного пальцевого возбудителей дерматита в вызывающих развитие животноводческих хозяйствах Белгородской области, изучена сезонная динамика развития, разработан препарат на основе сульфата меди для профилактики и лечения. Показана более высокая эффективность разработанного препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита в сравнении с аналогом, изучены иммунобиохимические и гематологические показатели сыворотки крови больных и подвергшихся лечению животных. Теоритическая и практическая значимость работы. В результате проведенных исследований установлена распространенность инфекционного пальцевого дерматита в животноводческих хозяйствах Белгородской области, разработан препарат для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита, изучены иммунобиохимические и гематологические показатели у больных и подвергшихся лечению животных, разработаны рекомендации по диагностике, лечению и профилактике пальцевого дерматита и препарат для профилактики и лечения. Основные положения, выносимые на защиту. 1. Материалы изучения распространенности и сезонной динамики развития инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Белгородской области. 2. Препарат для лечения инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота и способ его применения. 3. Данные по изучению сравнительной эффективности препарата для лечения инфекционного пальцевого дерматита и существующих аналогов. 7 4. Иммунологические, биохимические и гематологические показатели крови при развитии инфекционного пальцевого дерматита и при проведении лечебнопрофилактических мероприятий. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы были представлены на заседании кафедры инфекционной и инвазионной патологии Белгородской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Я. Горина, ежегодных научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава БелГСХА им. В.Я. Горина (2010 - 2013), XII международной научнопрактической конференции "Естественные и математические науки в современном мире" (Новосибирск, 2013), XVIII международной научно - производственной конференции "Проблемы и перспективы инновационного развития агроинженерии, энергоэффективности и IT-технологий" Белгородской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Я. Горина (Белгород, 2014). Публикации результатов исследований. По теме работы опубликованы 4 научные статьи в изданиях, рекомендованных ВАК Министерства образования и науки РФ, получено два патента. Объем и структура диссертации. Работа изложена на 123 страницах компьютерного текста, включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований, обсуждение полученных результатов, выводы, список использованной литературы. Работа содержит 18 рисунков, 17 таблиц. Список литературы состоит из 159 источников, в том числе 146 зарубежных авторов. 8 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Распространенность инфекционного пальцевого дерматита. Инфекционный пальцевый дерматит (ИПД) (другие названия „мортелляро" или "земляная болезнь") впервые описан в 1974 Cheli R. и Mortellaro C. [24] как заболевание кожи крупного рогатого скота, располагающееся проксимально от венчика. В дальнейшем Schrank K. было введено понятие "foot-rot", Hemling T. и Lampe S. в 1997 году - „hairy heel warts“, а Demirkan I. в 1999 году - „hairy warts“ [43, 125]. Döpfer D. и Willemen K. в 1998 упорядочили уже имеющиеся до них данные в понятие "комплекс пальцевый дерматит", а Rodriguez-Lainz A.С. соавторами в 1996 описали папиломатозный пальцевый дерматит (ППД) как пролиферативную форму ИПД, в то время как Read D. и Walker R. в 1998 году описывают его как „footwarts" [109, 116]. Berry S. С соавторами в 1999 году и Mumba T. классифицируют папиломатозный пальцевый дерматит и инфекционный пальцевый дерматит как одно инфекционное заболевание [93]. Большинство исследователей [34, 47, 69] пришли к выводу об инфекционном происхождении заболевания, не зависимо от существования большого числа способствующих факторов. Данное заболевание можно назвать одним из самых распространенных заболеваний в мире [45]. Об обнаружении инфекционного пальцевого дерматита в США заявляли Rebhun B. e. a. в 1980 году, в Канаде – Hanna P. e. a. в 1994-м, в Германии – Brentrup H. и Adams W. в 1990-м, в Японии – Kimura S. e. a. в 1992-м, в Иране - Nowrouzian I. в 1994-м, Аргентине – Rutter D. в 1994-м, в Словении – Zemljic B.B. в 1992, в Словакии – Ledecky V. в 1997-м, в Мексике – ArgaezRodriguez F. e. a. в 1997-м, в Чили – Rodriguez-Lainz A. e. a. в 1999-м, в Австралии – McLennan M. и McKenzie R. в 1996-м, в Украине – Козій В. в 2005-м, в Греции – Katsoulos P. e. a. в 2008-м [60, 27, 158, 79, 20, 117, 84, 15, 70]. 9 1.2 Возбудители ИПД Из пораженных ИПД мест выделяют большое количество разнообразных микроорганизмов в различных комбинациях, но не все авторы приходят к однозначным заключениям по поводу каждого найденного возбудителя в патогенезе. В 1997 Döpfer D. e. a. году при исследовании материала с пораженной поверхности ИПД было выявлено наличие Campylobacter faecalis и в этом же году посредством прямой детекции ДНК с использованием ПЦР было установлено наличие Bacteroides levii (новое название: Porphyromonas levii) и Mycoplasma hyopharyngis [47, 128, 37]. В 2010 году так же выделили из пораженных мест Porphyromonas levii, но авторы оставляют под сомнением участие этого возбудителя в патогенезе ИПД [89]. Некоторыми исследователями было проведено выделение возбудителей ИПД из 250 биоптатов тканей и изолировано в 73 % биоптатов Porphyromonas levii, в 25% - Fusobacterium necrophorum и в 10% - как Prevotella bivia, так и Prevotella oralis и Prevotella denticola [37]. Эти данные были подтверждены Moe K. e. a. в 2010 году при обнаружении Fusobacterium necrophorum в поражениях ИПД, но, по мнению Klitgaard K. e. a. возбудитель встречается только в поверхностных слоях [89, 71]. Многие исследователи в своих работах выделяли из пораженных мест ИПД спирохет, которые находились в основном в поверхностных слоях эпидермиса, проникали в Stratum spinosum и в более глубокие слои кожи, волосяные фолликулы, сальные железы [92, 109, 54]. Santos T. e. a. при исследовании биоптатов обнаружили 166 специфических филотипов бактерий, относящихся к 7ми основным видам причем, большинство из них спирохеты (преимущественно трепонемы) [121]. Collighan R. and Woodward M. так же как и Rijpkema S. e. a. идентифицируют и классифицируют спирохет посредством 16S рРНК-цепей и относят их к виду Treponema denticola [37,113]. К такому же результату приходит Moter A. e. a. 10 посредством применения "флюорисцентной in situ гибридизации" [92]. Demirkan I. e. a. посредством иммуноцитохимического окрашивания обнаруживают Borrelia burgdorferi, Treponema denticola и Treponema vincentii [42]. Collighan R. e. a. в своих исследованиях посредством 16S рРНК-цепей установили схожесть спирохет, которых обнаруживают при заболеваниях копытец овец, периодонтите у людей и ИПД у КРС [36]. Они отнесли данных спирохет к виду Treponema vincentii. Sayers G. e. a. констатировали общность возбудителей ИПД КРС и овец, которые схожи с Treponema Phagedenis и Treponema Medium / Treponema Vincentii [122]. Evans N. e. a. выделили из пораженных мест ИПД 3 филогруппы возбудителей рода Treponema: 1 Treponema medium/Treponema vincentii-подобные, 2 - Treponema phagedenisподобные, 3 - Treponema denticola/Treponema putidum-подобные [51]. Трепонемы обладают большим генотипическим и фенотипическим разнообразием в пределах разных филогрупп и отличаются от описанных раньше видов. Авторы так же отмечают, что только в 2-х из 21 поражений ИПД они обнаружили больше одной филогруппы спирохет. В работе Nordhoff M. e. a. напротив, отмечается большое разнообразие комбинаций филотипов и филогрупп Treponema spp., присутствующих в поражениях при ИПД. Причем некоторые комбинации (TRE I– TRE II–TRE IV–DDKL-4) встречаются в большинстве исследованных проб. Авторы подчеркивают, что Treponema spp. обнаруживается так же и на границе здоровых и пораженных тканей, что свидетельствует о превалирующей роли данного возбудителя в патогенезе ИПД [99]. Evans N. e. a. подтвердили гипотезу о видовой генетической вариабельности трепонем, выделяющихся из пораженных участков при ИПД. Так, при исследовании 51 биоптата трепонемы филогруппы 1 (Treponema medium/Treponema vincentii-подобные) встречались в 96,1 % случаев, трепонемы филогруппы 2 (Treponema phagedenis-подобные) встречались в 98 % случаев, трепонемы филогруппы 3 (Treponema putidum/Treponema denticola- подобные) встречались в 76,5 % случаев. Представители всех трех филогрупп присутствовали в 74,5 % случаев [52]. Yano T. e. a. так же отметили, что 11 трепонемы являются самой многочисленной группой микроорганизмов, выделенных из поражений при ИПД (45,1 % случаев), причем T. Phagedenisподобные спирохеты были выделены из всех исследованных образцов [157]. В 2009 году в Англии был выделен новый вид трепонем Treponema pedis sp. nov. – грамм негативная, анаэробная, подвижная палочка [52]. Brandt S. e. a. при исследовании 45 биоптатов от коров, пораженных ИПД, выявили в 51 % случаев T. pedis sp. nov., в 37,7 % случаев T. medium ssp. bovis и в 4,4 % случаев T. phagedenis ssp. Vaccae. Напротив, спирохета T. brennaborense не была обнаружена ни в одном случае [26]. Rasmussen M. e. a. при исследовании 96 биоптатов от Норвежских и Датских коров с ИПД обнаружили в каждом в среднем по 7 филотипов трепонем. Так же они обнаружили 5 новых филоваров трепонем [108]. Dhawi A. e. a. выдвигают гипотезу о том, что трепонемы играют одну из ведущих ролей в возникновении ИПД, а так же о том, что овцы могут быть источником заражения для КРС. Некоторые авторы полагают, что спирохеты играют первую и доминирующую роль в патогенезе пролиферативной формы ИПД. Они так же считают возможным симбиоз спирохет и других бактерий, изолированных из пораженных мест [44]. В 2005 году в Швейцарии был описан новый возбудитель Guggenheimella bovis грамположительная, анаэробная, протеолитическая палочка [155]. Strub S. e. a. так же обнаружили в поражениях ИПД Guggenheimella bovis, но в незначительных количествах случаев, предполагая при этом, что данный возбудитель маловероятно вовлечен в патогенез ИПД [140]. Позднее Schlafer S. e. a. при исследовании биоптатов от 58 коров в Германии, больных ИПД, используя дот-блот гибридизацию и FISH не обнаружили Guggenheimella bovis. Но все же авторы отводят определенную роль Guggenheimella bovis в патогенезе ИПД [128]. Обнаруженный в ИПД поражении возбудитель Dichelobacter nodosus по мнению некоторых авторов не играет роли в развитии заболевания [120]. По мнению других авторов, которые обнаружили Dichelobacter nodosus в 49 % случаев исследования, данный возбудитель все же участвует в патогенезе ИПД, 12 предполагая, что он нарушает целостность эпителия [108]. По данным Rogdo T. e. a. Dichelobacter nodosus участвует в перекрестном заражении овец и КРС при совместном выпасе [119]. Capion N. e. a. при бактериологическом исследовании 132 биоптатов из поражений ИПД в 70 % случаев обнаружили трепонем и в 27 % случаев – Dichelobacter nodosus. Так же были выявлены Treponema brennaborenseподобные и Treponema refringens/Treponema calligyrum-подобные микроорганизмы [31]. Исследователями предпринимались попытки вирусологических исследований, но когда Zemljic B. обнаружил тельца-включения в ядрах клеток из поражений ИПД, которые похожи на таковые при папилломатозе КРС, ему не удалось обнаружить паповавирус используя ПЦР [158]. Так же паповавирус не обнаружили и Borgmann I. e. a. [25]. Brandt S. e. a. обнаружили в ИПД поражениях папилломавирус КРС (22 % случаев) но, тем не менее, авторы не предполагают прямое участие вируса в патогенезе ИПД [26]. Инфекционное происхождение заболевания в очередной раз доказывают попытки искусственного заражения. Zemljic B. в 1994 году потерпел неудачу при попытке вызвать ИПД посредством заражения изолятом Treponema sp [158]. Gomez A. e. a. провели попытку заражения четырех телок голштинской породы 14 – 16-ти месячного возраста. Для этого была использована инокуляция гомогената из биоптатов от животных, пораженных ИПД, и гомогената из культуры Treponema spp.. в пяточной области и возле рудиментарных копытец. Так, на 4-х из 6-ти зараженных конечностях гомогенатом из биоптатов от животных, пораженных ИПД, наблюдалось развитие ИПД, а так же на одной из четырех конечностей, зараженных гомогенатом из культуры Treponema spp. (поражение развилось только в области рудиментарных копытец). При этом заражение гомогенатом из культуры Treponema spp.. в данном исследовании было применено впервые [58]. 13 Неинфекционные факторы являются способствующими для возникновения и развития ИПД. К ним относятся различные моменты в кормлении, содержании и использовании животных. Nocek J. e. a. отмечают, что достаточное содержание в рационе микроэлементов снижает заболеваемость ИПД [98]. Tomlinson D. e. a. указывают на то, что биотин снижает вероятность поражения коров ИПД [147]. Somers J. e. a. отмечают, что более быстрое повышение содержания концентрированных кормов в рационе коров сразу после отела способствует повышению заболеваемости ИПД [133]. К такому же выводу пришли другие авторы [69, 103]. В исследованиях Murray R. e. a. отмечается, что частота кормления, так же как и способ, не влияют на заболеваемость ИПД [94]. Содержание животных влияет в большей степени на возникновение ИПД. По мнению Wells S. e. a. ограниченный выпас, а так же условия содержания, при которых накапливается кал, способствуют развитию ИПД [152]. Так же Somers J. e. a. установили, что при постоянном выпасе заболеваемость ИПД ниже, чем при частичном, 25,4 и 36 % соответственно [133]. Onyiro e. a. полагают, что коровы, у которых есть доступ к пастбищу, менее подвержены заболеваемости ИПД. Так же авторы указывают на предрасположенность к возникновению ИПД при длительном содержании коров на соломенной подстилке [104]. Laven R. and Logue D. так же говорят о том, что при содержании нетелей до отела на чистой соломенной подстилке, они менее подвержены заболеванию ИПД после отела [104]. Хотя, Holzhauer M. e. a. указывают на то, что животные, у которых был доступ к выгулу более 8 часов, более подвержены заражению ИПД [67]. О схожих результатах заявляют Haufe H. e. a. [61]. Holzhauer M. e. a. утверждают, что содержание животных на пастбище сокращает заболеваемость ИПД, но наибольший эффект отмечается в мае и августе [68]. При беспривязном содержании была установлена зависимость заболеваемости ИПД от размеров боксов. Так, при длине боксов 220-230 см заболеваемость была максимальной (31,6 %), а при длине более 230 см – минимальной (22,4 %). 14 Аналогичная зависимость касается и ширины: при ширине боксов 110 – 115 см заболеваемость ИПД максимальна (32,5 %), а при ширине более 115 см – минимальна (20,3 %) [133]. Так же авторы установили зависимость и от толщины подстилки в боксах: толщина менее 5 см способствует увеличению заболеваемости ИПД (29,9 %); если же толщина подстилки превышает 5 см, то заболеваемость составляет 19,7 %. Так же была установлена минимальная заболеваемость ИПД при содержании животных на щелевых полах со скреперной системой навозоудаления (24,9 %) в сравнении с содержанием на щелевых полах (28,8 %) и бетонных полах (31,8 %) [133]. В более ранних исследованиях Somers J. e. a. уже приходили к выводу о том, что наименьшая заболеваемость ИПД наблюдается при содержании коров на щелевых полах со скреперной системой навозоудаления [132]. Сравнивая системы щелевых полов между собой была установлена более высокая заболеваемость на резиновых щелевых полах в сравнении с бетонными, 23 % и 14 % соответственно [76]. По данным Haufe H. e. a. ИПД встречается чаще на решетчатых бетонных полах в сравнении с покрытием полов из асфальтной мастики или резины [61]. Barker Z. e. a. установили, что ИПД чаще встречается при содержании коров на рифленых бетонных полах, чем на не рифленых [21]. Wells S. e. a. пришли к выводу, что у животных, которые преимущественно зимой содержатся на влажной, загрязненной подстилке, чаще встречается ИПД [152]. Cramer G. e. a. при исследовании всех молочных хозяйств в Онтарио, Канада установили уровень заболеваемости в хозяйствах с привязным содержанием 9,3 %, а с беспривязным – 22,7 % [39]. Немногим позже Cramer G. e. a. при исследовании 134-х стад с привязным содержанием и 38 стад с беспривязным отмечают, что только 29,9 % и 7,9 % стад соответственно были свободны от поражения ИПД. Так же они выявили, что при более частой очистке навозного прохода скрепером поражениями ИПД [40]. увеличивается количество животных с 15 Somers J. e. a. выявили так же зависимость заболеваемости ИПД от длинны прогонных коридоров для коров. Так, при максимальной длине 150 – 500 метров заболеваемость ИПД минимальна – 22,5 %, а при минимальной длине, заболеваемость ИПД максимальна – 40,7 %. Так же авторы установили, что при выращивании телят в помещениях для коров в дальнейшем их заболеваемость ИПД несколько ниже (24,4 %) в сравнении с теми, которых выращивали отдельно (32,7 %) [133]. Размер стада так же оказывает влияние на частоту возникновения ИПД. По данным Wells S. e. a. ИПД встречается в стадах насчитывающих менее 100 голов дойного стада в 36,4 % случаев; при поголовье 100 – 199 коров – в 61,9 % случаев и при поголовье более 200 коров – 80,3 % [152]. Среди других факторов, способствующих повышению заболеваемости ИПД, является температурный стресс [82]. Еще одним способствующим фактором является молочная продуктивность. При продуктивности коров более 8000 кг в год и с увеличением продолжительности лактации, а так же у первотелок Metzner M. e. a. отмечают повышенную заболеваемость ИПД [86]. König S. e. a. при помощи моделирования прогноза установили, что увеличение молочной продуктивности на 1 литр повышает заболеваемость ИПД на 2,4 % [75]. Так же была предпринята попытка установить влияние частоты доения на заболеваемость ИПД, но никаких закономерностей выявлено не было [100]. Некоторые авторы [20] отмечают зависимость возникновения ИПД от сроков лактации. Так, заболеваемость ИПД чаще наблюдается в первые месяцы лактации и чаще у первотелок. Эту закономерность подтверждают и Holzhauer M. e. a. отмечая, что наибольшему риску заражения подвержены животные на пике лактации (с 30-го по 60-й день) и в последней ее трети [67]. В более поздних исследованиях авторы указывают период, как наиболее опасный для возникновения активной стадии ИПД, 60 – 120 дней [69]. Brentrup H. and Adams 16 W. напротив не отмечают никакой зависимости ИПД от течения лактации [27]. Somers J. e. a. отмечают тот факт, что заболеваемость ИПД значительно снижается с наступлением 4-й лактации. А так же более низкий показатель заболеваемости сухостойных коров в сравнении с дойными, 24,9 % и 20,3 % соответственно [133]. Amory J. e. a. напротив указывают на то, что риск развития ИПД в начале лактации не снижается с повышением их числа [19]. Koenig S. e. a. получили схожие результаты: в проведенных исследованиях заболеваемость первотелок была незначительно выше, чем у коров с количеством лактаций ≥ 3, 13,9 % и 12,5 % соответственно [72]. Nielsen B.H. e. a. при обследовании стада коров установили, что 75 % поражений наблюдались у первотелок [97]. В более поздних исследованиях Nielsen B.H. e. a. установили, что вероятность появления ИПД во время первой лактации выше, чем во время второй, а после третьей он снижается. Так же авторы установили, что на ранних стадиях лактации вероятность появления ИПД ниже, чем на средних и поздних стадиях [96]. Схожие результаты получили и другие авторы так же [131, 21]. В работе ArgaezRodriguez e. a. отмечается, что при исследовании стада из 577 дойных коров, 33 % из них поражены ИПД в стадии лактации, и лишь 1 % в сухостойной стадии. Так же полученные данные свидетельствуют о том, что риск развития ИПД в первый месяц лактации наиболее высок [20]. Holzhauer M. e. a. отмечают более чем двукратное увеличение заболеваемости ИПД у первотелок в сравнении с нетелями [68]. Некоторые авторы связывают заболеваемость ИПД с обрезкой копыт. Согласно Metzner M. e. a. высокая заболеваемость связана с более короткими интервалами между обрезками копыт (6 – 8 месяцев вместо 12) [86]. Это, возможно, можно объяснить тем, что хозяйства, в которых наблюдается ИПД, чаще проводят обрезку копыт, чем другие [86]. Somers J. e. a. установили, что при интервале между обрезками копыт менее 5 месяцев, заболеваемость ИПД составляет 24,4 %, что отличается от заболеваемости при более длительном интервале (более 7 месяцев – 33,6 %) [133]. Так же недостаточная чистота и дезинфекция 17 инструментов для обрезки копыт, по мнению Wells S. e. a. способствует более высокой степени заболеваемости [152]. Ouweltjes W. e. a. проводили сравнительный анализ влияния стандартного датского метода обрезки копыт и альтернативного на интенсивность поражения животных ИПД в стаде, а так же влияние покрытия полов на данное заболевание. В результате была выявлена большая разница в интенсивности поражения ИПД разных групп в сравнение с другими поражениями копыт, хотя авторы отмечают при этом, что такое различие может обуславливаться изначальной разницей в заболеваемости ИПД между группами [105]. Cramer G. e. a. отмечают, что на степень поражения животных ИПД влияет сезонность проведения обрезки копыт в стадах с беспривязным содержанием. Так, после проведения обрезки копыт летом или осенью, ИПД встречается реже, чем при проведении ее весной [40]. Генетическая предрасположенность оказывает влияние на возникновение множества заболеваний, в том числе и на ИПД. О наследственном влиянии некоторых признаков экстерьера на возникновение ИПД говорят исследования van der Waaij e. a.. Так, авторами была установлена генетическая корреляция между ИПД и боковым видом задних конечностей (0,16±13), углом скакательного сустава (- 0,22±0,13), locomotion score (- 0,67±0,19) и комбинированным индексом конечностей (- 0,34±0,12) [149]. В исследованиях Onyiro e. a. получены такие же результаты генетической зависимости ИПД и locomotion score (- 0,67) и существенно различающиеся результаты по комбинированному индексу конечностей (- 0,63). Генетическая корреляция между ИПД и боковым видом задних конечностей, а так же углом скакательного сустава в данных исследованиях незначительно отличается от нулевого значения [104]. Koenig S. e. a. установили незначительный уровень наследственности ИПД (0,073) [72]. Olmos G. e. a. утверждают, что у коров с более высоким индексом племенной ценности реже встречается ИПД [149]. Scholey R. e. a. при изучении генетического материала от здоровых и больных ИПД животных из одного хозяйства 18 обнаружили гены с однонуклеотидным полиморфизмом, наличие которых было связано с восприимчивостью или же невосприимчивостью к ИПД [124]. 1.3 Эпизоотологические исследования. ИПД - заболевание, которому подвержен крупный рогатый скот. Существуют данные о регистрации заболевания во многих странах; данные о заболеваемости сильно разнятся. Cheli R. и Mortellaro C. в 1974 году заявляют о частоте заболеваемости в пределах 60% - 70% [34]. В исследовании Metzner M. e. a. ИПД отмечается как самое частое заболевание конечностей в 169 молочных хозяйствах северной Германии [86]. По данным Smits M. e. a. при обследовании 34 молочных хозяйств в Голландии, заболеваемость ИПД варьировала от 0 до 50 % [131]. Позднее, анализируя данные при обрезке копыт 383 стад в Голландии Holzhauer M. e. a. отмечают их пораженность на уровне 21,2 %, причем уровень пораженности внутри стада варьирует от 0 % (9,1 % стад) до 83 % [67]. Murray R. e. a. в исследованиях в Англии и Уэльсе обозначают, сопровождающийся хромотой ИПД, как самое частое заболевание кожи задних конечностей и четвертое по частоте заболевание в области копытец [95]. Wells S. e. a. в своей работе указывают, что в США за последние 12 месяцев до момента проведения исследований ППД регистрировался в 43,5% молочных хозяйств [152]. О распространенности ИПД среди стран ближнего зарубежья заявляет Козій В., говоря о пораженности ППД некоторых стад Украины в пределах 22,7 - 28,4 % [15]. По данным Ettema J. and Østergaard S. при обследовании молочных хозяйств в Дании установлена частота заболеваемости ИПД среди хромых животных на уровне 13 % [49]. В исследованиях Thomsen P. e. a. ИПД отмечается как самое частое поражение кожи конечностей [144]. На появление ИПД в стадах влияет закупка животных, особенно возросшая в последние годы. Argaez-Rodriguez F. e. a. выяснили, что у приобретенных животных риск развития ИПД в 3,4 раза выше чем у тех, которые родились в данном хозяйстве [20]. 19 Способствуют появлению ИПД некоторые поражения конечностей. Holzhauer M. e. a. указывают на то, что животные, у которых наблюдается межпальцевый дерматит, тилома или межпальцевая флегмона, более подвержены поражению ИПД [67]. Немногим позднее Holzhauer M. e. a. установили, что риск появления ИПД в течение недели у животных с эрозией пятки выше на 7 % в сравнении с изначально здоровыми животными [69]. В исследованиях Capion e. a. отмечается ассоциация ИПД и вогнутой стенки копытца [31]. 