УДК 615.254.2:615.276:616
advertisement
УДК 615.254.2:615.276:616-092.9. Т.И. Ермоленко ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НОВОГО КОМБИНИРОВАННОГО ПРЕПАРАТА УРОЛИТОЛИТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ Харьковский национальный медицинский университет пр. Ленина,4, г. Харьков, 61022, Украина Kharkiv National Medical University pr. Lenin, 4, Kharkov, 61022, Ukraine ermolenko_tamara@mail.ru Ключевые слова: уролитиаз, воспаление, биологически активные вещества, флавоноиды, противовоспалительная активность Key words: urolithiasis, inflammation, biologically active substances, flavonoids, anti-inflammatory activity Реферат. Експериментальне вивчення протизапальної активності нового комбінованого препарату уролітолітичної дії. Єрмоленко Т.І. Лікарські засоби рослинного походження надають різносторонній комплексний вплив на перебіг патологічного процесу в нирках, завдяки біологічно активним сполукам. А саме, безпосередній вплив на процес каменеутворення. Пошук лікарських засобів які у своєму складі містили б високо біологічні сполуки рослинного походження, є актуальною проблемою для сучасної фармакології. Метою дослідження було вивчення протизапальної активності нового комбінованого препарату уролітолітичної дії, до складу якого входять сумарний рослинний екстракт та буферний комплекс сукцинатів. Матеріали і методи: асептичне ексудативне запалення викликали за допомогою субплантарного введення в праву задню лапу щурів 0,1 мл 1% розчину λ-карагеніну, дослідний препарат вводили у дозах 1, 2 и 4 мл/кг. Вплив вивчаємого препарату оцінювали за показником об’єму набряку кінцівок. Показано, що виразність антиексудативної дії фларосукцину носила дозозалежний характер, збільшуючись від дози 1,0 мл/кг до дози 2,0 мл/кг (на 5,5%). Подальше підвищення дози до 4,0 мл/кг, не позначалося істотним підвищенням активності. Протизапальна активність препарату варіювала від 25 до 33%, що можна розцінювати як досить виразну, оскільки при фармакологічному вивченні протизапальних засобів, значущим є рівень фармакологічної активності не менше 20% Abstract. Experimental study of anti-inflammatory activity of the new combined urolytolytic action drug. Iermolenko T.I. Herbal medicines provide their versatile complex influence on the course of the pathological process in the kidneys due to biologically active compounds. Specifically, they cause the direct impact on the concrements formation. The search of drugs which would contain high biological compounds of plant origin is an actual issue of modern pharmacology. The aim of investigation was to study the anti-inflammatory activity of the new combined drug of urolytolytic action, which includes the total plant extract and succinate buffer complex. Materials and methods: aseptic exudative inflammation caused by subplantar introduction in the right hind paw of rats 0,1 ml of 1% solution of λ-karahenin, investigated drug administered at doses 1, 2 and 4 ml/kg. The influence of the studied drug was evaluated in terms of swelling volume limbs. It is shown that the severity of antiexudative action of flarosukcine had dose-dependent nature, increasing from dose of 1,0 ml/kg to 2,0 ml/kg (by 5,5%). Further dose escalation to 4,0 ml/kg, were not affect by significant increased activity. Antiinflammatory activity of the drug ranged from 25 to 33%, which can be regarded as quite distinct, since pharmacological study of antiinflammatory drugs have significant pharmacological activity level of at least 20%. Биологически активные компоненты, входящие в состав препаратов растительного происхождения, относятся к самым разнообразным химическим соединениям, которые по химической структуре подобны или даже идентичны физиологически активным веществам организма человека. Поэтому препараты растительного происхождения более физиологично включаются в биохимические