глава 1 - Diplomrus.ru
advertisement
Митохондриольное окисление в семенниках в условиях низкодозового радиационного воздействия» 03.00.04–биохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ………………………………….. ?ГЛАВА 1 1.1 Современные представления об энергетическом обмене……………… 1.1.1 Митохондриальный этап энергетического обмена………………….. 1.1.2 Характеристика обмена энергии в семенниках………………………. 1.1.3 Характеристика митохондриального окисления в семенниках……… 1 1.1.4 Характеристика антиоксидантной системы в семенниках…………….. 1.2 Гормон семенников…………………………………………………………. 1.2.1 Синтезирование тестостерона…………………………………………………… 1.2.2 Транспорт тестостерона…………………………………………………… 1.2.3 Роль митохондрии в образовании мужских половых гормонов……….. 1.3 Характеристика митохондриального окисления семенников в условиях низкодозового ионизирующего излучения…………………………………… 1.3.1 Биологические эффекты излучения………………………………………. 1.3.2.. Влияние малых доз ионизирующего излучения на семенники……… 1.3.3 Влияние малых доз внутреннего облучения семенников при инкорпорации 137 Cs…………………………………………………………………………………… 1.3.4 Влияние ионизирующего излучения на гормон семенников……………… 1.3.5 Характеристика митохондриального окисления семенников в условиях внешнего низкодозового ионизирующего излучения……………………………... 1.4 Характеристика функциональной активности семенников в условиях низкодозового ионизирующего излучения…………………………………………. 1.4.1 Влияние малых доз внешнего ионизирующего излучения на функциональную активность семенников эмбриональном периоде…………….. 1.4.2 Характеристика антиоксидантной системы семенников в условиях малых доз ионизирующего излучения…………………………………………………………. 1.5 Влияние малых доз радиации на морфологию семенников………………. 1.5.1 Краткая характеристика структуры семенников………………………… 1.5.2.Влияние малых семенников………………. доз радиации на морфологию 1.5.3 Влияние хронических малых дозах радиации на морфологию семенников. 1.6. Заключение……………………………………………………………………… ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Характеристика экспериментальных животных………………………….. 2.2 Введение витаминов………………………………………………………….. 2.3 Описание экспериментальной модели инкорпорации 137Cs…………………… 2.3.1 Определение показателей ТД и ОФ кусочков сменников…………………… 2.3.2 Определение показателей тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования кусочков семенников……………………………………….. 2.4 Полярографическое исследование тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования…………………………………………………………………….. 2 2.5 Определение продуктов пероксидных реакций…………………………………. 2.6 Реактивы, среды ………………………………………………………………….. 2.7 Изучение структуры семенников……………………………………………….. 2.8 Статистическая обработка материала………………………………………… ГЛАВА 3 СОСТОЯНИЕ МИТОХОНДРИАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ В ТКАНЯХ СЕМЕННИКОВ В УСЛОВИЯХ ИНКОРПОРАЦИИ 137Cs 3.1 Характеристика параметров митохондриального окисления интактных семенников ……………………………………………... 3.2 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников при антиоксидантах (АОК) и уровне инкорпорации 137Cs в дозе 600-800Бк/кг………. 3.3 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников при инкорпорации 137Cs в дозе 1300Бк/кг……………………………………………. 3.4. Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников при уровне инкорпорации 137Cs в дозах 600-800 и 3300 Бк/кг.…………………………………………………………. 3.5. Заключение…………………………………………………………………….. ГЛАВА 4 СОСТОЯНИЕ ТКАНЕВОГО ДЫХАНИЯ И ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ФОСФОРИЛИРОВАНИЯ СЕМЕННИКОВ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ВНЕШНЕГО ОБЛУЧЕНИЯ 4.1 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников на 3-е и 10-е сутки после внешнего облучения в дозе 0,5 Гр………………………………. 4.2 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников на 3-е и 10-е сутки после внешнего облучения в дозе 1,0 Гр………………………………. 4.3 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников на 45-е и 60-е сутки после внешнего облучения в дозе 0,5 Гр……………………………….. 