1.4 Клинические, гистологические исследования и классификация инфекционного пальцевого дерматита. Появление и развитие поражений при ИПД описывается по-разному. Döpfer D. делит заболевание на 4 различные стадии (М1 – М4). Эта классификация описывает степень проявления заболевания. М1 – изменения малого размера с красной или бело-красной поверхностью, возможна экссудация. Эпителий может быть сохранен или поврежден. М2 – "классическое изъязвление", красные или бело-красные поражения диаметром более 1 см. На поверхности поражения грануляционная или пролиферативная ткань (в большом количестве или филаментарно). М3 – заживающие поражения с черной струпьевидной поверхностью. М4 – изменения кожи вызывающие подозрение на ИПД, а так же пролиферативная форма [47]. Позднее, Döpfer D. добавляет еще одну стадию ИПД – М4.1, которая характеризуется развитием нового поражения М1 на хроническом процессе М4 [45]. Стадии заболевания не остаются неизменными на протяжении времени. Наблюдается постоянный переход из стадии в стадию под воздействием различных внешних факторов. Самый частый переход наблюдается между стадиями М2 – М4; встречаются так же менее логичные переходы: M3 M0, M0 - M2 и M0 - M3 [69]. Могут так же наблюдаться разные стадии ИПД на различных конечностях [25]. Manske e. a. предлагают свою классификацию в баллах от 1 до 5, где: 1 покраснение кожи с видимыми паппилами; 2 – влажная, покрасневшая, очерченная поверхность с неповрежденным эпидермисом; 3 – поверхность 20 покрыта экссудатом, эпидермис разрушен; 4 – эпидермис разрушен, подсыхающая поверхность с признаками заживления; 5 – темный налет, полностью или почти полностью зажившая поверхность [83]. Козій В. при изучении заболевания выделил 4 стадии его течения: эрозивную, пролиферативную, папиломоформную и смешанную. С начала заболевания (эрозивная форма) отмечаются четко ограниченные округлые поражения диаметром от 1 до 3 и больше сантиметров, с утраченным эпидермисом, болезненные при прикосновении. Соседние участки, как правило, не изменены. Со временем поражения покрываются грануляционной тканью (пролиферативная форма), которая заполняет дефект и при дальнейшем развитии выпячивается над уровнем кожи. Образуется округлая, выпуклая, болезненная грануляционная масса, которая легко кровоточит. Наблюдается гипертрихоз. Папиломоформная форма характеризуется образованием множественных папиломообразных отростков или волнистой пленки на поверхности пораженных участков, которые окружены полоской гиперкератизированной кожи. На прилежащих участках кожи - выраженных гипертрихоз. При смешанном течении ППД одновременно можно наблюдать признаки всех форм [15]. По мнению Rasmussen M. e. a. предполагают, что первый этап развития ИПД не инфекционный. Появляются какие-либо повреждения кожи, которые приводят к нарушению кератинизации. поверхностный слой Это эпидермиса приводит к подвергается тому, что в дальнейшем разрушению посредством протеолитических ферментов D. Nodosus или других возбудителей. Нарушенный эпидермальный барьер является воротами инфекции для различных филотипов трепонем, которые интенсивно размножаясь, приводят к клиническим признакам ИПД [108]. В некоторых случаях ИПД после переболевания или лечения может появляться снова. Так, по данным Argaez-Rodriguez F. e. a. у 68 % коров, у которых ИПД наблюдался на предыдущей лактации, был обнаружен рецидив в последующей [20]. Reader e. a. так же отметили повышенный рецидивизм заболевания [110]. 21 Döpfer D. отмечает, что рецидивы ИПД обусловлены глубоким проникновением возбудителя в кожу и его инкапсуляцией [46]. ИПД поражает преимущественно задние конечности, однако в некоторых случаях заболевание встречается и на передних конечностях. В основном поражаются отдельные конечности, но могут поражаться и пары конечностей или даже все конечности. ИПД локализируется большей частью на плантарной / пальмарной поверхностях конечностей возле венчика [34]. Brentrup H. and Adams W. находят поражения в межкопытцевой щели на уровне пяточной части копытец [27]. По данным Holzhauer M. e. a. в межкопытцевой щели обнаруживаются в основном стадии ИПД М1 и М4. Встречаются проникающие поражения до основы кожи копыта в области подошвы или стенки [69]. Иногда поражаются рудиментарные пальцы [115]. Поверхность поражений описывают как язвенное изменение с экcсудативным характером [34]. Поверхность имеет вогнутый вид, красная, гладкая или мелкозернистая, напоминающая поверхность клубники [27]. Cheli R. and Mortellaro C. отмечают наличие отросшей шерсти вокруг поврежденного участка, часто склеенную экссудатом [34]. Так же некоторые авторы описывают пролиферативную картину как толстые паракератические образования [35, 60, 109]. Диаметр пораженных участков составляет примерно 0,5 - 8 см. При этом вид поражений принимает формы от маленьких округлых до больших бесформенных [27]. В ранних исследованиях часто сообщается об отчетливой хромоте заболевших животных [34], но в последующих исследованиях указано, что у больных ИПД животных хромота может встречаться [84] но, не во всех случаях заболевания [154]. Пораженные места зачастую чувствительны к надавливанию [27]. Holzhauer M. e. a. указывают на то, что болезненность наблюдается, в основном, на стадии заболевания М2 [69]. По данным Frankena K. e. a. при усугублении протекания ИПД со временем количество хромых животных возрастает с 16 до 40 % [57]. Исследователями были отмечены и изменения в поведении пораженных коров. Так, Chapinal e. a. отмечает, что общая продолжительность лежания, количество 22 циклов лежания и продолжительность цикла лежания у коров с поражениями ИПД не отличается от коров без поражений копыт [33]. Pavlenko e. a. напротив отметили, что больные коровы лежат меньше здоровых [106]. Bruijnis M. e. a. изучили влияние наличия заболеваний копыт на т. н. благополучие животных (animal welfare impact). По полученным данным ИПД оказывает самое негативное влияние [28]. Описывая гистологическую картину, авторы отмечают периваскулярную воспалительную инфильтрацию и утолщение эпидермиса. Клетки эпителия гипертрофированы и гиперплазированы. Наблюдается дегенерация и образование пустот между клетками. Эндотелий клеток кожи набухший, они делятся и образуют тромбы гиперкератоз со [25, Наблюдается 158]. значительным эпидермальная эпидермальным отеком гиперплазия, и некрозом, поверхностный гнойный и негнойный дерматит, фиброз и присутствие грануляционной ткани. А так же наблюдаются интраэпидермальные микропустулы [25]. 1.5 Диагностические исследования и терапевтические подходы В большинстве случаев диагноз ставится на основании клинических признаков [150]. Местом для постановки клинического диагноза является, как правило, станок для обрезки копыт, а так же доильный зал. Чувствительность метода постановки диагноза в доильном зале 0,72, специфичность – 0,99. Точность постановки диагноза в станке для обрезки копыт гораздо выше [143]. Relun A. e. a. предложили использовать для облегчения постановки диагноза, пользоваться в доильном зале зеркалом и фонарем, что позволяет лучше обозревать пораженный участок [111]. Stokes e. a. предприняли попытку обнаружения ИПД при помощи инфракрасной термографии. Но, было установлено, что температура конечностей, пораженных ИПД, не отличается от таковой при других заболеваниях. Авторы предложили использовать бороскоп для выявления ИПД в доильном зале. 23 Чувствительность такого метода составила 1,00, а специфичность – 0,99 [138, 139]. На сегодняшний момент не существует надежного теста для лабораторной постановки диагноза [46]. Для лечения применяются индивидуальные и групповые методы. Местное лечение, особенно с применением средств, содержащих антибиотики, является наиболее распространенным методом лечения [78]. Toholj B. e. a. отмечают, что местное лечение более результативно, если предварительно удалить пораженные ткани [146]. Для локальной терапии применяют ряд различных субстанций. О хорошей результативности лечения сообщается при применении аэрозолей, содержащих тетрациклин (хлор- или окситетрациклин) [27, 16]. При таком лечении снижение степени хромоты должно произойти в течение 6 – 12 ч. Через 2 – 3 дня животные передвигаются без затруднений [27]. Однако Holzhauer M. e. a. указывают на то, что после применения СТС спрея (хлортетрациклин) 43 % поражений стадии М2 не исчезают в течение недели, а 35 % поражений переходят в стадию М4 [69]. В исследованиях Hernandez J. e. a. хороших успехов в лечении пролиферативной формы ИПД достигают посредством применения тетрациклина в виде аэрозоля один раз в день в течение 5 дней. После двухдневной паузы лечение проводится затем еще 3 дня [62]. Пролиферативные поражения, которые локализуются в межпальцевой щели, поддаются терапии хуже чем те, которые находятся в области пятки или венчика [63]. По данным Toholj B. e. a. высокий терапевтический эффект (86,1%) достигается путем использования спрея окситетрациклина с наложением защитной повязки [146]. Evans N. e. a. при проведении исследований in vitro на чувствительность 19 видов трепонем к 8 различными антибиотикам установили высокую чувствительность к пенициллину и эритромицину и невосприимчивость к энрофлоксацину [52]. Yano T. e. a. получили при определении чувствительности к T. phagedenis несколько иные данные. Так, была установлена низкая чувствительность к пенициллину G, ампициллину, эритромицину и средняя 24 чувствительность к окситетрациклину, линкомицину, энрофлоксацину, хлорамфениколу, цефтиофуру и гентамицину [157]. Согласно Hernandez J. and Shearer J. хороший эффект достигается при лечении пролиферативной формы ИПД с использованием растворимой меди [63]. В исследованиях Козій В. 5 % раствор сульфата меди упоминается как низкоэффективный [16]. Toholj B. e. a. используя 8 %-ный раствор сульфата меди без наложения защитной повязки достигают терапевтического эффекта 32,3 %, а с наложением повязки – 54,83 % [146]. При использовании 20 %-ного раствора, по данным Козій В. эффективность лечения возрастает до 72 %. Данный автор так же использовал для лечения йодсодеращий препарат "Йоддицерин", добиваясь при этом успешности терапии на уровне 85,7 % после однократного применения [16]. В последние годы на рынке появилось некоторое количество препаратов, предназначенных для лечения ИПД. Так, Kofler J. e. a. при использовании пасты Protexin Hoof-Care (соли металлов, органические кислоты) для лечения ИПД обнаружили такой же высокий терапевтический эффект как и у спрея окситетрациклина [74]. Shahabaddin M. e. a. при сравнении терапевтического эффекта спрея линкомицина, геля Solka Hoofgel (с наложением защитной повязки, без наложения, с удалением пораженных тканей), пришли к выводу, что максимальный эффект достигается после удаления пораженных тканей с применением Solka Hoofgel и наложением защитной повязки [129]. Holzhauer M. e. a. установили высокую эффективность геля Intra Hoof-fit, содержащего медь и цинк, при лечении стадии ИПД М2, применяя его по схеме: 1-й день – наложение геля с защитной повязкой, день 3 и 5 – наложение геля без защитной повязки [65]. Для лечения хронической стадии (М4) можно использовать пасту Novaderma, которая содержит салициловую кислоту [56]. Среди нелекарственных средств борьбы с ИПД можно назвать мазь Mortekill, которая применяется в комбинации со спреем, содержащим антибиотик, путем нанесения на пораженное service.jimdo.com). место 1 – 3 раза (http://mortellaro-killer- Существует пластырь для лечения ИПД под названием 25 Mortella Heal, который не содержит никаких лекарственных препаратов. Лечебное действие обуславливается созданием благоприятных условий на поверхности поражения для самозаживления. Он накладывается на пораженный участок кожи с фиксирующей повязкой на 10 дней [56]. Самым доступным и простым способом борьбы является обмывание пораженных мест проточной водой. Таким образом создаются аэробные условия на поверхности поражения, что способствует его заживлению [73]. Существуют системные методы терапии, которые применяются редко ввиду дороговизны и недостаточной эффективности [78, 150]. Rodrigues C.A. e. a. при однократном внутривенном введении тетрациклина гидрохлорида в дистальный участок пораженной конечности отметили лишь незначительный терапевтический эффект. Но, все же авторы полагают, что при повторном введении эффективность лечения будет гораздо выше [114]. Rodrigues C.A. e. a. добиваются хорошего эффекта при применении окситетрациклина в комбинации с хирургическим и местным лечением ИПД на рудиментарных пальцах [115]. Для лечения ИПД предпринимались попытки хирургического метода но, существует, тем не менее, повышенная вероятность рецидива [27]. В качестве групповой терапии используют копытные ванны, которые применяются для стояния в них и прогона животных через них. Хотя, по предположению Amory J. e. a. при не достаточно частой замене раствора в ванне, создаются условия для разноса возбудителей ИПД [19]. Эффективность лечения в ваннах будет выше, если перед основной ванной с лечебным раствором установить ванну с водой для уменьшения загрязненности конечностей [102]. Для заполнения ванн применяют различные субстанции. Metzner M. рекомендует применять раствор линкомицина в концентрации 150 – 350 мг на литр воды [86]. Cook N. e. a. отметили, что формалин, наряду с сульфатом меди, являются самыми распространенными веществами для использования в копытных ваннах [38]. Speijers H. e. a. отмечает высокую эффективность 5%-ного раствора сульфата 26 меди в хозяйствах с высокой степенью поражения ИПД [135]. В более поздней работе Speijers H. e. a. достигают хорошего лечебного эффекта при применении 5%-ного раствора сульфата меди в виде ванн после 4-х доений подряд, один раз в неделю [134]. Так же высокую эффективность в лечении ИПД при помощи 5%ного раствора сульфата меди в виде ванн подтверждает и Logue D. e. a. [80]. Так же авторы установили, что установка двух ванн подряд повышает терапевтический эффект. Согласно выводам Hoffman A. раствор сульфата меди в концентрации 5% и выше сокращает вероятность появления новых поражений ИПД и сокращает количество существующих [64]. Speijers H. e. a. пришли к выводу, что в хозяйствах с низкой степенью заболеваемости ИПД достаточно использовать 2% раствор сульфата меди один раз в две недели или месяц [136]. Существует рад коммерческих препаратов для использования в копытных ваннах. Gradle C. e. a. использовали кристаллический, не содержащий антибиотиков, состав на основе препарата Victory для копытных ванн. При этом авторы отметили довольно высокий терапевтический эффект [59]. Seymour J. e. a. при использовании коммерческого препарата Double ActionTM в виде ванн, в дополнение к местной терапии, добились снижения заболеваемости ИПД на 65 % [127]. Thomsen P. e. a. провели исследования по влиянию 3-х коммерческих продуктов на лечение и профилактику ИПД (Вироцид, содержащий глутаровый альдегид; Кикстарт 2, содержащий органические кислоты; Хуфкеар ДА, содержащий компоненты с четвертичным аммонием). Так, результаты показали отсутствие терапевтического и профилактического эффекта [143]. Teixeira A. e. a. провели сравнительную оценку эффективности коммерческого препарата T-Hexx Dragonhyde HBC с формалином и сульфатом меди. При этом авторы отметили более высокую эффективность коммерческого препарата в сравнении с формалином, и отсутствие разницы в эффективности в сравнении с сульфатом меди [141]. В своей работе Relun A. e. a. при использовании коммерческого препарата для копытных ванн Hoof-Fit, который содержит хелатные соединения меди и цинка, устанавливают успешность лечения на уровне 81 % (при режиме 2 дня через 4 недели) и 98 % (при режиме 2 дня через 2 недели). Так же в группе с 27 использованием данного препарата для индивидуальной обработки конечностей в виде опрыскивания была достигнута эффективность на уровне 95 % [112]. Holzhauer M. e. a. в сравнительном анализе эффективности коммерческого препарата Digiderm+ (содержащего сульфат меди) и формалина выяснили, что вероятность повторного появления ИПД после использования препарата Digiderm+ в виде ванн в 3 раза ниже, чем после применения формалина. Хотя, в лечебном эффекте разницы не было [68]. При применении группового метода лечениям важно соблюдать определенные размеры копытных ванн. Для того, что бы при прохождении коров через ванну они погружали задние конечности в раствор как минимум 2 раза, рекомендуется длина ванны минимум 3 м. Увеличение количества погружений положительно сказывается на эффективности лечения [38]. Говоря об общих факторах, которые ускоряют процесс заживления ИПД можно выделить следующие: размер пораженного участка, загрязненность конечностей, выпас и дополнительное индивидуальное лечение [112]. Так же Döpfer D. e. a. отметили, что на заживление поражений ИПД или же их дальнейшее развитие влияет скорость выявления острой стадии ИПД и эффективность его лечения [46]. Для борьбы с ИПД применяются так же так называемые "сухие ванны". По данным Pijl R. высокий терапевтический эффект достигается путем применения порошка Derma Health Powder в виде сухих ванн после лечения спреем, содержащим антибиотик [107]. Снижение заболеваемости ИПД можно добиться путем повышения гигиены конечностей. Для этого применяют специальные автоматические ванны для мытья дистального отдела конечностей. Так, Thomsen P. e. a. (2012) используя для мытья конечностей воду и мыльный раствор в специальных ваннах установили, что при использовании воды, в контроле ИПД встречался в 1,27 раза чаще, а при использовании мыльного раствора – в 1,48 раза [144]. 28 1.7 Иммунологические и биохимические изменения при развитии инфекционного пальцевого дерматита Oelkers B. устанавливают в своих исследованиях более высокую заболеваемость ИПД у животных в первые две лактации, что могло бы говорить о возрастном иммунитете [101]. В 2003 году Trott D. e. a. устанавливают, что у коров развивается гуморальный иммунный ответ на липополисахариды спирохет [148]. Elliott K. e. a. изучали интенсивность гуморального иммунного ответа на спирохет при ППД, а так же при искусственном заражении подопытных бычков Treponema phagedenis-подобными штаммами (1A, 3A, 4A и 5B). При этом авторы установили следующие факты: во всех случаях формируются антитела; наибольшее количество антител выработалось у животных с ИПД на штамм 5В по сравнению с другими штаммами, а наименьший – на штамм 3А [48]. Мое K. e. a. установили высокий титр IgG у здоровых животных в хозяйствах, где присутствует ИПД, в то время как в свободных от ИПД хозяйствах титр иммуноглобулинов этого класса оставался низким [88]. В другом исследовании Мое K. e. a. обнаружили повышенное содержание IgG против P. levii в сыворотке крови у коров в хозяйствах с ИПД не зависимо от наличия у них поражений. Но, высокое содержание IgG отмечалось не у всех животных, что можно объяснить различными стадиями течения болезни, разными антигенными свойствами возбудителя и наличием других возбудителей [89]. Murray R. e. a. установили прямо пропорциональную зависимость содержания IgG2 в сыворотке крови больных коров от интенсивности проявления клинических признаков ИПД [94]. В 2007 году Zuerner R. e. a. установили, что Treponema phagedenis-подобные спирохеты, которые находятся глубоко в пораженных местах при ППД, обладают иммуносупресивным эффектом на макрофаги и могут нарушать процессы заживления [159]. По данным Стельмухов М.В. пониженное содержание белка и его фракций наблюдалось у коров с гнойно-некротическими язвами [11]. Чумиков А.А. так же отмечает пониженное содержание общего белка в крови у таких животных и его 29 повышение в процессе терапии. Савин К.С. отмечает увеличение содержания лизоцима и БАСК в результате лечения коров препаратом Педилайн при инфекционной патологии дистального отдела конечностей [9]. По данным Улько Л.Г. у коров с ассоциированными бактериозами конечностей показатели неспецифической резистентности (ЛАСК, БАСК, ФА), общий белок, альбумины, α-, β-глобулины были ниже, чем у здоровых животных, а γ-глобулины выше. Так же была отмечена повышенная активность фермента АсАТ, пониженная активность каталазы и содержание малонового диальдегида [18]. 1.8 Использование активной иммунизации для предупреждения развития инфекционного пальцевого дерматита Использование вакцин не нашло широкого применения ввиду целого ряда факторов. Однако, существуют единичные удачные попытки применения вакцин. Позитивного эффекта в борьбе с ИПД добился Oelkers B. используя специфичную для хозяйства вакцину из изолятов анаэробов. В своих исследованиях автор отмечает положительный эффект в образовании и развитии ИПД, но, при применении вакцины ИПД не устраняется и не снижается количество вновь заболевших животных [101]. Schütz W. напротив, при применении специфичной вакцины не отмечает положительного эффекта [126]. Fidler A. e. a. указывают на отсутствие лечебного эффекта при вакцинации Serpens-бактерином коров с уже имеющимися поражениями ИПД [55]. 1.9 Экономический ущерб Хромота, вызываемая ИПД у КРС приводит большим экономическим потерям. Для английского сельского хозяйства Whitaker D e. a. называет ежегодный ущерб, причиненный хромотой, равным 35 млн. £ [153]. По данным Национальной системы мониторинга здоровья животных (NAHMS) в Огайо, Miller G. and Dorn C. дают средний экономический ущерб на одно животное, вызванный 30 заболеваниями, который составляет 172,4 $ на одну корову в год, где ущерб от хромоты составляет 5% [87]. Booth C.J. e. a. не отмечает сильного влияния ИПД на выбраковку животных [24]. К таким же выводам пришли и Cramer G. e. a. [41]. По оценке Losinger W. годовой ущерб, причиненный ППД молочному скотоводству США, составляет 190 млн. ± 130 млн. долларов США, а недополучение молока составляет 570 ± 370 млн. литров [81]. Bruijnis M. e. a. отмечают, что среди всех поражений копыт, самый большой ущерб причиняет ИПД т. к. он отличается сравнительно высокой заболеваемостью, а так же высокой долей клинических случаев [29]. По данным Ettema J. e. a. ИПД снижает молочную продуктивность на 0,5 % за лактацию, вызывает ежедневную потерю живой массы на 0,03 %, снижает оплодотворяемость при осеменении, увеличивает продолжительность пониженной оплодотворяющей способности на 42 дня, повышает вероятность выбраковки на 0,14 % и риск падежа (или забоя) на 0,16 % [50]. Cha E. e. a. указывают на годовой ущерб от одно случая ИПД на уровне 132,96 $, среди которых, ущерб от снижения удоя составляет 35,41 $, ущерб от ухудшения функции воспроизводства – 41,37 $ и затраты на лечение – 56,18 $ [32]. Pavlenko A. e. a. указывают на тот факт, что суточная молочная продуктивность у больных коров была ниже примерно на 5,5 литров в сравнении со здоровыми животными [106]. 31 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Материалы и методы Работа выполнена на базе кафедры инфекционной и инвазионной патологии Белгородской государственной сельскохозяйственной академии им. В.