процессы человеческого организма, чем синтетические лекарства [8]. Потребность в препаратах с нефропротекторной активностью особенно актуальна сегодня. В большинстве случаев для лечения заболеваний мочевыделительной системы используется комбинация нескольких синтетических лекарственных средств. Эффективность такой терапии несомненна, однако с увеличением количества одновременно принимаемых препаратов их побочные эффекты могут также добавляться. Анализ литературы позволил установить, что лекарственные средства растительного происхождения оказывают разностороннее комплексное воздействие на течение патологического процесса в почках, что имеет непосредственное несомненные влияние на преимущества. процесс А именно, камнеобразования, стабилизацию ионной силы мочи и ингибиторов камнеобразования, ускорения отхождения камней, их фрагментов и песка после разрушения их методом дистанционной литотрипсии, возможность длительного применения без выраженных побочных эффектов [1,3,4]. Пополнение ассортимента лекарственных средств, которые в своем составе содержали бы высоко биологические соединения растительного происхождения, является актуальной проблемой, поскольку спрос на них стремительно растет. Для лечения и метафилактики мочекаменной болезни (МКБ) на фармацевтическом рынке Украины присутствуют комбинированные лекарственные препараты растительного происхождения, действие которых обусловлено биологически активными веществами, которые входят в их состав и обладают противовоспалительным, спазмолитическим, мочегонным антисептическим, действием, а также способствуют выведению камней и их растворению. Научными сотрудниками ПАО НПЦ «Борщаговский ХФЗ» разработан новый оригинальный комбинированный лекарственный препарат уролитолитического действия для лечения и метафилактики МКБ фларосукцин в форме сиропа, который в своем составе содержит суммарный растительный экстракт листьев березы, цветков липы, травы астрагала серпоплодного и буферный сукцинатний комплекс. Биологически активные вещества лекарственных растений, входящих в состав препарата известны и спектр их фармакологической активности всесторонне изучается учеными. Противовоспалительное соединений связано воспаления, что действие растительных фенольных с торможением экссудативных процессов объясняется способностью флавоноидов ограничивать тканевые эффекты цитокининов и провоспалительных простагландинов [10]. В патогенезе уролитиаза важную роль играют факторы, связанные с инфекцией и воспалением мочевых путей, патологическими изменениями их верхних отделов, что может привести к нарушению уро и гемодинамики, устойчивого сдвига рН мочи и в дальнейшем к камнеобразования. С другой стороны, наличие конкрементов в мочевых путях повышает риск микротравмирования, возникновение очагов воспаления и присоединение инфекции [7]. Именно поэтому, одним из направлений патогенетической терапии уролитиаза является применение лекарственных средств, которые оказывают корректирующее воздействие на инфекционно- воспалительный и воспалительный варианты развития заболевания. Наличие в составе изучаемого препарата суммарного экстракта лекарственных растений (астрагала серпоплодого, листья березы, цветков липы), богатого на полифенольные соединения, обусловливает проявление противовоспалительного действия, для подтверждения которого проведено экспериментальное исследование. Материалы и методы исследования С целью изучения противовоспалительного действия в эксперименте общепринятым является моделирование асептического экссудативного воспаления. Классической моделью считается карагениновий отек конечности у крыс, в развитии которого важную роль играют различные медиаторы воспаления (гистамин, серотонин, кинины, простагландины). Экспериментальные требованиям исследования Европейской конвенции проводились о защите согласно позвоночных животных, которые используются в исследовательских и других научных целях, Страсбург, 1986 г.) [9], методических рекомендаций утвержденным ГФЦ МОЗ Украины (Стефанов А.