Чага гриб (Inonotus obliquus)

Чага
Inonotus obliquus
Научные исследования
Характеристика двух водорастворимого лигнина метаболитов с антипролиферативным
деятельности из Inonotus obliquus.
С чага гриб, Inonotus obliquus уже давно признано как средство от рака, гастрита, язвы, туберкулез
костей, начиная с 16 века. Здесь мы сообщали идентификации двух однородных биологических
макромолекул, места, как IOW-S-1 и IOW-S-2 с противоопухолевой деятельности от водяного
экстракт I. obliquus. Их молекулярные массы были определены 37.9 и 24,5 кда с помощью
высокоэффективной гель-проникающей хроматографии (HPGPC) соответственно. Химический и
спектральный анализ показал, что оба IOW-S-1 и IOW-S-2 были преобладающими в лигнине, наряду
с ∼20% углеводов. Исследование цитотоксичности показали, что эти два лигнин-углеводных
комплексов, индуцированной гибели клеток от концентрации образом, при этом индукция
апоптоза был в значительной степени клеточного цикла, независимый. Дальнейшее расследование
показало, что IOW-S-1 или IOW-S-2 ингибирует активацию ядерного фактора транскрипции в
раковых клетках. Эти результаты подразумевают, что растворимые производные лигнина были
одним из биологически активных компонентов в I. obliquus, и при условии дальнейшего
проникновения в понимание молекулярной основы для разнообразных лечебных и пищевую
ценность этого гриба.
Int J Biol Macromol. 2015 Jan 10;74C:507-514. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2014.12.044. [Epub ahead of
print]
Characterization of two water-soluble lignin metabolites with antiproliferative activities from
Inonotus obliquus.
Wang Q1, Mu H1, Zhang L1, Dong D1, Zhang W1, Duan J2.
Author information
1College of Science, Northwest A&F University, Yangling 712100, Shaanxi, China.

Abstract
The chaga mushroom, Inonotus obliquus has long been recognized as a remedy for cancer, gastritis,
ulcers, and tuberculosis of the bones since the 16th century. Herein we reported the identification of two
homogenous biological macromolecules, designated as IOW-S-1 and IOW-S-2 with anti-tumor activities
from the hot-water extract of I. obliquus. Their molecular weights were determined to be 37.9 and
24.5kDa by high performance gel permeation chromatography (HPGPC) respectively. Chemical and
spectral analysis indicated that both IOW-S-1 and IOW-S-2 were predominant in lignin, along with ∼20%
carbohydrates. Examination of cytotoxicity showed that these two lignin-carbohydrate complexes induced
cell death in a concentration dependent manner, while this apoptosis induction was largely cell-cycle
independent. Further investigation demonstrated that IOW-S-1 or IOW-S-2 inhibited the activation of the
nuclear transcription factor in cancer cells. These findings implied that soluble lignin derivatives were one
of bioactive components in I. obliquus, and further provided insights into the understanding of molecular
basis for diverse medicinal and nutritional values of this mushroom.
Химическая характеристика
лекарственного "гриб"
и
биологическая
1
активность
Чага
(Inonotus
obliquus),
В русской традиционной медицине экстракт из гриба Inonotus obliquus (Fr.) Pilat используется в
качестве противоопухолевого лекарства и мочегонное средство. Сообщалось, что Inonotus obliquus
имеет терапевтические эффекты, такие как противовоспалительное, иммуно-модулирующим и
гепатопротекторный эффекты. Данное исследование было разработано для изучения химического
состава и биологических свойств водного и спиртового экстрактов Inonotus obliquus из Финляндии,
России и Таиланда. Их антиоксидантной, антимикробной, и antiquorum свойства были
протестированы, а также цитотоксичность на различных опухолевых клеточных линиях.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Проверенные экстракт был подвергнут обычной химическое исследование идентифицированных
органических кислот и фенольных соединений. Антиоксидантная активность измеряли несколько
разных анализов. Антимикробный потенциал выдержки был протестирован microdilution метод, и
antiquorum зондирования деятельности и antibiofilm формирование Inonotus obliquus экстракты
был протестирован на Pseudomonas aeruginosa. Токсичности экстрактов был протестирован на
опухолевых клеток MCF-7, NCI-H460, HeLa и HepG2) и неопухолевой печеночных клеток первичных
культур.
Результаты:
Щавелевая кислота была найдена в качестве основной органической кислотой, с наибольшим
количеством в водный экстракт из России. Галловая, протокатеховая и п-гидроксибензойной
кислоты были обнаружены во всех образцах. Inonotus obliquus экстракты проявили высокую
антиоксидантную и антимикробную активность. Экстракты были протестированы в subMIC для антиquorum sensing (AQS) активность в отношении Pseudomonas aeruginosa и все экстракты
продемонстрировали определенный AQS деятельности. Анализы были выполнены с помощью
подергивания и роятся бактериальных культур, и количество произведенных pyocyanin как QS
параметров. Все экстракты продемонстрировали цитотоксический эффект на четырех опухолевых
клеточных линиях, а не на первичных клеток печени свиной PLP2.
Выводы:
Как Inonotus obliquus присутствие в Чагу conks ограничено, дальнейшее очищение необходимо
сделать количественные выводы. Наличие AQS активности лекарственных грибов предполагает
более широкую анти-инфекционных заболеваний, защиты, чем только иммуномодулирующим
действием.
J Ethnopharmacol. 2015 Jan 7. pii: S0378-8741(15)00004-5. doi: 10.1016/j.jep.2014.12.069. [Epub
ahead of print]
Chemical characterization and biological activity of Chaga (Inonotus obliquus), a medicinal
"mushroom"
Glamočlija J1, Ćirić A1, Nikolić M1, Fernandes Â2, Barros L2, Calhelha RC2, Ferreira IC2, Soković M1, van
Griensven LJ3.
Author information
1University of Belgrade, Department of Plant Physiology, Institute for Biological Research "Siniša

Stanković", Bulevar Despota Stefana 142, 11000 Belgrade, Serbia.
2Mountain Research Center (CIMO), ESA, Polytechnic Institute of Bragança, Campus de Santa

Apolónia, Ap. 1172, 5301-855 Bragança, Portugal.
3Plant Research International, Wageningen University and Research Centre, Droevendaalsesteeg 1,

Wageningen 6700 AA, Netherlands. Electronic address: [email protected].
In Russian traditional medicine, an extract from the mushroom Inonotus obliquus (Fr.) Pil´at is used as
an anti-tumor medicine and diuretic. It has been reported that Inonotus obliquus has therapeutic effects,
such as anti-inflammatory, immuno-modulatory and hepatoprotective effects. This study was designed to
investigate the chemical composition and biological properties of aqueous and ethanolic extracts of
Inonotus obliquus from Finland, Russia, and Thailand. Their antioxidative, antimicrobial, and antiquorum
properties were tested as well as the cytotoxicity on various tumor cell lines.
MATERIALS AND METHODS:
The tested extract was subjected to conventional chemical study to identified organic acids and
phenolic compounds. Antioxidative activity was measured by several different assays. Antimicrobial
2
potential of extracts was tested by microdilution method, and antiquorum sensing activity and antibiofilm
formation of Inonotus obliquus extracts was tested on Pseudomonas aeruginosa. Cytotoxicity of the
extracts was tested on tumor cells (MCF-7, NCI-H460, HeLa and HepG2) and non-tumor liver cells primary
cultures.
RESULTS:
Oxalic acid was found as the main organic acid, with the highest amount in the aqueous extract from
Russia. Gallic, protocatechuic and p-hydroxybenzoic acids were detected in all samples. Inonotus obliquus
extracts showed high antioxidant and antimicrobial activity. Extracts were tested at subMIC for antiquorum sensing (AQS) activity in Pseudomonas aeruginosa and all extracts showed definite AQS activity.
The assays were done using twitching and swarming of bacterial cultures, and the amount of produced
pyocyanin as QS parameters. All the extracts demonstrated cytotoxic effect on four tumor cell lines and
not on primary porcine liver cells PLP2.
CONCLUSIONS:
As the Inonotus obliquus presence in Chaga conks is limited, further purification is necessary to draw
quantitative conclusions. The presence of AQS activity in medicinal mushrooms suggests a broader antiinfectious disease protection than only immunomodulatory effects.
Тритерпеноиды из Inonotus obliquus и их противоопухолевую активность.
Три новых lanostane типа тритерпены, inonotusanes A-C (1-3), и новый естественным, 3β-гидрокси25,26,27-trinorlanosta-8,22 E-диен-24-овой кислоты (4), вместе с шестнадцатью известно,
тритерпеноиды (5-20), в том числе 13 lanostane производных, 2 lupanes и 1 oleanane типа
тритерпеновые были изолированы от склероции Inonotus obliquus. Их структуры были освещены с
помощью 1D и 2D ЯМР-спектроскопии и HRMS. Соединения 6, 8, 18 и 20 выставил сильную
цитотоксичность против опухолевых клеточных линиях А549, с IC50 значения 2.34, 1.63, 8.39 и 5.39
мкм, соответственно. Семь соединений(3, 9, 10, 12, 18-20) выставлены умеренную цитотоксичность
против А549, HT29, Hela или L1210 опухолевых клеточных линиях.
Fitoterapia. 2014 Dec 24;101C:34-40. doi: 10.1016/j.fitote.2014.12.005. [Epub ahead of print]
Triterpenoids from Inonotus obliquus and their antitumor activities.
Zhao F1, Mai Q2, Ma J3, Xu M4, Wang X4, Cui T4, Qiu F5, Han G6.
Author information
1Department of Natural Products Chemistry, School of Traditional Chinese Materia Medica, Key

Laboratory of Structure-Based Drug Design & Discovery, Ministry of Education, Shenyang Pharmaceutical
University, Shenyang 110016, China; Institute of Pharmacy, Henan University, Jinming street, Kaifeng
475004, China.
Abstract
Three new lanostane-type triterpenes, inonotusanes A-C (1-3), and a new naturally occurring one, 3βhydroxy-25,26,27-trinorlanosta-8,22E-dien-24-oic acid (4), together with sixteen known triterpenoids (520), including 13 lanostane derivatives, 2 lupanes and 1 oleanane-type triterpene were isolated from the
sclerotia of Inonotus obliquus. Their structures were elucidated by 1D and 2D NMR spectroscopy and
HRMS. Compounds 6, 8, 18 and 20 exhibited strong cytotoxicity against A549 tumor cell lines, with IC 50
values of 2.34, 1.63, 8.39 and 5.39μM, respectively. Seven compounds (3, 9, 10, 12, 18-20) exhibited
moderate cytotoxicity against A549, HT29, Hela or L1210 tumor cell lines.
Терпеноиды с альфа-глюкозидазы ингибирующей активности из погруженной культуры
Inonotus obliquus.
Lanostane типа тритерпеноиды, inotolactones A и B, drimane типа sesquiterpenoid, inotolactone C, и
пяти известных в терпеноидов 6β-окси-транс-dihydroconfertifolin, inotodiol, 3β,22-dihydroxyanosta7,9(11),24-триен, 3β-hydroxycinnamolide, и 17-окси-ЛОР-atisan-19-овой кислоты, были выделены из
погруженной культуры чага гриб, Inonotus obliquus. Их структуры были характерны
спектроскопические методы, в том числе MS и ЯМР (1D и 2D) спектроскопические методы.
3
Inotolactones A и B, примеры lanostane типа тритерпеноиды подшипника α,β-диметил-α,βненасыщенных δ-лактон боковых цепей, выставлены более мощным Альфа-глюкозидазы
ингибирующее деятельности, чем положительный контроль акарбоза. Этот вывод может быть
связано с Анти-гипергликемический свойства гриба и его популярных роль в качестве лечения
диабета. Кроме того, drimane типа sesquiterpenoid и atisane типа diterpenoid были изолированы от I.
obliquus.
Phytochemistry. 2014 Dec;108:171-6. doi: 10.1016/j.phytochem.2014.09.022. Epub 2014 Oct 18.
Terpenoids with alpha-glucosidase inhibitory activity from the submerged culture of Inonotus
obliquus.
Ying YM1, Zhang LY1, Zhang X2, Bai HB2, Liang DE1, Ma LF1, Shan WG3, Zhan ZJ4.
Author information
1College of Pharmaceutical Science, Zhejiang University of Technology, 18 Chaowang Road,

Hangzhou 310014, PR China.
Abstract
Lanostane-type triterpenoids, inotolactones A and B, a drimane-type sesquiterpenoid, inotolactone C,
and five known terpenoids 6β-hydroxy-trans-dihydroconfertifolin, inotodiol, 3β,22-dihydroxyanosta7,9(11),24-triene, 3β-hydroxycinnamolide, and 17-hydroxy-ent-atisan-19-oic acid, were isolated from the
submerged culture of chaga mushroom, Inonotus obliquus. Their structures were characterized by
spectroscopic methods, including MS and NMR (1D and 2D) spectroscopic techniques. Inotolactones A
and B, examples of lanostane-type triterpenoids bearing α,β-dimethyl, α,β-unsaturated δ-lactone side
chains, exhibited more potent alpha-glucosidase inhibitory activities than the positive control acarbose.
This finding might be related to the anti-hyperglycemic properties of the fungus and to its popular role as
a diabetes treatment. In addition, a drimane-type sesquiterpenoid and an atisane-type diterpenoid were
isolated from I. obliquus.
Inonotus obliquus)-производный полисахарид ингибирует миграцию и инвазию человеческого
немелкоклеточного рака легких клетки через подавление ММП-2 и ММП-9.
Полисахариды, изолированные от плодовые тела Inonotus obliquus (PFIO), как известно, обладают
различными фармакологическими свойствами, в том числе противоопухолевой активностью.
Однако, антиметастатических эффект и лежащее в ее основе механистического сигнальный путь
участвует в этих полисахаридов в человеческого немелкоклеточного рака легких остаются
неизвестными. Настоящего исследования таким образом, целью которого является определение
анти-метастатический потенциал и сигнальных путей PFIO в высоко метастатических клеток А549.
Мы обнаружили, что PFIO подавил миграционной и инвазивной способности клеток А549 при
снижении уровней экспрессии и активности матриксных металлопротеиназ (ММП)-2 и ММП-9.
Кроме того, PFIO снизили уровни фосфорилирования митоген-активированной протеинкиназы
(MAPKs) и фосфатидилинозитол 3-киназы (PI3K)/протеинкиназы в (AKT), а также уровень экспрессии
COX-2, и предотвратили ядерную транслокацию ядерного фактора b (NF-b) в А549 клеток. Эти
результаты позволяют предположить, что PFIO мог подавить инвазии и миграции человеческого
немелкоклеточного рака легкого путем снижения уровней экспрессии и активности ММП-2 и ММП9 через подавление MAPKs, PI3K/AKT и NF-b сигнальных путей.
Int J Oncol. 2014 Dec;45(6):2533-40. doi: 10.3892/ijo.2014.2685. Epub 2014 Sep 30.
Inonotus obliquus-derived polysaccharide inhibits the migration and invasion of human non-small cell
lung carcinoma cells via suppression of MMP-2 and MMP-9.
Lee KR1, Lee JS1, Song JE1, Ha SJ1, Hong EK1.
Author information
1Department of Bioengineering and Technology, Kangwon National University, Chuncheon,

Gangwon-do 200-701, Republic of Korea.
Abstract
Polysaccharides isolated from the fruiting body of Inonotus obliquus (PFIO) are known to possess
various pharmacological properties including antitumor activity. However, the anti-metastatic effect and
4
its underlying mechanistic signaling pathway involved these polysaccharides in human non-small cell lung
carcinoma remain unknown. The present study therefore aimed to determine the anti-metastatic
potential and signaling pathways of PFIO in the highly metastatic A549 cells. We found that PFIO
suppressed the migration and invasive ability of A549 cells while decreasing the expression levels and
activity of matrix metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9. Furthermore, PFIO decreased the
phosphorylation levels of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and phosphoinositide 3-kinase
(PI3K)/protein kinase B (AKT) as well as the expression level of COX-2, and inhibited the nuclear
translocation of nuclear factor κB (NF-κB) in A549 cells. These results suggested that PFIO could suppress
the invasion and migration of human lung carcinoma by reducing the expression levels and activity of
MMP-2 and MMP-9 via suppression of MAPKs, PI3K/AKT, and NF-κB signaling pathways.
CARI III ингибирует рост опухоли меланомы в-подшипник мышь модели посредством
индукции G0/G1 клеточного цикла.
Гриб-производные натуральных продуктов были использованы для предотвращения или лечения
рака на протяжении тысячелетий. В этом исследовании мы оценивали противоопухолевых
эффектов CARI (активации клеток-исследовательский институт) III, который состоит из смеси
грибного мицелия из Phellinus linteus, выращенных на проросшие коричневого риса, Inonotus
obliquus выращенные на проросшие коричневого риса, Antrodia camphorata, выращенных на
проросшие коричневого риса и Ganoderma lucidum. Здесь мы показали, что D-III оказывал
противоопухолевой активностью, которая сопоставима Dox против меланомы in vivo. B16F10 клеток
в условиях внутрибрюшинного введения мышам C57BL6 развитие твердых внутрибрюшной
опухоли. Триста миллиграммов CARI III/кг/сут стр.o. схема лечения опухоль уменьшается вес,
сопоставимый с доксорубицином (Dox) в группе, получавшей. Увеличение продолжительности
жизни (ILS% = 50.88%) наблюдалось в CARI III-административные группы, по сравнению опухоли
контрольной группы. CARI III демонстрирует анти-пролиферативной активности против меланомы
B16F10 клеток путем индуцирования G0/G1 клеточного цикла. CARI III ингибирует экспрессию
циклина D1, CDK4 и CDK2 и индуцирует р21. Поэтому, CARI III может быть потенциальным
химические добавки для меланомы пациентов.
Molecules. 2014 Sep 12;19(9):14383-95. doi: 10.3390/molecules190914383.
CARI III inhibits tumor growth in a melanoma-bearing mouse model through induction of G0/G1 cell
cycle arrest.
Park HJ1.
Author information
1Department of Food Science and Biotechnology, College of BioNano Technology Gachon

University, Sungnam Gyeonggi-do 461-701, Korea. [email protected].
Abstract
Mushroom-derived natural products have been used to prevent or treat cancer for millennia. In this
study, we evaluated the anticancer effects of CARI (Cell Activation Research Institute) III, which consists of
a blend of mushroom mycelia from Phellinus linteus grown on germinated brown rice, Inonotus obliquus
grown on germinated brown rice, Antrodia camphorata grown on germinated brown rice and Ganoderma
lucidum. Here, we showed that CARI III exerted anti-cancer activity, which is comparable to Dox against
melanoma in vivo. B16F10 cells were intraperitoneally injected into C57BL6 mice to develop solid intraabdominal tumors. Three hundred milligrams of the CARI III/kg/day p.o. regimen reduced tumor weight,
comparable to the doxorubicin (Dox)-treated group. An increase in life span (ILS% = 50.88%) was observed
in the CARI III-administered group, compared to the tumor control group. CARI III demonstrates antiproliferative activity against B16F10 melanoma cells through inducing G0/G1 cell cycle arrest. CARI III
inhibits the expression of cyclin D1, CDK4 and CDK2 and induces p21. Therefore, CARI III could be a
potential chemopreventive supplement to melanoma patients.
5
Ингибирующее и Acceleratory эффекты Inonotus obliquus на активность Тирозиназы и
образование меланина в клетках меланомы B16.
Целью настоящего исследования является предварительно исследовать antimelanogenesis эффект
Inonotus obliquus экстрактов клеток-бесплатно тирозиназы грибов анализа. Было установлено, что
петролейного эфира и н-бутанол экстракты могут содержать неизвестные потенциальные
ингибиторы тирозиназы, в то время как его этилацетат экстракт может содержать какие-то
неизвестные ускорителей. Шесть соединений были изолированы и их структуры были определены
путем интерпретации данных ЯМР и никотиновая кислота впервые была обнаружена в Inonotus
obliquus. В клетках тестирования, бетулин и trametenolic кислоты снизилась активность тирозиназы
и меланина Контента, в то время как inotodiol и ланостерин значительно возросла активность
тирозиназы и меланина Контента, показывая переменного тока⁡50 9.74 и 8.43 мкм,
соответственно. Nicotinie кислоты, 3β,22,25-тригидрокси-lanosta-8-ен, был небольшой или никакой
эффект на тирозиназы. Бетулин выставил режим неконкурентным торможением с K I = K 0,4 мкм) на
активность тирозиназы показывая IC50 = 5.13 мкм и более эффективно, чем койевая кислота (6.43
мкм), и trametenolic кислоты выставляется режим смешанного ингибирования с K I 0,9 мкм, K-0,5
мкм, и IC50 = 7,25 мкм. Мы предложили бетулина и trametenolic кислоты в качестве нового
кандидата сильнодействующих ингибиторов тирозиназы и inotodiol и ланостерин, как ускорители,
которые могут быть использованы в качестве терапевтического агента.
Evid Based Complement Alternat Med. 2014;2014:259836. doi: 10.1155/2014/259836. Epub 2014 Aug
13.
Inhibitory and Acceleratory Effects of Inonotus obliquus on Tyrosinase Activity and Melanin
Formation in B16 Melanoma Cells.
Yan ZF1, Yang Y1, Tian FH2, Mao XX1, Li Y2, Li CT2.
Author information
1College of Chinese Medicinal Materials, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, China.

Abstract
The aim of the present study is to preliminarily investigate the antimelanogenesis effect of Inonotus
obliquus extracts by cell-free mushroom tyrosinase assay. It was found that petroleum ether and nbutanol extracts might contain unknown potential tyrosinase inhibitors, while its ethyl acetate extract
might contain some unknown accelerators. Six compounds were isolated and their structures were
identified by interpretation of NMR data and nicotinic acid was first discovered in Inonotus obliquus. In
cells testing, betulin and trametenolic acid decreased tyrosinase activity and melanin content, while
inotodiol and lanosterol significantly increased tyrosinase activity and melanin content, showing an
AC⁡50 of 9.74 and 8.43 μM, respectively. Nicotinie acid, 3β,22,25-trihydroxy-lanosta-8-ene, had a little or
no effect on tyrosinase. Betulin exhibited a mode of noncompetitive inhibition with a K I = K IS of 0.4 μM
on tyrosinase activity showing an IC50 of 5.13 μM and being more effective than kojic acid (6.43 μM), and
trametenolic acid exhibited a mode of mixed inhibition with a K I of 0.9 μM, K IS of 0.5 μM, and an IC50 of
7.25 μM. We proposed betulin and trametenolic acid as a new candidate of potent tyrosinase inhibitors
and inotodiol and lanosterol as accelerators that could be used as therapeutic agent.
1. Введение
Лекарственные грибы имели длительную историю использования в пищевом отношении
продуктов функционального питания, а также традиционные восточные методы лечения.
Традиционных лекарственных препаратов, полученных из лекарственных грибов были все чаще
используется для лечения широкого спектра клинических условиях, с относительно небольшим
количеством знания их способы действия. Гриб Inonotus obliquus (Hymenochaetaceae) - это гриб,
который вырос как паразитизм на стволах живых brich-в холодном Северном климате [1-3].
Недавно, во многих докладах на I. obliquus были опубликованы относительно укрепления здоровья
эффектов, в том числе и противоопухолевый эффект, иммуностимулирующий деятельности [4-8].
Больше исследования были сосредоточены на антиоксидантную емкость и структура деятельности
исследования компонентов I. obliquus [9]. Однако, до сих пор, мало усилия были адресованы экран
ингибиторы тирозиназы от I. obliquus. Цвет кожи определяется меланином [10]. Главную роль
меланина для защиты кожи от вредного воздействия УФ-излучения [11]. Биосинтез меланина
6
является известным физиологическую реакцию кожи человека при воздействии ультрафиолетового
света и других раздражителей. Синтез меланина регулируется ферментов, таких как тирозиназы
[12]. Тирозиназа играет решающую роль в начальном этапе синтез меланина, катализирующий
окисление L-тирозин (L-Tyr) 3,4-выработки дигидроксифенилаланина (ДОФА) и окисление ДОФА,
чтобы dopaquinone [9, 13-15]. Окислительной полимеризации несколько dopaquinone производных
порождает меланина. В настоящее время, повышение информированности кожи-отбеливание,
спрос на отбеливание продукция была постепенно увеличена; ингибиторы тирозиназы стал горячей
точкой на исследование отбеливающие добавки. Исследование было предпринято, чтобы
исследовать, если I. obliquus есть какие-antimelanogenesis эффектов, с целью его возможного
использования в качестве лечения гиперпигментации и для кожи забеливая агент в косметике.
В данном докладе мы описываем дифференциальной экстракции высушенной и размолотой I.
obliquus с растворителями различной полярности. Способность различных экстрактов, которые
действуют как для кожи забеливая агент оценивали по его способности ингибировать тирозиназу,
ограничение скорости фермента меланогенеза и происходит. Изначально сотовый бесплатно гриб
тирозиназы системы широко применяются для тестирования и скрининга потенциальных кожиотбеливающие агенты [16]. Мы стремились изолировать активных веществ из I. obliquus экстракты,
используемые в качестве ингибиторов тирозиназы. Биопроб в отношении тирозиназы грибов был
использован для выявления потенциальных соединений. Затем потенциальные компоненты были
протестированы для сотовых antityrosinase деятельности и кинетически проанализированы в
клетках меланомы B16. Койевая кислота, которая, как известно, является ингибитором тирозиназы
и синтез меланина, был использован в качестве положительного контроля [17].
1. Introduction
Medicinal mushrooms had an established history of being used in nutritionally functional food as well
as traditional oriental therapies. Traditional medicines derived from medicinal mushrooms were
increasingly being used to treat a wide variety of clinical conditions, with relatively little knowledge of
their modes of action. The mushroom Inonotus obliquus (Hymenochaetaceae) is a fungus that grew as
parasitism on trunks of living brich in the colder northern climates [1–3]. Recently, many reports on I.
obliquus had been published concerning the health-promoting effects, including anticancer effects,
immune-stimulating activity [4–8]. More studies focused on the antioxidant capacity and structure activity
studies of components of I. obliquus [9]. However, up to now, the little efforts have been addressed to
screen tyrosinase inhibitors from I. obliquus. The color of skin is determined by melanin [10]. The major
role of melanin is to protect the skin from damaging effects of ultraviolet radiation [11]. Melanin
biosynthesis is a well-known physiological response of human skin upon exposure to ultraviolet light and
other stimuli. Melanogenesis is regulated by enzymes such as tyrosinase [12]. Tyrosinase plays a crucial
role in the initial step of melanin synthesis by catalyzing the oxidation of L-tyrosine (L-Tyr) to 3,4dihydroxyphenylalanine (DOPA) and the oxidation of DOPA to dopaquinone [9, 13–15]. Oxidative
polymerization of several dopaquinone derivatives gives rise to melanin. Nowadays, increasing the
awareness of skin-whitening, demand for whitening products was progressively increased; tyrosinase
inhibitors had become a hot spot on research of whitening additive. A study was undertaken to
investigate if I. obliquus have any antimelanogenesis effects with a view of its possible use as a treatment
for hyperpigmentation and a skin-whitening agent in cosmetics.
In this report, we describe the differential extraction of dried and powdered I. obliquus with solvents of
different polarity. The ability of the different extracts to act as a skin-whitening agent was evaluated by its
ability to inhibit tyrosinase, the rate limiting enzyme in melanogenesis. Initially, a cell-free mushroom
tyrosinase system has commonly been employed for the testing and screening of potential skin-whitening
agents [16]. We sought to isolate the active compounds from I. obliquus extracts used as tyrosinase
inhibitors. A bioassay against mushroom tyrosinase was used to identify potential compounds. Then
potential components were tested for cellular antityrosinase activity and kinetically analyzed in B16
melanoma cells. Kojic acid, that is well known to be an inhibitor of tyrosinase and melanogenesis, was
used as a positive control [17].
7
4. Выводы
Шесть компонентов, выделенных из I. obliquus были охарактеризованы и оценены на предмет их
ингибиторная активность тирозиназы в клетках меланомы B16. Среди них, ТВС-а и ТВС-б были
потенциально наиболее привлекательных. Они понижают клеточную активность тирозиназы и
меланина содержимое и отображается неконкурентоспособной и смешанного типа в режиме
торможения, соответственно. Наоборот, Fb-a и Fb-b увеличился тирозиназы деятельности, а также
содержание меланина в клетках меланомы B16. Они были потенциально наиболее
привлекательных в лечении витилиго.
4. Conclusions
Six compounds isolated from I. obliquus were characterized and evaluated for their tyrosinase
inhibitory activity in B16 melanoma cells. Among them, Fa-a and Fa-b were potentially the most
interesting. They reduced cellular tyrosinase activity and melanin content and displayed a noncompetitive
and mixed-type mode of inhibition, respectively. On the contrary, Fb-a and Fb-b increased tyrosinase
activities as well as melanin content in B16 melanoma cells. They were potentially the most interesting in
treatment with vitiligo.
[Профилактике Inonotus obliquus полисахариды высокой мощности СВЧ-излучения,
индуцированного травмы яичек у крыс: экспериментальное исследование].
Всего 30 самцов крыс линии Вистар были случайным образом разделены на 5 групп, то есть, в
нормальной контрольной группе, СВЧ-излучения, модель, группа, группа по лечению, новая СВЧизлучения модель группы, и групп по профилактике, 6 в каждой группе. Все крысы, за исключением
тех, которые в нормальной контрольной группы подвергались воздействию СВЧ при средней
плотностью мощности 200 МВт/см2 в течение 6 мин. Крыс в контрольной группе и модели группы
вводили с нормальным физиологическим путем gastrogavage, один раз в день. Крыс в группе
лечения и профилактики группе были даны с Inonotus obliquus полисахариды, gastrogavage, 2 мл
каждый раз (400 мг/кг массы тела) один раз в день. Все крысы были принесены в жертву на 11-й
день.Сперма плотность и скорость сперматозоидов деформации были определены. Патологические
изменения яичка наблюдались с помощью оптического микроскопа и просвечивающего
электронного микроскопа.
Результаты:
Краткосрочные HPM облучения может существенно снизить плотность спермы и увеличение
спермы скорость деформации (P < 0,05). Между тем, очевидно, патологические изменения яичек
произошло. По сравнению с две группы моделей, спермы и повышенная плотность и сперма
деформация ставка снизилась в группе лечения и профилактики группе (P < 0,05). Под световым
микроскопом, повреждения сперматогенного клеток и стромальных клеток, а также сосудистой
дилатации и перегрузки, очевидно, были смягчены в группе лечения и профилактики группы.
Набухания митохондрий и эндоплазматического ретикулума расширение показали
ультраструктурные наблюдения также были значительно смягчены. Из них, повреждения
сперматогенного клеток и воспаление ответа были мягче в обработке, чем в группе
профилактической группы.
Выводы:
Inonotus obliquus полисахариды имели значительный защитный эффект на СВЧ-излучения,
индуцированного травмы яичка. Лучший эффект был получен лечебный препарат, чем
профилактические лекарства.
Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 2014 Jul;34(7):864-8.
[Prevention of Inonotus obliquus polysaccharides for high power microwave radiation induced
testicular injury in rats: an experimental research].
To investigate the effect of Inonotus obliquus polysaccharides on testicular injury induced by exposure
to high power microwave (HPM) in rats.
8
METHODS:
A total of 30 male Wistar rats were randomly divided into 5 groups, i.e., the normal control group, the
microwave radiation model group, the treatment group, the new microwave radiation model group, and
the prevention group, 6 in each group. All rats, except those in the normal control group, were exposed to
microwave at an average power density of 200 mW/cm2 for 6 min. Rats in the control group and the
model group were administered with normal saline by gastrogavage, once a day. Rats in the treatment
group and the prevention group were given with Inonotus obliquus polysaccharides by gastrogavage, 2
mL each time (400 mg/kg body weight), once a day. All rats were sacrificed on the 11th day.The sperm
density and the rate of sperm deformity were determined. Pathological changes of testis were observed
by light microscope and transmission electron microscope.
RESULTS:
Short-term HPM irradiation could significantly reduce the sperm density and increase the sperm
deformity rate (P < 0.05). Meanwhile, obvious pathological changes of testes occurred. Compared with
the two model groups, the sperm density increased and the sperm deformity rate decreased in the
treatment group and the prevention group (P < 0.05). Under the light microscope, injuries of
spermatogenic cells and stromal cells, as well as vascular dilatation and congestion were obviously
alleviated in the treatment group and the prevention group. Mitochondrial swelling and endoplasmic
reticulum expansion shown by ultrastructural observation were also significantly alleviated. Of them,
injuries of spermatogenic cells and inflammation response were milder in the treatment group than in the
prevention group.
CONCLUSIONS:
Inonotus obliquus polysaccharides had significant protective effect on microwave radiation induced
testicular injury. Better effect was obtained by therapeutic medication than preventive medication.
Защитное действие полисахаридов из Inonotus obliquus на стрептозотоцинового диабетическая
симптомы и их потенциальных механизмов у крыс.
Настоящее исследование с целью оценки терапевтических эффектов полисахаридов из Inonotus
obliquus (PIO) на streptozotocin- (STZ-) индуцированных диабетических симптомов и их возможные
механизмы. Эффект PIO на массы тела, уровень сахара в крови, поврежденных β-клеток
поджелудочной железы, окислительный стрессы, провоспалительных цитокинов и ферментов
метаболизма глюкозы в печени было изучено. Результаты показывают, что администрация PIO
может восстановить аномальные показатели окислительного возле нормального уровня. В STZповреждения β-клеток поджелудочной железы крыс были частично восстановлены постепенно
после мышам вводили с PIO 6 недель спустя. Следовательно, мы вправе предположить, что ПИО
является эффективным в защите STZ-индуцированных диабетических крыс и PIO могут быть
использованы в качестве antihyperglycemic агента.
Evid Based Complement Alternat Med. 2014;2014:841496. doi: 10.1155/2014/841496. Epub 2014 Jun
30.
Protective Effect of Polysaccharides from Inonotus obliquus on Streptozotocin-Induced Diabetic
Symptoms and Their Potential Mechanisms in Rats.
Diao BZ1, Jin WR1, Yu XJ2.
Author information
1Department of Pharmaceutical Preparations, Liaocheng People's Hospital and Liaocheng Clinical