Я. Горина в соответствии с планами научно-исследовательских работ. Бактериологические исследования проведены в Централизованной ветеринарной лаборатории ООО «Ново – Ездоцкая». Научно-производственные опыты проведены на базе животноводческого хозяйства МК "Маячки 1" ООО "Нива" Прохоровского района Белгородской области. Поголовье хозяйства было сформировано в 2005 году нетелями голштинской породы отечественной и европейской селекции (Дания, Голландия). Изучение инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота проводили используя эпизоотологические, клинические, микробиологические, иммунологические, биохимические и гематологические методы [4,5]. Изучение особенностей клинического проявления инфекционного пальцевого дерматита проводили непосредственно в условиях хозяйства. Клиническую оценку интенсивности поражений при инфекционном пальцевом дерматите проводили по классификации предложенной Döpfer D. e. a., 1997 [47], заключающейся в разделении течения заболевания на 4 различные стадии (М1 – М4). М1 – поражения малого размера (менее 2 см) с красной или бело-красной поверхностью, возможна экссудация, эпителий может быть сохранен или поврежден. М2 – "классическое изъязвление", красные или бело-красные поражения диаметром более 2 см., на поверхности поражения грануляционная или пролиферативная ткань (в большом количестве или филаментарно). М3 – заживающие поражения с черной струпьевидной поверхностью. М4 – характеризуется дискератозом или пролиферацией. Материал для микробиологического исследования был отобран в убойном цехе при забое животных, пораженных ИПД. Отбирали дистальный отдел конечности 32 с пораженным участком кожи, помещали в непрозрачную полиэтиленовую упаковку и доставляли в лабораторию в течение 4 часов (прил. 1, с. 124). Для выявления возбудителей ИПД использовали общепринятые методики, описанные в пособиях [4,10]. Для проведения биохимических, иммунологических и гематологических исследований у животных, пораженных пальцевым дерматитом, были отобраны пробы цельной и стабилизированной крови. Цельную кровь отбирали из подхвостовой вены в вакуумные пробирки объемом 9,0 мл производства VACUETTE® с К3 ЭДТА в качестве стабилизатора; кровь для получения сыворотки отбирали из подхвостовой вены в вакуумные пробирки объемом 9,0 мл производства VACUETTE® с активатором образования сгустка. Пробирки с нестабилизированной кровью помещали в теплое место на 2 часа для образования сгустка. Иммунный статус животных оценивали по результатам биохимических, иммунологических и гематологических исследований. Содержание альбуминов в сыворотке крови определяли согласно "Инструкции к набору реактивов для определения альбуминов в сыворотке крови" [8]. Принцип метода заключается в определении интенсивности окрашивания раствора, которая прямо пропорциональна содержанию в ней альбуминов, образующих в слабокислой среде окрашенное соединение с индикатором бромкризоловым зеленым в присутствии детергента. Содержание белковых фракций определяли согласно Инструкции к набору реактивов для определения белковых фракций турбидиметрическим методом [8]. Принцип метода заключается в способности фосфатных растворов определенной концентрации осаждать отдельные белки сыворотки вызывая помутнение жидкости, интенсивность которой определяется фотометрическим методом. Содержание общего белка в сыворотке крови определяли по биуретовой реакции [8]. Принцип метода заключается в способности растворов белков 33 образовывать комплексное соединение с медью, которое окрашивает раствор, интенсивность которого позволяет количественно определить содержание белка [8]. Содержание витамина Е определяли согласно методическим рекомендациям "Методы оценки интенсивности перекисного окисления липидов и его регуляции в биологических объектах". Принцип метода основывается на окислении токоферолов железом лорным и определения железа, которое образовывает окрашенный комплекс с 2-2-дипиридилом [3]. Содержание диеновых конъюгатов, малонового согласно диальдегида, общей антиоксидантной активности определяли методическим рекомендациям "Методы оценки интенсивности перекисного окисления липидов и его регуляции в биологических объектах". Принцип метода определения ДК и МДА заключается в том, что после экстракции гидроперекисей липидов смесью гептан изопропанол (1:1) из суспензии какого-либо биологического вещества регистрируется поглощение конъюгированных диеновых структур в области 233 нм, малонового диальдегида в области 247 нм в гептановых экстрактах. Принцип метода определения АОА заключается в степени способности жиров тормозить накопление ТБК-активных продуктов пероксидации при инкубации биологического объекта с суспензией желтковых липопротеинов [12]. Иммуноглобулины определяли методом радиальной иммунодиффузии по Манчини [8]. Содержание лейкоцитов в сыворотке крови и лейкограмму - общепринятыми методами. Содержание лизоцима - турбидиметрическим методом согласно методическим рекомендациям по определению иммунорезистентного статуса [2]. Содержание оксида азота проводили колориметрическим методом [7]. Содержание серомукоидов - по методике Веймера и Мошина. Принцип метода заключается в определении содержания серомукоидов по содержанию белка и гексозы [8]. Фагоцитарную активность определяли согласно методам оценки состояния иммунной системы и факторов неспецифической резистентности в ветеринарии. Принцип метода основан на способности лейкоцитов захватывать и разрушать микробные клетки [12]. Содержание ЦИК - спектрометрическим методом [6]. 34 Подсчет хромых животных проводили по методике Sprecher e. a., которая заключается бальной оценке степени хромоты на основании состояния спины (прямая или изогнутая) в стоячем положении и при ходьбе. 1 балл - хромота отсутствует. 2 балла (легкая хромота) - корова стоит с прямой спиной, но ходит с изогнутой спиной и делает более короткие шаги; не делает упор ни на одну определённую конечность. 3 балла (умеренная хромота) - корова стоит и ходит с изогнутой спиной, передвигается короткими шагами, на повреждённую ногу даёт меньшую нагрузку, опускает голову, когда вес переносится на пораженную конечность. 4 балла (сильная хромота) - корова стоит и ходит с изогнутой спиной, хромота видна отчетливо; корова передвигается медленно, часто останавливается. 5 баллов (крайняя степень хромоты) - коровы проявляют неспособность или крайнее нежелание нагружать пораженную конечность [137]. При разработке препарата для лечения инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота использовали следующие компоненты в таких пропорциях, мас.%: оксид цинка 9-11, мелкодисперсный медный купорос 35-45, мазевая основа остальное. Препарат готовили путем смешивания компонентов до получения однородной массы. Выбранные компоненты для разработанного препарата обладают бактерицидным действием на возбудителей инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота, а так же противовоспалительным, подсушивающим и ранозаживляющим действием. Для разработки способа применения полученного препарата, его наносили на пораженные места 1 - 2 раза с наложением защитной повязки или без нее. Материалом для исследования по изучению профилактических и лечебных свойств разработанного препарата служили дойные коровы (n = 31), из которых было сформировано 4 группы. 1. Контрольная группа Животным данной группы (n=7) не применялось какого-либо лечения. Животные данной группы находились на привязном содержании с 35 индивидуальным доением. Контроль течения инфекционного пальцевого дерматита проводился 3 раза с интервалом 2 недели. Для этого животных фиксировали в станке для обрезки копыт, поднимали пораженную конечность, проводили ее механическую очистку, обмывание водой и высушивание. У каждого животного учитывались следующие показатели: № ушной бирки, хромота в баллах, наличие или отсутствие болевого рефлекса, стадия развития инфекционного пальцевого дерматита, диаметр пораженного участка, наличие или отсутствие припухлости окружающих тканей, наличие или отсутствие покраснения окружающих тканей, расположение пораженных мест, наличие признаков развития инфекционного пальцевого дерматита на других конечностях, наличие других заболеваний копыт. Так же было проведено фотографирование пораженных участков. Все данные занесли в таблицы и подвергли статистической обработке. 2. Контрольная группа с применением 10% р-ра медного купороса Контрольная группа (n=9), согласно существующей схеме ветеринарных обработок в хозяйстве, обрабатывалась 2 раза в неделю (вторник, пятница) путем прохождения через ванны с 10% водным раствором медного купороса. Ванны с раствором медного купороса располагались в аллее при выходе из доильного зала. Раствор меняли после прохождения через него 300 - 600 голов крупного рогатого скота. Дополнительных лечебных мероприятий животным этой группы не применялось. Контроль состояния животных проводился 3 раза с интервалом 2 недели по аналогии с контрольной группой. 3. Опытная группа с применением геля для копыт "Солка" Группе дойных коров (n=7) после обрезки копыт для лечения пальцевого дерматита применяли гель для копыт "Солка" производства Kanters Special Products B.V., Нидерланды (дата выпуска 01.2013). На пораженное место после предварительной обработки (механическая очистка, промывание проточной водой, высушивание) наносили гель. На конечности с обширными поражениями 36 (более 2 см) накладывали бинтовые повязки, покрывая их самофиксирующимся бинтом Пеха-хафт, производства ПАУЛЬ ХАРТМАНН АГ, Германия. Контроль течения заболевания проводили на 3-й и 14-й день. 4. Опытная группа с применением разработанного препарата для профилактики и лечения пальцевого дерматита Группе дойных коров (n=8) после обрезки копыт для лечения пальцевого дерматита применяли разработанный нами "Препарат для лечения пальцевого дерматита". На пораженное место после предварительной обработки (механическая очистка, промывание проточной водой, высушивание) наносили препарат. На конечности с обширными поражениями (более 2 см) накладывали бинтовые повязки, покрывая их самофиксирующимся бинтом Пеха-хафт, производства ПАУЛЬ ХАРТМАНН АГ, Германия. Контроль течения заболевания проводили на 3-й, 14-й и 26-й день. Для комплексной оценки состояния дистального одела конечности и его изменения в процессе проведения опытов, использовали методику разработанную Döpfer D., 1994, которая заключается в количественной оценке изменений, вызванных развитием ИПД. Соответствие возможных изменений количеству баллов приведено в таблице 1. Таблица 1 – Комплексная оценка состояния дистального одела конечности (по Döpfer D., 1994). Показатель Боль Болевая проба позитивная Хромота М2 поражение Не зависящее от размера, болевая проба отрицательная ≤ 4 см, болевая проба позитивная ˃ 4 см, болевая проба позитивная М3 поражение Любой размер М4 поражение Балл 2 4 16 32 64 2 37 ≤ 2 см 1 ˃ 2 см 2 Внешний вид М1, М2, М3 или М4 поражение, болевая проба отрицательна 4 М1, М2, М3 или М4 поражение, ≤ 2 см, болевая проба положительна 8 М1, М2, М3 или М4 поражение, ˃2 см, болевая проба положительна 16 Поверхность поражения Белая поверхность 1 Струпьевидная поверхность (темный слой) 2 Эрозия с пролиферативно-филаментарной поверхностью 2 Эрозия с пролиферативной поверхностью 2 Вогнутая эрозия 2 Бело-красная эрозия 2 Красная эрозия 2 Экссудация 4 Поверхность кожи, рост рога, волосяной покров Утолщение кожи 2 Пролиферативные образования 2 Белый эпителиальный край 2 Покраснение кожи 2 Увеличение пяток 2 Усиленный рост рога 2 Удлиненный или выпавший волосяной покров 2 Взъерошенный волосяной покров 2 Межкопытцевая щель и межпальцевый дерматит Межкопытцевая щель изменена 1 Эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый дерматит) 1 Серо-красные эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый 3 дерматит), ≤ 2 см Красные эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый дерматит) ≤ 4 2 см Серо-красные эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый 6 дерматит) 2 - 4 см Красные эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый дерматит) 2 8 - 4 см Серо-красные эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый 12 дерматит) < 4 см Красные эрозии в межкопытцевой щели (межпальцевый дерматит) < 16 4 см Полученные данные в ходе исследований подвергали статистической обработке, используя программу Microsoft Excel. 38 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1 Изучение распространенности инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота молочного комплекса ООО "Нива" "Маячки 1" Прохоровского р-на, Белгородской области. Для изучения распространенности инфекционного пальцевого дерматита был проведен клинический осмотр 884 коров (прил. 1, с. 135). На момент проведения исследований, в зимне-весенний период года, в данном хозяйстве содержалось 913 голов КРС, из которых 884 коровы (в сухостойном периоде 66 голов) и 29 телят до 10-ти дневного возраста. Животные находились в коровниках с бетонными полами на беспривязном содержании; удаление навоза осуществлялось при помощи скрепера. Кормление осуществлялось двукратно, смешанным рационом, в состав которого входил кукурузный силос, травяной сенаж, сено разнотравное, концентрированный корм, доля которого по обменной энергии составляла до 45%. Среднегодовая молочная продуктивность коров составляла 6400 кг на одну голову. Выход телят на одну корову составлял 78 голов. В хозяйстве периодически наблюдалась высокая заболеваемость послеродовыми эндометритами и маститами на разных стадиях лактации. Клиническими исследованиями было выявлено 104 коровы с различными формами поражения пальцевым дерматитом, что составило 11,7% от фуражного поголовья или 11,2% от дойных коров и 18,2% от общего поголовья сухостойных коров (таб. 2). Среди них с поражениями на обеих задних конечностях 2 головы (1,9% от пораженных). Таблица 2 – Результаты клинических исследований коров с поражениями дистального отдела конечностей (с признаками ИПД по классификации Döpfer D., 1997) Стадия пальцевого дерматита Количество пораженных голов 39 (по классификации Döpfer D., 1997) Дойных Сухост. Всего гол. % гол. % гол. % М1 (начальная) 6 6,5 7 58,3 13 12,6 М2 (выраженная) 9 9,8 - - 9 8,6 М3 (заживающая) 49 52,3 3 25,0 52 50,0 М4 (хроническая) 28 30,4 2 16,7 30 28,8 Итого: 92 100 12 100 104 100 Среди всех пораженных ИПД, наибольшее количество животных приходилось на стадию М3 - 52 головы (50%), а наименьшее - на стадию М2 - 9 голов (8,6%). Поражение ИПД наблюдалось у коров в сухостойном периоде: стадия М1 - 7 голов (58,3%), М2 - отсутствовали, М3 - 3 головы (25%), М4 - 2 головы (16,7%). Рисунок 1 - Характеристика поражений коров ИПД в зависимости от количества лактаций. Наибольшая доля пораженных животных наблюдалась во второй лактации - 42 головы (40,4%), а наименьшая - в четверной и последующих лактациях - 13 голов (12,5%). Необходимо отметить тенденцию возрастания доли пораженных 40 животных ко второй (40,4%) и постепенного их снижения в последующих лактациях (с 18,3% до 12,5%) (рис. 1). Рисунок 2 – Количественное соотношение поражений ИПД (на разных стадиях М1 - М4) в зависимости от количества лактаций. Анализируя данные рисунка 2 необходимо отметить, что количество животных со стадией М1 возрастает ко 2-й (7 голов, 16,6%) и незначительно снижается к третей лактации (3 головы, 15,8%). В четвертой и последующих лактациях животные со стадией ИПД М1, равно как и М2, отсутствовали. Доля животных со стадией М2 незначительно снижалась ко второй лактации (3 головы, 7,1%) и резко возрастала к третей (3 головы, 15,8%). Доля животных с М3 стадией колебалась не зависимо от количества лактаций, но максимальный показатель наблюдался на 4-й и последующих лактациях (8 голов, 61,5%). Доля животных с М4 стадией снижалась ко второй лактации (8 голов, 19%), оставалась на примерно одинаковом уровне к третей (4 головы, 21%), и возрастала в четверной и последующих (5 голов, 38,5%). Проведя анализ пораженности животных ИПД в зависимости от стадии лактации (рис. 3) необходимо отметить, что количество животных с ИПД несколько снижается ко второй трети лактации (13 голов, 12,5%), а затем 41 возрастает с увеличением стадии лактации с максимальным показателем на стадии превышающей 300 дней (36 голов, 34,6%). Минимальное же количество голов наблюдалось в сухостойной фазе (12 голов, 11,5%). Рисунок 3 – Характеристика поражений коров ИПД в зависимости от стадии лактации. Анализируя данные о распределении пораженных голов по стадиям лактации с учетом стадии ИПД (рис. 4) можно отметить, доля животных со стадией М1 находилась на максимальном уровне (3 головы, 15,8%) в первой трети лактации, во второй и третей третях лактации таких животных не наблюдалось и на стадии, превышающей 300 дней, их 8,3% (3 головы). 42 Рисунок 4 – Количественное соотношение поражений ИПД (на разных стадиях М1 - М4) в зависимости от стадии лактации. Доля пораженных стадией М1 в сухостойной группе существенно превышает таковых в лактирующей (58,3%, 7 голов). Доля животных со стадией ИПД М2 в первой трети лактации незначительна (1 голова, 5,2%), во второй - отсутствовали, возрастала к третей (3 головы, 12,5%) и оставалась на примерно одинаковом уровне в последующую стадию (5 голов, 13,9%). В сухостойной группе животных со стадией М2 не наблюдалось. Доля животных с М3 стадией возрастала к третей трети лактации, затем снижалась в группах более 300 дней лактации и сухостойной (8 голов, 42,1%; 7 голов, 53,9%; 17 голов, 70,9%; 16 голов, 44,4% и 3 головы, 25% соответственно). Доля животных со стадией М4 характеризовалась колебательной динамикой без какой-либо закономерности (36,8%, 46,1%, 16,7%, 33,3% и 16,7% соответственно). Анализ пораженности животных ИПД в зависимости от среднесуточной молочной продуктивности (рис. 5) показал прямо пропорциональную зависимость доли пораженных коров от их продуктивности, за исключением самой 43 высокопродуктивной группы, где показатель был минимальным (15 голов, 16,3%). Рисунок 5 – Характеристика поражений ИПД коров в зависимости от молочной продуктивности. Если рассматривать распределение количества пораженных животных с различными стадиями ИПД в зависимости от суточной молочной продуктивности (рис. 6), то можно отметить отсутствие животных со стадией ИПД М1 в низкопродуктивной группе. 44 Рисунок 6 – Количественное соотношение поражений ИПД (на разных стадиях М1 - М4) в зависимости от среднесуточной молочной продуктивности. Доля животных с данной стадией в группе с продуктивностью 10 - 20 л в сутки составляет 11,5% (3 головы), с повышением продуктивности доля животных с данной стадией снижается до 6,7% (2 головы) и остается неизменной в самой высокопродуктивной группе. Доля коров со стадией М2 снижается с ростом суточной продуктивности (19,0%, 4 головы; 7,7%, 2 головы; 6,7% 2 головы и 6,7%, 1 голова соответственно). Доля животных, пораженных ИПД М3 стадии, в большинстве групп составляет более 50% и колеблется с возрастанием продуктивности (61,9%, 13 голов; 30,8%, 8 голов; 63,3%, 19 голов и 53,3%, 8 голов соответственно). Доля коров со стадией М4 так же колеблется не зависимо от уровня продуктивности (19,0%, 4 головы; 50,0%, 13 голов; 23,3%, 7 голов и 33,3%, 5 голов соответственно). Во время проведения исследований, для определения видового состава возбудителей ИПД, нами был проведен ряд микробиологических тестов. Для этого было отобрано 9 биоптатов из пораженных мест у животных со стадиями ИПД М1, М2 и М4. В результате были выявлены микроорганизмы, относящиеся к родам Treponema, Borrelia, Pasteurella, Bacteroides, Clostridium и Fusobacterium necrophorum (таб. 3). Таблица 3 – Результаты проведения микробиологических исследований пунктатов от пораженных ИПД коров. Количество Удельный вес, выявленных проб % род Treponema 7 77,8 род Borrelia 5 55,6 Fusobacterium necrophorum 4 44,5 род Pasteurella 3 33,3 род Bacteroides 3 33,3 Название возбудителя 45 род Clostridium 3 33,3 Во время заключительного исследования, в летний период, был проведен клинический осмотр 802 дойных коров или 3208 конечностей (прил. 1, с. 126). Среди них было выявлено 171 коров (208 конечностей), пораженных пальцевым дерматитом, что составило 21,3% от дойного поголовья. Среди них с поражениями на обеих задних конечностях 37 голов (21,6% от пораженных). Количество пораженных голов с различными стадиями ИПД указаны в таблице 4. Таблица 4 – Результаты клинических исследований коров с поражениями дистального отдела конечностей (с признаками ИПД по классификации Döpfer D., 1997) Количество пораженных голов Стадия пальцевого дерматита гол. % М1 (начальная) 32 18,7 М2 (выраженная) 42 24,6 М3 (заживающая) 25 14,6 М4 (хроническая) 72 42,1 Итого: 171 100 Среди всех пораженных коров, наибольшее количество голов приходилось на хроническую стадию М4 - 72 головы (42,1%), а наименьшее на заживающую М3 25 голов (14,6%). 46 Рисунок 7 – Характеристика поражений ИПД коров в зависимости от количества лактаций. Наибольшая доля пораженных животных наблюдалась во второй лактации - 69 голов (38,0%), а наименьшая - в четверной и последующих лактациях - 18 голов (10,5%), что повторяет тенденцию предыдущего исследования (рис. 7). Анализируя данные количественного соотношения пораженных голов с учетом стадии ИПД в зависимости от количества лактаций (рис. 8) необходимо отметить, что доля животных со стадией М1 находится на примерно одинаковом уровне на 1-й (16,1%, 9 голов) и 2-й (15,3%, 10 голов) лактациях, а начиная с 3-й возрастает до 44,4% (8 голов) на 4-й лактации. 47 Рисунок 8 – Количественное соотношение поражений ИПД (на разных стадиях М1 - М4) в зависимости от количества лактаций. Доля животных со стадией М2 снижается с ростом количества лактаций (30,3%, 17 голов; 21,5%, 14 голов, 15,6%, 5 голов и 5,5%, 1 голова соответственно). Доля животных со стадией М3 находится на примерно одинаковом уровне на 1-й (25,0%, 14 голов) и 2-й (26,1%, 17 голов) лактациях, возрастает к 3-й (37,5%, 12 голов) и остается на примерно одинаковом уровне на 4-й выше (38,9%, 7 голов). Доля животных с М4 стадией повышается ко второй лактации (36,9%, 24 головы), а затем постепенно снижается к четверной и выше до 11,1% (2 головы). Распределение животных с обеими пораженными конечностями в зависимости от номера лактации произошло следующим образом: 27,0% пораженных находятся на 1-й лактации, 37,8% - на 2-й, 18,9% - на 3-й и 16,2% на 4-й и выше. При этом встречаются различные комбинации стадий ИПД на обеих конечностях, как с одинаковыми стадиями, так и с разными: М-1-2, М-1-3, М-2-4, М-3-4. Преобладающей же комбинацией была М-4-4, которая наблюдалась у 12 голов, что составляет 32,4% от таковых с комбинированным поражением, которые находились на 2-й лактации. Проведя анализ пораженности животных ИПД в зависимости от стадии лактации (рис. 9) необходимо отметить, что количество животных с ИПД возрастало с увеличением стадии лактации с минимальным показателем 14,7% (25 голов) в первой трети и максимальным на стадии превышающей 300 дней (39,2%, 67 голов). 48 Рисунок 9 – Характеристика поражений ИПД коров в зависимости от стадии лактации. Результаты изучения количественного соотношения пораженных ИПД животных с учетом его стадии (рис. 10) показали снижение доли животных со стадией М1 с возрастанием стадии лактации (36,0%, 9 голов; 28,6%, 8 голов; 17,6%, 9 голов и 11,9%, 8 голов соответственно) Рисунок 10 – Количественное соотношение поражений ИПД (на разных стадиях М1 - М4) в зависимости от стадии лактации. 49 Доля пораженных со стадией М2 увеличивается ко второй трети лактации (28,6%, 8 голов), остается на примерно одинаковом уровне на третей (27,4%, 14 голов) и снижается у животных с длительностью лактации более 300 дней (17,9%, 12 голов). Доля животных со стадией ИПД М3 в первой и второй трети лактации находится на примерно одинаковом уровне (28,0%, 7 голов; 28,6%, 8 голов) снижается к третей (19,6%, 10 голов) и снова повышается в последующую стадию (35,8%, 24 головы). Доля животных с М4 стадией снижается ко второй трети лактации (14,3%, 4 головы), затем повышается к третей (35,3%, 18 голов) и остается на примерно одинаковом уровне в последующей (34,3%, 23 головы). Результаты изучения пораженности животных ИПД в зависимости от среднесуточной молочной продуктивности (рис. 11) показали, что доля пораженных животных несколько возрастает у группы с суточной продуктивностью 10 - 20 литров до 33,3% (57 голов), остается на примерно одинаковом уровне в группе 20 - 30 литров (31,0%, 53 головы) и снижается в группе с максимальной продуктивностью до 9,9% (17 голов). Рисунок 11 – Характеристика поражений ИПД коров в зависимости от молочной продуктивности. Если рассматривать распределение количества пораженных животных с различными стадиями ИПД в зависимости от суточной молочной продуктивности (рис. 12), то можно отметить, что доля животных со стадией ИПД М1 возрастает с группе с продуктивностью 20 - 30 литров до 28,1% (16 голов), а затем снижается и 50 остается на примерно одинаковом уровне в группах с более высокой продуктивностью (11,3%, 6 голов и 11,8%, 2 головы соответственно). Рисунок 12 – Количественное соотношение поражений ИПД (на разных стадиях М1 - М4) в зависимости от среднесуточной молочной продуктивности. Доля коров со стадией М2 незначительно снижается в среднепродуктивной группе до 14,0% (8 голов), затем возрастает и остается на примерно одинаковом уровне в группах с более высокой продуктивностью (30,2%, 16 голов и 29,4%, 5 голов соответственно). Доля животных, пораженных ИПД М3 стадии, постепенно снижается с ростом продуктивности, однако максимальна в группе с продуктивностью более 30 л в сутки (34,1%, 28,1%, 17,0% и 53,0% соответственно). повышается Доля коров со стадией М4 с ростом продуктивности, но минимальна в группе с продуктивностью более 30 л в сутки (25,0%, 29,8%, 41,5% и 5,9% соответственно). Таким образом, изучение распространенности инфекционного пальцевого дерматита привело к выявлению ряда закономерностей. Распределение пораженных животных в зависимости от количества лактаций сохранило свою тенденцию на протяжении всего периода исследований, т. е. доля пораженных животных возрастала ко второй лактации, а затем снижалась на протяжении 51 последующих. На начальных этапах исследований основной удельный вес занимали животные с заживающей М3 и хронической М4 стадиями 52 головы (50%) и 30 голов (28,8%) соответственно, а начальная М1 (13 голов, 12,6%) и выраженная М2 (9 голов, 8,6%) наблюдались только до третей лактации и в не значительных соотношениях. На конечных этапах исследований тенденция изменилась в сторону увеличения удельного веса животных со стадией М1 (32 головы, 18,7%) и М2 (42 головы, 24,6%) и уменьшения М3 (25 голов, 14,6%), что говорит об активизации возбудителей ИПД и усугублении течения патологического процесса. В отобранных 9 биоптатах с различными стадиями развития ИПД были выявлены микроорганизмы, относящиеся к роду Treponema в 7 пробах (77,8 % случаев), роду Borrelia – 5 проб (55,6%), Fusobacterium necrophorum – 4 пробы (44,5%), роду Pasteurella – 3 пробы (33,3%), роду Bacteroides – 3 пробы (33,3%), роду Clostridium - 3 пробы (33,3%). 