В., 2002) [2], Комитета по Биоэтике НфаУ (протокол № 11 от 16.11.2011 г.). Для оценки выраженности антиэкссудативного действия изучаемого препарата выбрано несколько доз – 1, 2 и 4 мл/кг [6]. Препаратом сравнения избран диклофенак натрия в дозе 8 мг/кг (ЕД50), который считается «золотым стандартом» противовоспалительной терапии. Исследования проводились на 30 белых крысах обоего пола массой 150-180 г, которые были распределены на 5 исследовательских групп по 6 животных в каждой: 1 группа - контрольная патология; 2 группа - животные, получавшие фларосукцин в дозе 1,0 мл/кг; 3 группа - животные, получавшие фларосукцин в дозе 2,0 мл/кг; 4 группа - животные, получавшие фларосукцин в дозе 4,0 мл/кг; 5 группа - животные, получавшие диклофенак натрия в дозе 8,0 мг/кг. В начале эксперимента всем животным, за исключением группы контрольной патологии, однократно внутрижелудочно вводили исследовательские препараты. Через час после этого у всех животных воспроизводили патологию. Асептическое экссудативное воспаление вызвали с помощью субплантарного введения в правую заднюю лапу 0,1 мл 1% раствора λ-карагенина (Sigma, США) [2]. Для определения антиэкссудативной активности использовали показатели отека конечностей через 3 часа после введения флогогена (на пике развития отека) и выражали в процентах по степени уменьшения отека у животных, получавших препараты, по сравнению с животными группы контрольной патологии. Объем отека определяли с помощью плетизмометра и отражали в условных единицах. Противовоспалительную активность рассчитывали по формуле: ПА = ∆Vк –∆Vд х 100%, ∆Vк ПА – противовоспалительная активность, %; ∆Vк – средняя величина отека в группе контрольной патологии; ∆Vд – средняя величина отека в исследовательской группе. Полученные результаты обрабатывались методами вариационной статистики с использованием критериев Фишера – Стьюдента с помощью компьютерных программ [5]. Результаты и их обсуждения Измерение стопы у животных группы контрольной патологии через 3 часа после инъекции флогогена показало рост ее объема в 1,45 раза по сравнению с исходным значением (2,300,03 против 1,510,01 усл. ед.). Прирост объема стопы составил 0,800,03 усл. ед. (табл. 1). Полученный результат свидетельствует о развитии экссудативной фазы воспаления, основным признаком которой является формирование отека. Как видно из табл. 1 исследуемый препарат фларосукцин во всех выбранных дозах оказывал тормозящее влияние на развитие отека по сравнению с контрольной патологией в срок наблюдения. Противовоспалительная активность препарата варьировала от 25 до 33%, что можно расценивать как достаточно выразительную, поскольку при фармакологическом изучении противовоспалительных и анальгетических средств, особенно на этапах скринингового исследования, значимым активности не менее 20% [2]. является уровень фармакологической Таблица 1 Противовоспалительная активность препарата фларосукцин на модели карагенинового отека (n = 6) Условия исследования контрольная патология фларосукцин, 1,0 мл/кг фларосукцин, 2,0 мл/кг фларосукцин, 4,0 мл/кг диклофенак натрия, 8 мг/кг Примечания: Прирост объема стопы, усл. ед. Антиэкссудативная активность, % 0,800,03 – 0,600,04 25,16 0,550,07* 30,61 0,540,06* 32,66 0,440,06* 44,86 1. * – расхождение вероятного характера по сравнению с контрольной патологией (р≤0,05); 2. n – количество животных в группе. Выраженность антиэкссудативного действия фларосукцина носила дозозависимый характер, увеличиваясь наиболее очевидно от дозы 1,0 мл/кг к дозе 2,0 мл/кг (на 5,5%). Дальнейшее повышение дозы до 4,0 мл/кг, не сказывалось существенным повышением активности, хотя и носила характер недостоверной тенденции. Стоит отметить, что в группах животных, получавших фларосукцин в дозах 2,0 мл/кг и 4,0 мл/кг, расхождение