School of Taishan Medical University, Liaocheng, Shandong 252000, China.
Abstract
The present study aimed to evaluate the therapeutic effects of polysaccharides from Inonotus obliquus
(PIO) on streptozotocin- (STZ-) induced diabetic symptoms and their potential mechanisms. The effect of
PIO on body weight, blood glucose, damaged pancreatic β-cells, oxidative stresses, proinflammatory
cytokines, and glucose metabolizing enzymes in liver was studied. The results show that administration of
PIO can restore abnormal oxidative indices near normal levels. The STZ-damaged pancreatic β-cells of the
rats were partly recovered gradually after the mice were administered with PIO 6 weeks later. Therefore,
9
we may assume that PIO is effective in the protection of STZ-induced diabetic rats and PIO may be of use
as antihyperglycemic agent.
Исследование противогерпетический деятельность гриб чага (Inonotus obliquus) экстракты в
клетки Vero, инфицированных вирусом простого герпеса].
Этот гриб чага (Inonotus obliquus) содержит широкий спектр биологически активных соединений.
Однако, существует ограниченная информация о противовирусной активности соединения,
извлеченные из чага. Несколько подфракций из чага были получены с помощью различных
растворителей и различных процедур. В подфракций из чагу экстрагируют вода, спирт, щелочи,
были протестированы на их токсичность для культуры клеток Vero и противовирусным действием
на клетки Vero, инфицированных вирусом простого герпеса (HSV), Тип 1. Было показано, что
большинство подфракций были не токсичны для клеток Vero и имела защитное действие на клетки
Vero, инфицированных ВПГ. В subfraction IV в концентрации 5 микрогр/мл защищали клетки Vero от
cytodestructive действие ВПГ и не вирусная ДНК была обнаружена в инфицированных клетках,
обработанных чага экстрактов. Лучший защитный эффект наблюдался, когда составные был
добавлен до или в течение одного часа после клетки Vero, инфицированных ВПГ.
Vopr Virusol. 2014 Mar-Apr;59(2):45-8.
[A study of the antiherpetic activity of the chaga mushroom (Inonotus obliquus) extracts in the Vero
cells infected with the herpes simplex virus].
[Article in Russian]
Polkovnikova MV, Nosik NN, Garaev TM, Kondrashina NG, Finogenova MP, Shibnev VA.
Abstract
The chaga mushroom (Inonotus obliquus) contains a wide range of excellent bioactive compounds.
However, limited information exists on the antiviral activity of the compounds extracted from chaga. A
number of subfractions of chaga were obtained using different solvents and different procedures. The
subfractions of chaga extracted with water, alcohol, alkali were tested for their toxicity for the Vero cell
culture and antiviral effect in the Vero cells infected with the Herpes simplex virus (HSV), Type 1. It was
shown that most of the subfractions were not toxic for the Vero cells and had protective effect on the
Vero cells infected with HSV. The subfraction IV in the concentration 5 microg/ml protected the Vero cells
from cytodestructive action of HSV and no viral DNA was detected in infected cells treated with chaga
extracts. Best protective effect was observed when compound was added before or within one hour after
the Vero cells were infected with HSV.
Ингибирующее влияние полисахарид, экстракт из лекарственного гриба Чага, Inonotus obliquus
(высших базидиальных грибов), на пролиферацию человеческих neurogliocytoma клеток.
Это исследование с целью изучения ингибирующей роли полисахарид, экстракт из Inonotus
obliquus на человека U251 neurogliocytoma клеток, культивируемых in vitro. После введения
полисахарида выписка из I. obliquus , чтобы U251 клеток, культивируемых in vitro, метил thiazolyl
tetrazoliym анализа была выполнена для измерения ингибирующий эффект экстракта на опухолевой
пролиферации. Экспрессия апоптоз-связанных белков Bcl-2 и каспазы-3 определяли с помощью
Вестерн-блоттинга. Различных концентраций I. obliquus экстракт (25, 50, 100, 200 и 500 мкг/мл) были
добавлены U251 клеток через 24, 48 и 72 часа. Метил thiazolyl tetrazoliym анализа показали, что
ингибирование
возрастал
с увеличением
концентрации экстракта
и длительной
продолжительности лечения. I. obliquus экстракт резко снизилась экспрессия Bcl-2, но значительно
увеличена экспрессия каспазы-3. Эта функция была постепенно расширяется с увеличением
концентрации препарата и длительного курса лечения. I. obliquus экстракт может ингибировать
пролиферацию опухолевых клеток. Это торможение функции тесно связано с снижение экспрессии
Bcl-2 и регуляция каспазы-3.
Int J Med Mushrooms. 2014;16(1):29-36.
Inhibitory effects of a polysaccharide extract from the Chaga medicinal mushroom, Inonotus obliquus
(higher Basidiomycetes), on the proliferation of human neurogliocytoma cells.
Ning X1, Luo Q2, Li C3, Ding Z4, Pang J4, Zhao C4.
10
Author information
1Department of Neurosurgery, The First Affiliated Hospital of Jilin University, Changchun,

Department of Neurosurgery, The Affiliated Hospital of Beihua University, Jilin, China.
Abstract
This study aimed to investigate the inhibitory roles of a polysaccharide extract from Inonotus obliquus
on U251 human neurogliocytoma cells cultured in vitro. After administering the polysaccharide extract
from I. obliquus to U251 cells cultivated in vitro, methyl thiazolyl tetrazoliym assay was performed to
measure the inhibitory effects of the extract on tumor cell proliferation. The expression of the apoptosisrelated proteins Bcl-2 and caspase-3 were determined by Western blotting. Different concentrations of I.
obliquus extract (25, 50, 100, 200, and 500 µg/mL) were added to U251 cells at 24, 48, and 72 hours.
Methyl thiazolyl tetrazoliym assay showed that the inhibition ratio increased with increased extract
concentration and prolonged treatment duration. The I. obliquus extract sharply decreased the expression
of Bcl-2 but dramatically increased the expression of caspase-3. This function was gradually enhanced
with increased drug concentration and prolonged treatment duration. The I. obliquus extract can inhibit
the proliferation of tumor cells. This inhibition function is closely related to the downregulation of Bcl-2
and the upregulation of caspase-3.
Полисахариды из Inonotus obliquus склероции и культивированного мицелия стимуляции
продукции цитокинов человеческих мононуклеарных клеток периферической крови in vitro и их
химические характеристики.
Inonotus obliquus - съедобных и лекарственных грибов для лечения многих заболеваний. В
настоящем исследовании, полисахариды и фракций выделяли и очищали с помощью DEAE-52 и
Сефадексе G-200 хроматографии с I. obliquus дикий склероции, культуры бульон и
культивированного мицелия под глубинного культивирования. Экстрактов и фракций может
значительно стимулирует секрецию TNF-α, IFN-γ, IL-1β и IL-2 в человеческих мононуклеарных клеток
периферической крови (Рвмс) и показали отсутствие токсичности для PBMCs. Стимуляция эффекта
шесть экстрактов и восемь фракций на четыре-продукции цитокинов был дозозависимым. Sclerotial
полисахаридов были более эффективны в четыре-продукции цитокинов при 150 мкг/мл, в то время
как экзополисахаридов и endopolysacchrides показал гораздо лучшее влияние на IL-1β производства
на 30 мкг/мл. Очищенных фракций из экзополисахаридов и endopolysaccharides были более
эффективны, чем дробь из склероции в большинстве продукции цитокинов. Эти
heteropolysaccharide-белковых конъюгатов, в основном, содержащейся глюкозы, галактозы и
маннозы. Содержание белка, молекулярная масса, моносахарид мольном соотношении, и
аномерный углерод конфигурации отличались друг от друга и имели влияние на цитокиновой
индукции активности полисахаридов в какой-то степени.
Int Immunopharmacol. 2014 Aug;21(2):269-78. doi: 10.1016/j.intimp.2014.05.015. Epub 2014 May 24.
Polysaccharides from Inonotus obliquus sclerotia and cultured mycelia stimulate cytokine production
of human peripheral blood mononuclear cells in vitro and their chemical characterization.
Xu X1, Li J2, Hu Y2.
Author information
1Department of Chemistry, Zhejiang Sci-Tech University, Hangzhou 310018, China. Electronic

address: [email protected].
Abstract
Inonotus obliquus is an edible and medicinal mushroom to treat many diseases. In the present study,
polysaccharides and fractions were isolated and purified by DEAE-52 and Sephadex G-200
chromatography from I. obliquus wild sclerotia, culture broth and cultured mycelia under submerged
fermentation. The extracts and fractions could significantly induce the secretion of TNF-α, IFN-γ, IL-1β,
and IL-2 in human peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and showed no toxicity to PBMCs. The
stimulation effect of the six extracts and eight fractions on the four-cytokine production was dosedependent. Sclerotial polysaccharides were more effective in the four-cytokine production at 150 μg/ml
while exopolysaccharides and endopolysacchrides showed a much better effect on IL-1β production at 30
11
μg/ml. Purified fractions from exopolysaccharides and endopolysaccharides were more effective than the
fraction from sclerotia in most cytokine production. These heteropolysaccharide-protein conjugates
mainly contained glucose, galactose, and mannose. Protein content, molecular weight, monosaccharide
molar ratio, and anomeric carbon configuration differed from each other and had effects on the cytokine
induction activity of the polysaccharides to some extent.
Inotodiol обитает пролиферацию и индуцирует апоптоз посредством модуляции экспрессии
cyclinE, р27, bcl-2 и bax в карциномы шейки матки человека HeLa клеток.
Inonotus obliquus - это лекарственный гриб, который использовался в качестве эффективного
агента для лечения различных заболеваний, таких как сахарный диабет, туберкулез и рак. Inotodiol,
включенный тритерпеновые показывает значительный противоопухолевый эффект. Однако
механизмы не были хорошо документированы. В этом исследовании мы стремились исследовать
влияние inotodiol на пролиферацию и апоптоз в карциномы шейки матки человека HeLa клеток и
исследованы молекулярные механизмы, лежащие. Клетки HeLa обрабатывали различными
концентрациями inotodiol. МТТ был использован для оценки пролиферирующих клеток
способность, проточной цитометрии (ТСМ), был занят анализом клеточного цикла и апоптоза
клеток, в то время как выражение cyclinE, р27, bcl-2 и bax был обнаружен иммуноцитохимии.
Пролиферацию клеток HeLa была тормозится inotodiolin зависела от дозы в 24 часа (r=0.9999,
p<0.01). Sub-G1 пик (апоптотических клеток) клеток HeLa был обнаружен после лечения и апоптоза
ставка с концентрацией и дольше время инкубации (r=1.0, p<0.01), в то время как процент клеток в
S-фазе и G2/M фазе значительно уменьшились. Иммуноцитохимии анализ показал, что экспрессия
циклина E и bcl-2 в обработанных клетках значительно снизилась, в то время как экспрессия р27 и
bax, очевидно, увеличилось, по сравнению с контрольной группой (p<0,05). Результаты наших
исследований указывают на то, что inotodiol изолированы от Inonotus obliquus ингибирует
пролиферацию клеток HeLa и индуцированного апоптоза in vitro. Механизмы могут быть связаны
стимулирования апоптоза посредством увеличения экспрессии bax и резки bcl-2 и влияющих на
клеточный цикл, down-регуляции экспрессии циклина E и регулирования р27. Результаты также
свидетельствуют о потенциальной ценности inotodiol для лечения рака шейки матки человека.
Asian Pac J Cancer Prev. 2014;15(7):3195-9.
Inotodiol inhabits proliferation and induces apoptosis through modulating expression of cyclinE, p27,
bcl-2, and bax in human cervical cancer HeLa cells.
Zhao LW1, Zhong XH, Yang SY, Zhang YZ, Yang NJ.
Author information
1Department of Pathology, Jilin Medical College, Jilin, China E-mail : [email protected].

Abstract
Inonotus obliquus is a medicinal mushroom that has been used as an effective agent to treat various
diseases such as diabetes, tuberculosis and cancer. Inotodiol, an included triterpenoid shows significant
anti-tumor effect. However, the mechanisms have not been well documented. In this study, we aimed to
explore the effect of inotodiol on proliferation and apoptosis in human cervical cancer HeLa cells and
investigated the underlying molecular mechanisms. HeLa cells were treated with different concentrations
of inotodiol. The MTT assay was used to evaluate cell proliferating ability, flow cytometry (FCM) was
employed for cell cycle analysis and cell apoptosis, while expression of cyclinE, p27, bcl-2 and bax was
detected by immunocytochemistry. Proliferation of HeLa cells was inhibited by inotodiolin a dosedependent manner at 24h (r=0.9999, p<0.01). A sub-G1 peak (apoptotic cells) of HeLa cells was detected
after treatment and the apoptosis rate with the concentration and longer incubation time (r=1.0, p<0.01),
while the percentage of cells in S phase and G2/M phase decreased significantly. Immunocytochemistry
assay showed that the expression of cyclin E and bcl-2 in the treated cells significantly decreased, while
the expression of p27 and bax obviously increased, compared with the control group (p<0.05). The results
of our research indicate that inotodiol isolated from Inonotus obliquus inhibited the proliferation of HeLa
cells and induced apoptosis in vitro. The mechanisms may be related to promoting apoptosis through
increasing the expression of bax and cutting bcl-2 and affecting the cell cycle by down-regulation the
12
expression of cyclin E and up-regulation of p27. The results further indicate the potential value of
inotodiol for treatment of human cervical cancer.
Полисахарид из Inonotus obliquus ингибирует миграцию и инвазию в B16-F10 клеток путем
подавления ММП-2 и ММП-9 через снижение экспрессии NF-b сигнальный путь.
Полисахаридов, полученных из Inonotus obliquus (PIO), как известно, обладают множественной
фармакологической активности, в том числе противоопухолевой активностью. Однако, возможные
молекулярные механизмы этих работ неизвестны. В настоящем исследовании мы определяли антиметастатический потенциал и сигнальные пути из PIO в высокой метастатической B16-F10 мыши
линии клеток меланомы in vitro. Мы обнаружили, что ПИО подавил миграционной и инвазивной
способности B16-F10 клеток и снижение уровней экспрессии и активности матриксных
металлопротеиназ (ММП)-2 и ММП-9. Кроме того, PIO снизили уровни фосфорилирования
внеклеточной сигнал-регулируемой киназы (ERK), c-Jun N-терминальной киназы (JNK и p38 митогенактивированной протеинкиназы (MAPK); PIO также снизился уровень экспрессии циклооксигеназы
(ЦОГ)-2 и предотвратили ядерную транслокацию ядерного фактора b (NF-b) в B16-F10 клетках
меланомы. Эти результаты позволяют предположить, что ПИО мог подавить инвазии и миграции
B16-F10 клеток меланомы путем снижения уровней экспрессии и активности ММП-2 и ММП-9 через
подавление MAPK, ЦОГ-2 и NF-b сигнальных путей.
Oncol Rep. 2014 May;31(5):2447-53. doi: 10.3892/or.2014.3103. Epub 2014 Mar 21.
Polysaccharide from Inonotus obliquus inhibits migration and invasion in B16-F10 cells by suppressing
MMP-2 and MMP-9 via downregulation of NF-κB signaling pathway.
Lee KR1, Lee JS1, Kim YR1, Song IG1, Hong EK1.
Author information
1Department of Bioengineering and Technology, Kangwon National University, Chuncheon,

Gangwon-do 200-701, Republic of Korea.
Abstract
Polysaccharides derived from Inonotus obliquus (PIO) are known to possess multiple pharmacological
activities including antitumor activity. However, the possible molecular mechanisms of these activities are
unknown. In the present study, we determined the anti-metastatic potential and signaling pathways of
PIO in the highly metastatic B16-F10 mouse melanoma cell line in vitro. We found that PIO suppressed the
migration and invasive ability of B16-F10 cells and decreased the expression levels and activities of matrix
metalloproteinase (MMP)-2 and MMP-9. In addition, PIO decreased the phosphorylation levels of
extracellular signal-regulated protein kinase (ERK), c-Jun N-terminal kinase (JNK) and p38 mitogenactivated protein kinase (MAPK); PIO also decreased the expression level of cyclooxygenase (COX)-2 and
inhibited the nuclear translocation of nuclear factor κB (NF-κB) in B16-F10 melanoma cells. These results
suggest that PIO could suppress the invasion and migration of B16-F10 melanoma cells by reducing the
expression levels and activities of MMP-2 and MMP-9 through suppressing MAPK, COX-2 and NF-κB
signaling pathways.
Инсулин-сенсибилизирующим
и
выгодно
липидно-метаболические
эффекты
водорастворимого меланина комплекс, извлеченный из Inonotus obliquus.
Inonotus obliquus традиционно используется для лечения болезней обмена веществ; однако
механизм остается до конца не изучены. В этом исследовании мы обнаружили, что
водорастворимый меланин комплекс, извлеченный из I. obliquus улучшение чувствительности к
инсулину и снижается ожирение в высоком жира (HF)-кормили мышей с ожирением. Когда
меланина комплекс угощали 3T3-L1 адипоцитов, стимулированный инсулином поглощение
глюкозы был значительно увеличен, и фосфатидилинозитол 3-киназы-зависимых действий было
13
доказано с wortmannin лечения. Кроме того, Зависимое от дозы увеличение фосфорилирования Akt
и глюкозы transporter 4 транслокации в плазматической мембраны наблюдались в меланинового
комплекса-обработанных клетках. Экспрессия Гена адипонектина в 3T3-L1 клетки инкубировали с
меланином комплекса увеличилась, что было подтверждено увеличение AMP-активированной
протеинкиназы фосфорилирования в HepG2 и C2C12 клетки, обработанные кондиционером СМИ от
3T3-L1 культуры. Меланин комплекс-лечение 3T3-L1 клеток не было выявлено достоверных
изменений в экспрессии нескольких lipogenic генов, в то время как расширенные выражения
жирных кислот, окислительного генов наблюдалось. Аналогично, придатка жировой ткани
меланина комплекс обработанных HF-кормили мышей имели высшее выражение жирных кислот,
окислительного гены без значительных изменений в lipogenic экспрессии генов. Вместе, эти
результаты показывают, что водорастворимый меланин комплекса I. obliquus оказывает
antihyperglycemic и выгодно липидно-метаболических эффектов, что делает его перспективным
кандидатом для antidiabetic агента.
Phytother Res. 2014 Sep;28(9):1320-8. doi: 10.1002/ptr.5131. Epub 2014 Feb 24.
Insulin-sensitizing and beneficial lipid-metabolic effects of the water-soluble melanin complex
extracted from Inonotus obliquus.
Lee JH1, Hyun CK.
Author information
1School of Life Science, Handong Global University, Pohang, Gyungbuk, 791-708, Korea.

Abstract
Inonotus obliquus has been traditionally used for treatment of metabolic diseases; however, the
mechanism remains to be elucidated. In this study, we found that the water-soluble melanin complex
extracted from I. obliquus improved insulin sensitivity and reduced adiposity in high fat (HF)-fed obese
mice. When the melanin complex was treated to 3T3-L1 adipocytes, insulin-stimulated glucose uptake
was increased significantly, and its phosphoinositide 3-kinase-dependent action was proven with
wortmannin treatment. Additionally, dose-dependent increases in Akt phosphorylation and glucose
transporter 4 translocation into the plasma membrane were observed in melanin complex-treated cells.
Adiponectin gene expression in 3T3-L1 cells incubated with melanin complex increased which was
corroborated by increased AMP-activated protein kinase phosphorylation in HepG2 and C2C12 cells
treated with conditioned media from the 3T3-L1 culture. Melanin complex-treated 3T3-L1 cells showed no
significant change in expression of several lipogenic genes, whereas enhanced expressions of fatty acid
oxidative genes were observed. Similarly, the epididymal adipose tissue of melanin complex-treated HFfed mice had higher expression of fatty acid oxidative genes without significant change in lipogenic gene
expression. Together, these results suggest that the water-soluble melanin complex of I. obliquus exerts
antihyperglycemic and beneficial lipid-metabolic effects, making it a candidate for promising antidiabetic
agent.
Химические составляющие из Inonotus obliquus и их биологической активности.
Семь новых тритерпены, inonotusol A-G (1-7), один новый дитерпены, inonotusic кислоты (8), и 22
известных соединений были выделены из Inonotus obliquus. Их структуры были выяснены на основе
спектроскопического анализа, включая одномерные и гетероядерных корреляционных ЯМР (H(1)(1)H COSY, ROESY, HSQC и HMBC) экспериментов. В in vitro исследований, соединений 6 и 8-16
показал гепатопротекторным действием против d-galactosamine-индуцированной WB-F344
повреждения клеток, ингибирующих эффектов с 34,4% до 81,2%. Соединения 7, 17, и 18
выставленных селективного cytotoxicities против КБ, Bel-7402, или-549 клеточных линий.
Соединений 16 и 17 показал ингибиторных эффектов в отношении белка тирозинкиназы, с IC50
значения 24,6 7,7 мкм, соответственно.
J Nat Prod. 2014 Jan 24;77(1):35-41. doi: 10.1021/np400552w. Epub 2013 Dec 20.
14
Chemical constituents from Inonotus obliquus and their biological activities.
Liu C1, Zhao C, Pan HH, Kang J, Yu XT, Wang HQ, Li BM, Xie YZ, Chen RY.
Author information
1State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines, Institute of

Materia Medica, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College , Beijing 100050,
People's Republic of China.
Abstract
Seven new triterpenes, inonotusol A-G (1-7), one new diterpene, inonotusic acid (8), and 22 known
compounds were isolated from Inonotus obliquus. Their structures were elucidated on the basis of
spectroscopic analysis, including homonuclear and heteronuclear correlation NMR ((1)H-(1)H COSY,
ROESY, HSQC, and HMBC) experiments. In in vitro assays, compounds 6 and 8-16 showed
hepatoprotective effects against d-galactosamine-induced WB-F344 cell damage, with inhibitory effects
from 34.4% to 81.2%. Compounds 7, 17, and 18 exhibited selective cytotoxicities against KB, Bel-7402, or
A-549 cell lines. Compounds 16 and 17 showed inhibitory effects against protein tyrosine kinases, with
IC50 values of 24.6 and 7.7 μM, respectively.
Химический состав и антиоксидантная активность полисахаридов, извлеченных из Inonotus
obliquus склероции.
Три водорастворимых полисахаридных фракций (IOP40, IOP60 и IOP80) были изолированы с
помощью различных концентраций алкоголя осадков из Inonotus obliquus склероции. Их физикохимические свойства, в том числе общее содержание сахара, содержание белков, моносахаридов
состав и процент были проанализированы. И их in vitro антиоксидантной емкости были
исследованы с точки зрения снижения мощности анализа и очистки 2,2-дифенил-1-picrylhydrazyl
(DPPH) радикалов, гидроксильных радикалов (супероксид-анион радикалов и перекиси водорода
(H2O2). В общем, три полисахаридных фракций выставлены повышение антиоксидантной
активности с увеличением концентрации в диапазоне испытанных доз. Заказы снижения мощности,
DPPH-очистки мощность, H2O2-очистки мощность, и гидроксил-очистка деятельности были все
IOP60>IOP40>IOP80. Эти результаты показали, что три полисахаридных фракций, извлеченных из I.
obliquus, особенно IOP60, могут быть использованы в качестве натуральных функциональных
ингредиентов в пищевой и фармацевтической промышленности, чтобы облегчить окислительного
стресса.
Int J Biol Macromol. 2013 Nov;62:691-6. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2013.10.016. Epub 2013 Oct 18.
Chemical analysis and antioxidant activity of polysaccharides extracted from Inonotus obliquus
sclerotia.
Du X1, Mu H, Zhou S, Zhang Y, Zhu X.
Author information
1College of Life Science, Liaocheng University, Liaocheng, Shandong 252059, PR China. Electronic

address: [email protected].
Abstract
Three water-soluble polysaccharide fractions (IOP40, IOP60 and IOP80) were isolated by using different
concentrations of alcohol precipitation from Inonotus obliquus sclerotia. Their physicochemical
properties, including total sugar content, protein content, monosaccharide composition and percentage
were analyzed. And their in vitro antioxidant capacities were investigated in terms of reducing power
assay and scavenging of 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radicals, hydroxyl radicals, superoxide anion
radicals and hydrogen peroxide (H2O2). In general, three polysaccharide fractions exhibited increasing
antioxidant activity with increasing concentration at the ranges of tested dosage. The orders of reducing
power, DPPH-scavenging capacity, H2O2-scavenging capacity, and hydroxyl-scavenging activity were all
IOP60>IOP40>IOP80. These findings demonstrated that three polysaccharide fractions extracted from I.
obliquus, especially IOP60, could be employed as natural ingredients in functional food and
pharmaceutical industry to alleviate the oxidative stress.
15
3,4-dihydroxybenzalacetone защищает от болезни Паркинсона, связанных с нейротоксин 6-OHDA
через Akt/регулируемый белком nrf2/глутатион пути.
Окислительный стресс вовлечен в патогенез различных нейродегенеративных заболеваний,
включая болезнь Паркинсона (PD). 3,4-Dihydroxybenzalacetone (DBL) - это небольшой катехолсодержащего соединения изолированных из Чага (Inonotus obliquus [персоон] Pilat), и, как
сообщается, оказывают благотворное биологической активностью, в том числе антиоксидантным,
противовоспалительным и анти-онкогенными деятельности, с относительно низкой токсичности
для нормальных клеток. Поэтому мы исследовали нейропротекторной активности DBL против PD,
связанных с нейротоксин 6-hydroxydopamine (6-OHDA). Предобработка нейробластомы человека
SH-SY5Y клеток с DBL, но не с другой Чага-производные катехол-содержащего соединения,
кофейной кислоты, доза-зависимо улучшение выживания 6-OHDA-обработанных клетках. Хотя DBL
не сократить 6-OHDA-индуцированной активных форм кислорода в клетке-free системы, он
способствует транслокации, регулируемый белком nrf2 в ядро, активировать транскрипцию,
регулируемый белком nrf2-зависимых антиоксидантных генов, и увеличение синтеза глутатиона в
клетках. Buthionine sulfoximine, ингибитора синтеза глутатиона, но не Sn-mesoporphyrin IX,
гемоксигеназа-1 ингибитора, или dicoumarol,
NAD(P)H:
хинон оксидоредуктазы 1 ингибитора, отменили защитный эффект DBL против 6-OHDA. Кроме
того, DBL активации стресс-ассоциированной киназы, такие как Akt, ERK и p38 MAPK и PI3K или
ингибиторы Akt, но не ERK, p38 или ингибиторов JNK, уменьшилась DBL-индуцированного синтеза
глутатиона и защиту от 6-OHDA. Эти результаты позволяют предположить, что DBL активирует
регулируемый белком nrf2/глутатион путь через PI3K/Akt, и улучшает выживание SH-SY5Y клеток
против 6-OHDA токсичности.
J Cell Biochem. 2014 Jan;115(1):151-60. doi: 10.1002/jcb.24643.
3,4-dihydroxybenzalacetone protects against Parkinson's disease-related neurotoxin 6-OHDA through
Akt/Nrf2/glutathione pathway.
Gunjima K1, Tomiyama R, Takakura K, Yamada T, Hashida K, Nakamura Y, Konishi T, Matsugo S, Hori O.
Author information
1School of Natural System Bioengineering Course, College of Science and Engineering, Kanazawa