3.2 Изучение сезонной динамики возникновения инфекционного пальцевого дерматита. За время проведения исследований, с зимнего по летний период года, количество пораженных коров выросло со 104 голов до 171, что свидетельствует об увеличении на 64,4%. Доля пораженных коров выросла с 11,7% (зимневесенний период) до 21,3% (летний период). Так же резко увеличилось количество животных с обеими задними пораженными конечностями 21,6% против 1,9%. Рассматривая изменения количества пораженных животных с учетом стадии ИПД необходимо отметить, что в летний период коров с начальной стадией М1 прибавилось на 26 (12,2%,), с выраженной стадией М2 - на 33 (14,8%), с хронической стадией М4 - на 44 (11,7%), в то время как количество коров с заживающей стадией М3 сократилось на 24 (-37,7%). 52 Проведенный анализ сезонного изменения количества пораженных коров ИПД в зависимости от количества лактаций (рис. 13) показал незначительное увеличение таковых на первой (с 28,8% до 32,7%) и третей (с 18,3% до 18,7%) лактациях и незначительное снижение на второй (с 40,4% до 38,0%), четвертой и последующих (с 12,5% до 10,5%). Рисунок 13 – Сезонное изменение количества пораженных ИПД голов в зависимости от количества лактаций. Примечание: Обсл. 1 – исследования, проведенные в зимне-весенний период. Обсл. 2 – исследования, проведенные в летний период. Причем максимальное увеличение в летний период на первой лактации произошло за счет животных, пораженных стадией ИПД М2 (+14 голов, +20,3%), на второй лактации - среди коров, пораженных стадией М4 (+16 голов, +17,9%), на третей лактации не наблюдалось какой-либо существенной повышательной динамики, а на четвертой и последующих лактациях существенное увеличение произошло за счет пораженных М1 (+8 голов, +44,4%). Снижение общей доли пораженных животных на второй лактации произошло из-за сокращения количества животных с М3 (-7 голов, -31%), а на четвертой - из-за М3 (-1 голова, 22,6%) и М4 (-3 головы, -27,4%) 53 Анализируя данные сезонного изменения количества пораженных животных в зависимости от стадии лактации (рис. 14), можно отметить незначительное снижение их доли в первой трети лактации (с 18,3% до 14,7%) и увеличение во всех последующих: во вторую - с 12,5% до 16,3%, в третью – с 23,1% до 29,8%, на стадии более 300 дней – с 34,6% до 39,2%. Рисунок 14 – Сезонное изменение количества пораженных ИПД голов в зависимости от стадии лактации. Примечание: Обсл. 1 – исследования, проведенные в зимне-весенний период. Обсл. 2 – исследования, проведенные в летний период. Не смотря на общее понижение доли пораженных животных, которое произошло за счет стадии М3 (-1 голова, -14,1%) и стадии М4 (-1 голова, -12,8%), все же количество животных с М1 (+6 голов, +20,2%) и М2 (+2 головы, +11,5%) возросло в летний период. В средней трети лактации повышение произошло за счет равного увеличения долей животных с М1 и М2 (+8 голов, +28,6%), в то время как количество животных с М4 снизилось на 2 головы (-31,8%). В третей трети лактации происходило повышение количества животных со стадиями М1, М2, М4 в пределах 18%, на ряду с существенным сокращением стадии М3 (-7 голов, -51,3%). На стадии лактации более 300 дней наблюдалось незначительное 54 сезонное повышение количества животных, пораженных стадиями ИПД от М1 до М4. Изучая данные по сезонному изменению количества животных, пораженных ИПД, в зависимости от среднесуточной продуктивности (Рис. 15) можно отметить незначительное повышение в группах 0 - 10 литров (с 22,9% до 25,7%) и 10 - 20 литров (с 28,2% до 33,3%), и снижение в более высокопродуктивных группах: 20 – 30 литров – с 32,6% до 31,0%, более 30 литров – с 16,3% до 9,9%. Рисунок 15 – Сезонное изменение количества пораженных ИПД голов в зависимости от среднесуточной продуктивности. Примечание: Обсл. 1 – исследования, проведенные в зимне-весенний период. Обсл. 2 – исследования, проведенные в летний период. Сезонное повышение количества пораженных ИПД животных в группе с продуктивностью 0 - 10 литров произошло в основном за счет животных, пораженных стадией М1 (+10 голов, +22,7%), не смотря на то, что сократилась доля животных с М3 (-27,3%). В группе с продуктивностью 10 - 20 литров увеличилось количество животных с М1 стадией (+13 голов, +16,6%) с одновременным понижением доли животных с М4 (-20,2%). В группе с 55 продуктивностью 20 - 30 литров повышательный акцент сместился на стадии М2 (+14 голов, +23,5%) и М4 (+15 голов, +18,2%), но при этом наблюдалось существенное снижение количества животных со стадией М3 (-10 голов, -46,3%). В самой высокопродуктивной группе животных наблюдалось наибольшее повышение количества пораженных ИПД коров с М2 (+4 головы, +22,7%). Во время летнего обследования поголовья было выявлено 25 коров ИПД у которых наблюдался еще во время начала исследований, что значит, что инфекционный процесс, присущий для ИПД, у них возможно длился 6 месяцев. При этом у большинства животных наблюдалось специфическое развитие инфекционного процесса, которое сопровождалось переходом с одной стадии ИПД в другую. Так, из 25 коров, у одного животного наблюдался переход со стадии М1 в М2 и у одного – со стадии М2 в М4. Наиболее частой стадией, которая встречалась у данной группы, являлась стадия М3 (15 голов, 60,0%), среди которых у 4-х голов (26,7%) стадия заболевания осталась на том же уровне, у 2-х животных (13,3%) стадия изменилась на М1, у 4-х (26,7%) - на М2 и у 5 коров (33,3%) - на М4. Из 9-ти животных со стадией ИПД М4, у 6-ти коров (66,7%) стадия осталась неизменной и у 3-х коров (33,3%) стадия изменилась на М3. Кроме того, у 6-ти коров, у которых во время первого обследования была поражена одна конечность, во время второго обследования наблюдалось поражение обеих задних конечностей, среди которых у 5-ти животных наблюдалась стадия ИПД М4. Таким образом необходимо отметить, что не смотря на существенное сезонное увеличение (+64,4%) количества пораженных животных на конечных стадиях исследования, все же процентное соотношение пораженных коров в зависимости от количества лактаций, ее стадий и среднесуточной молочной продуктивности отличалось в пределах 5 - 6%, т. е. увеличение количества пораженных ИПД животных происходило равномерно. Кроме того, произошло резкое увеличение количества животных с пораженными обеими задними конечностями (с 1,9% до 56 21,6% от общего числа пораженных), что так же свидетельствует об увеличении заболеваемости ИПД и усугублении развития инфекционного процесса. 3.3 Разработка и апробация препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита. В связи с тем, что в мировой литературе среди исследователей ведущих научных центров существуют противоречивые мнения по поводу лечения инфекционного пальцевого дерматита, а так же беря во внимание отсутствие общепризнанного максимально эффективного препарата, нами была предпринята попытка разработки собственного препарата для лечения и профилактики пальцевого дерматита. Одним из наиболее распространенных во всем мире средством для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита являются водные растворы (2 – 10%) сульфата меди, которые применяют в виде копытных ванн [135, 80]. Но, эффективность данных растворов оценивается разными авторами по разному: Козій В., Toholj B. e. a. [146] отмечали низкую эффективность, в то время как Speijers H. e. a. констатировали его высокую эффективность [135]. Сульфат меди оказывает бактерицидное воздействие на возбудителей пальцевого дерматита, но эффективность зависит от множества факторов, среди которых одним из важнейших, по нашему мнению, является время адгезии раствора на пораженном месте [135]. Для того, что бы увеличить время адгезии сульфата меди на тканях с существующим локальным развитием инфекционного процесса мы предприняли попытку использования измельченного мелкодисперсного сульфата меди в виде мази. При создании лекарственной формы (мазь) нами учитывалось возможность использования компонентов, которые способствуют заживлению поверхности поражения эпидермиса, дермы, для чего был избран оксид цинка. Согласно данным Жуленко В.Н. использование оксида цинка с 10% концентрацией в составе ранозаживляющих мазей способствует быстрой 57 регенерации тканей [2]. Поэтому, в разрабатываемый нами препарат для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита, который на ряду с бактерицидным действием на возбудителей инфекционного пальцевого дерматита, был включен оксид цинка (10%), способствующий быстрой регенерации тканей. Было создано три варианта препарата для лечения и профилактики пальцевого дерматита с концентрацией сульфата меди на 100 г препарата: 1-й вариант – 25 г, 2-й вариант – 40 г, 3-й вариант – 55 г. Все три варианта препарата для лечения и профилактики пальцевого дерматита обладали вяжущим, подсушивающим, противовоспалительным и антисептическим действием. Для опыта было сформировано несколько групп коров, пораженных инфекционным пальцевым дерматитом, которым применяли для лечения и профилактики препарат для лечения пальцевого дерматита с разной концентрацией сульфата меди (таб. 5). Таблица 5 – Схема испытания 3-х вариантов препарата для лечения инфекционного пальцевого дерматита. Концентрация сульфата меди, масс % Количество обработанных голов Кратность применения, раз Длительность курса лечения, дней Вариант 1 25 5 3 9 3 4 12 Вариант 2 40 9 1 3 Примечания - 5 2 6 3 1 - Вариант 3 55 - При применении первого варианта препарата на 8-ми головах коров, у пяти из них на 9-й день наблюдалось образование струпа на всей поверхности пораженного ИПД участка, что является необходимым условием и признаком заживления. При этом препарат применялся 3-х кратно с интервалом 3 дня. У 3-х 58 голов полноценный струп образовался на 12-й день, для чего понадобилось наносить препарат на пораженное место четыре раза. Максимально эффективным вариантом оказался препарат с 40%-ной концентрацией сульфата меди. В данном случае достаточно было одно- или двукратного применения препарата для образования устойчивого струпа на поверхности поражения. При этом у 9-ти голов препарат применяли однократно, у 5-ти – двукратно. Препарат с более высокой концентрацией сульфата меди в третьем варианте, на уровне 55%, обладал, по всей видимости, раздражающим действием и вызывала незначительное покраснение кожи вокруг пораженного ИПД участка. Для подтверждения антисептического действия разработанного нами препарата были отобраны пунктаты из регенерировавших участков после слущивания с них струпа. В результате проведенных микробиологических исследований не отмечался рост колоний возбудителей ИПД на питательных средах (КиттаТароцци, сывороточный агар, кровяной агар, МПА, МПБ). Таким образом, опираясь на данные ведущих ученых научных ветеринарных центров [74, 112] была предпринята попытка разработки препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита, увенчавшаяся созданием "препарата для лечения пальцевого дерматита", обладающего вяжущим, подсушивающим, противовоспалительным и антисептическим действием. Это было достигнуто приготовлением препарата в виде мази, содержащего в своем составе следующие компоненты в таких пропорциях, мас.%: оксид цинка – 10, сульфат меди – 40, мазевая основа (вазелин) остальное. В составе этого препарата сульфат меди оказывал бактерицидное воздействие на возбудителей пальцевого дерматита, а оксид цинка – ранозаживляющее. Подтверждением антисептических свойств препарата были отрицательные результаты по выделению возбудителей (род Treponema, Borrelia, Fusobacterium necrophorum, род Pasteurella, Bacteroides, Clostridium) проведенных на питательных средах (Китта-Тароцци, сывороточный агар, кровяной агар, МПА, МПБ) в течение от 1 до 15 дней. 59 3.4 Изучение эффективности препаратов для лечения крупного рогатого скота, пораженного инфекционным пальцевым дерматитом. В результате проведенных исследований состояния конечностей четырех групп нами были изучены изменения коров (контрольной, группы с применением 10% раствора сульфата меди, группы с применением геля "Солка", группы с применением препарата для лечения ИПД) до начала лечения, через 14 дней после начала и после окончания лечения, представленные ниже. 1. Контрольная группа Данные по бальной оценке состояния конечностей до начала опыта, через 14 дней после начала лечения и после окончания лечения приведены в таблице 6. 60 Таблица 6 – Бальная оценка состояния конечностей контрольной группы на протяжении проведения опыта. № ушной бирки № исследования Показатель Боль Болевая проба положительная Хромота М2 поражение Не зависящее от размера, болевая проба отр. ≤ 4 см, болевая проба положит. ˃ 4 см, болевая проба положит. М3 поражение Любой размер М4 поражение ≤ 2 см ˃ 2 см Внешний вид М1, М2, М3 или М4 поражение, болевая проба отр. М1, М2, М3 или М4, ≤ 2 см, болевая проба положительная М1, М2, М3 или М4, ˃2 см, болевая проба положит. Поверхность язвы Белая поверхность Струпьевидная поверхность (темный слой) Эрозия с пролиферативно-филаментарной поверхностью Эрозия с пролиферативной поверхностью Вогнутая эрозия Бело-красная эрозия Красная эрозия 5029 1 2 3 4561 1 2 3 4664 1 2 2 4 2 4 4 4 2 4 4752 1 2 3 5148 1 2 3 5212 1 2 3 3 5127 1 2 3 2 2 - 4 4 - 2 2 - Балл 2 4 2 4 4 2 4 2 4 16 32 64 4 2 4 2 4 4 2 4 2 4 2 - 2 - 2 4 16 32 32 32 32 32 32 64 64 32 64 2 1 2 2 2 2 4 2 2 2 4 4 4 2 4 2 4 8 16 8 16 16 16 16 16 16 16 16 1 2 2 2 2 2 2 16 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 8 16 16 2 2 2 2 2 2 2 2 61 Экссудация Поверхность кожи, рост рога, волосяной покров Утолщение кожи Пролиферативные образования Белый эпител. Обод Покраснение кожи Припухлость у пяток Усиленный рост рога Удлин., выпав. волосяной покров Взъерошенный волос. покров МКЩ, межпальцевый дерматит Межкопытцевая щель изменена Эрозии в МКЩ (МПД) Серо-красные эрозии в МКЩ (МПД), ≤ 2 см Красные эрозии в МКЩ (МПД) ≤ 2 см Серо-красные эрозии в МКЩ (МПД) 2 - 4 см Красные эрозии в МКЩ (МПД ) 2 - 4 см Серо-красные МКЩ (МПД) < 4 см Красные эрозии в МКЩ (МПД) < 4 см И того И того ± 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 4 4 2 2 2 2 2 2 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 - - 2 2 2 2 2 2 2 2 - - 2 2 2 2 1 1 3 4 6 8 12 16 64 64 64 16 18 16 62 62 94 38 100 100 16 32 60 16 16 62 10 10 2 0 0 +32 +62 +44 +46 8 Примечание: первый столбец под номером животного – до начала лечения, второй – через 14 дней после начала лечения, третий - после окончания лечения. 62 Исходя из данных таблицы, за весь период исследования у 2-х коров течение ИПД оставалось на практически одинаковом уровне, хотя произошло увеличение диаметра поражений на 5 и 10 мм, что не отображается в бальной системе оценки состояния конечностей. У 4-х животных произошло усугубление течения заболевания (+32, +62, +44, +46 баллов), что выражалось в увеличении диаметра поражений, переходе стадий ИПД в более интенсивные, появлении болевого рефлекса и припухлости в области поражений. Дополнительно необходимо отметить, что данная система оценки поражений при ИПД учитывает изменение диаметра поражений только более 2-х см и не учитывает изменение степени хромоты. Поэтому, в дополнение к вышеуказанным изменениям в баллах, необходимо отметить, что у 3-х коров произошло увеличение диаметра поражений в пределах 10, 15 и 10 мм, и у 4-х коров произошло увеличение степени хромоты (с 2-х до 3-х баллов, с 1-го до 2-х баллов и с 2-х до 5-ти баллов у двух коров). У одной коровы со стадией ИПД М3 произошло окончательное заживление пораженного участка (- 8 баллов). Поскольку приведенная система оценки конечностей не отображает всех изменений, наблюдающихся при течении ИПД, то необходимо учитывать дополнительные показатели оценки изменений в течении развития инфекционного процесса. Данные об изменении степени хромоты и диаметра пораженных участков, приведенные в таблице 7, свидетельствуют об усугублении течения инфекционного процесса у 6-ти голов, что выражалось в резком увеличении общих показателей состояния конечностей в баллах и степени хромоты (+ 79,3% и + 76,9% соответственно), а так же увеличении общего диаметра поражений на 7,5%. Кроме того, необходимо отметить, что только у одного животного наблюдалось заживление (или же переход в менее интенсивную стадию, из М3 в М0), что составляет 14,3% от общего числа животных данной группы. 63 Таблица 7 – Изменение степени хромоты и диаметра поражений ИПД контрольной группы. 1 5092 Изменение состояния конечностей, балл 1 3 ± 64 64 0 2 4561 16 0 2 4 +2 40 40 0 3 4664 94 +32 2 3 +1 30 35 +5 4 4752 100 +62 2 5 +3 45 50 +5 5 5148 60 +44 2 5 +3 35 35 0 6 5212 62 +46 1 2 +1 10 15 +5 7 5127 2 -8 1 1 0 10 10 0 № п/п № ушной бирки Итого: Итого %: Хромота (балл) 1 3 ± 1 3 ± 3 3 0 30 30 0 222 398 +176 13 23 +79,3 Диаметр поражения, мм +10 +76,9 200 215 +15 +7,5 2. Контрольная группа с применением 10% раствора медного купороса. Данные по бальной оценке состояния конечностей до начала опыта, через 14 дней после начала лечения и после окончания лечения приведены в таблице 8. 64 Таблица 8 – Бальная оценка состояния конечностей контрольной группы с применением 10% раствора сульфата меди. № ушной бирки № исследования Показатель Боль Болевая проба положит. Хромота М2 поражение Не зависящее от размера, болевая проба отр. ≤ 4 см, болевая проба положит. ˃ 4 см, болевая проба положит. М3 поражение Любой размер М4 поражение ≤ 2 см ˃ 2 см Внешний вид М1, М2, М3 или М4 поражение, болевая проба отр. М1, М2, М3 или М4, ≤ 2 см, болевая проба положит. М1, М2, М3 или М4, ˃2 см, болевая проба положит. Поверхность язвы 4565 4537 4278 4871 5280 5161 4845 5093 3912 Балл 2 2 2 2 4 4 4 4 2 16 - 2 2 - 4 4 32 32 - 4 - 2 2 2 2 2 2 2 2 2 - 2 2 2 2 2 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 4 16 32 32 32 32 64 64 2 1 2 2 - 2 2 2 64 1 2 2 2 4 2 4 4 4 4 4 4 2 2 1 2 2 - 4 8 16 32 32 32 8 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 16 65 Белая поверхность Струпьевидная поверхность (темный слой) Эрозия с пролиферативнофиламентарной поверхностью Эрозия с пролиферативной поверхностью Вогнутая эрозия Бело-красная эрозия Красная эрозия Экссудация Поверхность кожи, рост рога, волосяной покров Утолщение кожи Пролиферативные образования Белый эпител. обод Покраснение кожи Припухлость у пяток Усиленный рост рога Удлиненный или выпавший волосяной покров Взъерошенный волосяной покров Межкопытцевая 1 2 2 1 1 3 2 2 2 2 - 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 - 2 2 2 2 - 2 2 2 2 - - 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 - 2 - 2 2 2 2 2 66 щель (МКЩ) и межпальцевый дерматит (МД) Межкопытцевая щель изменена Эрозии в МКЩ (МД) Серо-красные эрозии в МКЩ (МД), ≤ 2 см Красные эрозии в МКЩ (МД) ≤ 2 см Серо-красные эрозии в МКЩ (МД) 2 - 4 см Красные эрозии в МКЩ (МД) 2 - 4 см Серо-красные МКЩ (МД) < 4 см Красные эрозии в МКЩ (МД) < 4 см И того И того ± 1 1 1 1 6 6 6 1 3 4 6 8 12 16 38 38 38 9 7 13 34 68 68 12 16 4 43 107 105 30 30 32 62 62 62 17 23 36 70 70 70 0 +4 +34 +62 +2 0 +19 0 8 Примечание: первый столбец под номером животного – до начала лечения, второй – через 14 дней после начала лечения, третий - после окончания лечения. 67 В результате использования ванн с 10%-ым медным купоросом по принятой в хозяйстве схеме, у одного животного со стадией М3 произошло полное выздоровление, у 3-х животных состояние поражения осталось неизменным (согласно примененной методике) и у 5-ти животных наблюдалось усугубление течения ИПД (от незначительного +4 балла, до существенного +62 балла). Тем не менее, среди животных со стабильным течением ИПД у одной коровы снизилась степень хромоты на 1 балл, у одной коровы она повысилась на 1 балл, а диаметр поражения увеличился на 5 мм, и у одной коровы диаметр поражения снизился на 5 мм. Среди животных, у которых наблюдалось ухудшение течения ИПД, у 4-х коров наблюдалось увеличение диаметра поражения ИПД в пределах 5 мм, а у одной коровы его уменьшение на 5 мм. Обобщенные данные приведены в таблице 9. Таблица 9 – Данные об изменении степени хромоты и диаметра ИПД поражений контрольной группы с применением 10% раствора сульфата меди. Изменение состояния № ушной № п/п конечностей, балл бирки 1 3 ± 1 3 ± Диаметр поражения, мм 1 3 ± Хромота (балл) 1 4565 38 38 0 4 3 -1 40 40 0 2 4537 9 13 +4 1 2 +1 5 10 +5 3 4278 34 68 +34 1 2 +1 25 25 0 4 4871 12 4 -8 1 1 0 10 0 -10 5 5280 43 105 +62 4 4 0 35 40 +5 6 5161 30 32 +2 3 3 0 35 35 0 7 4845 62 62 0 3 4 +1 25 30 +5 8 5093 17 36 +19 2 4 +2 20 25 +5 9 3912 70 70 0 4 4 0 40 35 -5 +113 23 27 +4 235 240 +5 Итого: 315 428 68 Итого %: +35,9 +17,4 +2,1 Анализируя данные проведенных исследований необходимо отметить, что общая динамика течения инфекционного процесса при ИПД усугублялась, не смотря на отдельное продуктивное течение у некоторых животных. Отдельно необходимо отметить, что только у одного животного наблюдалось заживление (или же переход в менее интенсивную стадию, из М3 в М0), что составляет 11,1% от общего числа животных исследуемой группы. 3. Опытная группа с применением геля для копыт "Солка" Данные по бальной оценке состояния конечностей до начала опыта, через 14 дней после начала лечения и после окончания лечения приведены в таблице 10. 69 Таблица 10 – Бальная оценка состояния конечностей опытной группы с применением геля для копыт "Солка". № ушной бирки № исследования Показатель Боль Болевая проба положит. Хромота М2 поражение Не зависящее от размера, болевая проба отр. ≤ 4 см, болевая проба положит. ˃ 4 см, болевая проба положит. М3 поражение Любой размер М4 поражение ≤ 2 см ˃ 2 см Внешний вид М1, М2, М3 или М4 поражение, болевая проба отр. М1, М2, М3 или М4, ≤ 2 см, болевая проба положит. М1, М2, М3 или М4, ˃2 см, болевая проба положит. Поверхность язвы Белая поверхность Струпьевидная поверхность (темный слой) Эрозия с пролиферативно-филаментарной поверхностью Эрозия с пролиферативной поверхностью Вогнутая эрозия Бело-красная эрозия Красная эрозия 4743 1 2 3 5078 1 2 3 4632 1 2 3 3490 1 2 3 4957 1 2 2 4 2 4 2 4 3 5069 1 2 3 5014 1 2 3 Балл 2 4 16 32 64 4 4 - 4 4 4 2 4 2 4 4 2 4 4 4 2 4 2 4 4 2 2 32 32 4 2 2 2 32 32 64 2 2 2 2 2 1 2 4 4 4 4 4 4 4 4 8 4 4 4 8 16 16 16 16 16 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 4 16 32 32 2 4 2 4 2 - - - 2 2 16 16 16 2 2 16 16 2 2 2 2 2 2 2 - 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 70 Экссудация Поверхность кожи, рост рога, волосяной покров Утолщение кожи Пролиферативные образования Белый эпител. Обод Покраснение кожи Припухлость у пяток Усиленный рост рога Удлиненный или выпавший волосяной покров Взъерошенный волосяной покров Межкопытцевая щель (МКЩ) и межпальцевый дерматит (МД) Межкопытцевая щель изменена Эрозии в МКЩ (МД) Серо-красные эрозии в МКЩ (МД), ≤ 2 см Красные эрозии в МКЩ (МД) ≤ 2 см Серо-красные эрозии в МКЩ (МД) 2 - 4 см Красные эрозии в МКЩ (МД) 2 - 4 см Серо-красные МКЩ (МД) < 4 см Красные эрозии в МКЩ (МД) < 4 см И того И того ± 4 2 2 2 2 2 2 2 2 - 2 2 2 2 - - 2 2 2 - 2 - 2 2 - - 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 - 2 2 - 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 3 4 6 8 12 16 48 44 8 40 34 16 14 20 66 34 20 46 66 34 58 62 16 14 -8 48 98 34 18 80 34 32 18 16 Примечание: первый столбец под номером животного – до начала лечения, второй – через 14 дней после начала лечения, третий - после окончания лечения. 71 Анализирую данные таблицы 10 необходимо отметить, что в данной группе наблюдалось значительное терапевтическое воздействие изучаемого препарата, которое приводило к снижению пораженности дистального отдела конечностей ИПД от 8 до 80 баллов. У одной коровы произошло ухудшение заживляющего процесса при 3-м обследовании в сравнении со 2-м, что выражалось в бальной системе повышением с 34 до 58 баллов. Клинически картина течения заболевания выглядела следующим образом. На 3-й день после нанесения геля на пораженном месте образовывался струп, что является необходимым условием и признаком процесса заживления. Полноценный струп на 3-й день образовался у 2-х животных, однако через 2 недели, когда струп отпал, на коже наблюдались повторные признаки поражения ИПД стадий М1 и М2. У 3-х животных струп образовался частично, т. е. не покрыл всю площадь поражения, что стало причиной не полного заживления у 2-х коров (стадии М1) и персистенции изначальной стадии поражения до конца исследования (М4). У 2-х животных не наблюдалось образование полноценного струпа на 3-й день. К этому моменту, изменения, произошедшие на поверхности поражений, можно охарактеризовать как некроз и легкая степень мацерации из-за чего она приобрела серую окраску. В данном случае струп образовался на несколько дней позднее и персистировал до 3-го обследования. Обобщенные данные приведены в таблице 11. Анализируя данные таблицы установлено, что на ряду с уменьшением показателя состояния конечностей в баллах, так же произошло уменьшение суммарного балла хромоты, так же как и суммарного диаметра поражений, на 33,3%. При этом только у одного животного, которому не накладывалась защитная повязка, диаметр поражения остался неизменным и у одного животного степень хромоты осталась на прежнем уровне. 