значения прироста отека стопы носило статистически достоверный характер по сравнению с контрольной патологией. Относительно препарата сравнения диклофенака натрия, фларосукцин во всех дозах показал менее выразительное действие, о чем свидетельствует значение показателя противовоспалительной активности. Такое явление прогнозируемо, поскольку препараты растительного происхождения оказывают более умеренное фармакологическое действие, чем синтетические препараты, но выгодно отличаются от последних высоким уровнем безопасности. ВЫВОДЫ Исследуемый препарат фларосукцин в диапазоне условнотерапевтических доз проявлял выраженный (на уровне 30 %) противовоспалительный эффект. Таким образом, полученные результаты согласуются с данными литературы о наличии у фитопрепаратов, богатых полифенольными соединениями, угнетающего влияния на медиаторные механизмы воспаления, опосредованные простагландинами, гистамином, кининами и др. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Антиоксидантная активность сухого экстракта подземных органов Astragalus membranaceus и его фракций / А.А. Тропова, Э.Т. Батоцыренова, Д.Н. Оленников и др. // Сибирский медицинский журнал. – 2012. – Т. 114, № 7. – С. 107–109. 2. Доклинические исследования лекарственных средств : метод. рек. / под ред. А.В. Стефанова. – К. : Авиценна, 2002. – 528 с. 3. Макарова М.Н. Биодоступность и метаболизм флавоноидов / М.Н. Макарова // Экспериментальная и клиническая фармакология. – 2011. – Т. 74, № 6. – С. 33–40. 4. Попов А.М. Механизмы протективной фармакологической активности флавоноидов / А.М. Попов, О.Н. Кривошапко, А.А. Артюкова // Биофармацевтический журнал. – 2012. – Т. 4, № 4. – С. 27–41. 5. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica (4-е изд.) / О.Ю. Реброва. – М. : МедиаCфера, 2006. – 312 с. 6. Рыболовлев Ю.Р. Дозирование веществ для млекопитающих по константам биологической активности / Ю.Р. Рыболовлев, Р.С. Рыболовлев // Доклады АН СССЗ. – 1979. – № 6. – С. 1513–1516. 7. Тареева И.Е. Почечнокаменная болезнь : руководство для врачей / под ред. И.Е. Тареевой. – М. : Медицина, 2000. – С. 413–421. 8. Чекман І.С. Фітотерапія: експериментально-клінічний аспект / І.С. Чекман // Експериментальна і клінічна медицина. – 2007. – № 1. – С. 11–14. 9. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purpose. Council of Europe, Strasbourg, 1986. – 52 с. 10. Flavonoids: prospective drug candidates / L.H. Cazarolli, L. Zanatta, E.H. Alberton et al. // Mini Reviews in Medicinal Chemistry. – 2008. – Vol. 8 (13). – P. 1429–1440. REFERENCES 1. Toropova A.A., Batotcirenova E.T., Olejnikov D.N. [Antioxidant activity of dry groundwater bodies extract Astragalus membranaceus and its fractions]. Siberian Medical Journal. 2012. 114 (7): 107–9. Russian. 2. Stefanov A.V. [Preclinical drug’s studies: method. rivers.]. 2002; 528. Russian. 3. Makarova M.N. [Bioavailability and metabolism of flavonoids]. Experimental and Clinical Pharmacology. 2011. 74 (6): 33–40. Russian. 4. Popov A.M., Krivoshapko O.N., Artyukova A.A. [Mechanisms of protective pharmacological activity of flavonoids]. Biopharmaceutical magazine. 2012. 4 (4): 27–41. Russian. 5. Rebrov O.U. [Statistical analysis of medical data. Application software package Statistica (4th ed.)]. 2006; 312. Russian. 6. Rybolovlev Y.R., Rybolovlev R.S. [Dosage substances for mammalian by constants of biological activity]. 1979; 6: 1513–16. Russian. 7. Tareeva I.E. [Kidney Disease: A Guide for doctors]. 2000; 413–21. Russian. 8. Chekman І.S. [Fіtotherapy: experimental-clinic aspect]. Eksperimentalna i klіnіchna medicine. 2007; 1: 11–14. Ukrainian. 9. European convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purpose. Council of Europe, Strasbourg. 1986;52. 10. Cazarolli L.H., Zanatta L., Alberton E.H. Flavonoids: prospective drug candidates. Mini Reviews in Medicinal Chemistry. 2008; 8(13): 1429–40.