University, Kanazawa, Ishikawa, Japan.
Abstract
Oxidative stress is implicated in the pathogenesis of various neurodegenerative diseases including
Parkinson's disease (PD). 3,4-Dihydroxybenzalacetone (DBL) is a small catechol-containing compound
isolated from Chaga (Inonotus obliquus [persoon] Pilat), and has been reported to have beneficial
bioactivities, including antioxidative, anti-inflammatory, and anti-tumorigenic activities, with a relatively
low toxicity to normal cells. We, therefore, investigated the neuroprotective activity of DBL against the
PD-related neurotoxin 6-hydroxydopamine (6-OHDA). Pretreatment of human neuroblastoma SH-SY5Y
cells with DBL, but not with another Chaga-derived catechol-containing compound, caffeic acid, dosedependently improved the survival of 6-OHDA-treated cells. Although DBL did not reduce 6-OHDAinduced reactive oxygen species in the cell-free system, it promoted the translocation of Nrf2 to the
nucleus, activated the transcription of Nrf2-dependent antioxidative genes, and increased glutathione
synthesis in the cells. Buthionine sulfoximine, an inhibitor of glutathione synthesis, but not Snmesoporphyrin IX, a heme oxygenase-1 inhibitor, or dicoumarol, an
NAD(P)H:
quinone oxidoreductase 1 inhibitor, abolished the protective effect of DBL against 6-OHDA.
Furthermore, DBL activated stress-associated kinases such as Akt, ERK, and p38 MAPK, and PI3K or Akt
inhibitors, but not ERK, p38, or JNK inhibitors, diminished DBL-induced glutathione synthesis and
protection against 6-OHDA. These results suggest that DBL activates the Nrf2/glutathione pathway
through PI3K/Akt, and improves survival of SH-SY5Y cells against 6-OHDA toxicity.
16
Антиоксидантное и противовоспалительное деятельности Inonotus obliquus и проросшие
коричневого риса экстрактов.
Inonotus obliquus (IO) - это паразитический гриб, который растет на березе и других деревьях в
России, Корее, Европе и США. Однако, ИО не является легкодоступной для потребления из-за его
высокой стоимости и сложной роста. В связи с этим, IO был привит на проросшие коричневого риса
(GBR) в настоящем исследовании и антиоксидантного и противовоспалительного деятельности НЛ,
выращенных на проросшие коричневого риса (IOGBR) экстракты были оценены и широко по
сравнению с теми, для IO и НОД. IOGBR показал высочайшие антиоксидантные деятельности с
общей очистки внутриклеточных АФК и MDA уровнях, а также повышение активности
антиоксидантных ферментов в H₂O₂-стимулированных мышах печени. Она также показала лучший
воспалительных деятельности за счет подавления провоспалительных медиаторов, таких как NO,
PGE₂, iNOS, COX-2, TNF-α, IL-1β и IL-6 в LPS-стимулированных RAW 264.7 клеточной линии. Это
исследование содержит сравнительный подход, чтобы выяснить, является отличным природным
источником антиоксидантов и противовоспалительное средство в качестве пищевой добавки.
Molecules. 2013 Aug 2;18(8):9293-304. doi: 10.3390/molecules18089293.
Anti-oxidant and anti-inflammatory activities of Inonotus obliquus and germinated brown rice
extracts.
Debnath T1, Park SR, Kim da H, Jo JE, Lim BO.
Author information
1Department of Life Science, College of Biomedical and Health Science, Research Institute of

Inflammatory Disease, Konkuk University, Chungju 380-701, Korea.
Abstract
Inonotus obliquus (IO) is parasitic mushroom that grows on birch and other trees in Russia, Korea,
Europe and United States. However, IO is not readily available for consumption due to its high cost and
difficult growth. In this regard, IO was inoculated on germinated brown rice (GBR) in the present study
and the antioxidant and anti-inflammatory activities of the IO grown on germinated brown rice (IOGBR)
extracts were evaluated extensively and compared with those for IO and GBR. IOGBR showed highest
antioxidant activities with scavenging total intracellular ROS and MDA levels as well as increasing the
antioxidant enzymes activity in the H₂O₂-stimulated mice liver. It also exhibited best inflammatory
activities by suppressing the proinflammatory mediators such as NO, PGE₂, iNOS, COX-2, TNF-α, IL-1β, and
IL-6 in an LPS-stimulated RAW 264.7 cell line. This study provides a comparative approach to find out an
excellent natural source of antioxidants and anti-inflammatory agent as a dietary supplement.
Ингибирующее влияние низкомолекулярных polyphenolics из Inonotus obliquus на
человеческой ДНК топоизомеразы активность и пролиферацию раковых клеток.
С низким молекулярным весом (ЛМВ) polyphenolics, содержащий polyhydroxylated бензиловый
радикал, которые в изобилии содержатся в лекарственных растениях. В настоящей работе мы
сообщаем о деятельности семи ЛМВ polyphenolics изолирован от Inonotus obliquus, лекарственных
грибов. Изолированных соединений, входящих кофейной кислоты (CA), 3,4-dihydroxybenzalacetone
(DBL), галловая кислота, syringic кислота, протокатеховая кислота, 3,4-dihydroxybenzaldehyde и 2,5dihydroxyterephthalic кислоты. Мы проанализировали их ингибирующее воздействие на ДНКполимеразы (pol) и ДНК-топоизомеразы (topo), и их влияние на человеческий рост раковых клеток.
Все изолированных соединений ингибирует человека topo II деятельности; наиболее мощными
были DBL и CA, которые содержат катехол propanoid части. CA и DBL ингибируется активность
человеческого topo I, в то время как другие соединения имели никакого эффекта. Нет соединения с
модуляцией деятельности 11 млекопитающих pol видов или других ферментов метаболизма ДНК, в
том числе T7 РНК-полимеразы, mouse IMP дегидрогеназы (Тип II), T4 полинуклеотидной киназы и
крупного рогатого скота дезоксирибонуклеат I. CA и DBL заметно подавляли пролиферацию
человеческих толстой кишки HCT116 клеток карциномы с LD50 70.0 и 49.4 мкм, соответственно, и
остановку клеточного цикла в G2/M фазе. Подавляющая эффект этих соединений на рост раковых
клеток коррелирует с их способностью ингибировать topo II. Эти результаты позволяют
17
предположить, что ЦС - и DBL-зависимое уменьшение пролиферации клеток обусловлены
ингибированием клеточного topo II. Механизм действия этих катехол propanoid соединений и
последствия для их использования в качестве противоопухолевых агентов обсуждаются.
Mol Med Rep. 2013 Aug;8(2):535-42. doi: 10.3892/mmr.2013.1547. Epub 2013 Jun 25.
Inhibitory effects of low molecular weight polyphenolics from Inonotus obliquus on human DNA
topoisomerase activity and cancer cell proliferation.
Kuriyama I1, Nakajima Y, Nishida H, Konishi T, Takeuchi T, Sugawara F, Yoshida H, Mizushina Y.
Author information
1Laboratory of Food and Nutritional Sciences, Faculty of Nutrition, Kobe Gakuin University, Nishi
ku, Kobe, Hyogo 651-2180, Japan.
Abstract
Low molecular weight (LMW) polyphenolics containing a polyhydroxylated benzyl moiety are abundant
in medicinal plants. In the present study, we report on the activities of seven LMW polyphenolics isolated
from Inonotus obliquus, a medicinal mushroom. The isolated compounds included caffeic acid (CA), 3,4dihydroxybenzalacetone (DBL), gallic acid, syringic acid, protocatechuic acid, 3,4-dihydroxybenzaldehyde
and 2,5-dihydroxyterephthalic acid. We analyzed their inhibitory effects on DNA polymerase (pol) and
DNA topoisomerase (topo), and their effects on human cancer cell growth. All isolated compounds
inhibited human topo II activity; the most potent were DBL and CA, which contain a catechol propanoid
moiety. CA and DBL inhibited the activity of human topo I, whereas other compounds had no effect. No
compound modulated the activities of 11 mammalian pol species or other DNA metabolic enzymes,
including T7 RNA polymerase, mouse IMP dehydrogenase (type II), T4 polynucleotide kinase and bovine
deoxyribonuclease I. CA and DBL markedly suppressed the proliferation of human colon HCT116
carcinoma cells with an LD50 of 70.0 and 49.4 µM, respectively, and halted the cell cycle in the G2/M
phase. The suppressive effect of these compounds on cancer cell growth correlated with their ability to
inhibit topo II. These results suggest that CA- and DBL-dependent decreases in cell proliferation are due to
the inhibition of cellular topo II. The mechanism of action of these catechol propanoid compounds and
the implication for their use as anticancer agents are discussed.
Прогресс в понимании противоопухолевых механизмов лекарственного гриба inonotus
obliquus.
Рак является ведущей причиной смерти во всем мире. В последнее время спрос на более
эффективные и более безопасные лечебные препараты для химиопрофилактики человеческого
рака увеличилась. Как белая гниль гриб, Inonotus obliquus ценится в качестве пищевых и
лекарственных ресурсов. Химические исследования показали, что I. obliquus выпускает широкий
спектр вторичных метаболитов, в том числе фенольных соединений, типа пигмента, и lanostane
типа тритерпеноидов. Среди этих активных компонентов антиоксидантной, противоопухолевой и
противовирусной деятельности и для повышения иммунитета человека против инфекции
патогенных микробов. Главное, их противоопухолевую активность стали горячего недавно, но с
относительно небольшим количеством знания их способы действия. Некоторые соединения,
извлеченные из I. obliquus арест раковых клеток в G0/G1 фазе и затем индуцируют апоптоз клеток
или дифференциации, в то время как некоторые примеры, в которых непосредственно участвуют в
клетке апоптоз пути. В других случаях, полисахариды из I. obliquus может быть косвенно участвует в
противоопухолевой процессов, главным образом, посредством стимуляции иммунной системы.
Кроме того, антиоксидантные способности I. obliquus экстракты могут предотвращать образование
раковых клеток. В этом обзоре мы освещаем последние выводы относительно механизмов,
лежащих в основе противоопухолевого влияния I. obliquus для полноценной пейзаж вид действия
этого гриба в предотвращении рака.
Asian Pac J Cancer Prev. 2013;14(3):1571-8.
Progress on understanding the anticancer mechanisms of medicinal mushroom: inonotus obliquus.
Song FQ1, Liu Y, Kong XS, Chang W, Song G.
Author information
18

1Key
Laboratory of Microbiology, Life Science College, Heilongjiang University, Harbin, China.
[email protected]
Abstract
Cancer is a leading cause of death worldwide. Recently, the demand for more effective and safer
therapeutic agents for the chemoprevention of human cancer has increased. As a white rot fungus,
Inonotus obliquus is valued as an edible and medicinal resource. Chemical investigations have shown that
I. obliquus produces a diverse range of secondary metabolites, including phenolic compounds, melanins,
and lanostane-type triterpenoids. Among these are active components for antioxidant, antitumoral, and
antiviral activities and for improving human immunity against infection of pathogenic microbes.
Importantly, their anticancer activities have become a hot recently, but with relatively little knowledge of
their modes of action. Some compounds extracted from I. obliquus arrest cancer cells in the G0/G1 phase
and then induce cell apoptosis or differentiation, whereas some examples directly participate in the cell
apoptosis pathway. In other cases, polysaccharides from I. obliquus can indirectly be involved in
anticancer processes mainly via stimulating the immune system. Furthermore, the antioxidative ability of
I. obliquus extracts can prevent generation of cancer cells. In this review, we highlight recent findings
regarding mechanisms underlying the anticancer influence of I. obliquus, to provide a comprehensive
landscape view of the actions of this mushroom in preventing cancer.
Противовоспалительные и противораковые мероприятия экстрактов и соединений из гриба
Inonotus obliquus.
Гриб Inonotus obliquus (I. obliquus) был использован в качестве функциональных продуктов
питания и традиционных китайских трав в течение длительного времени. Эффективный метод
биопроб руководствуясь препаративная изоляции был использован для определения
противовоспалительной и противоопухолевой составляющих в I. obliquus. Петролейный эфир и
этилацетат фракций были выявлены существенные ингибирование эффектов на нет производство и
NF-b люциферазная активность макрофагов RAW 264.7 клеток и цитотоксичности против
человеческой клеточной карциномой предстательной железы PC3 и клеток карциномы молочной
железы MDA-MB-231. Шесть основных составляющих были изолированы от этих двух фракций, и
они были определены в качестве ланостерин (1), 3β-гидрокси-8,24-диен-21-al (2), эргостерин (3),
inotodiol (4), перекиси эргостерина (5) и trametenolic кислоты (6). Составные эргостерин, эргостерол
перекиси и trametenolic кислоты показали, противовоспалительное деятельности и перекиси
эргостерина и trametenolic кислоты показало, очевидно цитотоксичность по правам клеточной
карциномой предстательной железы PC3 и карциномы молочной железы MDA-MB-231 клеток.
Результаты, полученные в данной работе, может способствовать пониманию биологической
активности грибов и. obliquus для производства продовольствия и применения лекарственного
средства.
Food Chem. 2013 Aug 15;139(1-4):503-8. doi: 10.1016/j.foodchem.2013.01.030. Epub 2013 Feb 1.
Anti-inflammatory and anticancer activities of extracts and compounds from the mushroom Inonotus
obliquus.
Ma L1, Chen H, Dong P, Lu X.
Author information
1Tianjin Key Laboratory for Modern Drug Delivery & High-Efficiency, School of Pharmaceutical

Science and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, PR China.
Abstract
Mushroom Inonotus obliquus (I. obliquus) has been used as functional food and traditional Chinese
herbs for long time. An efficient method for bioassay-guided preparative isolation was used for identifying
the anti-inflammatory and anticancer constituents in I. obliquus. The petroleum ether and ethyl acetate
fractions were found to have significant inhibition effects on NO production and NF-κB luciferase activity
in macrophage RAW 264.7 cells and cytotoxicity against human prostatic carcinoma cell PC3 and breast
carcinoma cell MDA-MB-231. Six main constituents were isolated from these two fractions and they were
identified as lanosterol (1), 3β-hydroxy-8,24-dien-21-al (2), ergosterol (3), inotodiol (4), ergosterol
19
peroxide (5) and trametenolic acid (6). Compound ergosterol, ergosterol peroxide and trametenolic acid
showed anti-inflammatory activities and ergosterol peroxide and trametenolic acid showed obviously
cytotoxicity on human prostatic carcinoma cell PC3 and breast carcinoma MDA-MB-231 cell. The results
obtained in this work might contribute to understanding the biological activity of mushroom I. obliquus
for food and drug application.
Ингибирующее действие экстракт гриба чага на соединение 48/80-индуцированной
анафилактический шок и IgE производства в мышей.
Грибы чага (Inonotus obliquus) предположили, выставлять общие иммунной потенцирование,
противовоспалительные и противоопухолевые свойства, но их анти-аллергические деятельности до
конца не выяснены. Таким образом, это исследование исследовали, может ли гриб чага экстракт (Цон) может иметь анти-аллергенной активностью. Эта деятельность оценивалась по уровням IgE Ab,
вырабатываемые в ответ на аллерген (OVA). Администрация C-он профилактически угнетал
системный анафилактический шок, индуцированных соединения 48/80 в мышей. Оральное C-он
значительно снизить общий IgE у мышей и слегка пострадал производство IgG1. Кроме того,
селезенка клеточных культур, убранных из OVA-сенсибилизированных мышей, которые получили Cон в устной форме показали значительное увеличение Th1 полученных ответов (IFN-γ
производства). Таким образом, наши результаты показывают, что экстракт гриба чага, могут быть
использованы в качестве анти-аллергические функционального питания.
Int Immunopharmacol. 2013 Apr;15(4):666-70. doi: 10.1016/j.intimp.2013.03.015. Epub 2013 Mar 25.
Inhibitory effect of chaga mushroom extract on compound 48/80-induced anaphylactic shock and IgE
production in mice.
Yoon TJ1, Lee SJ, Kim EY, Cho EH, Kang TB, Yu KW, Suh HJ.
Author information
1Department of Food & Nutrition, Yuhan College, Bucheon 422-749, Republic of Korea.

Abstract
Chaga mushrooms (Inonotus obliquus) are hypothesised to exhibit general immune-potentiating, antiinflammatory, and antitumor properties, but their anti-allergic activities are not fully understood.
Therefore, this study investigated whether a chaga mushroom extract (C-HE) might have anti-allergic
activity. This activity was assessed through the levels of the IgE Ab produced in response to an allergen
(OVA). The administration of C-HE prophylactically inhibited the systemic anaphylactic shock induced by
compound 48/80 in mice. The oral administration of C-HE significantly reduced the total IgE levels in mice
and slightly affected the production of IgG1. Furthermore, spleen cell cultures harvested from OVAsensitised mice that had received C-HE orally showed a significant increase in Th1-derived responses (IFNγ production). Therefore, our results suggest that the chaga mushroom extract may be used as an antiallergic functional food.
Водный экстракт из лекарственного гриба Чага, Inonotus obliquus (высших базидиальных
грибов), предотвращает herpes simplex virus запись через ингибирование вируснойиндуцированное слияние мембраны.
Чага лекарственный гриб, Inonotus obliquus, популярный рецепт в традиционной медицине в
Европе и Азии, был использован для уменьшения воспаления в носоглотке и, чтобы облегчить
дыхание. Водный экстракт из I. obliquus (AEIO) продемонстрировали заметное снижение вируса
простого герпеса (ВПГ) (50% ингибирующая концентрация была 3.82 мкг/мл в редукции бляшек
анализа и 12.29 мкг/мл ВПГ-1/синий анализа), а также безопасности в клетки Vero (50%
цитотоксичность была > 1 мг/мл, а индекс выбора была > 80). Используя время курса анализа,
эффективного этапе анализа и синтеза ингибирование анализа, механизм anti-HSV активность была
обнаружена в отношении ранней стадии вирусной инфекции путем ингибирования вируснойиндуцированное слияние мембраны. Поэтому, AEIO может эффективно предотвратить HSV-1 вход,
20
действуя на вирусные гликопротеины, ведущий к профилактике слияние мембраны, которая
отличается от нуклеозидными antiherpetics.
Int J Med Mushrooms. 2013;15(1):29-38.
Aqueous extract from a Chaga medicinal mushroom, Inonotus obliquus (higher Basidiomycetes),
prevents herpes simplex virus entry through inhibition of viral-induced membrane fusion.
Pan HH1, Yu XT, Li T, Wu HL, Jiao CW, Cai MH, Li XM, Xie YZ, Wang Y, Peng T.
Author information
1Guangdong Institute of Microbiology, State Key Laboratory of Applied Microbiology, South China,

Guangzhou, China.
Abstract
Chaga medicinal mushroom, Inonotus obliquus, a popular prescription in traditional medicine in Europe
and Asia, was used to reduce inflammation in the nasopharynx and to facilitate breathing. The aqueous
extract from I. obliquus (AEIO) exhibited marked decrease in herpes simplex virus (HSV) infection (the 50%
inhibitory concentration was 3.82 μg/mL in the plaque reduction assay and 12.29 μg/mL in the HSV-1/blue
assay) as well as safety in Vero cells (the 50% cellular cytotoxicity was > 1 mg/mL, and selection index was
> 80). Using a time course assay, effective stage analysis, and fusion inhibition assay, the mechanism of
anti-HSV activity was found against the early stage of viral infection through inhibition of viral-induced
membrane fusion. Therefore, AEIO could effectively prevent HSV-1 entry by acting on viral glycoproteins,
leading to the prevention of membrane fusion, which is different from nucleoside analog antiherpetics.
[Защитной активности водных экстрактов высших грибов в отношении вируса простого герпеса
типа 2 на мышей-альбиносов модель].
Токсичности и противовирусной активности водных экстрактов высших грибов, таких как Lentinula
edodes (Berk.) / Труды (шиитаке), Pleurotus ostreatus (Jacq.) П. Кумм. ("устричный"), Inonotus obliquus
(Ach. ex Pers.) Pilát (чага), Hydnellum компакта (чел.) P. Karst. (compact зуба) были изучены. В дозах
0,8-4,0 мг (сухой вес) на мыши, перорально или внутрибрюшинно экстрактов показали отсутствие
острой токсичности. Когда доза чага, экстракта была увеличена до 20 мг на мышь, половина
животных погибла. Внутрибрюшинном введении водных вытяжек в дозе 0,4-2 мг на мышь до
загрязнения одним LD50 простого герпеса типа 2, при условии 100% выживаемость животных
подвергается Lentinula edodes или Pleurotus ostreatus экстракты и 90% выживаемости животных
подвергается Inonotus obliquus или Hydnellum компакта экстрактов.
Antibiot Khimioter. 2013;58(9-10):8-12.
[Protective activity of aqueous extracts from higher mushrooms against Herpes simplex virus type-2
on albino mice model].
[Article in Russian]
Razumov IA, Kazachinskaia EI, Puchkova LI, Kosogorova TA, Gorbunova IA, Loktev VB, Tepliakova TV.
Abstract
Toxicity and antiviral activity of aqueous extracts from higher mushrooms such as Lentinula edodes
(Berk.) Pegler (shiitake), Pleurotus ostreatus (Jacq.) P. Kumm. (oyster), Inonotus obliquus (Ach. ex Pers.)
Pilát (chaga), Hydnellum compactum (Pers.) P. Karst. (compact tooth) were studied. In doses of 0.8 to 4.0
mg (dry weight) per mouse administered orally or intraperitoneally the extracts showed no acute toxicity.
When the dose of the chaga extract was increased to 20 mg per mouse, a half of the animals died.
Intraperitoneal administration of the aqueous extracts in a dose of 0.4-2 mg per mouse prior to the
contamination by a single LD50 of Herpes simplex type 2 provided 100-percent survival of the animals
exposed to the Lentinula edodes or Pleurotus ostreatus extracts and 90-percent survival of the animals
exposed to the Inonotus obliquus or Hydnellum compactum extracts.
21
Lanostanoids из грибов: группа потенциальных противоопухолевых соединений.
Lanostanes группа тетрациклические тритерпеноиды, полученных из ланостерин. Они имеют
соответствующие биологические и Фармакологические свойства, такие как цитотоксические
эффекты через индукцию апоптоза. В этом обзоре мы собрали наиболее соответствующих
lanostanoids учился с 2000 по 2011 год, в основном те, изолированным от Ganoderma lucidum и
других родственных грибов, таких как Poria cocos, Laetiporus sulphureus, Inonotus obliquus, Antrodia
camphorata, Daedalea dickinsii, и Elfvingia applanata, которые имеют большой потенциал в качестве
противоопухолевых агентов, потому что их цитотоксические или апоптотические эффекты.
Соединений были выбраны на основе их проапоптотических механизмы, через их способность
изменять регуляции деятельности с помощью ядерных факторов или генов и активации или
ингибирования pro - или антиапоптотических белков; исследования, основанные только на их
цитотоксичность, были исключены из этого рассмотрения, в отсутствие дополнительных
исследований по их механизмы действия. В общей сложности 81 соединений из Ganoderma lucidum
и других видов из этого рода, а также 96 соединений, изолированных от других грибов, в основном
Poria cocos. Некоторые из этих соединений были обнаружены арест клеточного цикла в G1 фазе,
повышение уровня p53 и Bax, или ингибируют фосфорилирование Erk1/2 или активацию NF-b и AP1. Другие lanostanes иметь ингибирующее действие на рост андроген предстательной железы за
счет увеличения экспрессии р21, который активирует опухоль-супрессорных белков р53, в то время
как другие соединения, как было показано, избирательно подавляют topo II активность, не влияя на
топо I. Общие соображения, касающиеся химическая структура-биологическая активность этих
соединений также обсуждаются.
J Nat Prod. 2012 Nov 26;75(11):2016-44. doi: 10.1021/np300412h. Epub 2012 Oct 23.
Lanostanoids from fungi: a group of potential anticancer compounds.
Ríos JL1, Andújar I, Recio MC, Giner RM.
Author information
1Departament de Farmacologia, Facultat de Farmacia, Universitat de Valencia , Avenida Vicent

Andrés Estellés s/n, 46100 Burjassot, Valencia, Spain.
Abstract
Lanostanes are a group of tetracyclic triterpenoids derived from lanosterol. They have relevant
biological and pharmacological properties, such as their cytotoxic effects via induction of apoptosis. This
review compiles the most relevant lanostanoids studied from 2000 to 2011, principally those isolated
from Ganoderma lucidum and other related fungi, such as Poria cocos, Laetiporus sulphureus, Inonotus
obliquus, Antrodia camphorata, Daedalea dickinsii, and Elfvingia applanata, which have great potential as
anticancer agents because of their cytotoxic or apoptotic effects. The compounds were selected on the
basis of their proapoptotic mechanisms, through their ability to modify transcriptional activities via
nuclear factors or genes and the activation or inhibition of pro- or antiapoptotic proteins; studies based
only on their cytotoxicity were excluded from this review in the absence of complementary studies on
their mechanisms of action. A total of 81 compounds from Ganoderma lucidum and other species from
this genus are included, as well as 96 compounds isolated from other fungi, principally Poria cocos. Some
of these compounds were found to arrest the cell cycle in the G1 phase, increase levels of p53 and Bax, or
inhibit the phosphorylation of Erk1/2 or the activation of NF-κB and AP-1. Other lanostanes have
inhibitory effects on the growth of androgen prostate carcinoma through increasing the expression of
p21, which activates the tumor suppressor protein p53, while other compounds have been shown to
selectively inhibit topo II activity without affecting topo I. General considerations concerning the chemical
structure-biological activities of these compounds are also discussed.
Антиокислительные свойства сырой полисахаридов из Inonotus obliquus.
Гриб Inonotus obliquus широко используется народной медициной в России, Польши и
большинства стран Балтии. В этом исследовании, водорастворимые и растворимые в щелочи сырой
полисахариды (IOW и IOA) были изолированы от I. obliquus и углеводно-богатой фракции IOW-1 и
IOA-1 были получены соответственно после deproteination и депигментации. Их содержание,
22
например, нейтральных углеводов, уроновых кислот и белка, были измерены. Их антиоксидантные
свойства в отношении химических веществ-индуцированной reactive species (ROS), в том числе 1,1'Дифенил-2-picrylhydrazyl (DPPH) радикал, гидроксил-радикал и супероксид-анион радикал, а также
их защитное действие на H(2)O(2)-индуцированной гибели клеток PC12 были исследованы.
Результаты показали, что I. obliquus полисахариды могут удалять все рос испытания выше в
зависимости от дозы образом. IOA и его продукта IOA-1 может спасти жизнеспособность клеток
PC12 с 38,6% до 79,8% и 83.0% при концентрации 20μg/мл. Аналогично, IOW и его продукта IOW-1 в
той же дозе, также может повысить жизнеспособность клеток до 84.9% и 88,6% соответственно.
Антиоксидантные деятельности водорастворимые и растворимые в щелочи полисахаридных
компонентов из I. obliquus могут способствовать разнообразные лечебные и питательные свойства
этого гриба.
Int J Mol Sci. 2012;13(7):9194-206. doi: 10.3390/ijms13079194. Epub 2012 Jul 23.
Antioxidative Properties of Crude Polysaccharides from Inonotus obliquus.
Mu H1, Zhang A, Zhang W, Cui G, Wang S, Duan J.
Author information
1College of Science, Northwest A&F University, Yangling, Shaanxi 712100, China; E-Mails:

[email protected] (H.M.); [email protected] (A.Z.); [email protected] (W.Z.);
[email protected] (G.C.).
Abstract
The mushroom Inonotus obliquus has been widely used as a folk medicine in Russia, Poland and most
of the Baltic countries. In this study, water-soluble and alkali-soluble crude polysaccharides (IOW and IOA)
were isolated from I. obliquus, and the carbohydrate-rich fractions IOW-1 and IOA-1 were obtained
respectively after deproteination and depigmentation. Their contents, such as neutral carbohydrate,
uronic acid and protein, were measured. Their antioxidant properties against chemicals-induced reactive
species (ROS) including 1,1'-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) radical, hydroxyl radical and superoxide
anion radical, as well as their protective effects on H(2)O(2)-induced PC12 cell death were investigated.
Results showed that I. obliquus polysaccharides can scavenge all ROS tested above in a dose-dependent
manner. IOA and its product IOA-1 could rescue PC12 cell viability from 38.6% to 79.8% and 83.0% at a
concentration of 20μg/mL. Similarly, IOW and its product IOW-1 at the same dose, can also increase cell
viability to 84.9% and 88.6% respectively. The antioxidative activities of water-soluble and alkali-soluble
polysaccharide constituents from I. obliquus might contribute to diverse medicinal and nutritional values
of this mushroom.
1. Введение
Гриб Inonotus obliquus (I. obliquus), принадлежащих семейство Hymenochaetaceae Basidiomycetes,
черный паразитический гриб, который растет на живых стволах взрослых берез и встречается в
основном на широтах 45°N 50°N [1,2]. Еще в шестнадцатом веке, I. obliquus был использован в
качестве эффективного народной медицине в России и Северной Европе для лечения нескольких
человеческих вредоносных опухолей, таких как рак молочной железы, рак печени, рак матки и рак
желудка и других заболеваний, таких как артериальная гипертония и сахарный диабет [3], с мало
токсичных побочных эффектов [4]. В последнее время, много полифенольных соединений,
тритерпеноидов [5], и стероиды, такие как ланостерин, inotodiol [6], trametenolic кислоты и
перекиси эргостерина [7] из этого гриба были определены и их биологической активности, в том
числе гипогликемии [1], гепато-защитные [8] были продемонстрированы. Полисахариды являются
одним из основных компонентов I. obliquus и показано, что они обладают рядом биологических
мероприятий, в том числе анти-опухоли [9], антиоксидант, гипогликемическое и
иммуностимулирующий эффекты [10,11].
Активные формы кислорода (ROS) определяется как химически активных продуктов,
образующихся в результате частичного снижения кислорода, в том числе свободных радикалов,
таких как гидроксила и супероксида, а также номера-свободные радикалы, такие как перекись
водорода. В живых организмах, длительный повышенный уровень АФК могут вызывать
интенсивный окислительный стресс, который, как считается, играют очень важную роль в
патогенезе ряда дегенеративных заболеваний [12] и патологические эффекты, такие как, вызывая
23
повреждение ДНК, канцерогенеза и клеточной дегенерации, связанных с процессами старения [13].
Для защиты от окислительного повреждения, синтетические антиоксиданты, такие как butylated
hydroxytoluene (BHT), бутилгидроксианизол (BHA) и трет-бутилированного hydroxyquinone (TBHQ),
которые обычно используются. Тем не менее, наблюдается все возрастающее беспокойство по
поводу их безопасности и токсичности [14,15]. Таким образом, природные антиоксиданты,
например, фукоидан [16], хитозан [17], кофеварка полисахарид [18], Lycium barbarum полисахарид
[19], который может очистить ROS in vitro и in vivo привлекают больше внимания.
Здесь мы сообщали, антиоксидантный эффекты растворимых в воде и щелочи-растворимые
полисахариды из сырой I. obliquus о химических веществах-индуцированных АФК, а также защитное
действие на H2O2-индуцированной гибели клеток PC12.
1. Introduction
The mushroom Inonotus obliquus (I. obliquus), belonging to the Hymenochaetaceae family of
Basidiomycetes, is a black parasitic fungus that grows on living trunks of the mature birch and is mainly
found at latitudes of 45°N–50°N [1,2]. As early as in the sixteenth century, I. obliquus was used as an
effective folk medicine in Russia and Northern Europe to treat several human malicious tumors such as
breast cancer, liver cancer, uterine cancer and gastric cancer and other diseases like hypertension and
diabetes [3], with little toxic side effects [4]. Recently, many polyphenolic compounds, triterpenoids [5],
and steroids, such as lanosterol, inotodiol [6], trametenolic acids, and ergosterol peroxide [7] from this
fungus have been identified and their biological activities, including hypoglycemic [1], hepato-protective
[8] have been demonstrated. Polysaccharides are one of the main components of I. obliquus and they
have been shown to exhibit many biological activities including anti-tumor [9], antioxidant, hypoglycemic
and immune-stimulating effects [10,11].
Reactive oxygen species (ROS) is defined as chemically active products generated by partial reduction in
oxygen, including free radicals such as hydroxyl and superoxide as well as non-free radicals such as
hydrogen peroxide. In living organisms, prolonged elevated levels of ROS can cause intense oxidative
stress, which is considered to play a very important role in the pathogenesis of several degenerative
diseases [12] and pathological effects such as causing DNA damage, carcinogenesis and cellular
degeneration related to aging [13]. To help defend against oxidative damage, synthetic antioxidants such
as butylated hydroxytoluene (BHT), butylated hydroxyanisole (BHA) and tert-butylated hydroxyquinone
(TBHQ) are commonly used. However, there has been growing concern over their safety and toxicity
[14,15]. Thus, natural antioxidants, for example, fucoidan [16], chitosan [17], tea polysaccharide [18],
Lycium barbarum polysaccharide [19], which can scavenge ROS in vitro and in vivo attract more attention.
Herein, we reported antioxidative effects of water-soluble and alkali-soluble crude polysaccharides
from I. obliquus on chemicals-induced ROS, as well as the protective effects on H2O2-induced PC12 cell de
Противоопухолевой и иммуномодулирующей активностью водорастворимых полисахаридов
из Inonotus obliquus.
Лекарственный гриб Inonotus obliquus использовался как народное средство в течение
длительного времени в России и Восточно-европейских странах для лечения рака желудочнокишечного тракта, сердечно-сосудистые заболевания и диабет. В нашем исследовании,
водорастворимый полисахарид (ISP2a) был успешно очищен от I. obliquus на DEAE-Sepharose CL-6B и
Sepharose CL-6B колоночной хроматографии. In vivo ISP2a не только показали противоопухолевую
активность, но также может значительно усилить иммунный ответ на опухоль-подшипник мышей.
Кроме того, ISP2a значительно усиливается пролиферация лимфоцитов и увеличение продукции
TNF-α. Результаты этих исследований показали, что ISP2a имел потенциальное применение в
качестве естественных противоопухолевое средство с иммуномодулирующей активностью.
Carbohydr Polym. 2012 Oct 1;90(2):870-4. doi: 10.1016/j.carbpol.2012.06.013. Epub 2012 Jun 17.
Antitumor and immunomodulatory activity of water-soluble polysaccharide from Inonotus obliquus.
Fan L1, Ding S, Ai L, Deng K.
24

1State
Key Laboratory of Dairy Biotechnology, Technology Center of Bright Dairy & Food Co. Ltd.,
Shanghai 200436, China. [email protected]
Abstract
The medicinal mushroom Inonotus obliquus has been used as a folk remedy for a long time in Russia
and East-European countries to treat gastrointestinal cancer, cardiovascular disease and diabetes. In our
study, a water-soluble polysaccharide (ISP2a) was successfully purified from I. obliquus by DEAESepharose CL-6B and Sepharose CL-6B column chromatography. In vivo ISP2a had not only shown
antitumor activity, but also could significantly enhance the immune response of tumor-bearing mice. In
addition, ISP2a significantly enhanced the lymphocyte proliferation and increased the production of TNFα. Results of these studies demonstrated that ISP2a had a potential application as natural antitumor agent
with immunomodulatory activity.
Перорально водный экстракт Inonotus obliquus улучшает острого воспаления в декстрана
сульфата натрия (DSS)-индуцированный колит у мышей.
Чага гриб (Inonotus obliquus) использовался в народной медицине для лечения ряда заболеваний
через различные биологические функции. I. obliquus утверждал, производить общие иммунной
потенцирующее и укрепление, противовоспалительные и противоопухолевые свойства, но его
влияние на воспаление кишечника (неспецифический язвенный колит) явно не понял.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Чтобы определить эффекты и механизм действия водного экстракта I. obliquus (IOAE)
экспериментального колита у мышей, индуцированного декстрана сульфата натрия (DSS).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Сука 5-неделя-мышей линии C57BL/6 были рандомизированы на группы, отличающиеся условий
для лечения (профилактики и лечения) и дозы IOAE (50 и 100 мг/кг веса тела). Мышей подвергали
воздействию DSS (2%) в их питьевой водой в течение 7 дней, чтобы вызвать острые кишечные
воспаления. В толстой ткани, мы оценивали гистологические изменения, гематоксилин и эозином
окрашивание, уровень iNOS с помощью иммуногистохимического окрашивания, и приток
нейтрофилов, миелопероксидазы анализа. экспрессии мРНК провоспалительных медиаторов ФНОα, ил-1β, ил-6 и ИФН-γ определяли методом от-ПЦР.
Результаты:
При гистологических исследованиях показали, что IOAE подавлял отек, повреждение слизистой
оболочки, и потеря склепы, индуцированных DSS. IOAE заметно ослабляется DSS-индуцированный
iNOS уровней и миелопероксидазы накопления в кишке тканях, демонстрируя свое угнетающее
влияние на проникновение иммунных клеток. Кроме того, IOAE значительно ингибируется
экспрессия мРНК провоспалительных цитокинов, индуцированных DSS в толстой ткани.
Вывод:
Наши результаты показывают, противовоспалительное действие IOAE на колоректального сайтов,
вследствие даун-регуляции экспрессии воспалительных медиаторов. Подавление ФНО-α и iNOS
вместе с IL-1β, IOAE обозначает, что это может быть полезным дополнением в обстановке
воспалительные заболевания кишечника.
J Ethnopharmacol. 2012 Sep 28;143(2):524-32. doi: 10.1016/j.jep.2012.07.008. Epub 2012 Jul 20.
Orally administered aqueous extract of Inonotus obliquus ameliorates acute inflammation in dextran
sulfate sodium (DSS)-induced colitis in mice.
Mishra SK1, Kang JH, Kim DK, Oh SH, Kim MK.
1Cancer Epidemiology Branch, Division of Cancer Epidemiology and Management, National Cancer

Center, Ilsan-ro 323, Ilsandong-gu, Goyang-si, Gyeonggi-do 410-769, Republic of Korea.
Chaga mushroom (Inonotus obliquus) has been used in folk medicine to treat several disorders through
its various biological functions. I. obliquus is claimed to produce general immune-potentiating and
strengthening, antiinflammatory, and antitumor properties, but its effects on intestinal inflammation
(ulcerative colitis) are clearly not understood.
25
AIM OF THE STUDY:
To determine the effects and mode of action of an aqueous extract of I. obliquus (IOAE) on
experimental colitis in mice induced by dextran sulfate sodium (DSS).
MATERIALS AND METHODS:
Female 5-week-C57BL/6 mice were randomized into groups differing in treatment conditions
(prevention and treatment) and doses of IOAE (50 and 100mg/kg body weight). Mice were exposed to DSS
(2%) in their drinking water over 7 day to induce acute intestinal inflammation. In colon tissues, we
evaluated histological changes by hematoxylin and eosin staining, levels of iNOS by immuno-histochemical
staining, and neutrophil influx by myeloperoxidase assay. mRNA expression of pro-inflammatory
mediators TNF-α, IL-1β, IL-6, and IFN-γ was determined by RT-PCR.
RESULTS:
Histological examinations indicated that IOAE suppressed edema, mucosal damage, and the loss of
crypts induced by DSS. IOAE markedly attenuated DSS-induced iNOS levels and myeloperoxidase
accumulation in colon tissues, demonstrating its suppressive effect on infiltration of immune cells. In
addition, IOAE significantly inhibited mRNA expression of pro-inflammatory cytokines induced by DSS in
colon tissues.
CONCLUSION:
Our results suggest anti-inflammatory effect of IOAE at colorectal sites due to down-regulation of the
expression of inflammatory mediators. Suppression of TNF-α and iNOS together with IL-1β by IOAE
denotes that it might be a useful supplement in the setting of inflammatory bowel disease.
Деятельность антиоксидантов пять полисахаридов из Inonotus obliquus.
Пять полисахариды (IOP1b, IOP2a, IOP2c, IOP3a и IOP4) выделяли и очищали из Inonotus obliquus
на DEAE-Sepharose fast flow и SepharoseCL-6B колоночной хроматографии. Их химические и
физические характеристики были определены и антиоксидантной деятельности были исследованы
на основе гидроксильного радикала анализа, супероксидного радикала анализа и железа-снижение
мощности антиоксидантной анализа. Результаты показали, что пять полисахариды проявляют
антиоксидантную деятельности, и чем выше содержание уроновых кислот и proteinous веществ,
сильного антиоксиданта полисахаридов. Кроме того, молекулярная масса полисахаридов также
влияние их антиоксидантной активности. IOP3a и IOP4 показали более высокие антиоксидантные
свойства, чем IOP1b, IOP2a и IOP2c.
Int J Biol Macromol. 2012 Jun 1;50(5):1183-7. doi: 10.1016/j.ijbiomac.2012.03.019. Epub 2012 Mar 30.
Antioxidant activities of five polysaccharides from Inonotus obliquus.
Huang SQ1, Ding S, Fan L.
Author information
1College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangdong

Province, Guangzhou, China. [email protected]
Abstract
Five polysaccharides (IOP1b, IOP2a, IOP2c, IOP3a and IOP4) were isolated and purified from Inonotus
obliquus by DEAE-Sepharose fast flow and SepharoseCL-6B column chromatography. Their chemical and
physical characteristics were determined and antioxidant activities were investigated on the basis of
hydroxyl radical assay, superoxide radical assay and ferric-reducing antioxidant power assay. The results
showed that five polysaccharides exhibited antioxidant activities, and the higher content of uronic acid
and proteinous substances, the stronger antioxidant activities of polysaccharides. Besides, molecular
weights of polysaccharides also influence their antioxidant activities. IOP3a and IOP4 showed higher
antioxidant properties than IOP1b, IOP2a and IOP2c.
Противовирусная активность Inonotus obliquus экстракт гриба к инфекции, вызванной вирусом
гепатита С В культурах клеток.
Фракций Inonotus obliquus водный экстракт гриба выставлены вирулицидным действием в
отношении вируса гепатита С: это в 100 раз снизил свои инфекционные свойства в течение 10 мин.
26
Противовирусные эффекты гриба извлекает проявляется после профилактической (за 24 ч до
заражения) и терапевтическое использование (в течение инфекции свиного эмбриона клетки
почек). Кроме того, данные показывают, что экстракты березового гриба тормозят производство
инфекционный вирус свиного эмбриона клетки почки.
Bull Exp Biol Med. 2011 Sep;151(5):612-4.
Antiviral activity of Inonotus obliquus fungus extract towards infection caused by hepatitis C virus in
cell cultures.
Shibnev VA1, Mishin DV, Garaev TM, Finogenova NP, Botikov AG, Deryabin PG.
Author information
1D. I. Ivanovsky Institute of Virology, Ministry of Health Care and Social Development of the

Russian Federation, Moscow, Russia.
Abstract
Fractions of Inonotus obliquus fungus water extract exhibited a virucidal effect towards hepatitis C
virus: it 100-fold reduced its infective properties within 10 min. The antiviral effects of fungus extracts
manifested after preventive (24 h before infection) and therapeutic use (during infection of porcine
embryo kidney cells). Moreover, the data indicate that the birch fungus extracts inhibit production of
infective virus by porcine embryo kidney cells.
Противоопухолевые эффекты фракции изолированных от плодовых тел Чага лекарственный
гриб, Inonotus obliquus (Pers.:Fr.) Pilát (Aphyllophoromycetideae): исследования in vitro.
Лекарственный гриб Чага, Inonotus obliquus (Pers.:Fr.) Pilát (Hymenochaetaceae), использовался в
народной медицине в России, Польше, и большинство стран Балтии, как очищение и дезинфекция
мера, и как отвары болезни желудка, кишечных червей, печени и сердечных заболеваний, и
лечение рака. Многие доклады были опубликованы в отношении функций, способствующих
укреплению здоровья этого гриба, в том числе антибактериальных, гепатопротекторным,
противовоспалительным, противоопухолевым и антиоксидантным деятельности. Целью
настоящего исследования явилось изучение in vitro противоопухолевой активностью фракции IO4
изолирован от I. obliquus. Эффект на клеточную пролиферацию, подвижность и жизнеспособность
оценивали в диапазоне раковых и нормальных клеток. Чага фракции готовят из высушенных
плодовых тел был подвергнут оценки противоопухолевой в человеческой карциномы легкого
(А549), аденокарциномы толстой кишки (HT-29), и крысиной глиомы (C6) клеточных культур.
Человеческие фибробласты кожи (HSF), крупного рогатого скота эндотелиальных клеток аорты
(BAEC), модели rat олигодендроциты (OLN-93), гепатоцитов (Фао), крыса astroglia, и мышь нейронов
(P19) были применены для тестирования токсичности для нормальных клеток. Следующие методы
были применены: пролиферации опухолевых клеток (МТТ-теста и BrdU assay), цитотоксичности (ЛДГ
assay), опухоли подвижности клеток (рана assay), морфологии опухолевых клеток (Май-ГрюнвальдГимзе окрашивание), и смерть обнаружения (ИФА). Чага фракции вызвало противоопухолевых
эффектов, которые были отнесены к снижению пролиферации опухолевых клеток, подвижность и
морфологические изменения индукции. Следует отметить тот факт, что он произвел отсутствие или
низкая токсичность испытаны в нормальных клетках. Представленные данные могут открыть
интересные возможности для дальнейших исследований фракция IO4 в качестве потенциального
противоопухолевого агента.
Int J Med Mushrooms. 2011;13(2):131-43.
Anticancer effects of fraction isolated from fruiting bodies of Chaga medicinal mushroom, Inonotus
obliquus (Pers.:Fr.) Pilát (Aphyllophoromycetideae): in vitro studies.
Lemieszek MK1, Langner E, Kaczor J, Kandefer-Szerszeń M, Sanecka B, Mazurkiewicz W, Rzeski W.
Author information
1Department of Medical Biology, Institute of Agricultural Medicine, Lublin, Poland.

[email protected]
Abstract
27
The medicinal mushroom Chaga, Inonotus obliquus (Pers.:Fr.) Pilát (Hymenochaetaceae), has been used
in folk medicine in Russia, Poland, and most of the Baltic countries, as a cleansing and disinfecting
measure, and as decoctions for stomach diseases, intestinal worms, liver and heart ailments, and cancer
treatment. Many reports have been published concerning the health promoting functions of this
mushroom, including antibacterial, hepatoprotective, anti-inflammatory, antitumor, and antioxidant
activities. The purpose of the present study was evaluation of in vitro anticancer activity of fraction IO4
isolated from I. obliquus. The effect on cell proliferation, motility and viability was assessed in a range of
cancer and normal cells. Chaga fraction prepared from dried fruiting bodies was subjected to anticancer
evaluation in human lung carcinoma (A549), colon adenocarcinoma (HT-29), and rat glioma (C6) cell
cultures. Human skin fibroblasts (HSF), bovine aorta endothelial cells (BAEC), models of rat
oligodendrocytes (OLN-93), hepatocytes (Fao), rat astroglia, and mouse neurons (P19) were applied to
test toxicity in normal cells. The following methods were applied: tumor cell proliferation (MTT assay and
BrdU assay), cytotoxicity (LDH assay), tumor cell motility (wound assay), tumor cell morphology (MayGrünwald-Giemsa staining), and death detection (ELISA). Chaga fraction elicited anticancer effects which
were attributed to decreased tumor cell proliferation, motility and morphological changes induction. Of
note is the fact that it produced no or low toxicity in tested normal cells. The data presented could open
interesting paths for further investigations of fraction IO4 as a potential anticancer agent.
Inonotus obliquus экстракты подавляет антиген-специфических IgE производства посредством
модуляции Th1/Th2 цитокинов в овальбумин-сенсибилизированных мышей.
Чага гриб (Inonotus obliquus), IO) использовался как народное средство от рака, болезней органов
пищеварения и других заболеваний в России и Восточной Европе.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:
В настоящей работе мы исследовали иммуномодулирующие эффекты IO через in vivo и ex vivo.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Сывороточных иммуноглобулинов (IgE, IgG(1) и IgG(2a)) и цитокинов (интерлейкин (IL)-4,
интерферон (IFN)-γ и ИЛ-2) были измерены в конканавалин а (ConA)-стимулированных спленоцитов
и CD4(+) Т-клеток. Оксида азота (NO) секрецию липополисахарида (ЛПС)-стимулированных
макрофагов была также измерена после перорального введения 50, 100 или 200 мг / кг(-1) d(-1) IO
горячего водного экстракта (мор) овальбумин (OVA)-сенсибилизированных мышей BALB/c.
Результаты:
Мы обнаружили, что ОВА-индуцированной увеличение сывороточного IgE и IgG(2а) была
значительно подавлена, когда мор был перорально после второй иммунизации OVA. ConA
стимуляции в селезенке клеток, изолированных из OVA-сенсибилизированных мышей, получавших
100 мг / кг(-1) мор вылилось в 25.2% снижение IL-4 производства и 102.4% увеличение ИФН-γ по
сравнению с контролем. Кроме того, IL-4, IFN-γ и IL-2 были значительно снижены после стимуляции
Кона в изолированных CD4(+)Т-клеток. Мы также определили, что мор ингибирует секрецию не из
ЛПС-стимулированных макрофагов ex vivo.
Выводы:
Мы предполагаем, что IO модулирует иммунные реакции через секрецию Th1/Th2 цитокинов в
иммунных клетках и регулирует антиген-специфических антител производства.
J Ethnopharmacol. 2011 Oct 11;137(3):1077-82. doi: 10.1016/j.jep.2011.07.024. Epub 2011 Jul 28.
Inonotus obliquus extracts suppress antigen-specific IgE production through the modulation of
Th1/Th2 cytokines in ovalbumin-sensitized mice.
Ko SK1, Jin M, Pyo MY.
Author information
1Lab of Hygienic Pharmacy, College of Pharmacy, Sookmyung Women's University, 52

Hyochangwon-gil, Youngsan-ku, Seoul 140-742, Republic of Korea.
Chaga mushroom (Inonotus obliquus, IO) has been used as a folk remedy for cancer, digestive system
diseases, and other illnesses in Russia and Eastern Europe.
28
AIM OF THE STUDY:
In the present study, we investigated the immunomodulating effects of IO through in vivo and ex vivo
studies.
MATERIALS AND METHODS:
Serum immunoglobulins (IgE, IgG(1), and IgG(2a)) and cytokines (interleukin (IL)-4, interferon (IFN)-γ,
and IL-2) were measured in concanavalin A (ConA)-stimulated splenocytes and CD4(+) T cells. The nitric
oxide (NO) secretion of lipopolysaccharide (LPS)-stimulated peritoneal macrophages was also measured
after oral administration of 50, 100, or 200 mg kg(-1) d(-1) IO hot water extract (IOE) to ovalbumin (OVA)sensitized BALB/c mice.
RESULTS:
We found that the OVA-induced increase in serum IgE and IgG(2a) was significantly suppressed when
IOE was orally administered after the second immunization with OVA. ConA stimulation in spleen cells
isolated from OVA-sensitized mice treated with 100 mg kg(-1) IOE resulted in a 25.2% decrease in IL-4
production and a 102.4% increase in IFN-γ, compared to the controls. Moreover, IL-4, IFN-γ, and IL-2 were
significantly reduced after ConA stimulation in isolated CD4(+)T cells. We also determined that IOE inhibits
the secretion of NO from LPS-stimulated peritoneal macrophages ex vivo.
CONCLUSIONS:
We suggest that IO modulates immune responses through secretion of Th1/Th2 cytokines in immune
cells and regulates antigen-specific antibody production.
[Защитные эффекты и механизм Inonotus obliquus на астматический mice].
Исследовать защитные эффекты и механизм этанольный экстракт Inonotus obliquus (EEIO) раствор
для инъекций по астмой мышей.
Метод:
OVA вводили внутрибрюшинно и вдохнул того чтобы произвести астматический модели.
Тридцать две мыши были случайным образом разделены на четыре группы: контрольная группа,
астма группы и I. obliquus групп с высокой и низкой дозы. Концентрации IL-4, IL-5, IL-13 и IFN-гамма
в BALF, фосфор-p38 MAPK в легочной ткани были соответственно измерены с помощью ELISA и
Вестерн-блотинга. Количество воспалительных клеток в BALF и гистопатологических изменений не
наблюдалось.
Результат:
В астматический группы, количество воспалительных клеток и концентрации IL-4, IL-5, IL-13 в BALF
и фосфо-p38 MAPK в легочной ткани были выше, в то время как ИФН-гамма были ниже, чем в
обычных контрольных мышей (P < 0,05). В I. obliquus группы, количество воспалительных клеток,
концентрации IL-4, IL-5, IL-13 в BALF и фосфор-p38 MAPK в легочной ткани были ниже, но были
выше, чем в нормальных контрольных мышей (P < 0,05), и histropathology ущерба была значительно
облегчена. Не было никаких существенных различий, наблюдаемых между эффективностями в I.
obliquus групп с высокой и низкой дозы.
Вывод:
p38 MAPK может играть роль в патологический процесс астмы. I. obliquus эффективно лечит астму
путем ингибирования экспрессии фосфо-p38 MAPK, исправляя дисбаланс ИФН-гамма/ил-4 и
снижение количества воспалительных клеток.
Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2011 Apr;36(8):1067-70.
[Protective effects and mechanism of Inonotus obliquus on asthmatic mice].
[Article in Chinese]
Yan G1, Jin G, Li L, Qin X, Zheng C, Li G.
Author information
1Department of Anatomy, Yanbian University School of Basic Medical Sciences, Yanji 133002,

China. [email protected]
To explore the protective effects and mechanism of ethanol extract of Inonotus obliquus (EEIO)
injection on asthmatic mice.
29
METHOD:
OVA was injected intraperitoneally and inhaled to produce the asthmatic model. Thirty two mice were
randomly divided into four groups: control group, asthma group and I. obliquus groups of high and low
dose. The concentrations of IL-4, IL-5, IL-13 and IFN-gamma in BALF, the phosphor-p38 MAPK in lung
tissues were respectively measured by ELISA and Western blotting. The number of inflammatory cells in
BALF and histopathology changes were observed.
RESULT:
In asthmatic group, the number of inflammatory cells and the concentrations of IL-4, IL-5, IL-13 in BALF
and phospho-p38 MAPK in lung tissue were higher, while IFN-gamma were lower than those in normal
control mice (P < 0.05). In I. obliquus group, the number of inflammatory cells, the concentrations of IL-4,
IL-5, IL-13 in BALF and phosphor-p38 MAPK in lung tissue were lower, but were higher than those in
normal control mice (P < 0.05), and histropathology damage was alleviated significantly. There was no
significant difference observed among the efficacies in the I. obliquus groups of high and low dose.
CONCLUSION:
p38 MAPK may play a role in pathological process of asthma. I. obliquus effectively treats asthma by
inhibiting the expression of phosphor-p38 MAPK, correcting the unbalance of IFN-gamma/IL-4 and
decreasing the number of inflammatory cells.
Мелиорация скополамин индуцированной когнитивная дисфункция и окислительный стресс,
Inonotus obliquus - лекарственный гриб.
Настоящее исследование было направлено для расследования активизации познавательной и
анти-оксидант деятельности Inonotus obliquus (Чага) против скополамин-индуцированной
экспериментальной амнезии. Метанольного экстракта Чаги (MEC), 50 и 100 мг / кг (-1)дозах вводили
перорально в течение 7 дней амнезией мышей. Обучение и память оценивали путем пассивного
избегания задачи (PAT) и в водном лабиринте Морриса (MWM) тест. Такрина (ТХА, 10 мг / кг (-1),
устно (стр.o)), используемый в качестве эталонного препарата. Для выяснения механизма
повышения познавательной активности MEC, деятельность ацетилхолинэстеразы (AChE),
антиоксидантные ферменты, уровни ацетилхолина (ACh) и нитрита гомогенатов мозга мышей были
оценены. MEC лечения за 7 дней значительно улучшить память и обучение, как измеряется PAT и
MWM парадигм. Далее, MEC значительно снижается окислительно-nitritive стресса, о чем
свидетельствует снижение малонового диальдегида и уровня нитрита и восстановленного
глутатиона и супероксиддисмутазы уровнях в зависимости от дозы образом. Кроме того, MEC
лечения значительно снизилась активность Ахэ в обоих соли и моющего средства-растворимой
фракции гомогенатов мозга. Далее, лечение MEC восстановил уровень ACh, как это сделал ТХА.
Таким образом, значительное повышение познавательной наблюдается у мышей после MEC
администрация тесно связана с высшей мозговой антиоксидантными свойствами и ингибирование
AChE деятельности. Эти выводы подчеркивают критическое влияние Чага, лечебные грибы, на
высших мозговых функций, как обучение и память.
Food Funct. 2011 Jun;2(6):320-7. doi: 10.1039/c1fo10037h. Epub 2011 Jun 6.
Amelioration of scopolamine induced cognitive dysfunction and oxidative stress by Inonotus obliquus
- a medicinal mushroom.
Giridharan VV1, Thandavarayan RA, Konishi T.
Author information
1Department of Functional and Analytical Food Sciences, Niigata University of Pharmacy and