72 Таблица 11 – Данные об изменении степени хромоты и диаметра ИПД поражений 2 + 48 8 -40 3 1 -2 30 25 -5 2 5078 2 - 34 14 -20 3 2 -1 40 40 0 3 4632 2 + 66 20 -46 4 3 -1 35 5 -30 4 3490 2 + 66 58 -8 4 2 -2 30 10 -20 5 4957 2 + 62 14 -48 3 3 0 30 20 -10 6 5069 2 - 98 18 -80 3 2 -1 55 40 -15 7 5014 2 + 34 18 -16 4 3 -1 50 40 -10 408 150 -258 24 16 -8 270 180 -90 Итого: 1 Хромота (балл) Изменение состояния конечностей, балл Налож-е повязки, + - 4743 № ушной бирки 1 № п/п К-во применений препарата опытной группы с применением геля для копыт "Солка". 3 Итого %: ± -63,2 1 3 ± -33,3 Диаметр поражения, мм 1 3 ± -33,3 Отдельно необходимо отметить, что только у 5-ти животных наблюдался переход менее интенсивную стадию (из М2 в М1 у 3-х коров, из М2 в М3 - у 2-х коров), что составляет 71,4% от исследуемой группы. У остальных 2-х коров стадия ИПД осталась неизменной. 73 4. Опытная группа с применением препарата для лечения пальцевого дерматита Данные по бальной оценке состояния конечностей до начала опыта, через 14 дней после начала лечения и после окончания лечения приведены в таблице 12. 74 Таблица 12 – Бальная оценка состояния конечностей опытной группы с применением препарата для лечения пальцевого дерматита. № ушной бирки № исследования Показатель Боль Болевая проба положит. Ромота М2 поражение Не зависящее от размера, болевая проба отр. ≤ 4 см, болевая проба положит. ˃ 4 см, болевая проба положит. М3 поражение Любой размер М4 поражение ≤ 2 см ˃ 2 см Внешний вид М1, М2, М3 или М4 поражение, болевая проба отр. М1, М2, М3 или М4, ≤ 2 см, болевая проба положит. М1, М2, М3 или М4, ˃2 см, болевая проба положит. Поверхность язвы Белая поверхность Струпьевидная поверхность (темный слой) Эрозия с пролиферативнофиламентарной поверхностью Эрозия с пролиферат. пов-стью Вогнутая эрозия 5159 1 2 3 5448 1 2 3 4895 1 2 3 5274 1 2 2 4 4 2 4 2 4 4 2 4 3 5169 1 2 3 4979 1 2 3 4759 1 2 3 5014 1 2 3 4 4 Балл 2 4 4 4 2 4 4 2 4 4 4 16 16 32 64 32 32 32 64 2 1 2 4 2 2 4 2 2 2 2 2 2 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 8 16 16 1 2 2 2 2 16 2 2 16 2 2 2 16 2 2 16 2 2 16 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 75 Бело-красная эрозия Красная эрозия Экссудация Поверхность кожи, рост рога, волосяной покров Утолщение кожи Пролиферативные образования Белый эпител. Обод Покраснение кожи Припухлость у пяток Усиленный рост рога Удлиненный или выпавший волосяной покров Взъерошенный волосяной покров Межкопытцевая щель (МКЩ) и межпальцевый дерматит (МД) Межкопытцевая щель изменена Эрозии в МКЩ (МД) Серо-красные эрозии в МКЩ (МД), ≤ 2 см Красные эроз. в МКЩ (МД) ≤ 2 см Серо-красные эрозии в МКЩ (МД) 2 - 4 см Красные эрозии в МКЩ (МД) 2 - 4 см Серо-красные МКЩ (МД) < 4 см Красные эрозии в МКЩ (МД) < 4 см И того И того ± 2 2 4 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 1 1 3 1 4 6 8 12 16 12 34 16 12 71 6 6 64 10 12 62 12 8 32 10 8 104 16 10 18 10 10 34 14 14 -8 22 65 52 54 24 94 20 Примечание: первый столбец под номером животного – до начала лечения, второй – через 14 дней после начала лечения, третий - после окончания лечения. 76 77 Исходя из данных таблицы можно отметить, что после применения разработанного нами препарата против пальцевого дерматита произошло улучшение в течении заболевания у всех животных, что выражалось в бальной системе снижением в пределах от 8 до 94 баллов. У 6-ти коров наблюдалось снижение степени хромоты. У 7-ми коров наблюдалось образование полноценного струпа (переход в стадию М3) и у одной коровывы переход стадии М2 в М1 на момент второго обследования. Обобщенные данные приведены в таблице 13. Таблица 13 – Данные об изменении степени хромоты и диаметра ИПД поражений К-во применений препарата Наложение повязки, + - № ушной бирки № п/п опытной группы с применением препарата для лечения ИПД. Изменение состояния конечностей, балл Хромота (балл) 1 3 ± 1 3 ± Диаметр поражения, мм 1 3 ± 1 5159 2 + 34 12 -22 3 3 0 50 30 -20 2 5448 2 + 71 6 -65 4 1 -3 35 20 -15 3 4895 2 - 64 12 -52 3 2 -1 35 30 -5 4 5274 2 + 62 8 -54 4 2 -2 40 30 -10 5 5169 1 + 32 8 -24 4 1 -3 30 20 -10 6 4979 2 + 104 10 -94 4 2 -2 75 45 -30 7 4759 1 - 18 10 -8 3 1 -2 15 15 0 8 4475 1 - 34 14 -20 2 2 0 20 20 0 419 80 -339 27 14 Итого: -13 300 210 -90 Итого -80,9 -48,1 -30,0 %: Из данных, представленных в таблице, необходимо отметить, что после применения разработанного нами препарата произошло улучшение всех 78 оцениваемых показателей. У всех животных произошел переход на менее интенсивную стадию (из М2 в М3 у 4-х коров, из М4 в М3 - у 2-х коров, из М1 в М3 - у 1-й коровы). У одного животного произошел переход из М2 в М1. Так как разработанный нами препарат требовал более пристального контроля, то было принято решение обследовать данную группу животных 4-й раз на 26-й день. Во время четвертого исследования установили, что у 5-ти коров произошла полная регенерация пораженного участка, а у 3-х голов на пораженном месте персистировал струп. Таким образом, в процессе проведения у животных контрольной группы произошло общее ухудшение течения инфекционного процесса, что выражалось в резком увеличении общих показателей состояния конечностей в баллах и степени хромоты (+ 79,3% и +76,9% соответственно), увеличении общего диаметра поражений на 7,5%, а у одного животного со стадией ИПД М3 произошла окончательная регенерация пораженного участка (- 8 баллов). В опытной группе, где примененялся 10% раствор сульфата меди, так ухудшение течения ИПД, что выражалось в же наблюдалось общее увеличении общих показателей состояния конечностей в баллах (+35,9%), степени хромоты (+17,4%) и увеличении общего диаметра поражений на 2,1%, а у одного животного со стадией ИПД М3 произошла окончательная регенерация пораженного участка. В группе опытных животных, где использовался гель для копыт "Солка", наблюдалась положительная динамика течения ИПД, которая проявлялась в уменьшении показателя состояния конечностей в баллах на 63,2%, суммарного балла хромоты и суммарного диаметра пораженных участков на 33,3%. В опытной группе, где использовался разработанный нами препарат для профилактики и лечения ИПД, положительная динамика течения заболевания была более выраженной, что подтверждалось снижением показателя состояния конечностей в баллах на 80,9%, суммарного балла хромоты на 48,1%. 79 3.4.1 Сравнительная оценка эффективности лечебных и профилактических свойств препаратов для лечения крупного рогатого скота, пораженного инфекционным пальцевым дерматитом. Проведенными исследованиями установлено (прил. 1, с. 129), что данные по суммарной групповой бальной оценке состояния конечностей у всех животных подопытных групп на начало и конец опыта (рис. 16) существенно разнились. Необходимо отметить, что в контрольной группе и в группе с применением ванн с сульфатом меди происходило ухудшение состояния конечностей +176 баллов (79,3%) и + 113 баллов (35,9%) соответственно. Рисунок 16 – Динамика изменения суммарной групповой оценки состояния конечностей по состоянию на начало и конец опыта. В группах с применением геля Солка и разработанного нами препарата произошло улучшение течения инфекционного процесса, что в бальной системе выражалось в снижении на 258 баллов (63,2%) и 339 баллов (80,9%) соответственно. 80 Изменения коснулись степени хромоты животных. Приведенные данные по суммарной групповой бальной оценке степени хромоты у всех групп на начало и конец опыта (рис. 17) повторяют тенденцию данных предыдущей диаграммы. Рисунок 17 – Динамика изменения суммарного группового балла хромоты по состоянию на начало и конец опыта. Так, в контрольной группе и в группе с применением ванн с сульфатом меди происходило увеличение степени хромоты +10 баллов (76,9%) и + 4 балла (17,4%) соответственно. В группах с применением геля "Солка" и разработанного нами препарата произошло снижение показателя - 8 баллов (-33,3%) и - 13 баллов (48,1%) соответственно. Еще одним показателем, который мы учитывали при оценке состояния конечностей, был суммарный диаметр ИПД поражений, динамика которого отображена на рисунке 18. 81 Рисунок 18 – Динамика изменения суммарного группового диаметра поражений в миллиметрах на начало и конец опыта. Изменение суммарного диаметра поражений так же повторяет сходную с вышеизложенными данными тенденцию. Так, в контрольной группе и в группе с применением ванн с сульфатом меди происходило увеличение суммарного диаметра пораженных ИПД мест +15 мм (7,5%) и + 5 мм (2,1%) соответственно. В группах с применением геля "Солка" и разработанного нами препарата произошло снижение показателя: - 90 мм (33,3%) и - 90 мм (30,0%) соответственно. Таким образом, необходимо отметить общую тенденцию среди всех учитываемых нами показателей состояния конечностей, которая заключается в заметном ухудшении течения инфекционного процесса в контрольной группе (увеличение пораженности конечностей с 222 до 398 баллов, увеличение суммарного балла хромоты с 13 до 23, увеличение суммарного диаметра ИПД поражений с 200 до 215 мм), менее выраженном ухудшении в группе с применением копытных ванн (увеличение пораженности конечностей с 315 до 428 баллов, уменьшение суммарного балла хромоты с 24 до 16, увеличение суммарного диаметра ИПД поражений с 235 до 240 мм), в заметном улучшении в 82 группе с применением геля "Солка" (уменьшение пораженности конечностей с 408 до 150 баллов, уменьшение суммарного балла хромоты с 24 до 16, уменьшение суммарного диаметра ИПД поражений с 270 до 180 мм) и в выраженном улучшении в группе с применением разработанного нами препарата (уменьшение пораженности конечностей с 419 до 80 баллов, уменьшение суммарного балла хромоты с 27 до 14, уменьшение суммарного диаметра ИПД поражений с 300 до 210 мм). 83 3.5 Изучение показателей иммунологических, сыворотки крови биохимических коров и гематологических пораженных инфекционным пальцевым дерматитом. Изучали иммунологические, биохимические и гематологические показатели сыворотки крови коров пораженных инфекционным пальцевым дерматитом в контрольной (не леченой группе) и опытной, где применяли для лечения разработанный нами препарат для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита. При первом исследовании, равно как и при последующих, концентрация общего белка и его фракций, за исключением γ-глобулинов, в сыворотке крови контрольной и опытной групп оставалась в пределах физиологической нормы (таб. 14). Уровень ɤ-глобулинов был понижен в опытной группе на 41,2% и в контрольной на 45,8%. Таблица 14 – Содержание общего белка и его фракций у контрольной и опытной групп при применении препарата для лечения ИПД Показатели До начала опыта Через 14 дней После после начала окончания лечения лечения Общий белок 77,9+1,4 82,7+0,4 79,2+1,5 г/л 78,0+0,8 77,9+0,8 76,6+2,7 Альбумин, г/л 33,4+0,9 32,6+0,4 32,9+1,3 34,6+0,6 35,6+0,6 36,2+0,8 α-глобулин, г/л 15,2+0,9 15,8+0,2 15,1+0,74 16,6+0,5 17,6+0,8 16,2+0,3 β-глобулин, 14,4+0,4 15,8+0,2* 15,2+0,3 г/л 13,0+0,6 13,1+0,6 13,2+2,3 γ-глобулин, 14,1+1,2 18,6+1,2* 18,8+1,0* г/л 13,1+0,6 11,2+0,7 10,7+0,68 Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и опытной групп в данный период исследований при р≤0,05 Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы; нижняя строка - показатели контрольной группы. 84 Концентрация иммуноглобулинов класса M была понижена на 8,0% у опытной группы и на 16,0% у контрольной, а также наметилась тенденция к снижению IgG относительно нижней границы физиологической нормы (таб. 15). Снижение активности лизоцима составило 27,0% и 29,0% соответственно. Таблица 15 – Показатели резистентности контрольной и опытной групп при применении препарата для лечения ИПД Показатели До начала опыта Через 14 дней После после начала окончания лечения лечения Иммуноглобулин G, 12,4+0,6 14,6+0,6 14,7+0,76 мг/мл 12,9+0,5 12,5+0,5 11,3+1,4 Иммуноглобулин M, 2,3±0,2 2,6+0,2 2,7+0,04 мг/мл 2,1+0,1 2,16+0,14 2,0+0,16 ЦИК, мг/мл 0,16+0,008 0,17+0,008 0,17+0,006* 0,17+0,006 0,16+0,003 0,15+0,004 Серомукоиды, мг/мл 0,17+0,01 0,14+0,008 0,14+0,003* 0,17±0,01 0,16±0,004 0,18+0,006 Лизоцим, мкг/мл 43,8+2,0 48,1+1,4 53,2+1,4* 42,6+2,2 45,2+4,3 45,2+2,0 , Кислотная емкость, мг% 376+12,0 408+4,0* ** 428±12,0* 352+8,0 348+12,0 349±12,0 Активность ФИ, % 52,2±1,6 54,8±1,2 61,1±2,8*, фагоцитоза 51,4±2,0 51,0±2,0 47,6±2,60 ФЧ, ед. 3,9±0,14 4,2±0,12* 4,5±0,12* 3,68±0,16 3,6±0,12 3,5±0,1 КЗФ. Ед 2,5±0,16 2,86±0,14 3,19±0,14 2,4±0,08 2,68±0,14 2,71±0,12 Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и опытной групп в данный период исследований при р≤0,05 ** – разница статистически достоверна межу показателями опытной группы в данный и предыдущий период исследования. Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы; нижняя строка - показатели контрольной группы. 85 О нарушении кислотно-основного гомеостаза у животных свидетельствует снижение кислотной емкости сыворотки крови на 10,5% в опытной и 19,0% в контрольной группе относительно нижней границы нормы. Показатель фагоцитарной активности – фагоцитарный индекс, который указывает на долю нейтрофилов, захвативших микроорганизмы, были приближены к нижней границе физиологической нормы. В то же время фагоцитарное число – среднее число микроорганизмов, поглощенных одним нейтрофилом – было снижено относительно нижней границы нормы в обеих группах. Концентрация ЦИК оставалась в пределах физиологической нормы на протяжении всего опыта. Полученные данные (таб. 16) свидетельствуют об определенном напряжении в системе ПОЛ-АОЗ. Так, уровень конечного продукта ПОЛ – МДА превышает физиологически нормальный уровень на 30,7% у животных опытной группы и на 17,6% – у контрольной. В то же время, несмотря на соответствие концентрации витамина Е и активности каталазы физиологической норме, у коров обеих групп снижена общая антиокислительная активность (АОА) липидов сыворотки крови на 12,0% и 14,2% соответственно. Таблица 16 – Биохимические показатели контрольной и опытной групп при применении препарата против ИПД. Показатели До начала опыта Витамин Е, мкг/мл 9,1+0,7 9,8+0,5 9,4+0,5 9,4+0,4 30,9+1,0 31,1+0,6 21,2+0,5 19,6+0,9 2,0+0,04 1,8+0,06 31,6+1,3 31,1+1,2 Оксид азота, мкмоль/л Каталаза, нмоль н2о2 секхмг белка ДК, мкмоль/л МДА, ∆/Д АОА, % ингибиции Через 14 дней после начала лечения 10,7+1,2 8,9+0,84 11,6+0,4* 8,8+0,5 35,4+0,6* 32,5+0,8 19,6+0,4 21,2+0,5 1,8+0,06* 2,0+0,04 36,6+1,2 32,2+1,1 После окончания лечения 12,0±0,6* 9,3+0,7 12,4+0,48* 8,9+0,7 37,0+1,6* 29,6+0,5 18,5+0,4* 21,7+0,7 1,6+0,06 1,9+0,1 37,3+1,46* 28,9+0,9 86 Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и опытной групп в данный период исследований при р≤0,05 Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы; нижняя строка - показатели контрольной группы. При исследовании гематологических показателей (таб. 17) в обеих группах был установлен сдвиг лейкоцитарной формулы влево – количество палочкоядерных нейтрофилов было выше верхней границы нормы в среднем на 126% (в 2,26 раза), а уровень сегментоядерных нейтрофилов был снижен на 22,0% относительно нижней границы нормы. Процент моноцитов у животных опытной группы был повышен на 31,4%, а контрольной – на 37,1% относительно верхней границы физиологической нормы. Таблица 17 – Гематологические показатели контрольной и опытной групп при применении препарата для лечения ИПД До начала опыта Показатели Лейкоциты, Т/л П С Лейкоцитарная формула,% Э Б М Л 8,7±0,2 9,4±0,5 13,2±0,8 13,6±0,6 27,6±1,6 27,0±2,2 6,0±0,8 6,6±0,8 0 0 9,2±0,8 9,6±0,6 42,2±3,48 43,2±3,0 Через 14 дней после начала лечения 7,8±0,3* 9,7±0,6 9,4±0,6* ** 13,4±0,6 34,6±3,0* 24,6±1,2 5,4±0,8 7,2±0,4 0 0 7,2±0,4* 9,8±0,8 45,2±4,0 43,0±2,6 После окончания лечения 6,8±0,3* 9,4±0,4 7,4±0,6* 13,2±1,0 38,6±1,0* 22,6±1,8 5,2±0,7 7,0±0,6 0 0 6,4±0,6* 10,4±0,8 43,2±1,0 42,8±1,0 87 Примечание: * – разница статистически достоверна между показателями контрольной и опытной групп в данный период исследований при р≤0,05 ** – разница статистически достоверна межу показателями опытной группы в данный и предыдущий период исследования. Примечание 1: верхняя строка - показатели опытной группы; нижняя строка - показатели контрольной группы. При взятии крови после начала лечения у животных опытной группы установлено статистически достоверное повышение уровня ɤ-глобулинов на 66,6% относительно показателей контрольной группы и на 31,9% по сравнению с предыдущими показателями в этой группе, концентрация иммуноглобулинов у коров этой группы также возрастала: Ig G на 13,0% и 20,3% – IgM на 17,7% соответственно. О снижении иммуносупрессии в организме коров, подвергавшихся лечению, свидетельствует снижение уровня серомукоидов на 17,6% по сравнению с предыдущими показателями, и на 12,5% относительно показателей контрольной группы в этот период исследовании. Об определенной активизации ферментативного звена антиоксидантной защиты при лечении свидетельствует незначительное повышение активности каталазы – на 14,6% и АОА – на 15,8% относительно предыдущих показателей и на 8,9% и 13,7% по сравнению с контрольными значениями в этот период опыта. По-видимому, это обусловило тенденцию к снижению концентрации продуктов ПОЛ – ДК и МДА (на 7,5% и 10,0% относительно контроля). Лечение способствовало нормализации кислотно-основного равновесия в организме коров – кислотная емкость повысилась на 8,5% и достигла физиологической нормы. Применение препарата также способствовало изменению лейкоцитарной формулы – у коров снизился процент палочкоядерных нейтрофилов (на 29,8%) и 88 моноцитов (на 21,7%) (р≤0,05), также на 10 % снизилось количество лейкоцитов в крови. После начала лечения повысилось продуцирование оксида азота, на что указывает увеличение его концентрации на 23,4% относительно предыдущих показателей и на 31,8% по сравнению с контролем. Применение препарата положительно повлияло на активность фагоцитоза, о чем свидетельствует тенденция к повышению фагоцитарной активности нейтрофилов, и статистически достоверное повышение фагоцитарного индекса на 16,6%. У животных этой группы повысилась также активность лизоцима – на 11, 6% относительно предыдущих показателей и на 6,6 % относительно контроля на фоне аналогичного повышения этого показателя у коров контрольной группы по сравнению с первым взятием крови. Таким образом, после проведения лечебных мероприятий при изучении показателей крови зафиксирована некоторая стабилизация ряда иммунобиохимических показателей крови у коров опытной группы на фоне их ухудшения у животных контрольной группы. В частности, у коров контрольной группы продолжалось снижение уровня ɤ-глобулинов, IgG, IgМ, и повышение серомукоидов, при этом разница между показателями групп составляла 66,1%, 16,8% 20,4% (р≤0,05) и 12,5% соответственно. Лечение способствовало снижению расходования витамина Е – его уровень у коров опытной группы превысил средний показатель контрольной группы на 29,0% (р≤0,05). У животных опытной группы была выше контроля активность каталазы на 25,0%, а также АОА липидов сыворотки – на 29,1%. В этот период опыта продолжилась тенденция к снижению интенсивности ПОЛ, зафиксированная на предыдущем сроке исследования: разница между средними показателями уровня ДК и МДА у коров обеих групп составила 14,7% и 15,8% соответственно. 89 Усилилось влияние лечения и на состояние кислотно-основного гомеостаза животных, на что указывает повышение кислотной емкости у животных опытной группы на 22,3% по сравнению с контролем. В этот период опыта у животных опытной группы продолжалось снижение количества лейкоцитов в крови (относительно показателей группы контроля на 27,6%), доли палочкоядерных нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов (51,5% 25,7% и 38,5% соответственно). При этом в крови возрастало количество сегментоядерных нейтрофилов – уровень был выше у животных опытной группы на 70,7% по сравнению с контролем. Также повышалась интенсивность фагоцитарной реакции нейтрофилов, о чем свидетельствует повышение ФИ (на 9,8% по сравнению показателем предыдущего исследования и на 26,4% относительно контроля), ФЧ (на 6,1% и 28,1% соответственно) и КЗФ (на 11,9 и 18,5% соответственно). Также со времени предыдущего исследования у коров опытной группы незначительно усилилось продуцирование оксида азота – разница между предыдущими показателями по группе составила 6,8%, по сравнению с контрольными в этот период – 39,3% (р≤0,05). Эти данные согласуются с данными по увеличению активности лизоцима, продуцентом которого являются моноциты, обладающие фагоцитарной активностью. Активность лизоцима у животных опытной группы по сравнению с предыдущим исследованием крови повысилась на 10,8%, а относительно контрольных показателей зафиксировано статистически достоверное повышение – разница составила 66,7%. В заключение необходимо отметить, что до применения препарата для лечения ИПД показатели концентраций общего белка и его фракций оставалась в пределах физиологической нормы, а уровень ɤ-глобулинов понижался в опытной и контрольной группах соответственно на 41,2% и 45,8%. Снижалась активность лизоцима в соответствующих группах на 27,0% и 29,0%. Был нарушен кислотно- 90 основной гомеостаз, выражающийся снижением кислотной емкости сыворотки крови на 10,5% и 19,0% в обеих группах. Напряжение в системе ПОЛ-АОЗ выражалось превышением 17,6% физиологически нормального уровня на 30,7% и в опытной и контрольной группах. Наблюдалось снижение общей антиоксидантной активности на 12,0% и 14,2% соответственно. Наблюдался сдвиг лейкоцитарной формулы влево – количество палочкоядерных нейтрофилов было выше верхней границы нормы в среднем на 126% (в 2,26 раза), а уровень сегментоядерных нейтрофилов был снижен на 22,0% относительно нижней границы нормы. Таким образом, после начала лечебных мероприятий (через 10 дней после начала опыта) было установлено статистически достоверное повышение уровня ɤглобулинов на 66,6%, концентрация иммуноглобулинов возрастала: 13,0%, IgM на 17,7% относительно показателей контрольной Ig G на группы. Зафиксировано снижение иммуносупрессии коров, подвергавшихся лечению, выражающаяся снижением уровня серомукоидов на 17,6% по сравнению с предыдущими показателями, и на 12,5% относительно показателей контрольной группы. Наблюдалась активация ферментативного звена антиоксидантной защиты выражающаяся незначительным повышением активности каталазы – на 14,6% и АОА – на 15,8% относительно предыдущих показателей и на 8,9% и 13,7% по сравнению с контролем, что обусловило снижение концентрации продуктов ПОЛ – ДК и МДА (на 7,5% и 10,0% относительно контроля). Лечение способствовало нормализации кислотно-основного равновесия в организме коров, выражающаяся повышением на 8,5% кислотной емкости. Наблюдалось изменение лейкоцитарной формулы, которое выражалось палочкоядерных нейтрофилов на 29,8%, в снижении процента моноцитов на 21,7% (р≤0,05) и количества лейкоцитов в крови на 10%. Отмечалось повышение продуцирование оксида азота, на что указывало увеличение его концентрации на 23,4% относительно предыдущих показателей и на 31,8% по сравнению с контролем. Возрастала активность фагоцитоза, о чем свидетельствовала тенденция к 91 повышению фагоцитарной активности нейтрофилов и статистически достоверное повышение фагоцитарного индекса на 16,6%, и активность лизоцима – на 11, 6% относительно предыдущих показателей и на 6,6 % относительно контроля. После окончания проведения лечебных мероприятий была зафиксирована некоторая стабилизация ряда иммунобиохимических показателей у коров опытной группы на ряду с их ухудшением в контрольной группе, что выражалось в снижении уровня ɤ-глобулинов, IgG, IgМ, и повышении серомукоидов, при этом разница между показателями групп составляла 66,1%, 16,8% 20,4% (р≤0,05) и 12,5% соответственно. Отмечалось снижение расходования витамина Е, что выражалось в превышении показателя контрольной группы на 29,0% (р≤0,05), повышение активности каталазы на 25,0%, а также АОА липидов сыворотки на 29,1% по сравнению с контролем. Было отмечено продолжение тенденции к снижению интенсивности ПОЛ, которая выражалась в разнице между средними показателями уровня ДК и МДА у коров обеих групп на 14,7% и 15,8% соответственно и повышение кислотной емкости у животных опытной группы на 22,3% по сравнению с контролем. Отмечалось продолжение снижения количества лейкоцитов в крови (относительно показателей группы контроля на 27,6%), доли палочкоядерных нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов (51,5% 25,7% и 38,5% соответственно) и возрастание количества сегментоядерных нейтрофилов – уровень был выше у животных опытной группы на 70,7% по сравнению с контролем. Повышалась интенсивность фагоцитарной реакции нейтрофилов, о чем свидетельствует повышение ФИ (на 9,8% по сравнению показателем предыдущего исследования и на 26,4% относительно контроля), ФЧ (на 6,1% и 28,1%) и КЗФ (на 11,9% и 18,5%) соответственно. Наблюдалось незначительное усиление продуцирования оксида азота – разница между предыдущими показателями по группе составила 6,8%, по сравнению с контрольными в этот период – 39,3% (р≤0,05) и повышение активности лизоцима у животных опытной группы по сравнению с предыдущим исследованием на 92 10,8%, а относительно контрольных показателей зафиксировано статистически достоверное повышение – разница составила 66,7%. Исходя из полученных данных можно констатировать снижение защитных сил организма животных вследствие действия сезонных стресс-факторов, что привело к увеличению