Applied Life Sciences (NUPALS), Higashijima 265-1, Akiha-Ku, Niigata 956-8603, Japan.
Abstract
The present study was aimed to investigate the cognitive enhancing and anti-oxidant activities of
Inonotus obliquus (Chaga) against scopolamine-induced experimental amnesia. Methanolic extract of
Chaga (MEC) at 50 and 100 mg kg (-1)doses were administered orally for 7 days to amnesic mice. Learning
and memory was assessed by passive avoidance task (PAT) and Morris water maze (MWM) test. Tacrine
(THA, 10 mg kg (-1), orally (p.o)) used as a reference drug. To elucidate the mechanism of the cognitive
30
enhancing activity of MEC, the activities of acetylcholinesterase (AChE), anti-oxidant enzymes, the levels
of acetylcholine (ACh) and nitrite of mice brain homogenates were evaluated. MEC treatment for 7 days
significantly improved the learning and memory as measured by PAT and MWM paradigms. Further, MEC
significantly reduced the oxidative-nitritive stress, as evidenced by a decrease in malondialdehyde and
nitrite levels and restored the glutathione and superoxide dismutase levels in a dose dependent manner.
In addition, MEC treatment significantly decreased the AChE activity in both the salt and detergentsoluble fraction of brain homogenates. Further, treatment with MEC restored the levels of ACh as did
THA. Thus, the significant cognitive enhancement observed in mice after MEC administration is closely
related to higher brain anti-oxidant properties and inhibition of AChE activity. These findings stress the
critical impact of Chaga, a medicinal mushroom, on the higher brain functions like learning and memory.
Эффекты inotodiol выписки из inonotus obliquus на распространение цикла и апоптоза ген
человеческой аденокарциномы легкого клеточной линии А549.
Соблюдать ингибирование пролиферации, апоптоза и клеточной пролиферации цикл
человеческой клеточной линии карциномы легкого А549, получавших Inotodiol выписки из Inonotus
obliquus и изучить возможность Inotodiol выписки из Inonotus obliquus новообразование
химические лекарства.
Методы:
Человека рак легких клеточной линии А549 лечился в разных концентрациях Inotodiol,
последствия Inotodiol на клеточный апоптоз, экспрессию Ki-67, Bcl-2, Bax, p53 и клеточного цикла
было выявлено с помощью TUNEL-анализа, иммуногистохимии и проточной цитометрии анализа
соответственно.
Результаты:
Inotodiol экстракты было antiproliferation влияние на человека клеточной линии карциномы
легкого А549. Экспрессия Ki-67 уменьшается с увеличением Inotodiol концентрации и времени
экспозиции (P<0,05), в зависимости от дозы и время-зависимым образом. Типичные характеристики
апоптоза клеток А549 клеток, обработанных Inotodiol наблюдались, и скорость апоптоза клеток
А549 в 48 ч был самым высоким по TUNEL анализа. Inotodiol арестован А549 клеток в S-фазе, и пик
апоптоза наблюдалась методом проточной цитометрии. Иммуноцитохимии показали, что
экспрессия Bcl-2 белок снизился, в то время как экспрессия р53 и Bax белков увеличился в А549
клеток, обработанных Inotodiol, по сравнению с контрольными клетками (P<0,05).
Вывод:
Inotodiol может ингибировать пролиферацию и индуцировать апоптоз клеток А549, и его
молекулярный механизм может быть связан с up-регуляции экспрессии р53 и bax белков и вниз,
регулирующие экспрессию Bcl-2 белка, который арестован А549 клеток в S фазе.
Chin J Integr Med. 2011 Mar;17(3):218-23. doi: 10.1007/s11655-011-0670-x. Epub 2011 Feb 27.
Effects of inotodiol extracts from inonotus obliquus on proliferation cycle and apoptotic gene of
human lung adenocarcinoma cell line A549.
Zhong XH1, Wang LB, Sun DZ.
Author information
1Department of Pathology, Jilin Medical College, Jilin, 132013, China. [email protected]

To observe the proliferation inhibition, apoptosis, and cell proliferation cycle of human lung carcinoma
cell line A549 treated with Inotodiol extracts from Inonotus obliquus and explore the possibility of
Inotodiol extracts from Inonotus obliquus as a new tumor chemopreventive drug.
METHODS:
Human lung cancer cell line A549 was treated with different concentrations of Inotodiol, the effects of
Inotodiol on cell apoptosis, the expression of Ki-67, Bcl-2, Bax, and p53 and cell cycle were detected by
TUNEL assay, immunohistochemistry, and flow cytometry assay respectively.
RESULTS:
Inotodiol extracts had antiproliferation effect on human lung carcinoma cell line A549. The expression
of Ki-67 decreased with the increase of Inotodiol concentration and exposure time (P<0.05), in a dose31
dependent and time-dependent manner. The typical characteristics of the apoptosis of A549 cells treated
with Inotodiol were observed, and the apoptotic rate of A549 cell at 48 h was the highest by TUNEL assay.
Inotodiol arrested A549 cells in the S phase, and apoptotic peak was observed by flow cytometry.
Immunocytochemistry indicated that the expression of Bcl-2 protein decreased, while the expression of
p53 and Bax proteins increased in A549 cells treated with Inotodiol, compared with the control cells
(P<0.05).
CONCLUSION:
Inotodiol can inhibit proliferation and induce the apoptosis of A549 cells, and its molecular mechanism
may be associated with the up-regulating expression of p53 and bax proteins and down-regulating
expression of Bcl-2 protein, which arrested A549 cells in S phase.
[Тритерпеноидов из Inonotus obliquus защитить мышей от окислительного повреждения,
вызванного CCl4].
Чтобы исследовать эффекты ланостерин (1), inotodiol (2) и trametenolic кислоты (3) из Inonotus
obliquus от окислительного повреждения, вызванного CCl4 в мышей, 1, 2 и 3 (20, 10 и 5 мг x кг(-1))
были, соответственно, вводят мышам, один раз в день в течение 3 дней. Затем мыши были
индуцированного окислительного повреждения CCl4 на третий день через 30 мин после введения.
Активности супероксиддисмутазы (СОД), каталазы (кат), глутатионпероксидазы (GSH-PX) и
содержание малонового диальдегида (мда) и восстановительного глутатиона (GSH) в сыворотке
крови и гомогенате печени определяли. И уровни аланинаминотрансферазы (АЛТ) и
аспартатаминотрансферазы (АСТ) и интерлейкин-6 (IL-6) концентрации в сыворотке крови были
обнаружены. Результаты показали, что лечение с помощью соединения 1, 2 и 3 могут значительно
увеличить активностью СОД, кат и GSH-PX в сыворотке крови и гомогенате печени. Кроме того,
содержание GSH в сыворотке крови и гомогенате печени увеличилось и содержание мда снизилось
заметно. Кроме того, соединения 1, 2 и 3 могут значительно сдерживать деятельность АЛТ и АСТ в
сыворотке крови и снижение ил-6, концентрация в сыворотке замечательно. Таким образом,
соединения 1, 2 и 3 может защитить мышей от окислительного стресса, травмы, индуцированного
CCl4. Кроме того, соединения 1, 2 и 3 могут защитить клетки от повреждения за счет ингибирования
на АЛТ, АСТ и экспрессию IL-6.
Yao Xue Xue Bao. 2012 May;47(5):680-4.
[Triterpenoids from Inonotus obliquus protect mice against oxidative damage induced by CCl4].
[Article in Chinese]
Zhao FQ1, Yan L, Cui XH, Lin S, Wang C, Zhang H, Kang XY, Ji BS.
Author information
1Pharmaceutical Institute of Henan University, Kaifeng 475004, China.

Abstract
To investigate the effects of lanosterol (1), inotodiol (2) and trametenolic acid (3) from Inonotus
obliquus against oxidative damage induced by CCl4 in mice, 1, 2 and 3 (20, 10 and 5 mg x kg(-1)) were
respectively administered to mice, once a day for 3 days. Then the mice were induced to oxidative
damage by CCl4 on the third day 30 min after the administration. The activities of superoxide dismutase
(SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GSH-PX) and the content of malondialdehyde (MDA) and
reductive glutathione (GSH) in serum and liver homogenate were determined. And the levels of alanine
aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) and interleukin-6 (IL-6) concentration in
serum were detected. The results showed that treatment with compound 1, 2 and 3 could significantly
increase the activities of SOD, CAT and GSH-PX in serum and liver homogenate. Furthermore, the content
of GSH in serum and liver homogenate increased and MDA content decreased markedly. In addition,
compound 1, 2 and 3 could significantly inhibit the activities of ALT and AST in serum, and decrease the IL6 concentration in serum remarkably. So, compound 1, 2 and 3 can protect mice against oxidative stress
injury induced by CCl4. Furthermore, compound 1, 2 and 3 can protect cells from damage through
inhibition on ALT, AST and the expression of IL-6.
32
Фитохимическое характеристики и гипогликемической активностью фракции из гриба Inonotus
obliquus.
Inonotus obliquus) - это лекарственный гриб, который использовался в качестве эффективного
агента для лечения различных заболеваний, таких как сахарный диабет, туберкулез и рак. Для того
чтобы определить активные фракции и ее трехсторонних участников, последствия этилацетат от
фракции I. obliquus (EAFI) на гипергликемию были исследованы и основные составляющие EAFI
были изолированы и идентифицированы.
Результаты:
EAFI лечение привело к достоверному снижению уровня глюкозы в крови (P < 0,05) в alloxanиндуцированных диабетических мышей. Это значительно снизился уровень общего холестерина в
сыворотке крови, повышение активности глутатионпероксидазы и улучшение роста
физиологических характеристик. Кроме того, EAFI лечения снизился уровень триглицеридов и
малонового диальдегида и увеличения липопротеинов высокой плотности холестерина в сыворотке
крови и печеночной уровень гликогена в печени диабетических мышей. Пять соединений были
изолированы от EAFI и идентифицированы как ланостерин (1), 3beta-гидрокси-lanosta-8,24-диен-21al (2), inotodiol (3), перекиси эргостерина (4) и trametenolic кислоты (5) с помощью спектральных
методов. Inotodiol и trametenolic кислоты было обнаружено ингибирующее действие на Альфаамилазы и эффект очистки на 1,1-дифенил-2-picrylhydrazyl радикалов.
EAFI показал значительное antihyperglycaemic и antilipidperoxidative эффекты в alloxanиндуцированных диабетических мышей. Терпеноидные и стероидные соединения оказались
главными активными составляющими I. obliquus.
J Sci Food Agric. 2010 Jan 30;90(2):276-80. doi: 10.1002/jsfa.3809.
Phytochemical characteristics and hypoglycaemic activity of fraction from mushroom Inonotus
obliquus.
Lu X1, Chen H, Dong P, Fu L, Zhang X.
1Tianjin Key Laboratory for Modern Drug Delivery and High-Efficiency, School of Pharmaceutical

Science and Technology, Tianjin University, Tianjin 300072, China.
Inonotus obliquus is a medicinal mushroom that has been used as an effective agent to treat various
diseases such as diabetes, tuberculosis and cancer. In order to elucidate the active fraction and its
constituents, the effects of ethyl acetate fraction from I. obliquus (EAFI) on hyperglycaemia were
investigated and the main constituents of EAFI were isolated and identified.
RESULTS:
EAFI treatment led to a significant decrease in blood glucose level (P < 0.05) in alloxan-induced diabetic
mice. It significantly decreased the total cholesterol level in serum, increased glutathione peroxidase
activity and improved the growth physiological characteristics. In addition, EAFI treatment decreased the
levels of triglyceride and malondialdehyde and increased the high-density lipoprotein cholesterol level in
serum and the hepatic glycogen level in liver of diabetic mice. Five compounds were isolated from EAFI
and identified as lanosterol (1), 3beta-hydroxy-lanosta-8,24-diene-21-al (2), inotodiol (3), ergosterol
peroxide (4) and trametenolic acid (5) by spectral methods. Inotodiol and trametenolic acid were found to
have an inhibitory effect on alpha-amylase activity and a scavenging effect on 1,1-diphenyl-2picrylhydrazyl radicals.
CONCLUSION:
EAFI showed significant antihyperglycaemic and antilipidperoxidative effects in alloxan-induced diabetic
mice. Terpenoid and sterol compounds appeared to be the major active constituents of I. obliquus.
Inotodiol, lanostane тритерпеноида, из Inonotus obliquus ингибирует пролиферацию клеток
через каспазу-3-зависимого апоптоза.
33
Исследовать противоопухолевый эффект Inonotus obliquus Pilat, антипролиферативный эффект
lanostane тритерпеноидов из хлороформного экстракта I. obliquus склероции против лейкемии
мыши P388 клеток оценивали.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Жизнеспособность клеток измеряли с помощью МТТ-теста. Каспазы-3/7 деятельности и
фрагментации ДНК оценивали анализ индукции апоптоза. In vivo противоопухолевый эффект
оценивали по количеству выживания дней мышь лейкемии P388-подшипник самок мышей CDF1.
Результаты:
Хлороформного экстракта I. obliquus склероции ингибирует пролиферацию клеток P388. Среди
тритерпеноидов проверил, только inotodiol ингибирует пролиферацию клеток P388. Фрагментация
ДНК и каспазы-3/7 активации наблюдались в P388 клеток, обработанных inotodiol (30 мкмоль). В
каспазы-3 ингибитор, DEVD-CHO (N-ацетил-Asp-Glu-Val-Asp-al, 100 мкмоль) частично ингибирует
ДНК-фрагментации и роста, ингибирование индуцированной inotodiol. В внутрибрюшинное
введение 10 мг/кг inotodiol длительное количество выживание дней P388-подшипник мышей.
Вывод:
Inotodiol ингибирует пролиферацию клеток путем индукции апоптоза путем активации каспазы-3.
Антимутагенных эффектов подфракций из Чага гриб (Inonotus obliquus), экстракт.
Inonotus obliquus) - это гриб, широко известный как Чага, который широко используется в
народной медицине в Сибири, Северной Америке и Северной Европе. Здесь, мы оценили
антимутагенной и антиоксидантной емкости подфракций из Inonotus obliquus экстракт. Этиловый
ацетат, экстракт разделенных вакуумной хроматографии на три фракции, и фракция подшипник
высшей антимутагенная активность впоследствии был разделен на четыре фракции по противофазе
(ODS C18) колоночная хроматография. Наиболее антимутагенное фракции был затем разделен на
две подфракций (подфракций 1 и 2) нормальная фаза, силикагель колоночной хроматографии. Тест
эймса анализ показал, что подфракций были не мутагенны. На 50 мкг/плита, подфракций 1 и 2
сильно угнетал индуцированного мутагенеза в Salmonella typhimurium штамм ТА100)
непосредственно действуя мутаген MNNG (0.4 мкг/плита) на 80,0% и 77,3%, соответственно. Они
также ингибирует 0.15 мкг/плиты 4NQO-индуцированного мутагенеза в TA98 и ТА100 на 52,6-62.0%.
В мутагенеза в TA98, индуцированных косвенно и.о. мутагенов Trp-P-1 (0.15 мкг/плита) и B(α)P (10
мкг/плита) был снижен на 47.0-68.2% подфракций, а мутагенеза в ТА100, Trp-P-1 и B(α)P сократилась
на 70,5-87.2%. Subfraction 1 было больше, чем ингибирующее subfraction 2 с учетом мутагенные
эффекты 4NQO, Trp-P-1, и B(α)П. Подфракций 1 и 2 также имел сильную антиоксидантную
активность в отношении DPPH радикалов и были определены МС, ЯМР 1H и 13С ЯМР-анализов, как
3β-гидрокси-lanosta-8, 24-диен-21-al и inotodiol, соответственно. Таким образом, мы показали, что
3beta-гидрокси-lanosta-8, 24-диен-21-al и inotodiol компоненты Inonotus obliquus медведь
антимутагенной и антиоксидантной активности.
Mutat Res. 2009 Jan;672(1):55-9. doi: 10.1016/j.mrgentox.2008.10.002. Epub 2008 Oct 17.
Antimutagenic effects of subfractions of Chaga mushroom (Inonotus obliquus) extract.
Ham SS1, Kim SH, Moon SY, Chung MJ, Cui CB, Han EK, Chung CK, Choe M.
Author information
1Department of Food Science and Biotechnology, School of Bioscience and Biotechnology,

Kangwon National University, Chuncheon 200-701, Republic of Korea. [email protected]
Abstract
Inonotus obliquus is a mushroom commonly known as Chaga that is widely used in folk medicine in
Siberia, North America, and North Europe. Here, we evaluated the antimutagenic and antioxidant
capacities of subfractions of Inonotus obliquus extract. The ethyl acetate extract was separated by
vacuum chromatography into three fractions, and the fraction bearing the highest antimutagenic activity
was subsequently separated into four fractions by reversed phase (ODS-C18) column chromatography.
The most antimutagenic fraction was then separated into two subfractions (subfractions 1 and 2) by
normal phase silica gel column chromatography. Ames test analysis revealed that the subfractions were
not mutagenic. At 50 μg/plate, subfractions 1 and 2 strongly inhibited the mutagenesis induced in
Salmonella typhimurium strain TA100 by the directly acting mutagen MNNG (0.4 μg/plate) by 80.0% and
34
77.3%, respectively. They also inhibited 0.15 μg/plate 4NQO-induced mutagenesis in TA98 and TA100 by
52.6-62.0%. The mutagenesis in TA98 induced by the indirectly acting mutagens Trp-P-1 (0.15 μg/plate)
and B(α)P (10 μg/plate) was reduced by 47.0-68.2% by the subfractions, while the mutagenesis in TA100
by Trp-P-1 and B(α)P was reduced by 70.5-87.2%. Subfraction 1 was more inhibitory than subfraction 2
with regard to the mutagenic effects of 4NQO, Trp-P-1, and B(α)P. Subfractions 1 and 2 also had a strong
antioxidant activity against DPPH radicals and were identified by MS, 1H NMR and 13C NMR analyses as
3β-hydroxy-lanosta-8, 24-dien-21-al and inotodiol, respectively. Thus, we show that the 3beta-hydroxylanosta-8, 24-dien-21-al and inotodiol components of Inonotus obliquus bear antimutagenic and
antioxidative activities.
Определение структуры inonotsuoxides A и B и in vivo противоопухолевой содействие
деятельности inotodiol от склероции Inonotus obliquus.
Два новых lanostane типа тритерпеноиды, inonotsuoxides A (1) и B (2) наряду с тремя известными
lanostane типа тритерпеноиды, inotodiol (3), trametenolic кислоты (4), и ланостерин (5), были
изолированы от склероции Inonotus obliquus (Pers.: Fr.) (Японское имя: Kabanoanakake) (Русское
название: Чага). Их структуры были определены 22R,25-epoxylanost-8-ен-3beta,24S-диола (1) и
22S,25-epoxylanost-8-ен-3beta,24S-диол (2) на основе спектральных данных, включая single crystal Xray analysis. Эти соединения, кроме 2, были протестированы на их ингибирующее влияние на
Эпштейна-Барр вирус, ранний антиген (EBV-EA), активация, индуцированная 12-Otetradecanoylphorbol-13-ацетата (тра), в качестве тест для потенциальных рака химические агенты.
Наиболее распространенный тритерпеновые, inotodiol (3), была исследована в ингибирующее
действие в две стадии канцерогенеза тест на кожу с помощью мыши 7,12-dimethylbenz[a]антрацена
(DMBA) в качестве инициатора и TPA в качестве промоутера. Соединение 3 было установлено,
обладают мощным противоопухолевым содействие деятельности в сфере канцерогенеза in vivo
тест.
Bioorg Med Chem. 2007 Jan 1;15(1):257-64. Epub 2006 Sep 30.
Structure determination of inonotsuoxides A and B and in vivo anti-tumor promoting activity of
inotodiol from the sclerotia of Inonotus obliquus.
Nakata T1, Yamada T, Taji S, Ohishi H, Wada S, Tokuda H, Sakuma K, Tanaka R.
Author information
1Department of Medicinal Chemistry, Osaka University of Pharmaceutical Sciences, 4-20-1

Nasahara, Takatsuki, Osaka 569-1094, Japan.
Abstract
Two new lanostane-type triterpenoids, inonotsuoxides A (1) and B (2) along with three known
lanostane-type triterpenoids, inotodiol (3), trametenolic acid (4), and lanosterol (5), were isolated from
the sclerotia of Inonotus obliquus (Pers.: Fr.) (Japanese name: Kabanoanakake) (Russian name: Chaga).
Their structures were determined to be 22R,25-epoxylanost-8-ene-3beta,24S-diol (1) and 22S,25epoxylanost-8-ene-3beta,24S-diol (2) on the basis of spectral data including single crystal X-ray analysis.
These compounds except for 2 were tested for their inhibitory effects on Epstein-Barr virus early antigen
(EBV-EA) activation induced by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA), as a test for potential cancer
chemopreventive agents. The most abundant triterpene, inotodiol (3), was investigated for the inhibitory
effect in a two-stage carcinogenesis test on mouse skin using 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) as
an initiator and TPA as a promoter. Compound 3 was found to exhibit the potent anti-tumor promoting
activity in the in vivo carcinogenesis test.
Inonotus obliquus защищает от окислительного стресса, индуцированного апоптоза и
преждевременного старения.
В этом исследовании мы исследовали цитопротективные эффекты Inonotus obliquus против
окислительный стресс-индуцированного апоптоза и преждевременного старения. Предварительная
обработка с I. obliquus очистки внутриклеточных АФК и предотвратить перекисное окисление
35
липидов в перекись водорода-лечение человеческих фибробластов. Как результат, I. obliquus
оказывало защитный эффект против перекись водорода-индуцированного апоптоза и
преждевременного старения в человеческих фибробластов. Кроме того, I. obliquus подавленные
УФ-индуцированные морфологические изменения кожи, такие как утолщение кожи и образование
морщин, в лысых мышей in vivo и увеличение синтеза коллагена путем ингибирования ММП-1 и
ММП-9 мероприятий в перекись водорода-лечение человеческих фибробластов. Взятые вместе, эти
результаты показывают, что I. obliquus может предотвратить процесс старения, ослабления
окислительного стресса в модели стресс-индуцированного преждевременного старения.
Mol Cells. 2011 May;31(5):423-9. doi: 10.1007/s10059-011-0256-7. Epub 2011 Feb 22.
Inonotus obliquus protects against oxidative stress-induced apoptosis and premature senescence.
Yun JS1, Pahk JW, Lee JS, Shin WC, Lee SY, Hong EK.
Author information
1Department of Bioengineering and Technology, Kangwon National University, Chuncheon 200
701, Korea.
Abstract
In this study, we investigated the cytoprotective effects of Inonotus obliquus against oxidative stressinduced apoptosis and premature senescence. Pretreatment with I. obliquus scavenged intracellular ROS
and prevented lipid peroxidation in hydrogen peroxide-treated human fibroblasts. As a result, I. obliquus
exerted protective effects against hydrogen peroxide-induced apoptosis and premature senescence in
human fibroblasts. In addition, I. obliquus suppressed UV-induced morphologic skin changes, such as skin
thickening and wrinkle formation, in hairless mice in vivo and increased collagen synthesis through
inhibition of MMP-1 and MMP-9 activities in hydrogen peroxide-treated human fibroblasts. Taken
together, these results demonstrate that I. obliquus can prevent the aging process by attenuating
oxidative stress in a model of stress-induced premature senescence.
Обсуждение
Хронические воздействия на кожу УФ-излучения, как известно, индуцируют различных вредных
воздействий, в том числе утолщение кожи, образование морщин, снимает воспаления и
канцерогенеза. Показано, что УФ-облучение приводит к избыточной генерации АФК, тем самым, в
результате окислительного стресса, состояния (Ibbotson et al., 1999; Scharffetter-Kochanek et al.,
1997). Поэтому, вполне вероятно, что АФК, генерируемых УФ-облучения играют важнейшую роль в
UVinduced повреждения кожи. Соответственно, было показано, что ингибирование АФК продукции
и/или расширение ОРУ очистки может быть использован в качестве полезной терапии для лечения
УФ-индуцированного повреждения кожи (Harman, 1956). Антиоксиданты обладают способностью
утолить ROS, и, следовательно, являются примером соединения, которое может использоваться для
этой цели (Diplock et al., 1998 г.). Хотя некоторые синтетические антиоксиданты, такие как
бутилгидроксианизол (BHA) и butylated hydroxytoluene (BHT), проявляют антиоксидантное действие
против свободных радикалов, различные исследования показали, что они обладают также
токсикологических эффектов по сравнению с природными антиоксидантами. Таким образом,
наблюдается постепенный рост спроса на альтернативные и безопасные антиоксиданты,
изолированные из природных источников (Saito et al., 2003). Хотя некоторые отчеты предполагают,
что I. obliquus экспонаты мощный бесплатный антирадикальное воздействие (Lee et al., 2007; Park et
al., 2004 г.), не было ни одного сообщения на профилактические эффекты I. obliquus лечение на
окислительный стресс-индуцированного апоптоза и преждевременного старения.
Многие исследования показали, цитотоксическое воздействие окислителей, таких как перекись
водорода на человеческие фибробласты (Chen, 2000; Ohshima, 2004; Ри, 2006). В ответ на пероксид
водорода, pro-апоптоза Bcl-2 семейство белков, таких как Bax инициировать митохондрииопосредованного пути апоптоза путем формирования каналов на освоение в митохондрии, тем
самым увеличивая внешний проницаемости мембран митохондрий, и, тем самым, облегчая
высвобождение цитохрома С и других проапоптотических факторов из митохондрий
межмембранная пространства. Выпущено цитохром c образует apoptosome комплекс с Apaf-1,
который активирует каспазу 9, и, в свою очередь, ниже по течению каспазы 3, в результате чего
морфологическими признаками апоптоза (Cohen, 1997; Yuan et al., 2003). В согласии с этим, клетки
36
воздействию перекиси водорода выставлены увеличение числа апоптотических фибробластов как
показала экспозиция отличается, снижение соотношения Bcl-2/Bax экспрессии белка, и увеличение
каспазы 3 деятельности. Однако, клетки, предварительно обработанные с I. obliquus в результате
сниженный процент апоптотических клеток (Рис. 2). Эти результаты показывают, что ингибирование
внутриклеточных ROS поколения и перекисного окисления липидов может быть важно для
cytoprotection против окислительного повреждения (Рис. 1). Таким образом, эти результаты
позволяют предположить, что I. obliquus ингибирует окислительный стресс-индуцированного
апоптоза через ROS очистки эффекты в человеческих дермальных фибробластов.
Окислительного стресса было показано, что они индуцируют стресс-индуцированного
преждевременного старения в фибробластах (Dasari et al., 2006; Frippiat et al., 2001). Стареющие
клетки посмотреть различные функции из пролиферирующих клеток. Типичное старение
конкретных морфология характеризуется как ‘уплощен и расширен клетки (Хейфлик и Мурхед,
1961). SA-β-gal активность широко используется в качестве маркера стареющих. Поскольку этот
фермент работает в кислой среде рН в условиях старения определенным образом, позитивных
клеток в этом анализе признан стареющих клеток (Dimri et al., 1995). Таким же образом, клеток,
обработанных перекисью водорода выставлены фенотип стареющих судя по SA-β-gal анализа, а
также расширенное и уплощенное клетки морфологические внешний вид. Однако, клетки,
предварительно обработанные с I. obliquus наблюдается снижение числа стареющих клеток (Рис. 3).
ROS, таких как перекись водорода увеличивают секрецию ММП в человеческих кожных
фибробластов (Brenneisen et al., 1997). I. obliquus увеличение синтеза коллагена путем
ингибирования ММП-1 и ММП-9 в перекись водорода-лечение человеческих фибробластов (Рис. 4).
Кроме того, I. obliquus подавленные УФ-индуцированные морфологические изменения кожи, такие
как утолщение кожи и образование морщин, в голых мышей in vivo (Рис. 5). Таким образом, эти
результаты позволяют предположить, что I. obliquus ингибирует окислительный стрессиндуцированного преждевременного старения через ROS очистки эффекты.
В заключение, I. obliquus оказано ROS очистки активностью, ингибирует перекись водородаиндуцированный апоптоз и ингибирует перекиси водорода и УФ-индуцированного
преждевременного старения.
DISCUSSION
Chronic exposure of the skin to UV radiation is known to induce various harmful effects, including skin
thickening, wrinkle formation, inflammation and carcinogenesis. It has been shown that UV irradiation
leads to excessive generation of ROS, thereby resulting in an oxidative stress state (Ibbotson et al., 1999;
Scharffetter-Kochanek et al., 1997). Therefore, it is likely that ROS generated by UV irradiation play a
critical role in UVinduced skin damage. Accordingly, it has been shown that inhibition of ROS production
and/or enhancement of ROS scavenging can be used as beneficial therapies for the treatment of UVinduced skin damage (Harman, 1956). Antioxidants have the capacity to quench ROS, and therefore are an
example of a compound that can be used for this purpose (Diplock et al., 1998). Although some synthetic
antioxidants, such as butylated hydroxyanisole (BHA) and butylated hydroxytoluene (BHT), exhibit
antioxidant effects against free radicals, various studies have shown that they also possess toxicological
effects compared to natural antioxidants. Thus, there has been a gradual increase in the demand for
alternative and safe antioxidants isolated from natural sources (Saito et al., 2003). Although some reports
have suggested that I. obliquus exhibits potent free radical scavenging effects (Lee et al., 2007; Park et al.,
2004), there have been no reports on the preventive effects of I. obliquus treatment on oxidative stressinduced apoptosis and premature senescence.
Many studies have demonstrated the cytotoxic effects of oxidizing agents such as hydrogen peroxide on
human fibroblasts (Chen, 2000; Ohshima, 2004; Rhee, 2006). In response to hydrogen peroxide, proapoptotic Bcl-2 family proteins such as Bax initiate the mitochondria-mediated apoptotic pathway by
forming channels on assimilating into the mitochondria, thus increasing outer mitochondria membrane
permeability, and thereby facilitating the release of cytochrome c and other proapoptotic factors from the
mitochondrial intermembrane space. Released cytochrome c forms an apoptosome complex with Apaf-1,
which activates caspase 9, and in turn, its downstream caspase 3, resulting in the morphological features
of apoptosis (Cohen, 1997; Yuan et al., 2003). In agreement with this, cells exposed to hydrogen peroxide
37
exhibited an increased number of apoptotic fibroblasts as demonstrated by exposure of
phosphatidylserine, a reduced ratio of Bcl-2/Bax protein expression, and increased caspase 3 activity.
However, cells that were pretreated with I. obliquus resulted in a reduced percentage of apoptotic cells
(Fig. 2). These results indicate that the inhibition of intracellular ROS generation and lipid peroxidation
may be important for cytoprotection against oxidative damage (Fig. 1). Therefore, these results suggest
that I. obliquus inhibited oxidative stress-induced apoptosis through its ROS scavenging effects in human
dermal fibroblasts.
Oxidative stress has been shown to induce stress-induced premature senescence in fibroblasts (Dasari
et al., 2006; Frippiat et al., 2001). Senescent cells show different features from proliferative cells. A typical
senescence-specific morphology is characterized as ‘flattened and enlarged’ cells (Hayflick and Moorhead,
1961). SA-β-gal activity is commonly used as a senescent marker. Since this enzyme works under acidic pH
conditions in a senescence-specific manner, the positive cells in this assay recognized as senescent cells
(Dimri et al., 1995). In the same manner, cells treated with hydrogen peroxide exhibited the senescent
phenotype as judged by SA-β-gal assay as well as an enlarged and flattened cell morphological
appearance. However, cells that were pretreated with I. obliquus experienced a reduction in the number
of senescent cells (Fig. 3). ROS such as hydrogen peroxide increase MMP secretion in human dermal
fibroblasts (Brenneisen et al., 1997). I. obliquus increased collagen synthesis through inhibition of MMP-1
and MMP-9 in hydrogen peroxide-treated human fibroblasts (Fig. 4). In addition, I. obliquus suppressed
UV-induced morphologic skin changes, such as skin thickening and wrinkle formation, in hairless mice in
vivo (Fig. 5). Therefore, these results suggest that I. obliquus inhibited oxidative stress-induced premature
senescence through its ROS scavenging effects.
In conclusion, I. obliquus exerted ROS scavenging activity, inhibited hydrogen peroxide-induced
apoptosis, and inhibited hydrogen peroxide or UV-induced premature senescence.
Styrylpyrone-класс соединений из лекарственных грибов Phellinus и Inonotus spp., и их лечебное
значение.
Члены рода Phellinus и Inonotus, в том числе П. linteus, P. igniarius, П. ribis, I. obliquus и. xeranticus
хорошо известных лекарственных грибов (шампиньоны) и были использованы в лечении рака,
диабета, бактериальных и вирусных инфекций и язвы. Побочные эффекты этих лекарственных
грибов пока не поступало, указывая безопасный характер этих грибов. Полисахариды, в частности,
β-глюкан, считаются соединений, ответственных за биологическую активность лекарственных
грибов. Однако, есть только ограниченное количество данных, свидетельствующих о том, что
полисахариды являются на самом деле отвечает за биологические эффекты этих лекарственных
грибов. В последнее время многие научные группы начали идентификации active low-MW
соединений в лекарственных грибов, с акцентом на желтый полифенол пигментов, которые состоят
из styrylpyrone класса соединений. Интересно, что представитель группы лекарственных грибов, в
том числе П. linteus, P. igniarius, П. ribis, I. obliquus и. xeranticus были показаны, чтобы иметь
большой и разнообразный ассортимент styrylpyrone типа полифенолов пигменты, которые
выставлены различных биологических видов деятельности, в том числе антиоксидантный,
противовоспалительный, цитотоксический, анти-агрегации тромбоцитов, анти-диабет, антислабоумие и противовирусным действием. Styrylpyrone пигменты грибов, которые, как полагают,
играет роль, аналогичную флавоноидов в растениях. Уникальный и беспрецедентный углеродного
скелета плавленого styrylpyrone может быть привлекательной молекулярной леска для
фармакологического применения. В этом обзоре, структурное разнообразие, биологические
эффекты и биогенеза styrylpyrone-класса полифенолов из лекарственных грибов описаны.
J Antibiot (Tokyo). 2011 May;64(5):349-59. doi: 10.1038/ja.2011.2. Epub 2011 Feb 9.
Styrylpyrone-class compounds from medicinal fungi Phellinus and Inonotus spp., and their medicinal
importance.
Lee IK1, Yun BS.
Author information
38

1Division
of Biotechnology, College of Environmental and Bioresource Sciences, Chonbuk National
University, Jeonbuk, Korea.
Abstract
Members of the genera Phellinus and Inonotus, including P. linteus, P. igniarius, P. ribis, I. obliquus and
I. xeranticus are well-known medicinal fungi (mushrooms) and have been used in treatment of cancer,
diabetes, bacterial and viral infections and ulcer. Adverse effects of these medicinal mushrooms have not
yet been reported, indicating the safe nature of these mushrooms. Polysaccharides, particularly β-glucan,
are considered the compounds responsible for the biological activity of medicinal mushrooms. However,
there is only a limited amount of evidence to indicate that polysaccharides are in fact responsible for the
biological effects of these medicinal mushrooms. Recently, many research groups have begun
identification of active low-MW compounds in medicinal mushrooms, with a focus on the yellow
polyphenol pigments, which are composed of a styrylpyrone class of compounds. Interestingly, a
representative group of medicinal fungi, including P. linteus, P. igniarius, P. ribis, I. obliquus and I.
xeranticus were shown to produce a large and diverse range of styrylpyrone-type polyphenol pigments
that exhibited various biological activities, including anti-oxidative, anti-inflammatory, cytotoxic, antiplatelet aggregation, anti-diabetic, anti-dementia and anti-viral effects. Styrylpyrone pigments in
mushrooms are thought to have a role similar to that of flavonoids in plants. The unique and
unprecedented carbon skeleton of fused styrylpyrone might be an attractive molecular scaffold for
pharmacological applications. In this review, the structural diversity, biological effects and biogenesis of
styrylpyrone-class polyphenols from medicinal fungi are described.
Анализ антиоксидантной метаболитов путем экстракции из склероции Inonotus obliquus (Чага).
Склероции Inonotus obliquus (Чага) эффективны терапевтические агенты для лечения нескольких
человеческих злокачественных опухолей и других заболеваний без неприемлемых токсических
побочных эффектов.
Цель:
Исследовать эффекты растворителя на метаболические профили и деятельность антиоксидантов
экстрактов Чаги.
Методика:
Чага был извлечен с помощью петролейного эфира, хлороформа, этилацетата, ацетона, этанола и
воды. Эффекты растворителя на метаболиты в экстракты были проанализированы методом ЯМР на
основе микрофлюидика анализа. Антиоксидант деятельности были указаны в качестве потенциала
для нейтрализации супероксид-анион, DPPH и гидроксильные радикалы.
Результаты:
Петролейный эфир и хлороформ извлекает содержащуюся в первую очередь lanostane типа
тритерпеноиды (LT), в то время как экстракты этилацетата, ацетона и этанола характеризуется
преобладающим присутствием hispidin аналогов и LT, и водные экстракты, полисахариды и
фенольные соединения. В этилацетат, ацетон, этанол и вода, экстракты выявил значительный
потенциал для очистки испытуемой радикалы, а те, петролейного эфира и хлороформа не.
Полифенолы являются основными факторами для закалки проверенные свободных радикалов, в то
время как в ЛТ только соединений 16, 17 и 22 приняли участие в очистки гидроксильных радикалов.
Вывод:
Полифенолы в Чагу принципы для гашения свободных радикалов, в то время как полисахариды и
некоторые LT соединений способствуют частично в очистки DPPH и гидроксильных радикалов,
соответственно. На основе ЯМР микрофлюидика анализ-это полезный метод, с помощью которого
соотнести 1H-ЯМР спектры Чага экстрактов с антиоксидантными деятельности, и это позволяет
предсказать потенциал для нейтрализации свободных радикалов методом 1Н-ЯМР спектроскопии.
Phytochem Anal. 2011 Mar-Apr;22(2):95-102. doi: 10.1002/pca.1225. Epub 2011 Jan 24.
Analysis of antioxidant metabolites by solvent extraction from sclerotia of Inonotus obliquus (Chaga).
Zheng W1, Zhang M, Zhao Y, Miao K, Pan S, Cao F, Dai Y.
Author information
39

1Key
Laboratory for Biotechnology on Medicinal Plants of Jiangsu Province, Xuzhou Normal
University, Xuzhou 221116, China. [email protected]
The sclerotia of Inonotus obliquus (Chaga) are effective therapeutic agents to treat several human
malignant tumours and other diseases without unacceptable toxic side-effects.
OBJECTIVE:
To investigate solvent effects on metabolic profiles and antioxidant activities of extracts of Chaga.
METHODOLOGY:
Chaga was extracted by petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, acetone, ethanol and water.
Solvent effects on metabolites in the extracts were assayed by NMR-based metabolomic analysis.
Antioxidant activities were indicated as capacities for scavenging superoxide anion, DPPH and hydroxyl
radicals.
RESULTS:
Petroleum ether and chloroform extracts contained primarily lanostane-type triterpenoids (LT),
whereas the extracts of ethyl acetate, acetone and ethanol were characterised by the predominant
presence of hispidin analogues and LT, and water extracts by polysaccharides and phenolic compounds.
The ethyl acetate, acetone, ethanol and water extracts revealed remarkable potential for scavenging the
tested radicals, while those of petroleum ether and chloroform did not. Polyphenols are the major
contributors for quenching the tested free radicals, while in LT only compounds 16, 17 and 22 participated
in scavenging hydroxyl radicals.
CONCLUSION:
Polyphenols in Chaga are the principles for quenching free radicals while polysaccharides and a few LT
compounds contribute partially in scavenging DPPH and hydroxyl radicals, respectively. NMR-based
metabolomic analysis is a useful method by which to correlate ¹H-NMR spectra of Chaga extracts with
their antioxidant activities, and this allows the prediction of potentials for scavenging free radicals by ¹HNMR spectroscopy.
Иммуностимулирующей активностью, полисахариды, изолированные от плодовые тела
Inonotus obliquus.
В этом исследовании мы исследовали иммуностимулирующей активности полисахаридов
изолирован от плодовые тела Inonotus obliquus (PFIO). Кроме того, сигнальные пути PFIOопосредованной активации макрофагов исследовали в RAW264.7 макрофагальных клеток. Мы
обнаружили, что PFIO был способен продвижения нет/ROS производства, TNF-α секреторной и
фагоцитарной поглощение в макрофагах, а также клеточную пролиферацию, comitogenic эффект и
IFN-γ/IL-4 секрета в спленоцитов мыши. PFIO был способен индуцировать фосфорилирование трех
MAPKs, а также ядерной транслокации NF-b, что приводит к его активации RAW264.7 макрофагов.
PFIO также индуцированное ингибирование TNF-α секреции анти-TLR2 маб, следовательно, PFIO
могут быть вовлечены в TNF-α секреции через TLR2 рецепторов. Кроме того, наши результаты
показали, что пероральное введение PFIO подавлено in vivo роста опухоли меланомы в
tumorbearing мышей. В заключение, наши опыты представили, что PFIO эффективно способствует
активации макрофагов через MAPK и NF-b сигнальные пути, предполагая, что PFIO потенциально
могут регулировать иммунный ответ.
Mol Cells. 2011 Feb;31(2):165-73. doi: 10.1007/s10059-011-0022-x. Epub 2010 Dec 22.
Immunostimulating activity by polysaccharides isolated from fruiting body of Inonotus obliquus.
Won DP1, Lee JS, Kwon DS, Lee KE, Shin WC, Hong EK.
Author information
1Department of Bioengineering and Technology, Kangwon National University, Chuncheon, Korea.

Abstract
In this study, we investigated the immunostimulating activity of polysaccharides isolated from fruiting
body of Inonotus obliquus (PFIO). Additionally, the signaling pathway of PFIO-mediated macrophage
activation was investigated in RAW264.7 macrophage cells. We found that PFIO was capable of promoting
NO/ROS production, TNF-α secretion and phagocytic uptake in macrophages, as well as cell proliferation,
40
comitogenic effect and IFN-γ/IL-4 secretion in mouse splenocytes. PFIO was able to induce the
phosphorylation of three MAPKs as well as the nuclear translocation of NF-κB, resulting in activation of
RAW264.7 macrophages. PFIO also induced the inhibition of TNF-α secretion by anti-TLR2 mAb,
consequently, PFIO might be involved in TNF-α secretion via the TLR2 receptor. In addition, our results
showed that oral administration of PFIO suppressed in vivo growth of melanoma tumor in tumorbearing
mice. In conclusion, our experiments presented that PFIO effectively promotes macrophage activation
through the MAPK and NF-κB signaling pathways, suggesting that PFIO may potentially regulate the
immune response.
Введение
Рак является одной из главных причин человеческой смертности во всем мире. Существует
множество противораковых методов лечения, включая химиотерапию и противораковых
препаратов, которые, как известно, вызывают побочные эффекты, такие как повреждение
иммунной системы. Поэтому необходимо исследовать новые противоопухолевые препараты,
которые повышают иммунитет без вреда для хозяина. Грибы привлекли много внимания в
последнее время в биохимических и медицинских областях из-за их полезных терапевтических
эффектов (Balkwill, 2009). Особенно, Inonotus obliquus (I. obliquus), традиционный лекарственный
гриб, широко используется для укрепления здоровья и долголетия. I. obliquus известен как гаревой
носище и принадлежит Hymenochaetaceae семья (Zhong et al., 2009).
Недавно его попытались исследовать активные вещества I. obliquus участвует в профилактике
различных заболеваний, таких как рак (Kim et al., 2006 г.) и сердечно-сосудистых заболеваний (Cui et
al., 2005). Биологические модификаторы реакции, полученных из грибов все чаще используются для
лечения широкого спектра клинических условиях, с относительно небольшим количеством знания
их способы действия. Особенно, полисахариды считаются одной из основных активных веществ в
грибах (Dalmo и Bøgwald, 2008). Полисахариды, изолированные от грибов может иметь
значительное воздействие на состояние врожденного и адаптивного иммунного ответа и,
следовательно, имеют потенциал в качестве иммуностимуляторов с широкой клинической и
медицинского применения (Ooi и Лю, 2000; Tsan и Baochong, 2007).
Иммуностимуляция рассматривается как одна из важных стратегий для улучшения защитный
механизм тела у пожилых людей, а также больных раком (Borchers et al., 2004; 2008). Существует
значительное количество экспериментальных доказательств, свидетельствующих о том, что
полисахариды образуют грибы повысить самых иммунной системы за счет стимуляции
естественных киллеров (NK-клеток), T-клетки, B-клетки и макрофаги-зависимых иммунных реакций
(Kim et al., 2006; затишье et al., 2005). Среди них Т-клетки характеризуются как CD4+ Th1 клетки или
CD8+ Th2 клетки на основе их функциональных возможностей и цитокинового профилей. Th1 клетки
секретируют интерферон (IFN)-γ и стимулируют клеточный иммунитет, в то время как Th2-клетки
секретируют IL-4 и IL-10 и активации гуморального иммунитета. Поскольку цитокинов,
продуцируемых этими двумя суб-типы имеют различные иммунологические деятельности, баланс
между ними считается важным иммунного ответа (т. et al., 2007). Когда тело стимулируется
патологических раздражителей или травмы, фагоцитоз-это первый шаг в макрофагального ответа
на патогены. Кроме того, макрофаги могут защитить против возбудителя инвазии секреции
провоспалительных цитокинов [например,, фактор некроза опухоли (TNF)-α и IL-1] (Balkwill, 2009) и
высвобождение цитотоксического и воспалительных молекул [например,, оксида азота (NO) и
активных форм кислорода (АФК)] (Карини et al., 2004; Goossens et al., 1995).
В этом исследовании мы показали, что PFIO может повысить иммуностимулирующей
активностью, таких как пролиферация клеток, выброс токсичных молекул, фагоцитарной
поглощения и секреции цитокинов у мышиных спленоцитов и макрофагов. И потом, митогенактивированной протеинкиназы (MAPKs) и ядерного фактора-b (NF-b) сигнального пути, PFIO на
макрофаг-опосредованную иммунную реакцию системы была также продемонстрирована.
Наконец, мы показали, что PFIO подавлено in vivo рост меланомы в экспериментальной мышиной
модели.
41
INTRODUCTION
Cancer is one of the major causes of human death worldwide. There are many anti-cancer therapies
available, including chemotherapy and anti-cancer drugs, which are known to cause adverse effects such
as injury to the immune system. Therefore, it is necessary to investigate novel anti-tumor drugs that
improve immunity without harming the host. Mushrooms have attracted much attention recently in the
biochemical and medical fields due to their useful therapeutic effects (Balkwill, 2009). Especially, Inonotus
obliquus (I. obliquus), a traditional medicinal mushroom, has been widely used to promote health and
longevity. I. obliquus is known as cinder conk and belongs to the Hymenochaetaceae family (Zhong et al.,
2009).
Recently, it was tried to investigate the active substances of I. obliquus involved in the prevention of
various diseases such as cancer (Kim et al., 2006) and cardiovascular diseases (Cui et al., 2005). The
biological response modifiers derived from mushrooms are increasingly being used to treat a wide variety
of clinical conditions, with relatively little knowledge of their modes of action. Especially, polysaccharides
are considered to be one of the major active substances in mushrooms (Dalmo and Bøgwald, 2008).
Polysaccharides isolated from mushrooms can have significant effects on the innate and adaptive immune
response and therefore have the potential as immunostimulators with wide clinical and medicinal
applications (Ooi and Liu, 2000; Tsan and Baochong, 2007).
Immunostimulation is regarded as one of the important strategies to improve the body’s defense
mechanism in elderly people as well as cancer patients (Borchers et al., 2004; 2008). There is a significant
amount of experimental evidence suggesting that polysaccharides form mushrooms enhance the most
immune system by stimulating natural killer (NK) cells, T cells, B cells and macrophages-dependent
immune responses (Kim et al., 2006; Lull et al., 2005). Among them, T cells are characterized as either
CD4+ Th1 cells or CD8+ Th2 cells based on their functional capabilities and cytokine profiles. Th1 cells
secrete interferon (IFN)-γ and stimulate cell-mediated immunity, whereas Th2 cells secrete IL-4 and IL-10
and activate humoral immunity. Since the cytokines produced by these two sub-types have different
immunological activities, balance between them is considered to be important to the immune response
(So et al., 2007). When the body is stimulated by pathologic stimuli or injury, phagocytosis is the first step
in the macrophage response to pathogens. In addition, macrophages can defend against pathogen
invasion by secreting pro-inflammatory cytokines [e.g., tumor necrosis factor (TNF)-α and IL-1] (Balkwill,
2009) and releasing cytotoxic and inflammatory molecules [e.g., nitric oxide (NO) and reactive oxygen
species (ROS)] (Carini et al., 2004; Goossens et al., 1995).
In this study, we demonstrated that PFIO can enhance immunostimulating activity such as cell
proliferation, the release of toxic molecules, phagocytic uptake, and cytokine secretion in mouse
splenocytes and macrophages. And then, mitogen-activated protein kinases (MAPKs) and nuclear factorκB (NF-κB) signaling pathway by PFIO on macrophage-mediated immune system responses was also
demonstrated. Finally, we demonstrated that PFIO suppressed in vivo growth of melanoma in an
experimental mouse model.
Обсуждение
Различные гриб-производные полисахаридов используются в качестве средства правовой защиты
и агентов для профилактики рака и иммунных нарушений, и так далее (Гудридж et al., 2009; Kim et
al., 2004а). Например, полисахариды, извлеченные из грибов, таких как L. edodes (Lee et al., 2008), Т.
matsutake (Российская Федерация et al., 2009), H. erinaceus (Son et al., 2006 г.) и I. obliquus (Kim et al.,
2006 г.) хорошо известно, обладают важным иммуностимулирующее prop-erties. Однако
сигнальный путь к активации иммуноцитов, такие как макрофаги и т-клетки, полисахариды,
изолированные от I. obliquus до сих пор неясно. Таким образом, в данном исследовании,
иммуностимулирующей активности PFIO на макрофаги и т-клеток оценивали, и сигнальный путь
участвует в макрофаг-опосредованной иммунной реакции PFIO было продемонстрировано.
Активация макрофагов и т-клеток считается одним из самых важных событий произошло после
заражения. Кратко, после заражения, макрофаги опосредуют фагоцитоз через врожденного
иммунного ответа. В ходе фагоцитарный процесс, активированные макрофаги продуцируют
несколько воспалительные и цитотоксические молекулы, такие как нет, ОРУ и TNF-α (Balkwill, 2009;
Kuo et al., 2005 г.). Кроме того, макрофаги выступают в качестве акцессорных клеток в
42
представлении шествие антигена T-клеткам, а также эффекторов клеточного иммунного ответа
против опухолевых клеток и внутриклеточных микроорганизмов. С другой стороны, Т-клетки
способны пролиферировать и впоследствии секретировать цитокины двух разных типов (Neves et
al., 2009; Tsan и Baochong, 2007), в том числе Th1 и Th2 типа клеточного ответа. В настоящем
исследовании, PFIO заметно увеличилась пролиферацию спленоцитов мыши в зависимости от дозы
и показали значительное comitogenic влияние на Кона-активированных спленоцитов. Кроме того,
PFIO усиленной IFN-γ и IL-4 секрета, которые, PFIO может стимулировать как Th1 и Th2 типа ответов,
сохраняя баланс (Fujihara et al., 2003; Kidd, 2003). Кроме того, PFIO была способна повышение
продукции NO, ROS поколения и TNF-α секреции в перитонеальных макрофагов мыши и RAW264.7
клеток. PFIO также усиленной фагоцитарной способности RAW264.7 клеток и перитонеальных
макрофагов мыши in vitro и in vivo. В частности, PFIO-индуцированной никакого производства не
было принято под влиянием лечения с PMB (декапептидов циклических антибиотик с сильной
привязки сродство для липида а эндотоксина) (Schorey и Cooper, 2003), и, следовательно,
повышение продукции NO, казалось, не будет из-за эндотоксин загрязнения.
Ранее сообщалось, что LPS, мощный фактор активации макрофагов, индуцирует NF-b активации и
фосфорилирования MAPKs, например ERK1/2, JNK и p38, в макрофагах (Kim et al., 2004; Lee et al.,
2009a). MAPKs семья из serime/ треонин протеинкиназ, участвующих в инициации NF-b активация
следующие различные внеклеточные стимулы, такие как LPS, провоспалительных цитокинов,
полисахариды и т.д. (Schorey и Cooper, 2003). Фосфорилирование MAPKs можете соответственно
активировать транскрипцию нескольких целей, таких как NF-b (Chang et al., 2010) и AP-1 (Zaidman et
al., 2005 г.). Поэтому в настоящем исследовании предпринята попытка продемонстрировать
активацию NF-b и все три MAPK пути PFIO во RAW264.7 активации макрофагов. Наши результаты
показали, что все три MAPKs были фосфорилированных в RAW264.7 макрофагов. Кроме того,
блокада их путем фосфорилирования специфических ингибиторов (PD98059, ЭРК ингибитора;
SP600125, ингибитор JNK; и SB20358, ингибитор p38) также подавляются как LPS - и PFIOиндуцированной фагоцитарной поглощения. NF-b транскрипционные факторы представляют собой
семейство структурно родственных эукариотических факторов транскрипции, которые играют
важную роль в контроле за большого количества нормальных клеточных и целом-компенсаторных
реакций организма, таких как иммунные и воспалительные реакции, клеточный рост, апоптоз, и так
далее. В покоящихся клетках, неактивные NF-b комплексы существуют в виде латентной форме в
цитозоле с помощью нековалентных взаимодействий с IκBα. В ответ на различные стимулы,
цитозольной IκBα фосфорилирован, который вызывает транслокацию цитозольной NF-b в ядро
(Kumar et al., 2004) и активации экспрессии генов (Zaidman et al., 2005 г.). Наши результаты
показали, что уровень экспрессии цитозольной NF-b уменьшается, в то время как уровень
экспрессии ядерного NF-b были увеличены на LPS - или PFIO-индуцированной RAW264.7 активации
макрофагов. Кроме того, лечение с SN50 и BAY11-7082, ингибиторы NF-b ядерных транслокации,
эффективно ингибирует активацию NF-b ком-плексах и фосфорилирования IκB, и, следовательно,
подавляться, как LPS - и PFIO-индуцированной фагоцитарной поглощения. Хотя основным
рецептором для полисахаридов в грибковых иммунитет, как известно, является dectin-1 (Herre et al.,
2004 г.), несколько Ррсс, таких как TLR2, TLR4 и CR3 (Schepetkin и Куинн, 2006; Yoon et al., 2000) также
было показано, участвует в ответе растений-производных полисахаридов. Таким образом, это
исследование исследовали, являются ли эти молекулы способны выступать в качестве рецептора
для PFIO в модуляции активации макрофагов через PFIO-индуцированной TNF-α секреции. Наши
результаты показали, что TLR2, но не TLR4, dectin-1 и CR3 были вовлечены в PFIO-индуцированной
TNF-α секреции, похожими на предыдущие отчеты (Herre et al., 2004; Lee et al., 2008).
Сообщалось, что пероральном и внутрибрюшинном введении эндо-полисахариды, извлеченные
из I. obliquus тормозит in vivo рост клеток меланомы у мышей через гуморального иммунитета
защитной системы (Kim et al., 2005; 2006). Наши результаты показали, что пероральный прием
оказался эффективным для ингибирования солидной опухоли меланома. В частности,
предварительное пероральное введение PFIO было более быстрым и эффективным для
ингибирования солидной опухоли меланома, чем после перорального приема. Эти результаты
позволяют предположить, что ингибирование солидной опухоли меланома произошло через
43
регуляция и активация кишечной иммунной системы. β-глюканы, основной составляющей
полисахаридов, принимается кишечных макрофагов, по истечении которого он переносится в
лимфатических узлах, селезенке и костном мозге; соответственно, можно сделать вывод, что
пероральное введение полисахаридов в качестве эффективного и парентерального введения для
защиты против возбудителя инфекции (Rop et al., 2009; Вольман et al., 2008). Таким образом,
результаты наших исследований выяснено, что противоопухолевый эффект PFIO, возможно, было
оказано за счет активации нескольких иммунный ответ системы (Youn et al., 2009).
Взятые вместе, наши результаты подтверждают тот факт, что PFIO была мощной
иммуностимулирующей активностью in vitro и in vivo. PFIO усиленной митогенных и comitogenic
деятельности спленоцитов мыши и индуцированных IL-4 и IFN-γ секреции. Кроме того, PFIO может
быть индуцированная регуляция нет, ROS, TNF-α и фагоцитоза MAPKs и NF-b сигнальных путей,
через TLR2 рецепторов в макрофаги. Наши исследования также демонстрировали, что PFIO подавил
in vivo рост солидной опухоли меланома в экспериментальной мышиной модели после того, как
предварительные устные и после перорального применения.
DISCUSSION
Various mushroom-derived polysaccharides are used as remedies and prevention agents for cancer and
immune disorders, and so on (Goodridge et al., 2009; Kim et al., 2004a). For instance, polysaccharides
extracted from mushrooms such as L. edodes (Lee et al., 2008), T. matsutake (Byeon et al., 2009), H.
erinaceus (Son et al., 2006) and I. obliquus (Kim et al., 2006) are well-known to possess important
immunostimulating prop-erties. However, the signaling pathway toward the activation of immunocytes
such as macrophages and T cells by polysaccharides isolated from I. obliquus is still unclear. Therefore, in
this study, immunostimulating activity by PFIO on macrophages and T cells was evaluated, and the
signaling pathway involved in macrophage-mediated immune response by PFIO was demonstrated.
The activation of macrophages and T cells is considered to be one of the most important events
happened after infection. Briefly, after infection, macrophages mediate phagocytosis through the innate
immune response. During the phagocytic process, activated macrophages produce several inflammatory
and cytotoxic molecules such as NO, ROS and TNF-α (Balkwill, 2009; Kuo et al., 2005). Moreover,
macrophages act as accessory cells in the presenting procession of an antigen to T cells as well as
effectors in cell-mediated immune response against tumor cells and intracellular microorganisms. On the
other hand, T cells are able to proliferate and subsequently to secrete the cytokines of two different types
(Neves et al., 2009; Tsan and Baochong, 2007), including Th1 and Th2 type cellular response. In the
present study, PFIO remarkably increased the proliferation of mouse splenocytes in a dose-dependent
manner and showed a significant comitogenic effect on ConA-activated splenocytes. Furthermore, PFIO
enhanced IFN-γ and IL-4 secretion, that is, PFIO could stimulate both the Th1 and Th2 type responses
while maintaining balance (Fujihara et al., 2003; Kidd, 2003). In addition, PFIO was capable of enhancing
NO production, ROS generation and TNF-α secretion in mouse peritoneal macrophages and RAW264.7
cells. PFIO also enhanced the phagocytic abilities of RAW264.7 cells and mouse peritoneal macrophages in
vitro and in vivo. In particular, PFIO-induced NO production was not affected by treatment with PMB (a
decapeptide cyclic antibiotic with strong binding affinity for endotoxin lipid A) (Schorey and Cooper,
2003), and therefore enhancement of NO production seemed not to be due to endotoxin contamination.
It was previously reported that LPS, a potent macrophage activation factor, induced NF-κB activation
and phosphorylation of MAPKs, such as ERK1/2, JNK and p38, in macrophages (Kim et al., 2004b; Lee et
al., 2009a). MAPKs are a family of serime/ threonine protein kinases that participate in the initiation of
NF-κB activation following various extracellular stimuli such as LPS, pro-inflammatory cytokines,
polysaccharides, and so on (Schorey and Cooper, 2003). Phosphorylation of MAPKs can accordingly
activate the transcription of several targets such as NF-κB (Chang et al., 2010) and AP-1 (Zaidman et al.,
2005). Therefore, this study attempted to demonstrate the activation of NF-κB and all three MAPK
pathways by PFIO during RAW264.7 macrophage activation. Our results showed that all three MAPKs
were phosphorylated in RAW264.7 macrophages. Moreover, blockade of their phosphorylation by specific
inhibitors (PD98059, ERK inhibitor; SP600125, JNK inhibitor; and SB20358, p38 inhibitor) also suppressed
both LPS- and PFIO-induced phagocytic uptake. NF-κB transcription factors are a family of structurally
related eukaryotic transcription factors that play an essential role in controlling a large number of normal
44
cellular and whole-organism responses, such as the immune and inflammatory responses, cellular growth,
apoptosis, and so on. In resting cells, inactive NF-κB complexes exist as a latent form in the cytosol via
non-covalent interaction with IκBα. In response to various stimuli, cytosolic IκBα is phosphorylated, which
causes translocation of cytosolic NF-κB into the nucleus (Kumar et al., 2004) and activation of gene
expression (Zaidman et al., 2005). Our results showed that expression levels of cytosolic NF-κB were
decreased, whereas expression levels of nuclear NF-κB were increased on LPS- or PFIO-induced RAW264.7
macrophage activation. Moreover, treatment with SN50 and BAY11-7082, inhibitors of NF-κB nuclear
translocation, effectively inhibited the activation of NF-κB com-plexes and the phosphorylation of IκB, and
consequently suppressed both LPS- and PFIO-induced phagocytic uptake. Although the major receptor for
polysaccharides in fungal immunity is known to be dectin-1 (Herre et al., 2004), several PRRs such as TLR2,
TLR4 and CR3 (Schepetkin and Quinn, 2006; Yoon et al., 2000) have also been shown to participate in the
response to plant-derived polysaccharides. Therefore, this study investigated whether these molecules
are capable of acting as a receptor for PFIO in the modulation of macrophage activation through PFIOinduced TNF-α secretion. Our results showed that TLR2 but not TLR4, dectin-1 and CR3 were involved in
PFIO-induced TNF-α secretion, similar to previous reports (Herre et al., 2004; Lee et al., 2008).
It has been reported that oral and intraperitoneal administration of endo-polysaccharides extracted
from I. obliquus inhibits the in vivo growth of melanoma cells in mice via humoral immunity of the host
defense system (Kim et al., 2005; 2006). Our results showed that oral administration was effective for
inhibition of melanoma solid tumor. In particular, pre-oral administration of PFIO was more rapid and
effective for the inhibition of melanoma solid tumor than post-oral administration. These results
suggested that inhibition of melanoma solid tumor occurred through upregulation and activation of the
intestinal immune system. β-glucans, a major component of polysaccharides, is taken up by intestinal
macrophages, after which it is transported to lymph nodes, spleen and bone marrow; accordingly, it can
be concluded that oral administration of polysaccharides in as effective as parenteral administration for
protecting against pathogen infections (Rop et al., 2009; Volman et al., 2008). Therefore, our results
elucidated that the anti-tumor effects of PFIO may have been exerted through activation of several
immune response systems (Youn et al., 2009).
Taken together, our results provided evidence that PFIO had potent immunostimulating activity in vitro
and in vivo. PFIO enhanced the mitogenic and comitogenic activities of mouse splenocytes and induced IL4 and IFN-γ secretion. Furthermore, PFIO might be induced upregulation of NO, ROS, TNF-α and
phagocytosis by MAPKs and NF-κB signaling pathways via the TLR2 receptor in macrophages. Our study
also exhibited that PFIO suppressed the in vivo growth of melanoma solid tumor in an experimental
mouse model after both pre-oral and post-oral administration.
Экстракт гриб Чага (Inonotus obliquus) стимулирует 3T3-L1 дифференциации адипоцитов.
Чага гриб (Inonotus obliquus) издавна используются как в народной медицине из-за его
многочисленных биологических функций, таких как антибактериальные, противоаллергические,
противовоспалительные и антиоксидантные деятельности. В настоящем исследовании было
установлено, что I. obliquus горячий водный экстракт (IOWE) активированный adipogenesis из 3T3-L1
preadipocytes. Даже в отсутствие adipogenic раздражители с помощью инсулина, IOWE сильно
индуцированной adipogenesis из 3T3-L1 preadipocytes. Основной составляющей IOWE был глюкозыбогатый полисахаридов с молекулярной массой 149 кда. IOWE усиленной дифференциации 3T3-L1
preadipocytes, повышение ТГ (триглицеридов) накопления, что является критичным для
приобретения адипоцитов фенотип, в зависимости от дозы образом. IOWE стимулированной
экспрессии Гена C/EBPα (CCAAT/enhancer-binding protein-α) и PPARγ (пероксисом пролифераторактивирующие рецепторы γ) в процессе дифференцировки адипоцитов, так и индуцированной
экспрессии PPARγ генов-мишеней, таких как aP2 (адипоцитов белка 2), LPL (липопротеинлипазы) и
CD36 (жирные кислоты translocase). Иммуноблот анализ показал, что IOWE повышенная экспрессия
adipogenic таких производителей, как PPARγ и GLUT4 (glucose transporter 4). В luciferase reporter
assay показал, что IOWE не выставлять лиганда PPARγ активностью. Хотя эти результаты требуют
дальнейшего изучения, способность природных гриб продукт для увеличения PPARγ
45
транскрипционной деятельность может быть как ожидается, будет терапевтических мишеней для
дислипидемии и диабета 2 типа.
Phytother Res. 2010 Nov;24(11):1592-9. doi: 10.1002/ptr.3180.
Extract of Chaga mushroom (Inonotus obliquus) stimulates 3T3-L1 adipocyte differentiation.
Joo JI1, Kim DH, Yun JW.
Author information
1Department of Biotechnology, Daegu University, Kyungsan, Kyungbuk 712-714, Korea.