заболеваемости ИПД, зафиксированному в предыдущих главах работы, а применение разработанного нами препарата, улучшению иммунобиологического статуса опытных животных. способствовало 93 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ Возрастающие потребности производства продукции животноводства требуют его интенсификации. Увеличение молочной продуктивности животноводческих комплексов является одной из важнейших задач современного животноводства. Для этого прибегают к комплексу мер непосредственно в самих хозяйствах (укрупнение стад, оптимизация кормления, улучшение молочной продуктивности местных пород посредством использования семени высококлассных быковпроизводителей и т. д.), а так же прибегают к завозу импортного, высокопродуктивного скота. Завоз животных происходит в основном из стран Европы, США, Австралии, где развито интенсивное молочное животноводство. Наряду с потребностью в импорте высокопродуктивного молочного скота, стоит задача недопущения попадания на территорию РФ различных инфекционных заболеваний, для чего при ввозе животных проводятся карантинные мероприятия. Но, некоторые инфекционные заболевания, такие как инфекционный пальцевый дерматит, не входят беспрепятственно в список карантинных, а следовательно, могут попадать на территорию РФ с завозимыми животными. Поскольку по данным многих авторов ИПД распространен во многих странах Европы и США [27, 79], то вероятность заноса его в нашу страну возрастает. Интенсификация молочного животноводства подразумевает под собой увеличение концентрации поголовья в хозяйствах, интенсивное кормление, направленное процесса на максимальную производства и ряд молочную других мер, продуктивность, среди которых удешевление нарушение технологических процессов, которые, в конечном счете, приводят к снижению иммунного статуса поголовья с увеличением вероятности появления различных инфекционных заболеваний. Выбранное нами для проведения исследований хозяйство не является исключением. Молочное стадо хозяйства комплектовалось животными голштино-фризской породы отечественной и импортной селекции, завезенными из Дании и Голландии в 2005 году. В хозяйстве, на ряду с интенсивным кормлением и рядом нарушений технологических процессов, 94 наблюдался ряд факторов (низкий уровень гигиены, конструктивные особенности покрытия полов, сопутствующая патология дистального отдела конечностей), которые способствовали распространению и развитию инфекционного пальцевого дерматита, что подтверждается данными исследователей всего мира [133, 152, 86]. Однако, основной причиной возникновения инфекционного пальцевого дерматита в хозяйстве, по нашему мнению, является занос возбудителей заболевания (больных животных) из-за рубежа. На момент начала исследований, в зимне-весенний период года, нами была установлена пораженность стада инфекционном пальцевым дерматитом на уровне 11,7% (104 головы), которая в летний период возросла до 21,3% (171 голова) от дойного поголовья. Такая распространенность сопоставима с данными ряда исследователей, отмечающих данный показатель в диапазоне от 1 до 83% [67]. Анализируя данные при проведении начальных этапов исследований установлено, что большая часть животных, среди пораженных ИПД по классификации Döpfer D., (1997) [47], составляли особи с заживающей стадией ИПД М3 - 50% (52 головы) и хронической стадией М4 - 28,8% (30 голов). Соответственно можно заключить, что инфекционный процесс у этих животных находился в стадии преобладания процессов заживления. На примере ООО "Нива" МК "Маячки 1" нами впервые была установлена довольно высокая степень пораженности дойных коров инфекционным пальцевым дерматитом (со стадией М4), что свидетельствует о недостаточно эффективной схеме профилактики и лечения дистального отдела конечностей, применяемой в изучаемом хозяйстве и, возможно, о несвоевременной диагностике данной патологии. Более детальное изучение распространенности инфекционного пальцевого дерматита в этот период показало возрастание доли пораженных коров ко второй лактации до 40,4% (42 головы) и в дальнейшем снижение на протяжении последующих (13 голов (12,5%) на 4-й и последующих лактациях). Данный факт свидетельствует о формировании возрастной невосприимчивости к заболеванию, что так же отмечал Oelkers B. [101]. В подтверждение данного 95 предположения можно отметить, что пораженные инфекционным пальцевым дерматитом коровы с начальной стадией М1 и выраженной стадией М2 наблюдались только на протяжении первых трех лактаций и их доля не превышала 16,6% от всех пораженных, а максимальная доля коров с заживающей стадией М3 регистрировались у животных, находящихся на 4-й и последующих лактациях 61,5% (8 голов). Литературные данные о зависимости возникновения инфекционного пальцевого дерматита от стадии лактации несколько противоречивы. Ряд авторов определяют начальную стадию лактации, как наиболее опасную для возникновения инфекционного пальцевого дерматита [20, 67], в то время как Brentrup H. and Adams W. [27] не обнаружили какой-либо зависимости возникновения инфекционного пальцевого дерматита от стадии лактации, а Nielsen B.H. e. a. [96] установили, что на ранних стадиях лактации вероятность появления инфекционного пальцевого дерматита ниже, чем на средних и поздних стадиях. Наши данные о доле пораженных коров инфекционным пальцевым дерматитом коррелируют с данными Nielsen B.H. e. a. [96] и выражаются в возрастании пораженности в нашем случае с 18,3% в первой трети до 34,6% в последней стадии лактации. Исходя из полученных данных установлено достоверное снижение доли пораженных коров до 12,5% ко второй трети лактации. Объяснением этому может служить факт проведения плановой обрезки копыт примерно на 100-й день лактации, во время которого производилось лечение инфекционного пальцевого дерматита. Анализ пораженности животных инфекционным пальцевым дерматитом в зависимости от среднесуточной молочной продуктивности показал прямо пропорциональную зависимость доли пораженных коров от их продуктивности, т. е. с увеличением молочной продуктивности увеличивалась заболеваемость, что укладывается в общие знания о большей подверженности высокопродуктивных животных возникновению различных факторных инфекционных заболеваний, в т. ч. и инфекционного пальцевого дерматита, что подтверждается данными европейских исследователей 96 [86, 75]. Однако же, минимальная заболеваемость инфекционным пальцевым дерматитом в ООО "Нива" МК "Маячки 1", составляющая 16,3% в группе коров с максимальной молочной продуктивностью (более 30 литров в сутки), не полностью согласовывается с данными Metzner M. e. a. [86] и König S. e. a., [75], утверждающих, что с ростом молочной продуктивности увеличивается заболеваемость инфекционном пальцевым дерматитом. В группе коров с максимальной молочной продуктивностью (более 30 литров в сутки) наблюдалась так же минимальная доля пораженных коров инфекционным пальцевым дерматитом на стадиях М1 и М2 (по 6,7%) и высокая доля коров с заживающей стадией М3 (53,3%), что свидетельствует о повышении сопротивляемости животных с высокой молочной продуктивностью к данной инфекционной патологии дистального отдела конечностей. Заключительный этап исследований в летний период был выбран нами для возможности оценки влияния сезонных факторов на появление и развитие инфекционного пальцевого дерматита. Температура воздуха в период проведения заключительных исследований преимущественно превышала 30°С в дневное время, что является для крупного рогатого скота сильным стресс-фактором. Известно, что молочный скот чрезвычайно чувствителен к тепловому стрессу, вследствие чего повышается риск возникновения различных факторных инфекционных заболеваний на фоне снижения напряженности иммунитета. Существуют некоторые методы понижения температуры воздуха в коровниках и охлаждения животных, такие как принудительная вентиляция, "душ" для коров, система распыления мелкодисперсного тумана, которые в выбранном нами для исследований хозяйстве не применялись. В летний период количество пораженных коров возрастало с 104 голов до 171 (увеличение на 64,4%), что составляло 21,3% от общего количества дойного поголовья. Увеличивалось количество животных с обеими задними пораженными конечностями с 1,9% до 21,6%, так же изменялось распределение долей пораженных голов с разными стадиями инфекционного пальцевого дерматита в сторону увеличения количества 97 животных со стадией М1 (до 18,7%), М2 (до 24,6%), М4 (до 42,1%) и снижения количества животных с заживающей стадией М3 (до 14,6%). Увеличение доли животных с активными стадиями инфекционного пальцевого дерматита (М1 и М2), хронической (М4) и снижение количества животных с заживающей (М3) свидетельствует об усугублении процесса инфекционного процесса. Особенностью течения инфекционного процесса в наших исследованиях явился тот факт, что на 4-й и выше лактациях возникли пораженные животные со стадиями М1 и М2, доля которых среди животных этой группы составляла 44,4% и 5,5% соответственно. По всей видимости, развитие инфекционного пальцевого дерматита у животных зависит от высоких температурных режимов (более 25°С). Все же вышеупомянутое соотношение пораженных животных М1 и М2 позволяет сделать предположение о том, что защитные силы организма, не смотря на их угнетение, все же сдерживают развитие патологического процесса из стадии М1 в М2 у большинства животных. На протяжении всех лактаций происходило увеличение количества животных с поражениями инфекционным пальцевым дерматитом М1 и М2 (16,1% и 30,3% соответственно), максимальные значения которых наблюдались на 1-й лактации. А среди животных, пораженных инфекционным пальцевым дерматитом со стадией М2, отмечалась понижательная динамика с ростом количества лактаций (с 30,3% до 5,5%), что явилось еще одним фактом подтверждающим предположения о возрастной сопротивляемости развитию инфекционного пальцевого дерматита. Коровы, находившиеся на 2-й лактации, были более подвержены поражению обеих задних конечностей (37,8%), с наиболее часто встречающейся комбинацией инфекционного пальцевого дерматита М4-4. Результаты анализа пораженности животных пальцевым дерматитом в зависимости от стадии лактации показывали схожесть тенденции на начальном этапе исследований, т. е. количество коров, пораженных инфекционным пальцевым дерматитом, возрастала с ростом стадии. Наряду с возраставшим количеством пораженных животных со стадиями М1 и М2 во всех периодах лактации по сравнению с предыдущими исследованиями, было отмечено снижение удельного веса количества животных с возрастанием периода 98 лактации (с 36,0% до 11,9% для М1 и с 28,6% до 17,9% для М2). Анализируя данные распределения количества пораженных коров с учетом среднесуточной молочной продуктивности, необходимо отметить сходную тенденцию с начальным этапом исследований: наблюдался рост количества пораженных инфекционным пальцевым дерматитом коров с ростом продуктивности, но минимальный показатель (9,9%) наблюдался в группе с максимальной продуктивностью. С этой закономерностью логично согласовывается показатель удельного веса коров со стадией пальцевого дерматита М3, т. е. он снижается с ростом молочной продуктивности (с 34,1% до 17,0%), но максимален в самой высокопродуктивной группе (53,0%). При изучении микробиологического состава возбудителей, выделенных из пораженных мест инфекционным пальцевым дерматитом, в большинстве проб были обнаружены спирохеты родов Treponema (77,8% случаев) и Borrelia (55,6% случаев), что совпадает с данными многих авторов [157, 51, 52]. Опираясь на проведенные нами исследования с учетом данных Gomez A. e. a., которым удалось искусственно вызвать возникновение ИПД, используя гомогенат из культуры Treponema spp., можно утверждать, что ведущая роль в этиопатогенезе ИПД принадлежит спирохетам [58]. Выделенные из пунктатов Fusobacterium necrophorum, возбудители родов Pasteurella и Bacteroides, а так же выделенные некоторыми авторами [42, 122] возбудители Guggenheimella bovis, Dichelobacter nodosus, T. pedis sp. nov., T. medium ssp. bovis, T. phagedenis ssp. vaccae, T. brennaborense, T. denticola, Borrelia burgdorferi, Bacteroides fragilis, Fusobacterium nucleatum, Fusobacterium mortiferum принимают участие в развитии инфекционного процесса в дистальном отделе конечностей, сопровождающегося развитием инфекционного пальцевого дерматита. Многие обнаруженные микроорганизмы в месте развития воспалительного процесса при инфекционном пальцевом дерматите вызывают секундарные инфекции, а иногда, по всей видимости, развивается устойчивый синергизм. 99 При изучении иммунологических, биохимических и гематологических показателей сыворотки крови коров пораженных инфекционным пальцевым дерматитом в контрольной (не леченой группе) и опытной, где применяли для лечения разработанный нами препарат для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита, установлено, что у опытных животных были обнаружены изменения в иммунологических и биохимических показателях. Содержание общего белка и его фракций, за исключением γ-глобулинов, находилось в пределах физиологической нормы. Содержание γ-глобулинов в сыворотке крови было понижено у коров обеих групп, что могло быть вызвано длительным течением заболевания, а так же снижение лизоцимной активности и фагоцитарного числа свидетельствуют об иммунодефицитном состоянии. Концентрация IgM была понижена у опытной и у контрольной на 8,0% и 16,0% соответственно, что могло быть вызвано снижением их синтеза при длительном течении инфекционного процесса. Изменения в системе ПОЛ-АОЗ, а именно увеличение МДА в обеих группах, снижение антиокислительной активности липидов сыворотки крови и продукции оксида азота свидетельствовало о снижении иммунного статуса подопытных животных. При изучении гематологических показателей был отмечен сдвиг лейкоцитарной формулы влево, проявляющимся моноцитозом, палочкоядерным нейтрофилоцитозом и сегментоядерной нейтофилией, что свидетельствовало об интенсивном развитии инфекционного процесса. Принимая во внимание данные распространенности инфекционного пальцевого дерматита, сезонную динамику, эффективность предпринимаемых мер по борьбе с заболеванием, эффективность, доступность препаратов против инфекционного пальцевого дерматита на Российском рынке, мы предприняли попытку разработки собственного препарата. Взяв за основу препарата действующее вещество сульфат меди была предложена оптимальная его концентрация. Клинические испытания препарата проводились на заключительных этапах исследований, когда доля пораженных инфекционным пальцевым дерматитом животных была 100 максимальной. Для сравнительной оценки эффективности разработанного нами препарата были сформированы 4 группы коров, которые состояли из группы чистого контроля (без применения какого-либо лечения), группы с применением копытных ванн с 10% сульфатом меди, группы с применением препарата-аналога геля для копыт "Солка" и группы с применением разработанного нами препарата. Для изучения иммунобиохимических процессов, протекающих в организме при возникновении ИПД и контроля лечения, на протяжении опыта трижды были отобраны пробы крови; результаты первого представлены выше в данном разделе. В опыт были взяты коровы с различными стадиями проявления инфекционного пальцевого дерматита и размерами самих поражений от 0,5 до 8 см. На протяжении опыта в контрольной группе наблюдалось ухудшение течения заболевания, что проявлялось в увеличении комплексной бальной оценки состояния конечностей, увеличении диаметра поражений и усилении хромоты. Здесь нужно отметить естественное ухудшение течения заболевания при отсутствии лечения, хотя у одной головы произошла окончательная регенерация поражения стадии М3 (по классификации Döpfer D., 1997) [47]. В группе с применением копытных ванн так же наблюдалось общее ухудшение показателей, но менее выраженное, чем у контрольной группы. На фоне общего ухудшения показателей, данная схема, все же, оказывала лечебно-профилактический эффект, что выражалось в уменьшении комплексного балла оценки состояния конечностей у одной головы, его неизменном состоянии у 2-х голов, снижении степени хромоты у одной головы на 1 балл и уменьшении диаметра ИПД поражения на 10 мм. Эти данные противоречат полученным результатам других авторов [135, 80, 64], которые заявляют о высокой эффективности сульфата меди даже при 5% концентрации. Для получения максимального эффекта от таких копытных ванн необходимо придерживаться некоторых правил, среди которых определенная длина ванны (минимум 3 м), установка дополнительных ванн с водой для обмывания копыт, смена рабочего раствора после прохождения через ванну 150 - 200 голов. Несоблюдение этих правил, по нашему мнению, приводило к резкому снижению эффективности применяемой в хозяйстве схемы лечения. 101 Применение геля для копыт "Солка" приводило к улучшению всех контролируемых показателей: комплексный балл оценки состояния конечностей снизился на 63,2%, общий балл хромоты и общий диаметр поражений снизились на 33,3%. Но, не смотря на общее улучшение, у 3-х голов наблюдалось лишь частичное образование на пораженном месте струпа (что является необходимым условием для заживления), что приводило к неполной регенерации пораженного участка к концу опыта, у 2-х голов после слущивания струпа наблюдались повторные признаки инфекционного пальцевого дерматита и у 2-х голов образование струпа произошло с задержкой. В сравнении с показателями оценки состояния конечностей данной группы, показатели группы с применением разработанного нами препарата были выше. Комплексный балл оценки состояния конечностей снижался на 80,9%, общий балл хромоты - на 48,1% и общий диаметр поражений - на 30,0%. При этом, устойчивый струп образовывался у 7ми голов. Для дальнейшего наблюдения за данной группой было проведено дополнительное клиническое обследование на 26-й день после начала опыта, которое показало полную регенерацию пораженного участка у 5-ти голов и у 3-х голов персистирование струпа. Полученные клинические данные подтверждались иммунобиохимическими исследованиями, которые показали повышение уровня ɤглобулинов на 66,1%, IgG – на 16,8%, IgМ – на 20,4%, активизацию ферментативного звена антиоксидантной защиты на 29,1%, снижение процента палочкоядерных нейтрофилов на 51,5% и моноцитов – на 38,5%, увеличение продукции оксида азота на 39,3%, что свидетельствовало об интенсивном восстановлении иммунологической защиты. Повышение кислотной емкости крови наблюдалось из-за снижения болезненных ощущений, что привело к улучшению двигательной активности и, как следствие, увеличению потребления энергии корма. Эффективность проведенного лечения так же подтверждалась микробиологическими исследованиями пунктатов из регенерировавших мест, не было выявлено культур микроорганизмов при посевах на питательные среды Китта-Тароци, МПА, МПБ, сывороточный агар, кровяной агар. 102 Помимо высокой эффективности, разработанный нами препарат отличался низкой себестоимостью входящих в него компонентов, которые широкодоступны на отечественном рынке. Таким образом, проведенные нами научно-производственные опыты показывают, что возникновение и течение инфекционного пальцевого дерматита зависит от многих факторов, важную роль среди которых играет сезонность. Комплекс мер борьбы с данным заболеванием должен быть последовательным и направленным, в первую очередь, на раннее выявление поражений, повышение эффективности лечения и массовую профилактику. Так как данное заболевание заносится в хозяйства с импортируемыми животными, то остается актуальным вопрос об изучении его распространенности на всей территории РФ. 103 5. ВЫВОДЫ 1. Распространенность инфекционного пальцевого дерматита у крупного рогатого скота молочного комплекса ООО "Нива" МК "Маячки 1" Прохоровского р-на, Белгородской области составила 11,2% (104 головы), от которых были выделены микроорганизмы рода Treponema в 77,8 % случаев, рода Borrelia – 55,6%, Fusobacterium necrophorum – 44,5%, рода Pasteurella – 33,3%, рода Bacteroides – 33,3%, рода Clostridium - 33,3%. 2. Сезонная динамика развития инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота в МК «Маячки 1» Прохоровского района, Белгородской области проявлялась увеличением количества пораженных животных до 171 особей (на 64%) под действием сезонных факторов. Максимальное увеличение пораженных инфекционным пальцевым дерматитом животных наблюдалось среди коров со стадиями М2 (14,8%) и М1 (12,2%). 3. Разработан новый препарат и способ его применения для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота, содержащий следующие компоненты в таких пропорциях, мас.%: оксид цинка – 10, мелкодисперсный сульфат меди – 40, мазевая основа (вазелин) остальное, способ применения которого заключается в 1 – 2-кратоном нанесении на пораженный участок с интервалом 3 дня (патент RU 2521242, опубликовано 27.06.2014; патент RU 2521247, опубликовано 27.06.2014). 4. Изучена сравнительная эффективность препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита и прототипа (гель для копыт "Солка"), которая выявила более выраженный лечебный эффект у разработанного нами препарата при лечении коров, обеспечивающего бактерицидное действие на возбудителей инфекционного пальцевого дерматита, выражающийся в уменьшении суммарной групповой оценки 104 состояния конечностей на 17,7%, суммарного балла хромоты на 14,8%, суммарного диаметра поражений на 9,5%. 5. Иммунологические, биохимические и гематологические показатели у больного инфекционным пальцевым дерматитом крупного рогатого скота после проведения лечебно-профилактических мероприятий с использованием разработанного нами препарата, выявили повышение концентрации γ-глобулинов до 18,8+1,0 г/л, IgM до 2,3±0,2 мг/мл, лизоцимной активности до 53,2+1,4 мкг/мл, фагоцитарного индекса до 60,2±2,8% и фагоцитарного числа до 4,5±0,12 ед., антиоксидантной активности липидов сыворотки крови до 37,3+1,46 % ингибиции, снижение концентрации МДА до 1,6+0,06 ∆/Д, усиление продукции оксида азота до 12,4+0,48 мкмоль/л, снижение доли палочкоядерных нейтрофилов до7,4±0,6, эозинофилов до 5,2±0,7 и моноцитов до 6,4±0,6 (р≤0,05). 105 6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ 1. Использовать усовершенствованную нами методику оценки состояния конечностей для изучения распространенности инфекционного пальцевого дерматита в животноводческих хозяйствах. 2. Использовать разработанный нами препарат для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита, в состав которого входят оксид цинка, мелкодисперсный сульфат меди, и мазевая основа, который позволяет достичь первичного терапевтического эффекта в течение трех дней. 3. Применять для изучения профилактической и лечебной эффективности препаратов, обладающих бактерицидным действием на возбудителей инфекционного пальцевого дерматита, иммунобиохимические исследования, характеризующие процессы регенерации и восстановления иммунной системы и обменных процессов. 106 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 1. Асатилни В.С. Биохимическая фотометрия / В.С. Асатилни. - М.: Академия Наук СССР, 1957. – 836 с. 2. Жуленко В. Н., Волкова О. И., Уша Б. В. Общая и клиническая ветеринарная рецептура: справочник / Под ред. Проф. В. Н. Жуленко – 2-е изд. – М.: Колос, 2000. – с. 161. 3. Кленина Н.В., Герман В.В., Антонов В.С. Методические рекомендации по определению иммунорезистентного статуса бройлеров. – Харьков, 1989. - с. 13. 4. Костенко Т. С. Практикум по ветеринарной иммунологии и микробиологии / Т. С. Костенко, В. Б. Родионова, Д. И. Скородумов. – М.: Колос, 2001. – 344 с. 5. Красников Г.А. Методические рекомендации по применению иммунохимических, цито и гистоморфологических тестов для оценки иммунобиологического статуса крупного рогатого скота Г.А. Красников, Н.А. Наумова, Н.В. Кленина. – Харьков. – 1985. - с. 6–7. 6. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследований в клинике В.В. Меньшиков. - М.: Медицина, - 1987. - с. 365. 7. Метельская В.А. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке крови / В.А. Метельская, Гуманова Н.Г. – М.: Клиническая лабораторная диагностика № 6. – 2005. - с. 15-16. 8. Покровский А.А. Биохимические методы исследования в клинике: Справочник / А. А. Покровский. - М.: Медицина, - 1969. - с. 61 9. Савин К.С. Применение дезинфектанта нового поколения "Педилайн" для профилактики заболеваний копытец КРС: автореф. дис. … канд. биол. наук: 06.02.05 / Савин Константин Сергеевич. - М., 2012. - с. 16 - 17. 10. Сидоров М. А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов / М. А. Сидоров, Д. И. Скородумов, В. Б. Федотов. – М.: Колос, 1995. – 319 с. 107 11. Стельмухов М.В. Этиопатогенетическая терапия гнойно-некротических язв у коров: автореф. дис. … канд. вет. наук: 16.00.05 / Стельмухов Михаил Владимирович. - С.Пб., 2009. - с. 13. 12. Чеботкевич В.Н. Методы оценки состояния иммунной системы и факторов неспецифической резистентности в ветеринарии / В.Н. Чеботкевич, С.И. Лютинский. - С.Пб., - 1998. - с. 21–22. 13. Чумиков А.