Abstract
Chaga mushroom (Inonotus obliquus) has long been used as a folk medicine due to its numerous
biological functions such as antibacterial, antiallergic, antiinflammatory and antioxidative activities. In the
present study, it was found that the I. obliquus hot water extract (IOWE) activated adipogenesis of 3T3-L1
preadipocytes. Even in the absence of adipogenic stimuli by insulin, the IOWE strongly induced
adipogenesis of 3T3-L1 preadipocytes. The major constituent of IOWE was glucose-rich polysaccharides
with a molecular mass of 149 kDa. IOWE enhanced the differentiation of 3T3-L1 preadipocytes, increasing
TG (triacylglycerol) accumulation that is critical for acquisition of the adipocyte phenotype, in a dosedependent manner. IOWE stimulated gene expression of C/EBPα (CCAAT/enhancer-binding protein α) and
PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptors γ) during adipocyte differentiation, and induced the
expression of PPARγ target genes such as aP2 (adipocyte protein 2), LPL (lipoprotein lipase) and CD36
(fatty acid translocase). Immunoblot analysis revealed that IOWE increased the expression of adipogenic
makers such as PPARγ and GLUT4 (glucose transporter 4). The luciferase reporter assay demonstrated
that IOWE did not exhibit PPARγ ligand activity. Although these results require further investigation, the
ability of natural mushroom product to increase PPARγ transcriptional activities may be expected to be
therapeutic targets for dyslipidemia and type 2 diabetes.
Благотворное действие этанольного экстракта в сухом веществе культуры, бульон из Inonotus
obliquus в глубинной культуре на состояние антиоксидантной системы защиты и регенерации βклеток поджелудочной железы при экспериментальном диабете у мышей.
В antihyperglycaemic и antilipidperoxidative влияние этанольного экстракта в сухом веществе
культуры бульон (DMCB) Inonotus obliquus были исследованы в alloxan-индуцированных
диабетических мышей и возможный механизм действий был также обсужден. В alloxanиндуцированных диабетических мышей, лечение с этанольного экстракта из DMCB I. obliquus (30 и
60 мг / кг(-1) вес тела (б.Вт.) в течение 21 дня), показали значительное снижение уровня глюкозы в
крови: процент сокращения на 7-е сутки были 11.54 и 11.15%, соответственно. Однако,
скармливание препарата в течение трех недель, произведенного сокращения 22.51 и 24.32%. Кроме
того, этанол выписка из DMCB I. obliquus лечения значительно снижается сыворотке крови
содержания свободных жирных кислот, общего холестерина, триглицеридов и липопротеинов
низкой плотности-холестерина, в то время как это эффективно повышает липопротеиды высокой
плотности-холестерин, уровень инсулина и гликогена в печени и содержание в печени
диабетических мышей. Кроме этого, этанол, экстракты из DMCB лечения значительно увеличилось
каталазы, супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы, за исключением уменьшения
малеинового диальдегида уровень в диабетических мышей. Гистологическую морфологию
экспертиза показала, что этанольный экстракт из DMCB и. obliquus восстановил повреждение
тканей поджелудочной железы у мышей с диабетом. Результаты показали, что этанольный экстракт
из DMCB I. obliquus обладает значительным antihyperglycaemic, antilipidperoxidative и
антиоксидантный эффекты в alloxan-индуцированных диабетических мышей.
Nat Prod Res. 2010 Apr;24(6):542-53. doi: 10.1080/14786410902751009.
Beneficial effects of the ethanol extract from the dry matter of a culture broth of Inonotus obliquus in
submerged culture on the antioxidant defence system and regeneration of pancreatic beta-cells in
experimental diabetes in mice.
Xu HY1, Sun JE, Lu ZM, Zhang XM, Dou WF, Xu ZH.
Author information
46

1Laboratory
of Pharmaceutical Engineering, School of Medicine and Pharmaceutics, Jiangnan
University, Wuxi 214122, PR China.
Abstract
The antihyperglycaemic and antilipidperoxidative effects of the ethanol extract from the dry matter of a
culture broth (DMCB) of Inonotus obliquus were investigated in alloxan-induced diabetic mice and the
possible mechanism of action was also discussed. In alloxan-induced diabetic mice, treatment with the
ethanol extract from DMCB of I. obliquus (30 and 60 mg kg(-1) body weight (b.w.) for 21 days) showed a
significant decrease in blood glucose level: the percentage reductions on the 7th day were 11.54 and
11.15%, respectively. However, feeding of this drug for three weeks produced reduction of 22.51 and
24.32%. Furthermore, the ethanol extract from the DMCB of I. obliquus treatment significantly decreased
serum contents of free fatty acids, total cholesterol, triglycerides and low-density lipoprotein-cholesterol,
whereas it effectively increased high-density lipoprotein-cholesterol, insulin levels and hepatic glycogen
contents in livers of diabetic mice. Besides this, the ethanol extracts from the DMCB treatment
significantly increased catalase, superoxide dismutase and glutathione peroxidase activities, except for
decreasing the maleic dialdehyde level in diabetic mice. Histological morphology examination showed
that the ethanol extract from the DMCB of I. obliquus restored the damage of pancreatic tissues in mice
with diabetes mellitus. The results showed that the ethanol extract from the DMCB of I. obliquus
possesses significant antihyperglycaemic, antilipidperoxidative and antioxidant effects in alloxan-induced
diabetic mice.
Раковых клеток цитотоксичность экстрактов и маленькие фенольных соединений из Чага
[Inonotus obliquus (персоон) Pilat].
Ранее мы изучали антиоксидантный потенциал Чага гриб [Inonotus obliquus (персоон) Pilat]
экстракты и несколько небольших изолированных (поли)фенольных соединений в качестве
основных антиоксидантных компонентов в 80% метанол (MeOH), экстракт. В настоящем
исследовании эти единичные фенольные компоненты вместе с несколькими другими типами Чага
экстракты были изучены цитотоксические эффекты в отношении нормальных (IMR90) и рак (А549,
ПА-1, U937 и HL-60) клеточных линий. Результаты показали, отвары из плодовое тело (FB) и
склероции (ST) части Чага, особенно ST части, показали, что значительная цитотоксичность по
отношению к опухолевым клеткам, но цитотоксичность сильнее оказалась против нормальных
клеток, чем раковые клетки. 80% MeOH ST экстракт также наблюдалась та же тенденция. С другой
стороны, 80% MeOH экстракт FB показали значительную цитотоксичность в отношении опухолевых
клеточных линий, не затрагивая нормальные клетки, например, 50% летальная доза составил 49,4
+/- 2.9 микрогр/мл для ПА-1 клеток по сравнению с 123.6 +/- 13.8 микрогр/мл для нормальных
клеток. Фенольной компоненты изолированы от 80% MeOH экстракты было заметно больше
раковых клеток токсичность, чем экстракты себя. В частности, два из семи соединений показал
сильную цитотоксичность по отношению к нескольким опухолевых клеточных линиях без
возникновения значительных клеток токсичность по отношению к нормальным клеткам. Например,
50% летальная доза для 3,4-dihydroxybenzalacetone составила 12,2 micromol/Л В ПА-1 клеток, но был
272.8 micromol/Л В IMR90 клеток. Fluorescence-activated cell sorting дальнейшего анализа было
установлено, что эти фенольные ингредиенты, имеют высокие потенциальные возможности для
индукции апоптоза в ПА-1 клеток.
J Med Food. 2009 Jun;12(3):501-7. doi: 10.1089/jmf.2008.1149.
Cancer cell cytotoxicity of extracts and small phenolic compounds from Chaga [Inonotus obliquus
(persoon) Pilat].
Nakajima Y1, Nishida H, Matsugo S, Konishi T.
Author information
1Niigata University of Pharmacy and Applied Life Sciences, Japan.

Abstract
Previously, we studied the antioxidant potential of Chaga mushroom [Inonotus obliquus (persoon) Pilat]
extracts and isolated several small (poly)phenolic compounds as the major antioxidant components in the
47
80% methanol (MeOH) extract. In the present study, these isolated phenolic ingredients together with
several other types of Chaga extracts were examined for cytotoxic effects against normal (IMR90) and
cancer (A549, PA-1, U937, and HL-60) cell lines. Results revealed decoctions from both the fruiting body
(FB) and sclerotium (ST) parts of Chaga, especially the ST part, showed considerable cytotoxicity toward
tumor cells, but the cytotoxicity appeared to be stronger against normal cells than cancer cells. The 80%
MeOH ST extract also showed the same trend. On the other hand, the 80% MeOH extract of FB showed
significant cytotoxicity towards tumor cell lines without affecting normal cells, for example, the 50% lethal
dose was 49.4 +/- 2.9 microg/mL for PA-1 cells versus 123.6 +/- 13.8 microg/mL for normal cells. The
phenolic components isolated from the 80% MeOH extracts had markedly greater cancer cell toxicity than
the extracts themselves. In particular, two out of seven compounds showed strong cytotoxicity towards
several tumor cell lines without giving rise to significant cell toxicity toward normal cells. For example, the
50% lethal dose for 3,4-dihydroxybenzalacetone was 12.2 micromol/L in PA-1 cells but was 272.8
micromol/L in IMR90 cells. Fluorescence-activated cell sorting analysis further revealed these phenolic
ingredients have high potentiality for apoptosis induction in PA-1 cells.
Противовоспалительный эффект Inonotus obliquus, Polygala senega L., Viburnum trilobum в
ячейке скрининг-анализа.
Целью исследования было оценить противовоспалительное действие гриба Inonotus obliquus
(Чага), Polygala senega (Senega) и Viburnum trilobum (Клюква) экстракт коры фракций из материалов
местного производства в липополисахарида (LPS), индуцированной мышиных макрофагов RAW
164.7 клеток.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Четыре фракции от каждого из трех экстрактов были получены: (80% этанол, извлеченные; Fa),
(водорастворимые полисахаридные фракции; Fb), (Полифенольной фракции; Fc) и (ETOAc/H(2)O
извлеченные фракции; Fd). Эти извлечения фракций были протестированы в ячейке системы
скрининга на 50,100 и 500 микрогр/мл по их способности ингибировать LPS-индуцированной
воспалительных цитокинов IL-1beta, TNFalpha и IL-6. Супернатантах от LPS в одиночку обработанные
клетки были использованы в качестве контроля. Цитокинов в супернатантах культуры клеток после
процедуры с экстрактом фракций были количественно определены методом ИФА с
использованием 96-луночных ИФА пластин.
Результаты:
Всех фракций экстрактов значительно ингибирует (p<0,05) уровни IL-1beta, IL-6 и TNFalpha, кроме
полифенольных ФК фракции Senega, которые показали повышенную продукцию IL-6. Кроме того,
каждой фракции показало доза-зависимые противовоспалительное действие. Продукции оксида
азота не влияет клюква и senega, а Чага значительно сократили производство NO в мышиных
макрофагов ячейки анализа.
Выводы:
Эти результаты показывают, что экстракты, полученные из корня Polygala senega L.), кора
Viburnum trilobum, и гриб Inonotus obliquus обладают противовоспалительными свойствами при
испытании в RAW 264.7 клеток макрофагального системы.
J Ethnopharmacol. 2009 Sep 25;125(3):487-93. doi: 10.1016/j.jep.2009.06.026. Epub 2009 Jul 3.
Anti-inflammatory effect of Inonotus obliquus, Polygala senega L., and Viburnum trilobum in a cell
screening assay.
Van Q1, Nayak BN, Reimer M, Jones PJ, Fulcher RG, Rempel CB.
Author information
1Richardson Centre for Functional Foods and Nutraceuticals, University of Manitoba, 196

Innovation Drive, Winnipeg, Manitoba R3T 6C5, Canada.
The purpose of the study was to assess the anti-inflammatory effects of the mushroom Inonotus
obliquus (Chaga), Polygala senega (Senega) and Viburnum trilobum (Cranberry) bark extract fractions
from locally produced materials in lipopolysaccharide (LPS) induced murine macrophage RAW 164.7 cells.
48
MATERIALS AND METHODS:
Four fractions from each of the three extracts were obtained: (80% ethanol extracted; Fa), (watersoluble polysaccharide fraction; Fb), (Polyphenolic fraction; Fc) and (ETOAc/H(2)O extracted fraction; Fd).
These extract fractions were tested in the cell screening system at 50,100 and 500 microg/ml for their
ability to inhibit LPS induced inflammatory cytokines IL-1beta, TNFalpha and IL-6. Supernatants from LPS
alone treated cells were used as control. The cytokines in the cell culture supernatants following
treatments with extract fractions were quantified by ELISA method, using 96 well ELISA plates.
RESULTS:
All fractions of the extracts significantly inhibited (p<0.05) the levels of IL-1beta, IL-6 and TNFalpha
except the polyphenolic Fc fraction of Senega which showed an increased production of IL-6.
Furthermore, each fraction showed a dose-dependant anti-inflammatory effect. Nitric oxide production
was not affected by cranberry and senega, while Chaga significantly reduced NO production in murine
macrophage cell assay.
CONCLUSIONS:
These results demonstrate that the extracts obtained from the root of Polygala senega L., bark of
Viburnum trilobum, and the mushroom Inonotus obliquus possess anti-inflammatory properties when
tested in a RAW 264.7 macrophage cell system.
Противоопухолевая активность водного экстракта гриб, Inonotus obliquus, против HT-29
человеческих клеток рака толстой кишки.
В текущем исследовании, было показано, что горячая вода, экстракт I. obliquus (IOWE) оказывает
ингибирующей активностью в отношении пролиферации человеческих клеток рака толстой кишки
(HT-29). Ингибиторный эффект IOWE на рост HT-29 раковых клеток оценивали путем обработки
клеток с IOWE в концентрациях 0,25, 0,5 и 1,0 мг/мл в течение 24 или 48 ч. В IOWE ингибирует рост
клеток в зависимости от дозы, и это торможение сопровождалось апоптотической гибели клеток.
Максимальное ингибирующее действие (56%) наблюдалось при IOWE лечился в концентрации 1,0
мг/мл в течение 48 ч. Апоптотической эффект IOWE на НТ-29 клеток было также подтверждено flow
cytometric analysis. Кроме того, апоптотических клеток процент был тесно связан с down-регуляции
Bcl-2 и до-регулирование Вах и каспазы-3. Результаты показывают, что IOWE бы быть полезен в
качестве противоопухолевого агента через индукцию апоптоза и ингибирование роста раковых
клеток через up-регуляции экспрессии проапоптотических белков и вниз-регулирование
антиапоптотических белков.
Phytother Res. 2009 Dec;23(12):1784-9. doi: 10.1002/ptr.2836.
Antitumor activity of water extract of a mushroom, Inonotus obliquus, against HT-29 human colon
cancer cells.
Lee SH1, Hwang HS, Yun JW.
Author information
1Department of Biotechnology, Daegu University, Kyungsan, Kyungbuk 712-714, Republic of Korea.

Abstract
In the current study, it was demonstrated that the hot water extract of I. obliquus (IOWE) exerts
inhibitory activity against the proliferation of human colon cancer cells (HT-29). The inhibitory effect of
IOWE on the growth of HT-29 cancer cells was evaluated by treating cells with IOWE at concentrations of
0.25, 0.5 and 1.0 mg/mL for 24 or 48 h. The IOWE inhibited cell growth in a dose-dependent manner, and
this inhibition was accompanied by apoptotic cell death. The maximum inhibitory effect (56%) was
observed when IOWE was treated at a concentration of 1.0 mg/mL for 48 h. The apoptotic effect of IOWE
on HT-29 cells was also confirmed by flow cytometric analysis. In addition, the apoptotic cell percentage
was closely associated with down-regulation of Bcl-2 and up-regulation of Bax and caspase-3. The results
suggest that IOWE would be useful as an antitumor agent via the induction of apoptosis and inhibition of
the growth of cancer cells through up-regulation of the expression of proapoptotic proteins and downregulation of antiapoptotic proteins.
49
Потенциальные противораковые свойства водного экстракта Inonotus [исправлено] obliquus
путем индукции апоптоза в меланомы B16-F10 клеток.
Inonotus obliquus (Чага гриб), один из широко известных лекарственных грибов, используемых
для лечения различных видов рака в России и большинство стран Балтии на протяжении многих
веков.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ:
Изучение анти-пролиферативные эффекты Inonotus obliquus выписка по меланомы B16-F10
клеток. Кроме того, оценить противоопухолевый эффект Inonotus obliquus extract in vivo мышей
Balb/c.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Водный экстракт из Inonotus obliquus исследована анти-пролиферативные эффекты на рост и
морфологию B16-F10 клетках меланомы и противоопухолевый эффект, используя in vivo мышей
Balb/c.
Результаты:
Inonotus obliquus извлечь не только подавляет рост B16-F10 клеток вызывает арест клеточного
цикла в G(0)/G(1) фазы и апоптоза, а также индуцированной дифференцировки клеток. Эти эффекты
были связаны с down-регуляции проблема, р53 и р27 выражения уровней, и дальнейшее показало,
что Inonotus obliquus экстракт привело к G(0)/G(1) клеточного цикла с уменьшением циклин E/D1 и
Cdk 2/4 уровней экспрессии. Кроме того, противоопухолевый эффект Inonotus obliquus экстракта
оценивали in vivo мышей Balb/c. Внутрибрюшинное введение Inonotus obliquus экстракт
значительно ингибирует рост опухолевых масс в B16-F10 клеток, имплантированных мышам, в
результате чего в 3 раза (относительно положительного контроля (*)p<0.05) тормозят в дозе
20мг/кг/день в течение 10 дней.
Вывод:
Это исследование показало, что водный экстракт Inonotus obliquus гриб выставлены
потенциальной противоопухолевой активностью в отношении B16-F10 клеток меланомы in vitro и in
vivo через ингибирование пролиферации и индукции дифференцировки и апоптоза опухолевых
клеток.
J Ethnopharmacol. 2009 Jan 21;121(2):221-8. doi: 10.1016/j.jep.2008.10.016. Epub 2008 Oct 25.
Potential anticancer properties of the water extract of Inonotus [corrected] obliquus by induction of
apoptosis in melanoma B16-F10 cells.
Youn MJ1, Kim JK, Park SY, Kim Y, Park C, Kim ES, Park KI, So HS, Park R.
Author information
1VestibuloCochlear Research Center and Department of Microbiology, Wonkwang University,

Iksan, Jeonbuk 570-749, South Korea.
Inonotus obliquus (Chaga mushroom), one of the widely known medicinal mushrooms, has been used
to treat various cancers in Russia and most of Baltic countries for many centuries.
AIM OF THE STUDY:
To examine the anti-proliferative effects of Inonotus obliquus extract on melanoma B16-F10 cells.
Furthermore, to assess the anti-tumor effect of Inonotus obliquus extract in vivo in Balb/c mice.
MATERIALS AND METHODS:
The water extract of Inonotus obliquus was studied for anti-proliferative effects on the growth and
morphology of B16-F10 melanoma cells and for anti-tumor effect using in vivo in Balb/c mice.
RESULTS:
Inonotus obliquus extract not only inhibited the growth of B16-F10 cells by causing cell cycle arrest at
G(0)/G(1) phase and apoptosis, but also induced cell differentiation. These effects were associated with
the down-regulation of pRb, p53 and p27 expression levels, and further showed that Inonotus obliquus
extract resulted in a G(0)/G(1) cell cycle arrest with reduction of cyclin E/D1 and Cdk 2/4 expression levels.
Furthermore, the anti-tumor effect of Inonotus obliquus extract was assessed in vivo in Balb/c mice.
Intraperitoneal administration of Inonotus obliquus extract significantly inhibited the growth of tumor
50
mass in B16-F10 cells implanted mice, resulting in a 3-fold (relative to the positive control, (*)p<0.05)
inhibit at dose of 20mg/kg/day for 10 days.
CONCLUSION:
This study showed that the water extract of Inonotus obliquus mushroom exhibited a potential
anticancer activity against B16-F10 melanoma cells in vitro and in vivo through the inhibition of
proliferation and induction of differentiation and apoptosis of cancer cells.
Lanostane типа тритерпеноидов из склероции Inonotus obliquus , обладающих
противоопухолевой пропаганды деятельности.
Два новых lanostane типа тритерпеноиды, 1 и 2, кроме двух известных lanostane типа
тритерпеноиды, 3 и 4 были изолированы от склероции Inonotus obliquus. Их структуры были
определены lanosta-8,23 E-диен-3beta,22R,25-триол (1) и lanosta-7:9(11),23E-триен-3beta,22R,25триол (2) с помощью спектральных данных. Эти соединения были протестированы на их
антиопухолевых деятельности, используя краткосрочные in vitro анализ на EBV-EA активации,
индуцированной тонн в год. Соединения 1, 2 и 4 были сильнее, чем положительный контроль,
олеаноловая кислота. Наиболее распространенный соединение 4 было исследовано для
ингибирующее действие в две стадии канцерогенеза тест на кожу с помощью мыши DMBA в
качестве инициатора и TPA в качестве промоутера. Соединение 4 было установлено, обладают
мощным противоопухолевым содействие деятельности в сфере канцерогенеза in vivo тест.
Eur J Med Chem. 2008 Nov;43(11):2373-9. doi: 10.1016/j.ejmech.2008.01.037. Epub 2008 Feb 8.
Lanostane-type triterpenoids from the sclerotia of Inonotus obliquus possessing anti-tumor
promoting activity.
Taji S1, Yamada T, Wada S, Tokuda H, Sakuma K, Tanaka R.
Author information
1Department of Medicinal Chemistry, Osaka University of Pharmaceutical Sciences, 4-20-1

Nasahara, Takatsuki, Osaka 569-1094, Japan.
Abstract
Two new lanostane-type triterpenoids, 1 and 2 besides two known lanostane-type triterpenoids, 3 and
4 were isolated from the sclerotia of Inonotus obliquus. Their structures were determined to be lanosta8,23E-diene-3beta,22R,25-triol (1) and lanosta-7:9(11),23E-triene-3beta,22R,25-triol (2) by spectral data.
These compounds were tested for their anti-tumor-promoting activity using a short-term in vitro assay for
EBV-EA activation induced by TPA. Compounds 1, 2 and 4 were stronger than the positive control,
oleanolic acid. The most abundant compound 4 was investigated for the inhibitory effect in a two-stage
carcinogenesis test on mouse skin using DMBA as an initiator and TPA as a promoter. Compound 4 was
found to exhibit the potent anti-tumor promoting activity in the in vivo carcinogenesis test.
Чага гриб (Inonotus obliquus) индуцирует G0/G1 арест и апоптоза в человеческой гепатомы
HepG2 клеток.
Исследовать анти-пролиферативной и апоптотической эффекты гриб Чага (Inonotus obliquus)
водный экстракт на гепатомы человека линии клеток, HepG2 и клетки Hep3B.
Методы:
Цитотоксичность Чага экстракт был показан по 3-[4,5-dimethylthiazol-2-ил]-2, 5-diphenyltetrazolium
бромид (МТТ) анализа. Морфологические наблюдения, проточной цитометрии анализа Вестернблот были использованы для выяснения цитотоксический механизм Чага экстракт.
Результаты:
HepG2 клетки были более чувствительны к Чаги экстракт, чем клетки Hep3B, как показали заметно
снижается жизнеспособность клеток. Чага экстракт ингибирует рост клеток в зависимости от дозы,
которая сопровождалась G0/G1-фазе ареста и апоптотической гибели клеток. Кроме того, G0/G1
арест клеточного цикла был тесно связан с down-регуляции р53, pRb, р27, cyclins D1, D2, E, циклинзависимые киназы (Cdk) 2, Cdk4 и Cdk6 выражение.
51
Вывод:
Чага гриб может дать новый терапевтический вариант, в качестве потенциального
противоопухолевого агента, в лечении гепатомы.
World J Gastroenterol. 2008 Jan 28;14(4):511-7.
Chaga mushroom (Inonotus obliquus) induces G0/G1 arrest and apoptosis in human hepatoma
HepG2 cells.
Youn MJ1, Kim JK, Park SY, Kim Y, Kim SJ, Lee JS, Chai KY, Kim HJ, Cui MX, So HS, Kim KY, Park R.
Author information
1Vestibulocochlear Research Center, Wonkwang University School of Medicine, #344-2, Shinyoung
dong, Iksan, Jeonbuk 570-749, Korea.
To investigate the anti-proliferative and apoptotic effects of Chaga mushroom (Inonotus obliquus)
water extract on human hepatoma cell lines, HepG2 and Hep3B cells.
METHODS:
The cytotoxicity of Chaga extract was screened by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium
bromide (MTT) assay. Morphological observation, flow cytometry analysis, Western blot were employed
to elucidate the cytotoxic mechanism of Chaga extract.
RESULTS:
HepG2 cells were more sensitive to Chaga extract than Hep3B cells, as demonstrated by markedly
reduced cell viability. Chaga extract inhibited the cell growth in a dose-dependent manner, which was
accompanied with G0/G1-phase arrest and apoptotic cell death. In addition, G0/G1 arrest in the cell cycle
was closely associated with down-regulation of p53, pRb, p27, cyclins D1, D2, E, cyclin-dependent kinase
(Cdk) 2, Cdk4, and Cdk6 expression.
CONCLUSION:
Chaga mushroom may provide a new therapeutic option, as a potential anticancer agent, in the
treatment of hepatoma.
Обсуждение
Несколько противораковых препаратов или соединений для лечения рака были обнаружены в
натуральных продуктах. В этом исследовании мы обнаружили, что водные экстракты из Чага гриб
(Inonotus obliquus) вызывало торможение роста человеческой гепатомы HepG2 клеток, и это было
тесно связано с арестом клеточного цикла в G0/Г1 фазы и индукции апоптоза.
У эукариот клеточный цикл регулируется путей передачи сигнала, опосредованного с помощью
ряда клеточного цикла, регуляторы. Cyclins являются положительными регуляторами клеточного
цикла и функции, формируя комплекс с Cdk. CDK ингибиторы негативных регуляторов клеточного
цикла и привязать к циклин-CDK комплексов и ингибировать активность этих комплексов[20].
Следовательно, индукция клеточного цикла и апоптоза химические препараты, может быть
эффективным подходом для лечения неконтролируемой клеточной пролиферации и выживаемости
опухолевых клеток.
В последние годы, грибные экстракты были обнаружены противовоспалительные,
противоопухолевые свойства[21]. Хотя сообщалось, что гриб Чага и другие грибы обладают
лечебными эффектами, такими как противоопухолевым, противовоспалительным и
гепатопротекторным действием[4], механизмы противовоспалительного и противоопухолевого
эффектов Чага гриб не были четко осветил[22]. В настоящем исследовании мы показали, что водный
экстракт из Чага гриб, который используется в лечении рака и болезней органов пищеварения[2],
значительно ингибирует жизнеспособность и пролиферацию, и индуцированной апоптотической
гибели клеток человеческой гепатомы HepG2 клеток (Рис. (Figure1A),1A), но этот эффект не был
найден в Чанг клетки, человеческого увековечены не опухолевых клеток линии (Рис. (Figure1C).1С).
Эти данные указывают на то, что Чага экстракт селективной цитотоксический эффект на клетках
гепатомы человека. Эта избирательность может быть большим преимуществом Чага экстракт для
терапевтического или профилактического использования в лечении рака. Хотя было несколько
сообщений о том, что многие натуральные продукты индуцируют арест клеточного цикла в
различных фазах клеточного цикла, данное исследование-это первый доклад, который показывает,
ингибиторный эффект Чага экстракт на клеточный цикл раковых клеточных линий. В этом
52
исследовании, flow cytometric analysis ясно показало, что клетки HepG2 были дозо-зависимо
арестован Чага экстракт в г0/Г1 фазе клеточного цикла (Рис. (Figure2A2А).
Блокада путей выживания или индукции апоптоза пути противораковых агентов препятствует
размножению раковых клеток, которые могут быть использованы для терапии рака[23]. р53
является опухолевым супрессором Гена, кодирующего транскрипционный фактор. Ее опухольподавляющей активности включает в себя ингибирование пролиферации клеток путем клеточного
цикла и/или апоптоза. Мутации в р53 встречается более чем в половине опухолей человека[24-26].
Таким образом, активация р53, противораковые агенты могут индуцировать остановку клеточного
цикла и апоптоз в раковых клетках, ведущих к торможению прогрессии опухоли. HepG2 имеет
функционального р53 (wt p53), однако Hep3B не имеет функционального р53 (удалить р53)[27]. В
нашем исследовании, клетки HepG2 были более чутко повреждены Чага экстракт, чем клетки Hep3B
(Рис. (Рисунок 1).1). Поэтому, мы предположили, что wt р53 играет важную роль на апоптозиндуцирующий эффект Чага экстракт в HelpG2 клеток. Однако, наши данные не показывают,
является ли активация р53 может быть посредником цитотоксичность и арест клеточного цикла в
Чагу, получавших экстракт клеток HepG2, потому что wt p53 был вниз-регулируется Чага экстракт
(Рис. (Рис. 4).4). Интересно, Park et al (2006)[28] показали, что 6-гингеролов, основным фенольным
компонентом имбиря, индуцированных G0/Г1 арест с up-регуляции p21WAF1 выражение и downрегуляции р53/pRb выражение в панкреатических раковых клеток. В настоящем исследовании внизрегулирование pRb и экспрессии белка p27 а также р53 была выявлена в Чагу, получавших экстракт
клеток HepG2. Наш главный вопрос, который осталось решить, заключается в том, что downрегуляции р53, pRB, и белка р27, тесно связанный с терминальной дифференцировки или других
сигнальных путей уровнях. Однако, к сожалению, этот вопрос не может быть решен в настоящее
время.
Эукариотического клеточного цикла предусматривает последовательные активации Cdk, чьи
активации зависит от их ассоциации с cyclins. G1-фаза остановки клеточного цикла обеспечивает
возможность для клеток либо пройти ремонт механизмов или перейдите по пути апоптоза[29].
Было высказано предположение, что Cdk деятельности Управления G1/С переходом в клетках
млекопитающих[30]. Как D - и E-типа cyclins известно, что важнейшими регуляторами в
г1/Управления, хотя в некоторых докладах подняли вероятность того, что они имеют другие
различные роли[31]. В наши результаты, мы обнаружили, что лечение с Чага экстракт вызывает
существенное снижение экспрессии циклин D1, D2 и E и Cdk 2, Cdk4, Cdk6 в клетки HepG2. Таким
образом, мы предположили, что снижение циклин или Cdk выражения привели к блокировке
циклин/Cdk комплексообразования и, что снизило уровень pRb (Рис. (Figure3).3). Когда Rb белки
остаются в unphosphorylated форме, E2F не может быть активирован, и клетки не удастся ввести Sфазы[28]. На основе данных (Рис. (Рисунок 4),4), кажется, что циклин D1 и Cdk2, и Cdk6 ответственны
за большинство клеточного цикла наблюдается в ответ Чага экстракт потому, что эти регуляторы
эффективно погибшего на низкие дозы Чага экстракт (250 мкг/мл).
Взятые вместе, мы пришли к выводу, что Чага экстракт вызывало торможение роста, г0/Г1-фаза
ареста и апоптоза в человеческой гепатомы HepG2 клеток, но не в нормальных Чанг клеток печени.
Результаты работы могут дать надежду для химиотерапии гепатомы, рак. Кроме того, более
глубокое понимание взаимодействия между фитохимические с генами, которые являются
критическими для регулирования раковых клеток новообразования будет оказывать сильное
вооружение для терапии рака.
DISCUSSION
Several anti-cancer drugs or compounds for cancer treatment have been found in natural products. In
this study, we found that aqueous extracts of Chaga mushroom (Inonotus obliquus) caused a growth
inhibition of human hepatoma HepG2 cells, and this was closely associated with the arrest of the cell cycle
in G0/G1 phase and induction of apoptosis.
The eukaryotic cell cycle is regulated by signal transduction pathways mediated by a series of cell-cycle
regulators. Cyclins are positive regulators of cell cycle progression and function by forming a complex with
CDKs. CDK inhibitors are negative regulators of the cell cycle and bind to cyclin-CDK complexes and inhibit
the activity of those complexes[20]. Therefore, induction of cell cycle arrest and apoptosis by
53
chemopreventive drugs could be an effective approach to treat uncontrolled cell proliferation and survival
in tumor cells.
In recent years, mushroom extracts have been found to have anti-inflammatory, anti-tumor
properties[21]. Although it has been reported that the Chaga mushroom and other mushrooms have
therapeutic effects such as anti-tumor, anti-inflammatory and hepatoprotective effects[4], the
mechanisms of anti-inflammatory and anti-tumor effects of the Chaga mushroom have not been clearly
elucidated[22]. In the present investigation, we showed that the water extract of the Chaga mushroom,
which has been used in the treatment of cancers and digestive system diseases[2], significantly inhibited
the viability and proliferation, and induced apoptotic cell death in human hepatoma HepG2 cells (Figure
(Figure1A),1A), but this effect was not found in Chang cells, the human immortalized non-tumor cell line
(Figure (Figure1C).1C). These data indicate that Chaga extract has selective cytotoxic effects on human
hepatoma cells. This selectivity may be the great advantage of the Chaga extract for therapeutic or
preventative use in cancer treatment. Though there were several reports that many natural products
induce cell cycle arrest in various cell cycle phases, this study is the first report that reveals the inhibitory
effect of Chaga extract on the cell cycle in cancer cell lines. In this study, flow cytometric analysis clearly
revealed that HepG2 cells were dose-dependently arrested by Chaga extract at the G0/G1 phase of the cell
cycle (Figure (Figure2A2A).
The blockade of survival pathways or the induction of apoptosis pathways by anti-cancer agents
prevents the proliferation of cancer cells, which may be exploited for cancer therapy[23]. p53 is a tumor
suppressor gene encoding a transcription factor. Its tumor-suppressive activity involves inhibition of cell
proliferation through cell cycle arrest and/or apoptosis. Mutation in p53 occurs in more than half of
human cancers[24–26]. Therefore, the activation of p53 by anticancer agents may induce the cell cycle
arrest and apoptosis in cancer cells leading to the inhibition of tumor progression. HepG2 has a functional
p53 (wt p53), however Hep3B does not have a functional p53 (delete p53)[27]. In our study, HepG2 cells
were more sensitively damaged by Chaga extract than Hep3B cells (Figure (Figure1).1). Therefore, we
speculated that wt p53 plays an important role on the apoptosis-inducing effect of Chaga extract in
HelpG2 cells. However, our data did not show whether the activation of p53 may mediate the cytotoxicity
and cell cycle arrest in Chaga extract-treated HepG2 cells, because wt p53 was down-regulated by Chaga
extract (Figure (Figure4).4). Interestingly, Park et al (2006)[28] showed that 6-gingerol, a major phenolic
component in ginger, induced G0/G1 arrest with up-regulation of p21WAF1 expression and down-regulation
of p53/pRb expression in pancreatic cancer cells. In the present study, the down-regulation of pRb and
p27 protein expression as well as p53 was detected in the Chaga extract-treated HepG2 cells. Our major
question remaining to be addressed is that the down-regulation of p53, pRB, and p27 protein, are closely
associated with the terminal differentiation or the other signaling pathways levels. However,
unfortunately, this question cannot be addressed at the present time.
Eukaryotic cell cycle progression involves sequential activation of Cdks, whose activation is dependent
upon their association with cyclins. G1-phase arrest of cell cycle progression provides an opportunity for
cells to either undergo repair mechanisms or proceed by the apoptotic pathway[29]. It has been
suggested that Cdk activities control G1/S transition in mammalian cells[30]. Both D- and E-type cyclins are
known to be important regulators in G1/S control, even though some reports raised the possibility that
they have other distinct roles[31]. In our results, we found that treatment with Chaga extract causes a
significant decrease in the expression of cyclin D1, D2 and E and Cdk 2, Cdk4, Cdk6 in HepG2 cells. Thus,
we speculated that the reduction of cyclin or Cdk expression resulted in the blocking of cyclin/Cdk
complex formation and that lowered the levels of pRb (Figure (Figure3).3). When Rb proteins remain in an
unphosphorylated form, E2F cannot be activated and the cells fail to enter the S phase[28]. Based on the
data (Figure (Figure4),4), it seems that cyclin D1 and Cdk2, and Cdk6 are responsible for most of the cell
cycle arrest observed in response to Chaga extract because these regulators are effectively deceased at
the lowest dose of Chaga extract (250 μg/mL).
Taken together, we concluded that Chaga extract induced the growth inhibition, G0/G1-phase arrest,
and apoptosis in human hepatoma HepG2 cells, but not in normal Chang liver cells. The present results
can provide new hope for chemotherapy of hepatoma cancer. Furthermore, an improved understanding
54
of the interactions between phytochemicals with the genes that are critical to the regulation of cancer cell
growths will provide strong armaments to cancer therapy.
Идентификация роман блокатор IkappaBalpha активации киназы, что усиливает апоптоз и
ингибирует пролиферацию и инвазию путем подавления ядерного фактора-kappaB.
3,4-dihydroxybenzalacetone (DBL) - полифенолов, полученных из лекарственных растений Чага
[Inonotus obliquus (персоон) Pilat]. Хотя Чага используется в России в народной медицине для
лечения опухолей, очень мало известно о его механизме действия. Потому что большинство генов,
участвующих в воспалении, антиапоптоза и пролиферации клеток регулируется фактором
транскрипции ядерного фактора-kappaB (NF-kappaB), мы предположили, что DBL деятельности,
опосредуется через модуляцию NF-kappaB активации пути. Нами было изучено влияние DBL на NFkappaB активации методом электрофоретического mobility shift assay и на NF-kappaB-регулируемой
экспрессии генов с помощью Вестерн-блот анализа. Мы обнаружили, что в DBL подавлено NFkappaB активации разнообразные воспалительные агенты, включая фактор некроза опухоли (TNF),
интерлейкин-1beta, эпидермальный фактор роста, окадаиновой кислоты, phorbol 12-myristate 13acetate, и липополисахарида. Подавление не было конкретного типа клеток и ингибирует оба
индуцибельной и конститутивной NF-kappaB активации. DBL не нарушать связывание NF-kappaB
ДНК, но скорее угнетал IkappaBalpha киназы, IkappaBalpha фосфорилирования и деградации, Р65
фосфорилирования и транслокации. DBL также подавили экспрессию TNF-индуцированной и NFkappaB-регулируемых пролиферативной, антиапоптотическим, и метастатическим генных
продуктов. Эти эффекты коррелируют с повышением TNF-индуцированного апоптоза и подавление
ФНО-индуцированного вторжения. Вместе, наши результаты указывают на то, что DBL ингибирует
NF-kappaB активации NF-kappaB-регулируемой экспрессии генов, что может объяснить способность
DBL усиления апоптоза и препятствовать вторжению.
Mol Cancer Ther. 2008 Jan;7(1):191-201. doi: 10.1158/1535-7163.MCT-07-0406.
Identification of a novel blocker of IkappaBalpha kinase activation that enhances apoptosis and
inhibits proliferation and invasion by suppressing nuclear factor-kappaB.
Sung B1, Pandey MK, Nakajima Y, Nishida H, Konishi T, Chaturvedi MM, Aggarwal BB.
Author information
1Cytokine Research Section, Department of Experimental Therapeutics, The University of Texas M.

D. Anderson Cancer Center, Unit 143, 1515 Holcombe Boulevard, Houston, TX 77030, USA.
Abstract
3,4-dihydroxybenzalacetone (DBL) is a polyphenol derived from the medicinal plant Chaga [Inonotus
obliquus (persoon) Pilat]. Although Chaga is used in Russia folk medicine to treat tumors, very little is
known about its mechanism of action. Because most genes involved in inflammation, antiapoptosis, and
cell proliferation are regulated by the transcription factor nuclear factor-kappaB (NF-kappaB), we
postulated that DBL activity is mediated via modulation of the NF-kappaB activation pathway. We
investigated the effects of DBL on NF-kappaB activation by electrophoretic mobility shift assay and on NFkappaB-regulated gene expression by Western blot analysis. We found that DBL suppressed NF-kappaB
activation by a wide variety of inflammatory agents, including tumor necrosis factor (TNF), interleukin1beta, epidermal growth factor, okadaic acid, phorbol 12-myristate 13-acetate, and lipopolysaccharide.
The suppression was not cell type specific and inhibited both inducible and constitutive NF-kappaB
activation. DBL did not interfere with the binding of NF-kappaB to DNA but rather inhibited IkappaBalpha
kinase activity, IkappaBalpha phosphorylation and degradation, p65 phosphorylation, and translocation.
DBL also suppressed the expression of TNF-induced and NF-kappaB-regulated proliferative, antiapoptotic,
and metastatic gene products. These effects correlated with enhancement of TNF-induced apoptosis and
suppression of TNF-induced invasion. Together, our results indicate that DBL inhibits NF-kappaB activation
and NF-kappaB-regulated gene expression, which may explain the ability of DBL to enhance apoptosis and
inhibit invasion.
55
Противораковый эффект и структурная характеристика эндо-полисахарид из культивируемым
мицелием Inonotus obliquus.
Эндо-полисахарид, извлеченный из мицелием Inonotus obliquus (Pers.:Fr.) Pil. (Hymenochaetaceae)
является специфическим активатором в-клеток и макрофагов. Однако, in vivo анти-рак эффектам и
химической структуре эндо-полисахарид неизвестны. Мы очистили эндо-полисахарид, исследованы
его противораковые эффекты с помощью in vitro и in vivo анализов, а также выполнено структурные
характеристики. Эндо-полисахарид был извлечен из I. obliquus мицелия культивируемых в 300-l
пилотный ферментер, с последующим извлечением горячей воды и этанола осадков. Очищение
достигается с помощью DEAE-целлюлозы ионообменной хроматографии и гель-проникающей
хроматографии. Химический анализ показал, что очищенная эндо-полисахарид является Альфасвязанные fucoglucomannan с молекулярной массой около 1000 кда. Анти-рак деятельностью эндополисахарид против различных типов опухолевых клеток были определены. Нет прямой
токсичности либо против рака или нормальных клеток не наблюдалось. Внутрибрюшинное
введение эндо-полисахарид значительно увеличить выживаемость B16F10-имплантированных
мышам, в результате чего 4.07-кратное увеличение выживаемости в дозе 30 мг/кг/день. После 60
дней кормления, примерно 67% от первоначального количества мышей выжили без частоты
опухолевых заболеваний, основанный на макроскопическом изучении. Эти результаты указывают
на то, что противораковый эффект эндо-полисахарид, напрямую не tumorcidal, а иммуностимулирующее.
Life Sci. 2006 May 30;79(1):72-80. Epub 2006 Feb 3.
Anti-cancer effect and structural characterization of endo-polysaccharide from cultivated mycelia of
Inonotus obliquus.
Kim YO1, Park HW, Kim JH, Lee JY, Moon SH, Shin CS.
Author information
1Department of Biotechnology, College of Engineering, Yonsei University, Shinchon-dong,

Seodaemoon-gu, Seoul 120-749, South Korea.
Abstract
The endo-polysaccharide extracted from mycelia of Inonotus obliquus (Pers.:Fr.) Pil.
(Hymenochaetaceae) is a specific activator of B cells and macrophages. However, the in vivo anti-cancer
effects and the chemical structure of the endo-polysaccharide are unknown. We purified the endopolysaccharide, investigated its anti-cancer effects via in vitro and in vivo assays, and performed a
structural characterization. The endo-polysaccharide was extracted from I. obliquus mycelia cultivated in
a 300-l pilot fermenter, followed by hot water extraction and ethanol precipitation. Purification was
achieved by DEAE-cellulose ion-exchange chromatography and gel-permeation chromatography. Chemical
analysis revealed that the purified endo-polysaccharide is an alpha-linked fucoglucomannan with a
molecular weight of approximately 1,000 kDa. The anti-cancer activities of the endo-polysaccharide
against various types of tumor cells were determined. No direct toxicity against either cancer or normal
cells was observed. Intraperitoneal administration of the endo-polysaccharide significantly prolonged the
survival rate of B16F10-implanted mice, resulting in a 4.07-fold increase in the survival rate at a dose of 30
mg/kg/day. After 60 days of feeding, approximately 67% of the initial number of mice survived with no
tumor incidence based on macroscopic examination. These results indicate that the anti-cancer effect of
endo-polysaccharide is not directly tumorcidal but rather is immuno-stimulating.
Иммуномодулирующей активности водного извлечения из лекарственного гриба Inonotus
obliquus.
В иммуномодулирующий эффект водного экстракта Inonotus obliquus, как называется Чага, была
проверена на клетках костного мозга от химически мышей с ослабленным иммунитетом. На Чагу
водного экстракта ежедневно вводят в течение 24 дней мышам, которые обращались с
циклофосфаном (400 мг/кг веса тела), иммуносупрессивные алкилирующий агент. Количество
колониеобразующие единицы (CFU)-гранулоцитов/макрофагов (GM) и эритроидных burst-блок
формирования (BFU-E), возросло почти до уровня, наблюдаемого в необработанных управления
56
уже 8 дней после лечения. Пероральное введение экстракта сильно увеличены сывороточные
уровни IL-6. Кроме того, уровень TNF-α был повышен путем химической обработки в контрольных
мышей, в то время как оставалась на фоновом уровне, получавших экстракт, мышей, указывая, что
экстракт может эффективно подавляет TNF-α, связанных патологических состояниях. Эти результаты
убедительно свидетельствуют о большом потенциале водный экстракт из Inonotus obliquus как
иммунная enhancer во время химиотерапии.
Mycobiology. 2005 Sep;33(3):158-62. doi: 10.4489/MYCO.2005.33.3.158. Epub 2005 Sep 30.
Immunomodulatory Activity of the Water Extract from Medicinal Mushroom Inonotus obliquus.
Kim YR1.
Author information
1Laboratory of Macromolecular Interactions, School of Biological Sciences and Institute of

Microbiology, Seoul National University, Seoul 151-742, Korea.
Abstract
The immunomodulatory effect of aqueous extract of Inonotus obliquus, called as Chaga, was tested on
bone marrow cells from chemically immunosuppressed mice. The Chaga water extract was daily
administered for 24 days to mice that had been treated with cyclophosphamide (400 mg/kg body weight),
immunosuppressive
alkylating
agent.
The
number
of
colony-forming
unit
(CFU)granulocytes/macrophages (GM) and erythroid burst-forming unit (BFU-E), increased almost to the levels
seen in non-treated control as early as 8 days after treatment. Oral administration of the extract highly
increased serum levels of IL-6. Also, the level of TNF-α was elevated by the chemical treatment in control
mice, whereas was maintained at the background level in the extract-treated mice, indicating that the
extract might effectively suppress TNF-α related pathologic conditions. These results strongly suggest the
great potential of the aqueous extract from Inonotus obliquus as immune enhancer during chemotherapy.
In vivo и in vitro анти-воспалительные и анти-ноцицептивных эффектов метанольного экстракта
из Inonotus obliquus.
Гриб Inonotus obliquus (Fr.) Pilát (Hymenochaetaceae), традиционно используется для лечения рака
желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистых заболеваний и диабета в России, Польши и
большинства стран Балтии. Данное исследование было разработано для изучения антивоспалительные и анти-ноцицептивных эффектов метанольного экстракта из Inonotus obliquus
(МЕЙО) in vivo и in vitro. МЕЙО (100 или 200 мг/(kgday), стр.o.) снижение острой лапой отека,
индуцированного carrageenin в крыс, и показал, болеутоляющее действие, как определяется
уксусной кислоты-индуцированной брюшной сужение тест и плитой тесте на мышах. Раскрыть
механизм противовоспалительного эффекта MEIO, мы исследовали его влияние на
липополисахарид (LPS)-индуцированных ответов в мышиных макрофагов клеток линии RAW 264.7.
MEIO оказалась значительно ингибируют производства оксида азота (NO), простагландина Е2 (PGE2)
и фактора некроза опухоли-Альфа (ФНО-Альфа) в LPS-стимулированных RAW 264.7 макрофагов. В
соответствии с этими наблюдениями, MEIO мощно ингибирует белок и мРНК выражений
индуцибельной синтазы окиси азота (iNOS) и циклооксигеназы-2 (ЦОГ-2). Кроме того, MEIO
ингибирует ЛПС-индуцированных ДНК-связывающая активность ядерного фактора-kappaB (NFkappaB), и это было связано с профилактикой ингибитор kappaB деградации и сокращению
ядерного белка Р65 уровнях. Взятые вместе, наши данные показывают, что анти-воспалительные и
анти-ноцицептивных свойства MEIO может быть из-за ингибирование iNOS и COX-2 выражение
через down-регуляции NF-kappaB активности вяжущего.
J Ethnopharmacol. 2005 Oct 3;101(1-3):120-8.
In vivo and in vitro anti-inflammatory and anti-nociceptive effects of the methanol extract of
Inonotus obliquus.
Park YM1, Won JH, Kim YH, Choi JW, Park HJ, Lee KT.
Author information
1Department of Biochemistry, College of Pharmacy, Kyung-Hee University, Dongdaemun-Ku,

Hoegi-Dong, Seoul 130-701, South Korea.
57
Abstract
The mushroom Inonotus obliquus (Fr.) Pilát (Hymenochaetaceae), has been traditionally used for the
treatment of gastrointestinal cancer, cardiovascular disease and diabetes in Russia, Poland and most of
Baltic countries. This study was designed to investigate the anti-inflammatory and anti-nociceptive effects
of the methanol extract from Inonotus obliquus (MEIO) in vivo and in vitro. MEIO (100 or 200 mg/(kgday),
p.o.) reduced acute paw edema induced by carrageenin in rats, and showed analgesic activity, as
determined by an acetic acid-induced abdominal constriction test and a hot plate test in mice. To reveal
the mechanism of the anti-inflammatory effect of MEIO, we examined its effect on lipopolysaccharide
(LPS)-induced responses in a murine macrophage cell line RAW 264.7. MEIO was found to significantly
inhibit the productions of nitric oxide (NO), prostaglandin E2 (PGE2) and tumor necrosis factor-alpha (TNFalpha) in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages. Consistent with these observations, MEIO potently
inhibited the protein and mRNA expressions of inducible nitric oxide synthase (iNOS) and cyclooxygenase2 (COX-2). Furthermore, MEIO inhibited the LPS-induced DNA binding activity of nuclear factor-kappaB
(NF-kappaB), and this was associated with the prevention of inhibitor kappaB degradation and a reduction
in nuclear p65 protein levels. Taken together, our data indicate that the anti-inflammatory and antinociceptive properties of MEIO may be due to the inhibition of iNOS and COX-2 expression via the downregulation of NF-kappaB binding activity.
Чага гриб экстракт ингибирует окислительное повреждение ДНК в лимфоцитах человека как
оценивают комет.
Этот гриб Чага (Inonotus obliquus) утверждал, что полезные свойства для здоровья человека, такие
как антибактериальные, антиаллергические, противовоспалительные и антиоксидантные
деятельности. Антиоксидантные эффекты гриба может быть частично объяснено защиты
компонентов клетки от свободных радикалов. Мы оценили эффект водной Чага гриб извлекает их
потенциал для защиты от окислительного повреждения ДНК в лимфоцитах человека. Клетки были
предварительно обработанных при различных концентрациях (10, 50, 100 и 500 микрогр/мл)
экстракта в течение 1 ч при 37 ° C. Клетки были затем обрабатывают 100 мкмоль H2O2 в течение 5
мин. в качестве окислительного стресса. Оценка окислительного повреждения проводили с
использованием одной ячейки гель-электрофореза для фрагментации ДНК (ДНК-комет). Используя
анализ изображения, степень повреждения ДНК оценивали как ДНК хвоста момент. Клетки,
предварительно обработанные с Чага экстракт показал более чем 40% снижение фрагментации ДНК
по сравнению с положительным контролем (100 micromol лечения Н2О2). Таким образом, гриб Чага
лечение дает клеточной защиты от эндогенных повреждений ДНК, произведенные H2O2.
Biofactors. 2004;21(1-4):109-12.
Chaga mushroom extract inhibits oxidative DNA damage in human lymphocytes as assessed by comet
assay.
Park YK1, Lee HB, Jeon EJ, Jung HS, Kang MH.
Author information
1Department of Medical Nutrition, Kyunghee University, 1 Hoekidong, Dongdaemoonku, Seoul

130-701, South Korea.
Abstract
The Chaga mushroom (Inonotus obliquus) is claimed to have beneficial properties for human health,
such as anti-bacterial, anti-allergic, anti-inflammatory and antioxidant activities. The antioxidant effects of
the mushroom may be partly explained by protection of cell components against free radicals. We
evaluated the effect of aqueous Chaga mushroom extracts for their potential for protecting against
oxidative damage to DNA in human lymphocytes. Cells were pretreated with various concentrations (10,
50, 100 and 500 microg/mL) of the extract for 1 h at 37 degrees C. Cells were then treated with 100
microM of H2O2 for 5 min as an oxidative stress. Evaluation of oxidative damage was performed using
single-cell gel electrophoresis for DNA fragmentation (Comet assay). Using image analysis, the degree of
DNA damage was evaluated as the DNA tail moment. Cells pretreated with Chaga extract showed over
40% reduction in DNA fragmentation compared with the positive control (100 micromol H2O2 treatment).
58
Thus, Chaga mushroom treatment affords cellular protection against endogenous DNA damage produced
by H2O2.
59