А. Комплексное лечение гнойно-некротических заболеваний пальцев у продуктивных животных [электронный ресурс]. - ЮФ НУБиП Украины «КАТУ». – Режим доступа: http://archive.nbuv.gov.ua/portal/chem_biol/Npkau/vet/2012_ 148/files_148/12caaopa.pdf 14. Інструкція до набору реактивів для визначення білковых фракцій турбідиметричним методом В.Ф. Девко. – ДУО "Політехмед". – 2011. 15. Козій В. Етіологія та перебіг масових папіломатозних пальцевих дерматитів у високопродуктивних корів / В.І. Козій // Вет. медицина України. – 2005. №1 - с. 26-28. 16. Козій В.І. Порівняльна ефективність різних методів лікування корів хворих на папіломатозний пальцевий дерматит / В.І. Козій // Наук. вісник Львів. нац. акад. вет. медицини ім. С.З. Гжицького. - 2005. - Т. 7 (№2), ч.1. - с. 6470. 17. Стегній Б.Т. Методи оцінки інтенсивності перикисного окислення ліпідів та його регуляції у біологічних об'єктах / Б.Т. Стегній, Л.В. Коваленко // Методичні рекомендації. – Харьков. – 2009. - с. 56 – 58 18. Улько Л.Г. Бактеріальні асоціації за некробактеріозу у корів (поширення, етіопатогенез, профілактика та засоби лікування): автореф. докт. вет. наук : 16.00.03 / Улько Лариса Григорівна. – Харків, 2013. - с. 17 - 18. 19. Amory J. R. Risk Factors for Reduced Locomotion in Dairy Cattle on Nineteen Farms in The Netherlands / J.R. Amory, P. Kloosterman, Z.E. Barker, J.L. Wright, R.W. Blowey, L.E. Green // American Dairy Science Association. – 2006. – V. 89. – P. 1509–1515. 108 20. Argaez-Rodriguez F. J. Papillomatous digital dermatitis on a commercial dairy farm in Mexicali / F.J. Argaez-Rodriguez, D.W. Hird, J. Hernhdez, D.H. Read, A. Rodriguez-Lainz // Preventive Veterinary Medicine. – 1997. – V. 32. – P. 275286. 21. Barker Z.E. Risk factors for increased rates of sole ulcers, white line disease, and digital dermatitis in dairy cattle from twenty-seven farms in England and Wales / Z.E. Barker, J.R. Amory, J.L. Wright, S.A. Mason, R.W. Blowey, L.E. // J. Dairy Sci.. – 2009 - V. 92. – P. 1971–1978. 22. Berg, J.N. Fusobacterium necrophorum and Bacteroides melaninogenicus as Etiologic Agents of Foot Rot in Cattle / J.N. Berg, R.W. Loan // Am. J. Vet. Res. – 1975. – V. 36. – P. 1115-1122. 23. Berry S.L. Long-term observations on the dynamics of bovine digital dermatitis lesions on a California dairy after topical treatment with lincomycin HCl / S.L. Berry, D.H. Read, T.R. Famula, A. Mongini, D. Döpfer // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 654–658 24. Booth C.J. Effect of Lameness on Culling in Dairy Cows / C.J. Booth, L.D. Warnick, Y.T. Grohn, D.O. Maizon, C.L. Guard, D. Janssen // J. Dairy Sci. – 2004. – V. 87. – P. 4115–4122 25. Borgmann I.E. Spirochete-associated bovine digital dermatitis / I.E. Borgmann, J. Bailey, E.G. Clark // Can Vet J. - 1996. – V. 37. – P. 35-37. 26. Brandt S. Prevalence of bovine papillomavirus and Treponema DNA in bovine digital dermatitis lesions / S. Brandt, V. Apprich, V. Hackl, R. Tober, M. Danzer, C. Kainzbauer, C. Gabriel, C. Stanek, J. Kofler // Veterinary Microbiology. – 2011. V. 148. – P. 161–167. 27. Brentrup H. Klinische Aspekte der Dermatitis digitalis beim Rind / H. Brentrup, W. Adams // Tierärztl. Umschau. – 1990. – V. 45. – S. 311-316. 28. Bruijnis M. R. Assessing the welfare impact of foot disorders in dairy cattle by a modeling approach / M. R. Bruijnis, N. B. Beerda, H. Hogeveen, E. N. Stassen // The Animal Consortium Animal. – 2012. – V. 6:6. – P. 962–970. 109 29. Bruijnis M. R. Assessing economic consequences of foot disorders in dairy cattle using a dynamic stochastic simulation model / M. R. Bruijnis, N.H. Hogeveen, E.N. Stassen // J. Dairy Sci.. – 2010. – V. 93. – P. 2419–2432. 30. Capion N. Conformation of Hind Legs and Lameness in Danish Holstein Heifers / N. Capion, S.M. Thamsborg, C. Enevoldsen // J. Dairy Sci.. – 2008. – V. 91. – P. 2089–2097. 31. Capion N. Infection dynamics of digital dermatitis in first-lactation Holstein cows in an infected herd / Capion N., M. Boye, C. T. Ekstrøm, T. K. Jensen // J. Dairy Sci. – 2012. – V. 95. – P. 6457–6464. 32. Cha Е. The cost of different types of lameness in dairy cows calculated by dynamic programming / Е. Cha, J.A. Hertl, D. Bar, Y.T. Gröhn // Preventive Veterinary Medicine. – 2010. – V. 97. – P. 1–8 33. Chapinal N. Using gait score, walking speed, and lying behavior to detect hoof lesions in dairy cows / Chapinal N., A.M. de Passillé, D.M. Weary, M.A.G. von Keyserlingk, J. Rushen // J. Dairy Sci.. – 2009. – V. 92. – P. 4365–4374. 34. Cheli R. La dermatite digitale del bovino / R. Cheli, C. M. Mortellaro // Proc. 8th International Conference on Diseases of Cattle. – 1974. – P. 208-213. 35. Choi B. K. Spirochetes from digital dermatitis lesions in cattle are closely related to treponemes associated with human periodontitis / B. Choi, K.H. Nattermann, S. Grund, W. Haider, U.B. Göbel // Int. J. Syst. Bacteriol. – 1997. – V. 47. – P. 175-181. 36. Collighan R. J. A spirochete isolated from a case of severe virulent ovine foot disease is closely related to a treponeme isolated from human periodontitis and bovine digital dermatitis / Collighan R. J., R.D. Naylor, P.K. Martin, B.A. Cooley, N. Buller, M.J. Woodward // Vet. Microbiol. – 2000. – V. 74. – P. 249257. 37. Collighan, R.J., M.J. Woodward Spirochaetes and other bacterial species associated with bovine digital dermatitis / R. J. Collighan, M. J. Woodward // FEMS Mic. Lett.. – 1997. – V. 156. – P. – 37-41. 110 38. Cook N.B. Observations on the design and use of footbaths for the control of infectious hoof disease in dairy cattle / N.B. Cook, J. Rieman, A. Gomez, K. Burgi // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 669–673. 39. Cramer G. Herd- and Cow-Level Prevalence of Foot Lesions in Ontario Dairy Cattle / G. Cramer, K.D. Lissemore, C.L. Guard, K.E. Leslie, D.F. Kelton // J. Dairy Sci.. – 2008. – V. 91. – P. 888–3895. 40. Cramer G. The association between foot lesions and culling risk in Ontario Holstein cows / G. Cramer, K.D. Lissemore, C.L. Guard, K.E. Leslie, D.F. Kelton // J. Dairy Sci.. – 2009. – V. 92. – P. 2572–2579. 41. Cramer G. Herd-level risk factors for seven different foot lesions in Ontario Holstein cattle housed in tie stalls or free stalls / G. Cramer, K.D. Lissemore, C.L. Guard, K.E. Leslie, D.F. Kelton // J. Dairy Sci.. – 2009. – V. 92 P. 1404–1411. 42. Demirkan I. The frequent detection of a treponeme in bovine digital dermatitis by immunocytochemistry and polymerase chain reaction / I. Demirkan, S.D. Carter, R.D. Murray, R.W. Blowey, M.J. Woodward // Veterinary Microbiology. – 1998. – V. 60. – P. 285–292. 43. Demirkan I. Serological evidence of spirochaetal infections associated with digital dermatitis in dairy cattle / I. Demirkan, R.L. Walker, R.D. Murray, R.W. Blowey S.D. Carter // Vet. J.. – 1999. – V. 157. – P. 69-77. 44. Dhawi A. Bovine digital dermatitis and severe virulent ovine foot rot: a common spirochaetal pathogenesis / A. Dhawi, C.A. Hart, I. Demirkan, I.H. Davies, S.D. Carter // Vet J.. – 2005. – V. 169(2). – P. 232-41. 45. Döpfer D. Dermatitis digitalis: Klauen-krankheit mit vielen Gesichtern / D. Döpfer // Milchpur das Magazi n des Milchprüfring Bayern E.V.. – 2012. – V. 3. – S. 12-17. 46. Döpfer D. The dynamics of digital dermatitis in populations of dairy cattle: Model-based estimates of transition rates and implications for control / D. Döpfer, M. Holzhauer, M. van Boven // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 648–653. 111 47. Döpfer D. Histological and bacteriological evaluation of digital dermatitis in cattle, with special reference to spirochaetes and Campylobacter faecalis / D. Döpfer, A. Koopmans, F.A. Meijer, I. Szakall, Y.H. Schukken, W. Klee, R.B. Bosma, J.L. Cornelisse, A.M. van Asten, H. M. // Vet. Rec. – 1997. – V. 140. – P. 620-623. 48. Elliott K. Bovine immune response to papillomatous digital dermatitis (PDD)associated spirochetes is skewed in isolate reactivity and subclass elicitation / K. Elliott, D.P. Alt // Veterinary Immunology and Immunopathology. – 2009. – V. 130. – P. 256–261. 49. Ettema J.F. Economic decision making on prevention and control of clinical lameness in Danish dairy herds / J.F. Ettema, S. Østergaard // Livestock Science. – 2006. – V. 102. – P. 92–106. 50. Ettemaa J.F. Modelling the economic impact of three lameness causing diseases using herd and cow level evidence / J.F. Ettemaa, S. Østergaarda, A.R. Kristensen // Preventive Veterinary Medicine. – 2010. – V. 95. – P. 64–73. 51. Evans N.J. Three unique groups of spirochetes isolated from digital dermatitis lesions in UK cattle / N.J. Evans, J.M. Brown, I. Demirkan, R.D. Murray, W.D. Vink, R.W. Blowey, C.A. Hart, S.D. Carter // Veterinary Microbiology. – 2008. – V. 130. – P. 141–150. 52. Evans N.J. In vitro susceptibility of bovine digital dermatitis associated spirochaetes to antimicrobial agents / Evans N.J., J.M. Brown, I. Demirkan, R. Birtles, C.A. Hart, S.D. // Carter Veterinary Microbiology. – 2009. – V. 136. – P. 115–120. 53. Evans N.J Association of Unique, Isolated Treponemes with Bovine Digital Dermatitis Lesions / N.J. Evans, J.M. Brown, I. Demirkan, P. Singh, B. Getty, D. Timofte, W.D. Vink, R.D. Murray, R.W. Blowey, R.J. Birtles, C.A. Hart, S.D. Carter // Journal of clinical microbiology. – 2009. – V. 47. – N. 3. – P. 689–696. 54. Evans N.J. Treponema pedis sp. nov., a spirochaete isolated from bovine digital dermatitis lesions / N.J. Evans, J.M. Brown, I. Demirkan, R.D. Murray, R.J. 112 Birtles, C.A. Hart S.D. Carter // International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. – 2009. – V. 59. – P. 987–991. 55. Fidler A. Evaluation of a Serpens species bacterin for treatment of digital dermatitis in dairy cattle / A. Fidler, M.L. Alley, G.W. // Smith Research in Veterinary Science. – 2012. – V. 93. – P. 1258–1260. 56. Fiedler A. Ein Pflaster gegen Mortellaro / A. Fiedler // Elite Magazin für Milcherzeuger SONDERDRUCK aus der Ausgabe 06/2012. 57. Frankena K. The effect of digital lesions and floor type on locomotion score in Dutch dairy cows / K. Frankena, J.G.C.J. Somers, W.G.P. Schouten, J.V. van Stek, J.H.M. Metz, E.N. Stassen, E.A.M. Graa // Preventive Veterinary Medicine. – 2009. – V. 88. – P. 150–157. 58. Gomez А., N.B. Cook, N.D. Bernardoni, J. Rieman, A.F. Dusick, R. Hartshorn, M.T. Socha, D.H. Read, D. Döpfer An experimental infection model to induce digital dermatitis infection in cattle / А. Gomez, N.B. Cook, N.D. Bernardoni, J. Rieman, A.F. Dusick, R. Hartshorn, M.T. Socha, D.H. Read, D. Döpfer // J. Dairy Sci.. – 2012. – V. 95. – P. 1821–1830. 59. Gradle C.D. Treatment of digital dermatitis lesions in dairy cows with a novel nonantibiotic formulation in a foot bath / C.D. Gradle, J. Felling, A.O. Dee // Proceedings of the 12th International Symposium on Lameness in Ruminants. – 2002. – P. 363-365. 60. Hanna P., Papillomatous digital dermatitis in a Canadian dairy herd / P. Hanna, J. Lofstedt, P. Duivenvoorden // Can. Vet. J.. – 1994. – V. 35. – P. 657. 61. Haufe H.C. Influence of floor surface and access to pasture on claw health in dairy cows kept in cubicle housing systems / H.C. Haufe, L. Gygax, B. Wechsler, M. Stauffacher, K. Friedli // Preventive Veterinary Medicine. – 2012. – V. 105. – P. 85–92. 62. Hernandez J. Comparison of topical application of oxytetracycline and four nonantibiotic solutions for treatment of papillomatous digital dermatitis in dairy cows / J. Hernandez, J.K. Shearer, J.B. Elliot // J. Am. Vet. Med. Assoc.. – 1999. – V. 214. – P. 688-690. 113 63. Hernandez J. Efficacy of oxytetracycline for treatment of papillomatous digital dermatitis lesions on various anatomic locations in dairy cows / J. Hernandez, J.K. Shearer // J. Am. Vet. Med. Assoc.. – 2000. – V. 216. – P. 1288-1290. 64. Hoffman А. Footbaths for the Treatment or Control of Hairy Heel Warts (Digital Dermatitis) in Dairy Herds: Summary of Seven Studies А. Hoffman Veterinary medicine extension. – 2012. – P. 1-6. 65. Holzhauer M. Curative effect of topical treatment of digital dermatitis with a gel containing activated copper and zinc chelate / M. Holzhauer, C.J. Bartels, M. van Barneveld, C. Vulders, T. Lam // Vet Rec.. – 2011. – V. 169(21). – P. 1-4. 66. Holzhauer M. A longitudinal study into the effect of grazing on claw disorders in female calves and young dairy cows / M. Holzhauer, B. Brummelman, K. Frankena, T.J.G.M. Lam // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 633– 638. 67. Holzhauer M. Herd- and Cow-Level Prevalence of Digital Dermatitis in The Netherlands and Associated Risk Factors / M. Holzhauer, C. Hardenberg, C. J. M. Bartels, K. Frankena // J. Dairy Sci.. – 2006. – V. 89. – P. 580–588. 68. Holzhauer M. The effect of an acidified, ionized copper sulphate solution on digital dermatitis in dairy cows / M. Holzhauer, C.J. Bartels, C. Bergsten, M.M.J. van Riet, K. Frankena, T.J.G.M. Lam // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – V. 659–663. 69. Holzhauer M. Clinical course of digital dermatitis lesions in an endemically infected herd without preventive herd strategies / M. Holzhauer, C.J.M. Bartels, D. Döpfer, G. van Schaik // The Veterinary Journal. – 2008. – V. 177. – P. 222– 230. 70. Katsoulos P. D. First Confirmed Case of Digital Dermatitis in Greece / P. D. Katsoulos, Minas A., Christodoulopoulos G. // American Journal of Animal and Veterinary Science. – 2008. – V. 3(2). – P. 57–61. 71. Klitgaard K. Evidence of Multiple Treponema Phylotypes Involved in Bovine Digital Dermatitis as Shown by 16S rRNA Gene Analysis and Fluorescence In 114 Situ Hybridization / K. Klitgaard, M. Boye, N. Capion, T.K. Jensen // Journal of clinical microbiology. – 2008. – V. Sept.. – P. 3012–3020. 72. Koenig S. Genetic Parameters of Claw and Foot Disorders Estimated with Logistic Models / S. Koenig, A.R. Sharifi, H. Wentrot, D. Landmann, M. Eise, H. Simianer // J. Dairy Sci.. – 2005. – V. 88. – P. 3316–3325. 73. Kofler J. Die Mortellaro-Krankheit (Erdbeerkrankheit, Dermatitis digitalis) eine multifaktorielle Erkrankung mit starkem Hygienebezug / J. Kofler // Fürstenburger Klauenspot Aktuelles-Neus-Fachliches. – 2010. – S. 1–6. 74. Kofler J. Efficacy of the Non-antibiotic Paste Protexin Hoof-Care for Topical Treatment of Digital Dermatitis in Dairy Cows / J. Kofler, M. Pospichal, M. Hofmann-Parisot // J. Vet. Med.. – 2004. V. – 51. – P. 447–452. 75. König S. Exploration of Relationships Between Claw Disorders and Milk Yield in Holstein Cows via Recursive Linear and Threshold Models / S. König, X.L. Wu, D. Gianola, B. Heringstad, H. Simianer // J. Dairy Sci.. – 2008. – V. 91. – P. 395–406. 76. Kremer P. V. Comparison of Claw Health and Milk Yield in Dairy Cows on Elastic or Concrete Flooring / P. V. Kremer, S. Nueske, A. M. Scholz, M. Foerster // J. Dairy Sci.. – 2007. – V. 90. – P. 4603–4611. 77. Laven R.A. The effect of pre-calving environment on the development of digital dermatitis in first lactation heifers R.A. / Laven, D.N. Logue // The Veterinary Journal. – 2007. – V. 174. – P. 310–315. 78. Laven R.A. Treatment strategies for digital dermatitis for the UK / R.A. Laven, D.N. Logue // The Veterinary Journal. – 2006. – V. 171. – P. 79–88. 79. Ledecky V. Dermatitis digitalis in cattle / V. Ledecky, A. Orsag, J. Veghova // Fol. Vet.. – 1997. – V. 41. – P. 51-53. 80. Logue D.N. A field evaluation of a footbathing solution for the control of digital dermatitis in cattle / D.N. Logue, T. Gibert, T. Parkin, S. Thomson, D.J. Taylor // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 664–668. 115 81. Losinger W.C. Economic impacts of reduced milk production associated with papillomatous digital dermatitis in dairy cows in the USA / W.C. Losinger // Journal of Dairy Research. – 2006. – V. 73. – P. 244–256. 82. MacMillan S. Heat stress can be a problem for modern cows - even in winter / S. MacMillan // Dairy Farmer. – 2007. – July 9. – P. 28. 83. Manske T. Topical treatment of digital dermatitis associated with severe heelhorn erosion in a Swedish dairy herd / T. Manske, J. Hultgren, C. Bergsten // Prev. Vet. Med. – 2002. – V. 53. – P. 215–231. 84. McLennan M. W. Digital dermatitis in a Friesian Cow / McLennan M. W., R. A. McKenzie // Austr. Vet. J.. – 1996. – V. 74. – P. 314-315. 85. Metzner M. Dermatitis digitalis (Mortellaro'sche Krankheit, Erdbeerkrankheit, digital dermatitis, hairy footwarts) [электронный ресурс] / M. Metzner// Режим доступа: http://rinderskript.net/skripten/b1-10.html 86. Metzner M. Dermatitis digitalis des Rindes: klinisches Bild, Epidemiologie und Maßnahmen / M. Metzner, D. Döpfer, R. Pijl W. Kehler // Prakt. Tierarzt. – 1995. – V. 76, Sondernummer collegium veterinarium XXV. – P. 46-50. 87. Miller G. Y. Costs of dairy cattle diseases to producers in Ohio / G. Y. Miller, C. R. Dorn // Prev. Vet. Med. – 1990. – V. 8. – P. 171-182. 88. Moe K. K. Detection of antibodies against Fusobacterium necrophorum and Porphyromonas levii-like species in dairy cattle with papillomatous digital dermatitis / K.K. Moe, T. Yano, K. Misumi, C. Kubota, K. Nibe, W. Yamazaki, M. Muguruma, N. Misawa // Microbiol. Immunol. – 2010. – V. 54. – P. 338–346. 89. Moe K.K. Analysis of the IgG Immune Response to Treponema phagedenis-Like Spirochetes in Individual Dairy Cattle with Papillomatous Digital Dermatitis / K.K. Moe, T. Yano, K. Misumi, C. Kubota, W. Yamazaki, M. Muguruma, N. Misawa // Clinical and vaccine immunology. – 2010. – V. Mar.. – P. 376–383. 90. Mortellaro - weltweites Problem für Rinderhalter jetzt gelöst! [Электронный ресурс]. – Режим доступа: http://mortellaro-killer-service.jimdo.com/ 91. Mortellaro'sche Krankheit / Elite Best Practice. – 2012. – S. 42-43. 116 92. Moter A. Fluorescence in situ hybridization shows spatial distribution of as yet uncultured treponemes in biopsies from digital dermatitis lesions / A. Moter, G. Leist, R. Rudolph, K. Schrank, B.K. Choi, M. Wagner U.B. Göbel // Microbiol. – 1998. – V. 144. P. 2459-2467. 93. Mumba T. Detection of spirochetes by polymerase chain reaction and its relation to the course of digital dermatitis after local antibiotic treatment in dairy cattle / T. Mumba, D. Döpfer, C. Kruitwagen, M. Dreher, W. Gaastra, B.A.M. van der Zeijst // J. Vet. Med. – 1999. – V. 46. – P. 117-126. 94. Murray R.D. Carter Some relationships between spirochaete infections and digital dermatitis in four UK dairy herds / R.D. Murray, D.Y. Downham, I. Demirkan, S.D. Carter // Research in Veterinary Science. – 2002. – V. 73. – P. 223–230. 95. Murray R. D., D.Y. Downham, M.J. Clarkson, W.B. Faull, J.W. Hughes, F.J. Manson, J.B. Merritt, W.B. Russell, J.E. Sutherst, W.R. Ward Epidemiology of lameness in dairy cattle: description and analysis of foot lesions // Vet. Rec. – 1996. – V. 138. – P. 586-591. 96. Nielsen B.H. A study of the dynamics of digital dermatitis in 742 lactating dairy cows / B.H. Nielsen, P.T. Thomsen, L.E. Green, J. Kaler // Preventive Veterinary Medicine. – 2012. – V. 104. – P. 44–52. 97. Nielsen B.H. A study of duration of digital dermatitis lesions after treatment in a Danish dairy herd / B.H. Nielsen, P.T. Thomsen J.T. Sørensen // Acta Veterinaria Scandinavica. – 2009. – V. 51. – P. 1–5. 98. Nocek J.E. Digital characteristics in commercial dairy herds fed metal-specific amino acid complexes / J.E Nocek., A.B. Johnson, M.T. Socha // J Dairy Sci. – 2000. – V. 83(7). – P. 1553-72. 99. Nordhoff M. High prevalence of treponemes in bovine digital dermatitis molecular epidemiology / M. Nordhoff, A. Moter, K. Schrank, L.H. Wieler // Veterinary Microbiology. – 2008. – V. 131. – P. 293–300. 100. O'Driscoll K. Effect of milking frequency and nutritional level on hoof health, locomotion score and lying behaviour of dairy cows / K. O'Driscoll, D. Gleeson, B. O'Brien, L. Boyle // Livestock Science. – 2010. – V. 127. – P. 248–256. 117 101. Oelkers B. Untersuchungen zur Wirksamkeit bestandsspezifischer Vakzinen gegen Dermatitis digitalis des Rindes in zwei Milchviehbetrieben : diss. : Bernd Oelkers. - Hannover, 1996. – P. 91. 102. Offer J. Role of footbaths in battle to control digital dermatitis / J. Offer // Dairy Farmer. – 2005. – V. 16. – P. 30. 103. Olmos G. Effect of genetic group and feed system on locomotion score, clinical lameness and hoof disorders of pasture-based Holstein–Friesian cows G. / Olmos, L. Boyle, B. Horan, D.P. Berry, P. O’Connor, J.F. Mee, A. Hanlon // The Animal Consortium Animal. – 2009. V. 3:1. – P. 96–107. 104. Onyiro O.M. Genetic Parameters for Digital Dermatitis and Correlations with Locomotion, Production, Fertility Traits, and Longevity in Holstein-Friesian Dairy Cows / O.M. Onyiro, L.J. Andrews, S. Brotherstone // J. Dairy Sci. – 2008. – V. 91. – P. 4037 – 4046. 105. Ouweltjes W. Effects of two trimming methods of dairy cattle on concrete or rubber-covered slatted floors / W. Ouweltjes, M. Holzhauer, P.P.J. van der Tol, J. van der Wer // J. Dairy Sci. – 2009. – V. 92. – P. 960–971. 106. Pavlenko A. Influence of digital dermatitis and sole ulcer on dairy cow behaviour and milk production / A. Pavlenko, C. Bergsten, I. Ekesbo, T. Kaart, A. Aland L. Lidfors // The Animal Consortium Animal. – 2011. – V. 5:8. – P. 1259–1269. 107. Pijl R. Die Mortellaro'sche Krankheit: Ein Pulver hilft [Электронный ресурс] / R. Pijl // Agrarheute. – 2012. – Режим доступа: http://www.agrarheute.com/klauengesundheit-mortellaro-sche-krankhei 108. Rasmussen M. Bovine digital dermatitis: Possible pathogenic consortium consisting of Dichelobacter nodosus and multiple Treponema species / M. Rasmussen, N. Capion, K. Klitgaard, T. Rogdo, T. Fjeldaas, M. Boye, T. K. Jensen // Veterinary Microbiology. – 2012. – V. 160. – P. 151–161. 109. Read D.H. Papillomatous digital dermatitis (footwarts) in California dairy cattle: clinical and gross pathologic findings / D.H. Read R.L., Walker // J. Vet. Diag. Invest. – 1998. V. – 10. – P. 67-76. 118 110. Reader J.D. Effect of mobility score on milk yield and activity in dairy cattle / J.D. Reader, M.J. Green, J. Kaler, S. A. Mason, L.E. Green // J. Dairy Sci.. – 2011. – V. 94. – P. 5045–5052. 111. Relun A. A simple method to score digital dermatitis in dairy cows in the milking parlor / A. Relun, R. Guatteo, P. Roussel, N. Bareille // J. Dairy Sci.. – 2011. – V. 94. – P. 5424–5434. 112. Relun А. Effectiveness of different regimens of a collective topical treatment using a solution of copper and zinc chelates in the cure of digital dermatitis in dairy farms under field conditions / А. Relun, A. Lehebel, N. Bareille, R. Guatteo // J. Dairy Sci.. – 2012. V. 95. – P. 3722–3735. 113. Rijpkema S.G.T. Woodward Partial identification of spirochaetes from two dairy cows with digital dermatitis by polymerase chain reaction analysis of the 16S ribosomal RNA gene / S.G.T. Rijpkema, G.D. David, S.L. Hughes M.J. // Vet. Rec.. – 1997. – V. 140. – P. 257-259. 114. Rodrigues C.A. Pharmacokinetics of tetracycline in plasma, synovial fluid and milk using single intravenous and single intravenous regional doses in dairy cattle with papillomatous digital dermatitis / C.A. Rodrigues, C.A. Hussni, E.S. Nascimento, C. Esteban, S.H.V. Perri // J. vet. Pharmacol. Therap.. – 2009. – V. 33. – P. 363–370. 115. Rodrigues C.A. Digital dermatitis of the accessory digits of dairy cows / C.A. Rodrigues, M.C.R. Luvizoto, A.L.G. Alves, P.H.M. Teodoro, E.A. Gregório // Pesquisa Veterinária Brasileira. – 2010. – V. 30(3). – P. 246-248. 116. Rodriguez-Lainz, A. Papillomatous digital dermatitis in 458 dairies A. Rodriguez-Lainz, D.W. Hird, R.L. Walker D.H. Read // J. Am. Vet. Med. Assoc.. – 1996. – V. 209. – P. 1464-1467. 117. Rodriguez-Lainz A. Farm- and host-level risk factors for papillomatous digital dermatitis in Chilean dairy cattle / A. Rodriguez-Lainz, P. Melendez-Retamal, D.W. Hird, D.H. Read R.L. Walker // Prev. Vet. Med.. – 1999. – V. 42. – P. 8797. 119 118. Rodriguez-Lainz A. Papillomatous digital dermatitis in Chilean dairies and evaluation of a screening method / A. Rodriguez-Lainz, P. Melendez-Retamalb, D.W. Hirda, D.H. Read // Preventive Veterinary Medicine. – 1998. – V. 37. – P. 197 – 207. 119. Rogdo T. Possible cross-infection of Dichelobacter nodosus between co-grazing sheep and cattle / T. Rogdo, L. Hektoen, J.S. Slettemeås, H.J. Jørgensen, O. Østerås T. Fjeldaas // Acta Veterinaria Scandinavica. – 2012. – V. 54. – P. 19. 120. Rolle M. Medizinische Mikrobiologie, Infektions- und Seuchenlehre / M. Rolle, A. Mayr. – Enke, 2006. – S. 476-477. 121. Santos T.M.A. Microbial diversity in bovine papillomatous digital dermatitis in Holstein dairy cows from upstate New York / T.M.A. Santos, R.V. Pereira, L.S. Caixeta, C.L. Guard R.C. Bicalho // FEMS Microbiol. Ecol.. – 2012. – V. 79. – P. 518–529. 122. Sayers G. Identification of spirochetes associated with contagious ovine digital dermatitis / G. Sayers, P.X. Marques, N.J. Evans, L. O’Grady, M.L. Doherty, S.D. Carter J.E. Nally // J. Clin. Microbiol. – 2009. V. 47. – P. 1199–1201. 123. Schlafer S. Involvement of Guggenheimella bovis in digital dermatitis lesions of dairy cows / S. Schlafer, M. Nordhoff, C. Wyss, S. Strub, J. Hübner, D.M. Gescher, A. Petrich, U.B. Göbel, A. Moter // Veterinary Microbiology. – 2008. – V. 128. – P. 118–125. 124. Scholey R.A. Determining host genetic susceptibility or resistance to bovine digital dermatitis in cattle / R.A. Scholey, Ollier W.E.R., R.W. Blowey, R.D. Murray, S.D. Carter // Advances in Animal Biosciences. – 2010. – V. 1. – P. 2. 125. Schrank K. Treponema brennaborense sp. nov., a novel spirochaete isolated from a dairy cow suffering from digital dermatitis / K. Schrank, B.K. Choi, S. Grund, A. Moter, K. Heuner, H. Nattermann U.B. Göbel // Int. J. Syst. Bacteriol.. – 1999. – V. 49. – P. 43-50. 126. Schütz W. Überprüfung der Wirksamkeit stallspezifischer Vakzinen zur Bekämpfung der Dermatitis digitalis bei Milchkühen : Diss. : Werner Schütz. – München, 2001. – 103 S. 120 127. Seymour J. Footbathing in the management of digital dermatitis / J. Seymour, J. Durkin, H. Bathina, T. Hemling // Proceedings of the 12th International Symposium on Lameness in Ruminants. – 2002. – P. 374-376. 128. Shah H.N. Reclassification of Bacteroides levii (Holdeman, Cato, and Moore) in the genus Porphyromonas, as Porphyromonas levii comb. Nov.. / H.N. Shah, M.D. Collins, I. Olsen, B.J. Paster F.E. Dewhirst Int. // J. Syst. Bacteriol. – 1995. – V. 45. – P. 586-588. 129. Shahabaddin M. Clinical Assessment of Four Individual Treatment for Digital Dermatitis in Dairy Cows / M. Shahabaddin, I. Nowrouzian, M. Nouri, S.M.K.S. Javad // Iranian journal of veterinary surgery. – 2007. – V. 2. – P. 56-60. 130. Shearer J.K. Efficacy of two modified nonantibiotic formulations (Victory) for treatment of papillomatous digital dermatitis in dairy cows / J.K. Shearer, J. Hernandez // J. Dairy Sci.. – 2000. – V. 83. – P. 741-745. 131. Smits M.C.I. Prevalence of digital disorders in zero-grazing dairy cows / M.C.I. Smits, K. Frankena, J.H.M. Metz, I.P.T.M. Noordhuizen // Livest. Prod. Sci.. – 1992. – V. 32. – P. 231-244. 132. Somers J.G.C.J. Prevalence of Claw Disorders in Dutch Dairy Cows Exposed to Several Floor Systems / J.G.C.J. Somers, K. Frankena, E.N. Noordhuizen-Stassen J.H.M. Metz // J. Dairy Sci.. – 2003. – V. 86. – P. 2082–2093. 133. Somers J.G.C.J. Risk factors for digital dermatitis in dairy cows kept in cubicle houses in The Netherlands / J.G.C.J. Somers, K. Frankena, E.N. NoordhuizenStassen, J.H.M. Metz // Preventive Veterinary Medicine. – 2005. – V. 71. – P. 11–21. 134. Speijers M.H.M. Effectiveness of different footbathing frequencies using copper sulfate in the control of digital dermatitis in dairy cows / M.H.M. Speijers, G.A. Finney, J. McBride, S. Watson, D.N. Logue, N. E. O’Connell // J. Dairy Sci.. – 2012. V. 95. – P. 2955–2964. 135. Speijers M.H.M. Effectiveness of different footbath solutions in the treatment of digital dermatitis in dairy cows / M.H.M. Speijers, L.G. Baird, G.A. Finney, J. 121 McBride, D.J. Kilpatrick, D.N. Logue, N.E. O’Connell // J. Dairy Sci.. – 2010. – V. 93. – P. 5782–5791. 136. Speijers M.H.M. Treatment Strategies for Digital Dermatitis for the UK WCDS / M.H.M. Speijers, D.N. Logue, N.E. O’Connell // Advances in Dairy Technology. – 2013. – V. 25. – P. 283-294. 137. Sprecher D.J. Locomotion Scoring of Dairy Cattle / D.J. Sprecher, D.E. Hostetler, J.B. Kaneene // Theriogenology. – 1997. – V. 47. – P. 1178-1187. 138. Stokes J.E. An investigation into the use of infrared thermography (IRT) as a rapid diagnostic tool for foot lesions in dairy cattle / J.E. Stokes, K.A. Leach, D.C.J. Main, H.R. Whay // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 674– 678. 139. Stokes J.E. The reliability of detecting digital dermatitis in the milking parlour / J.E. Stokes, K.A. Leach, D.C.J. Main, H.R. Whay // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 679–684. 140. Strub S. Quantitation of Guggenheimella bovis and treponemes in bovine tissues related to digital dermatitis / S. Strub, J.R. van der Ploeg, K. Nuss, C. Wyss, A. Luginbühl, A. Steiner // FEMS Microbiol Lett.. – 2007. – V. 269. – P. 48–53. 141. Teixeira A.G.V. Efficacy of formalin, copper sulfate, and a commercial footbath product in the control of digital dermatitis / A.G.V. Teixeira, V.S. Machado, L.S. Caixeta, R.V. Pereira, R.C. Bicalho // J. Dairy Sci. – 2010. – V. 93. – P. 3628– 3634. 142. Thomsen P.T. Short Communication: Scoring of Digital Dermatitis During Milking as an Alternative to Scoring in a Hoof Trimming Chute / P.T. Thomsen, I.C. Klaas, K. Bach // J. Dairy Sci.. – 2008. – V. 91. – P. 4679–4682. 143. Thomsen P.T. Ersbøll Evaluation of Three Commercial Hoof-Care Products Used in Footbaths in Danish Dairy Herds / P.T. Thomsen, J.T. Sørensen, A.K. Ersbøll // J. Dairy Sci.. – 2008. – V. 91. – P. 1361–1365. 144. Thomsen P.T. Short communication: Automatic washing of hooves can help control digital dermatitis in dairy cows / P.T. Thomsen, A.K. Ersbøll, J.T. Sørensen // J. Dairy Sci.. – 2012. – V. 95. – P. 7195-7199. 122 145. Thomsen P.T. Locomotion scores and lying behaviour are indicators of hoof lesions in dairy cows / P.T. Thomsen, L. Munksgaard, J.T. Sørensen // The Veterinary Journal. – 2012. – V. 193. – P. 644–647. 146. Toholj B. Efficiency investigation into different therapeutic protocols in treating digital dermatitis in dairy cows / B. Toholj, M. Stevančević, J. Kos, O. Smolec, A. Potkonjak, M. Cincović, B. Belić, V. Ivetić, J. Spasojević, O. Stevančević // Vet. arhiv. – 2012. – V. 82. – P. 133-142. 147. Tomlinson D.J. Formation of Keratins in the Bovine Claw: Roles of Hormones, Minerals, and Vitamins in Functional Claw Integrity / Tomlinson D.J., C.H. Mülling, T.M. Fakler // J. Dairy Sci.. – 2004. – V.87. – P. 797–809. 148. Trott D.J. Characterization of Treponema phagedenis-Like Spirochetes Isolated from Papillomatous Digital Dermatitis Lesions in Dairy Cattle / D.J. Trott, M.R. Moeller, R.L. Zuerner, J.P. Goff, W.R. Waters, D.P. Alt, R.L. Walker, M.J. Wannemuehler // J Clin Microbiol. – 2003. – V. 41(6). – P. 2522–2529. 149. van der Waaij E.H. Genetic parameters for claw disorders in Dutch dairy cattle and correlations with conformation traits / E.H. van der Waaij, M. Holzhauer, E.E. Kamphuis, G. de Jong // J Dairy Sci.. – 2005. – V. 88(10). – P. 3672 – 3678. 150. Vink D. Bovine digital dermatitis: from aggravation to intervention [электронный ресурс] / D. Vink // Epidemiology Group, Faculty of Veterinary Science, University of Liverpool. – 2004. – Режим доступа: www.cattlelameness.com 151. Weaver A.D. Advances in bovine digital diseases / A.D. Weaver // Bovine Prac.. – 1993. – V. 27. – P. 23-27. 152. Wells S.J. Papillomatous digital dermatitis and associated risk factors in US dairy herds / S.J. Wells, L.P. Garber, B.A. Wagner // Prev. Vet. Med.. – 1999. – V. 38. – P. 11-24. 153. Whitaker D.A. Incidence of lameness in dairy cows / D.A. Whitaker, J.M. Kelly, E.J. Smith // Vet. Rec.. – 1983. – V. 113. – P. 60-62. 154. Winkler B. Mechanical properties of the bovine claw horn during lactation / B. Winkler, J. K. Margerison // J. Dairy Sci.. – 2012. – V. 95. – P. 1714–1728. 123 155. Wyss C., Guggenheimella bovis gen. nov., sp. nov., isolated from lesions of bovine dermatitis digitalis / C. Wyss, F.E. Dewhirst, B.J. Paster, T. Thurnheer, A. Luginbühl // International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. – 2005. – V. 55. – P. 667–671. 156. Yano T. Antimicrobial susceptibility of Treponema phagedenis-like spirochetes isolated from dairy cattle with papillomatous digital dermatitis lesions in Japan / T. Yano, Moe K. K., Chuma T., Misawa N.J. // Vet. Med. Sci.. – 2010. – V. 72(3). – P. 379-382. 157. Yano T. Identification of candidate pathogens of papillomatous digital dermatitis in dairy cattle from quantitative 16S rRNA clonal analysis / T. Yano, K.K. Moe, K. Yamazaki, T. Ooka, T. Hayashi, N. Misawa // Veterinary Microbiology. – 2010. – V. 143. – P. 352–362. 158. Zemljic, B., F. Trenti Current observations of dermatitis digitalis in cattle in Slovenia / Zemljic, B., F. Trenti // In Proceedings 18th World Buiatrics Congress. – 1994. – P. 415-420. 159. Zuerner R.L. Papillomatous digital dermatitis spirochetes suppress the bovine macrophage innate immune response / R.L. Zuerner, M.H. Margaret, K. Elliott, D.P. Alt, J.D. Neill // Veterinary Microbiology. – 2007. – V. 125. – P. 256–264. 124 ПРИЛОЖЕНИЕ 1. Акты проведенных исследований. 2. Инструкция по применению препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота. 3. Патенты. 125 Приложение 1. Акты проведенных исследований. 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 Приложение 2. Инструкция по применению препарата для профилактики и лечения инфекционного пальцевого дерматита крупного рогатого скота. 140 141 Приложение 3. Патенты. 142 РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) RU (11) 2521247 (13) C2 (51) МПК ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (12) A61K33/08 A61K33/30 A61K33/34 A61P17/02 A61P31/02 (2006.01) (2006.01) (2006.01) (2006.01) (2006.01) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 27.06.2014 - действует Пошлина: (21), (22) Заявка: 2012125032/15, 15.06.2012 (24) Дата начала отсчета срока действия патента: 15.06.2012 Приоритет(ы): (22) Дата подачи заявки: 15.06.2012 (43) Дата публикации заявки: 20.12.2013 (45) Опубликовано: 27.06.2014 (72) Автор(ы): Писаренко Виктор Федорович (RU), Коваленко Анатолий Михайлович (RU), Левицкая Инна Леонидовна (RU) (73) Патентообладатель(и): Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я. Горина" (RU) (56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: ЖУЛЕНКО В. Н. и др. Общая и клиническая ветеринарная рецептура: Справочник. Под ред. Проф. Жуленко В. Н. , 2-е изд., М., Колос, 2000, с. 161. RU 0002211028C2, 27.08.2003. RU 0002035183C1, 20.05.1995. WO 2005089803A2,29.09. 2005 Адрес для переписки: 308503, Белгородская обл., Белгородский р-н, п. Майский, ул. Вавилова, 24, ФГБОУ ВПО БелГСХА им. В.Я. Горина, зав.сектором петентоведения Н.Е. Крючковой (54) ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ПАЛЬЦЕВОГО ДЕРМАТИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА (Dermatitis digitalis) (57) Реферат: Изобретение относится к ветеринарии, в частности к веществам, используемым при лечении гнойно-некротических поражений дистальных отделов конечностей крупного рогатого скота, к которым относится пальцевый дерматит. Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази состоит из наполнителя, содержащего мазевую основу, и действующего вещества - оксида цинка и медного купороса при следующем соотношении компонентов, мас.%: оксид цинка 9-11, медный купорос 35-45, мазевая основа остальное. Изобретение обеспечивает повышение эффективности лечения при снижении затрат на изготовление мази. 1 табл. Изобретение относится к ветеринарии, в частности к препаратам, используемым при лечении гнойно-некротических поражений дистальных отделов конечностей крупного рогатого скота, к которым относится пальцевый дерматит. 143 Данное заболевание распространено по всему миру и причиняет большой ущерб молочному животноводству. Пальцевый дерматит крупного рогатого скота поражает в основном дойных коров, локализируется чаще на коже свода межкопытцевой щели задних конечностей в виде округлой эрозии размером 1-5 см [Самоловов А.А. Болезни копытцев и пальца крупного рогатого скота / А.А. Самоловов, С.В. Лопатин; Рос. акад. с.-х. наук. Сиб. регион отд-ние. Ин-т эксперим. ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. -Новосибирск, 2010. - С.80-95]. В последнее десятилетие численность животных, пораженных пальцевым дерматитом крупного рогатого скота, в России резко возросла. Существует мазь для лечения гнойных ран [RU 2035183C1, A61K35/78, A61K35/78, A61K31/00, 20.05.1995] у сельскохозяйственных животных, в состав которой входит медный купорос. Она способствует быстрому заживлению ран. Однако информации о применении данной мази для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в доступных источниках литературы не обнаружено. Ближайшим аналогом является Мазь цинковая [Жуленко В.Н., Волкова О.И., Уша Б.В. Общая и клиническая ветеринарная рецептура: Справочник/ Под ред. Проф. Жуленко В.Н. -2-е изд. -М.: Колос, 2000. - с. 161], которая в своем составе содержит оксид цинка 10%, остальное - мазевая основа. Цинковая мазь обладает вяжущим, подсушивающим, противовоспалительным и дезинфицирующим действием. Применяют данную мазь при заболеваниях кожи (мокнущие раны, ожоги, дерматиты, фурункулез, пиодермии, пролежни и др.). Данных о применении цинковой мази против пальцевого дерматита крупного рогатого скота не обнаружено. Задачей предлагаемого изобретения является создание препарата в виде мази для эффективного лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота. Это достигается приготовлением препарата для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази, содержащего в своем составе следующие компоненты в таких пропорциях, мас.%: оксид цинка 9 - 11 медный купорос 35 - 45 мазевая основа остальное Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази обладает бактерицидным действием на возбудителей пальцевого дерматита крупного рогатого скота, а также противовоспалительным, подсушивающим и ранозаживляющим действием. Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази готовят путем смешивания компонентов до получения однородной массы. Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази представляет собой однородную вязкую массу голубого цвета. Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази применяют путем нанесения на пораженные участки кожи. Достаточно 1-2-х аппликаций. Все используемые компоненты препарата для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази не являются дорогостоящими и широкодоступны на современном рынке ветеринарных препаратов, т.е. изобретение может применяться практически в каждом хозяйстве. Пример применения препарата для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази с различными концентрациями медного купороса. Концентрация медного купороса, мас.% 25 40 К-во обработанных голов Кратность применения, раз Длительность курса лечения, дней 5 3 9 3 4 12 9 1 3 Примечания - 144 5 55 3 2 1 6 - После нанесения мази животное испытывает сильное беспокойство Технико-экономическая эффективность препарата для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази заключается в возможности эффективного лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота. ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ 1. Самоловов А.А. Болезни копытцев и пальца крупного рогатого скота./ А.А. Самоловов, С.В. Лопатин; Рос. акад. с.х. наук. Сиб. регион отд-ние. Ин-т эксперим. ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. - Новосибирск, 2010. - С. 8095. 2. RU 2035183 C1, МПК6 A61K 35/78, A61K 31/00, 20.05.1995. 1. Жуленко В.Н., Волкова О.И., Уша Б.В. Общая и клиническая ветеринарная рецептура: Справочник/ Под ред. Проф. Жуленко В.Н. -2-е изд. -М.: Колос, 2000. -с. 161. Формула изобретения Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в виде мази, состоящий из наполнителя, содержащего мазевую основу, и действующего вещества - оксида цинка, отличающийся тем, что действующее вещество дополнительно содержит медный купорос при следующем соотношении компонентов, мас.%: оксид цинка 9-11 медный купорос 35-45 мазевая основа остальное 145 146 РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) RU 2521242 (11) (13) C2 (51) МПК A61K9/06 (2006.01) A61K33/30 (2006.01) A61K33/34 (2006.01) A61P17/00 (2006.01) ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ Статус: по данным на 27.06.2014 - действует Пошлина: (21), (22) Заявка: 2012125030/15, 15.06.2012 (24) Дата начала отсчета срока действия патента: 15.06.2012 Приоритет(ы): (22) Дата подачи заявки: 15.06.2012 (43) Дата публикации заявки: 20.12.2013 (45) Опубликовано: 27.06.2014 (72) Автор(ы): Писаренко Виктор Федорович (RU), Коваленко Анатолий Михайлович (RU), Левицкая Инна Леонидовна (RU) (73) Патентообладатель(и): Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Белгородская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Я. Горина" (RU) (56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: RU 2025110 C1, 30.12.1994. RU 2391110 C2, 10.06.2010. RU 2414902 C1, 27.03.2011. WO 2002102352 A1, 27.12.2002. STEFFENSEN M. Digital dermatitis hos kvaeg// Dansk. Veter.- Tidsskr. 2000, Arg, 83, N22, c.11-16 Адрес для переписки: 308503, Белгородская обл., Белгородский р-н, п. Майский, ул. Вавилова, 24, ФГБОУ ВПО БелГСХА им. В.Я. Горина, зав. сектором патентоведения Н.Е. Крючковой (54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПАЛЬЦЕВОГО ДЕРМАТИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА (57) Реферат: (57) Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота. Способ включает применения препарата в виде мази следующего состава, масс.%: ветеринарный медный купорос 35 - 45, оксид цинка 9 - 11, мазевая основа -остальное. Препарат готовят перемешиванием компонентов до получения однородной массы. Препарат наносят на пораженные места 1 - 2 раза с наложением защитной повязки или без нее. Способ эффективен при лечении пальцевого дерматита крупного рогатого скота. 1 табл., 1пр. СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ПАЛЬЦЕВОГО ДЕРМАТИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА 147 ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способам лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота. Пальцевый дерматит крупного рогатого скота встречается чаще всего у дойных коров, зачастую поражает кожу свода межкопытцевой щели в виде изъязвления или пролиферации. Поражения болезненны и вызывают хромоту различной степени что, в свою очередь, приводит к снижению молочной и мясной продуктивности. Данное заболевание распространено по всему миру и причиняет большой ущерб молочному животноводству. [Самоловов А.А. Болезни копытцев и пальца крупного рогатого скота / А. А. Самоловов, С. В. Лопатин; Рос. акад. с.-х. наук. Сиб. регион отд-ние. Ин-т эксперим. ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. - Новосибирск, 2010 - с. 80 - 95.]. Известен способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота путем нанесения на пораженные места тетрациклинового спрея. Негативной стороной данного способа является недостаточный терапевтический эффект. Через некоторое время применения данного спрея его лечебное действие снижается [Самоловов А.А. Болезни копытцев и пальца крупного рогатого скота / А. А. Самоловов, С. В. Лопатин; Рос. акад. с.-х. наук. Сиб. регион отдние. Ин-т эксперим. ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. - Новосибирск, 2010 - с. 80 - 95.]. Известен способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота путем применения стоячих или прогонных ножных ванн, которые заполняют растворами различных веществ (медный купорос, антибиотики, формалин, перуксусная кислота, глутаровый альдегид, составы аммония и др.). У данного способа есть свои существенные недостатки: терапевтический эффект сильно варьирует в зависимости от выбранного вещества; ванны быстро загрязняются при проходе через них большого количества животных, что так же снижает терапевтический эффект; метод относительно трудоемок [Hulek M. Klauengesundheit & Klauenpflege / Leopold Stocker Verlag, Graz - Stuttgart, 2005 - s. 112 - 113.]. Наиболее близким к заявленному является способ лечения при помощи геля Solka Hoofgel, который обладает хорошим терапевтическим эффектом [Shahabaddin M, Nowrouzian I, Nouri M. Clinical Assessment of Four Individual Treatment for Digital Dermatitis in Dairy Cows. Iranian jounal of veterinary surgery. Vol.: 2 - Tehran, 2007 - p. 56 - 60]. Существенным недостатком этого способа распространенность на российском рынке. является высокая стоимость данного геля и низкая его Задачей изобретения является повышение эффективности способа лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота с низкой себестоимостью применяемых препаратов. Это достигается тем, что препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота наносят на пораженные места с наложением защитной повязки или без нее, при этом в качестве лечебного препарата используют мазь следующего состава, мас.%: ветеринарный медный купорос - 35 - 45, оксид цинка - 9 - 11, остальное - мазевая основа. Препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота готовят посредством смешивания компонентов до однородной массы. Способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота осуществляют следующим образом. На пораженные участки конечностей наносят препарат в виде мази вышеуказанного состава. Если диаметр пораженного места превышает 2 - 2,5 см, то сверху накладывают защитную повязку. Через 3 - 5 дней проводят осмотр пораженного места. Если при этом не наблюдается признаков заживления, то препарат в виде мази наносят еще раз. Как правило, достаточно одного нанесения для полного выздоровления. Признаки заживления и снижение степени хромоты начинают проявляться в течение последующих 1 - 2-х дней после нанесения препарата в виде мази. Применение способа лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота позволяет оказывать губительное действие на возбудителей пальцевого дерматита крупного рогатого скота, а так же способствует ускорению регенерации тканей. Применяемый при этом препарат для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота, благодаря своей консистенции, хорошо удерживается на пораженном месте, обеспечивая продолжительное 148 локальное воздействие. Осуществление способа лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота требует минимальных затрат труда, является простым в исполнении, доступным по стоимости препарата, не вызывает стресса у животных. Для лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота был предложен препарат следующего состава, мас.%: ветеринарный медный купорос - 40, оксид цинка - 10, остальное - мазевая основа. Пример конкретного выполнения 1. В хозяйстве ООО «Имени Гателло», корове с инв. № 256, поставлен диагноз пальцевый дерматит задней правой конечности. Диаметр поражения кожи 4 см. Применен способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота с использованием препарата в виде мази вышеуказанного состава с наложением защитной повязки двукратно с интервалом 3 дня. После удаления защитной повязки на 6-й день на месте поражения наблюдаются признаки заживления: развитие грануляционной ткани по всей поверхности поражения кожи, отсутствие болезненности при надавливании. Пример конкретного выполнения 2. В хозяйстве «Калужская Нива», корове с инв. № 505, поставлен диагноз пальцевый дерматит начальной стадии задней правой конечности. Диаметр поражения кожи 1 см. Применен способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота с использованием препарата в виде мази вышеуказанного состава. Через 3 дня наблюдались признаки заживления: уменьшение поверхности поражения и ее подсыхание. Пример конкретного выполнения 3. В хозяйстве «Маяк», нетели с инв. № 12, поставлен диагноз хронический пальцевый дерматит задней левой конечности. Диаметр поражения кожи 3 см. Применен способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота с использованием препарата в виде мази вышеуказанного состава двукратно с интервалом 4 дня. На 8-й день наблюдались признаки заживления: резкое уменьшение количества характерной пролиферативной ткани, уменьшение диаметра поражения. Примеры применения способа лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота в зависимости от интенсивности поражения указаны в таблице. Таблица Интенсивность поражения, см d < 1 см Кол-во обработанных Кол-во гол. обработок 5 3 2 d 1 - 3 см 2 4 3 8 d 3 и более 1 2 1 1 2 2 3 Длительность лечения, дней 3 5 3 4 6 8 6 8 9 149 Технико-экономическая эффективность заключается в возможности: способа лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота - снижения себестоимости лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота, - повышения эффективности лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота. ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ 1. Самоловов А.А. Болезни копытцев и пальца крупного рогатого скота / А. А. Самоловов, С. В. Лопатин; Рос. акад. с.-х. наук. Сиб. регион отд-ние. Ин-т эксперим. ветеринарии Сибири и Дальнего Востока. - Новосибирск, 2010. - с. 80 - 95. 2. Hulek M. Klauengesundheit & Klauenpflege / Leopold Stocker Verlag, Graz - Stuttgart, 2005 - s. 112 - 113. 3. Shahabaddin M, Nowrouzian I, Nouri M. Clinical Assessment of Four Individual Treatment for Digital Dermatitis in Dairy Cows. Iranian jounal of veterinary surgery. Vol.: 2 - Tehran, 2007 - p. 56 - 60 Формула изобретения Способ лечения пальцевого дерматита крупного рогатого скота посредством применения препарата в виде мази, отличающийся тем, что препарат в виде мази наносят на пораженные места 1 - 2 раза с наложением защитной повязки или без нее, при этом в качестве препарата используют препарат в виде мази следующего состава, мас.%: ветеринарный медный купорос 35 45, оксид цинка 9 11, мазевая основа остальное, который готовят при перемешивании компонентов до получения однородной массы.