4.4 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников на 45- е и 60-е сутки после внешнего облучения в дозе 1,0 Гр……………………... 4.5 Характеристика митохондриального окисления в тканях семенников на 90-е сутки после внешнего облучения в дозах 0,5 и 1,0 Гр……………………….. 4. Заключение…………………………………………………………………………. 3 ГЛАВА 5 ВЛИЯНИЕ ВНЕШНЕГО ОБЛУЧЕНИЯ НА СТРУКТУРУ СЕМЕННИКОВ 5.1 Влияние внешнего облучения в дозах 0.5 и 1 Гр на структуру семенников на 3, 10-е и 90-е сутки после однократного облучения……………………………….. 5.2. Заключение……………………………………………………………………….. ЗАКЛЮЧЕНИЕ……………………………………………………………………. 4 ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ АДФ - аденозиндифосфат АОЗ – антиоксидантная защита АОС – антиоксидантная система АОК– антиоксидантный комплекс АФК – активные формы кислорода АМ – амитал АМФ – аденозинмонофосфат АРД – амиталрезистентное дыхание АТФ – аденозинтрифосфат АФК – активные формы кислорода глу – глутаминовая кислота (глутамат) ДГ – дегидрогеназа ДНФ – 2,4–динитрофенол ДЦ – дыхательная цепь ИСК – извитые семенные канальца МАЛ – малонат МДА – малоновый диальдегид МО – митохондриальное окисление МРД – малонатрезистентное дыхание Мх – митохондрии ПОЛ – перекисное окисление липидов СД – коэффициент стимулирующего действия СДГ – сукцинатдегидрогеназа СОД – супероксиддисмутаза Т– тестостерон ТД и ОФ – тканевое дыхание и окислительное фосфорилирование Фн – неорганический фосфат ФАДH2 – восстановленный флавинадениндинуклеотид ЦТК – цикл трикарбоновых кислот (цикл Кребса) ЯК – янтарная кислота (сукцинат) NAD – никотинамиддинуклеотид GSH – glutathione peroxidase (глутатионпероксидазы) FP – флавопротеид Δpm – 5 ВВЕДЕНИЕ Несмотря на то, что в течение века было проделано много работ по изучению действия острого и хронического ионизирующего излучения на семенники, эта проблема остается актуальной и на современном этапе для медико-биологических исследований, принимая во внимание морфофункциональные изменения этого органа под воздействием малых доз радиационного облучения [ P Doyle ,2001,Попов Е.Г., 2002, Конопля и др,,2002,2003, Мамина В.П.,2003 Курило Л.Ф,2004, Попов Е ,2005, Федосенко. О,2007,2008,, Конопля.Е.Ф ,2007,2008]. Изучение воздействия облучения проводилось в ходе различных клинических и экспериментальных исследований лучевой терапии, проводимой над пациентами с многими заболеваниями, в результате чего были обнаружены нарушения функций клеток Лейдига, в которых продуцируется около 75% тестостерона [Liang Chen, 2006]. Итак, вследствие лечения заболевания посредством облучения, например, острой лимфобластной лейкемии, после тотального облучения всего организма производится пересадка костного мозга. При этом наблюдается дисфункция клеток Лейдига и как следствие этого - нарушение нормального развития пубертатности у мальчиков [Kliesch S, 2000, Bakker et al., 2000,A Kamischke, 2003, Krawczuk-Rybak M,2004, Frisk P, ,2004]. В настоящее время, рост опасности облучения проявляется, с одной стороны, из-за роста его востребованности во всех областях жизни, особенно в медицинских целях - в диагностике или лечении болезней. Данные о лечении малыми дозами радиации в терапевтических целях выявили снижение уровня тестостерона в сыворотке крови у самцов, что приводит к появлению различных сексуальных проблем [Ramadoss Sivakumar, 2006]. Также снижение уровня тестостерона было отмечено после проведения радиотерапии односторонней зародышевой клетки тестикулярной семиномы, карциномы, гипертиреоза и рака прямой кишки [Petersen et al., 2002, 2003; Ceccarelli C,2006, Hermann RM,2006]. Однако ряд исследований, проведенных в последние годы, показали, что после облучения в семенниках наступает ряд ультраструктурных нарушений, которые приводят к функциональному дисбалансу органа [Конопля,2002,2008]. В ходе ранее проведенных исследований было установлено, что воздействие ионизирующего излучения на область надпочечников после радиационного облучения ограничивает развитие ряда ультрастуктурных нарушений в гипоталамусе и паращитовидной железе, и в тоже время усиливает субклеточные проявления адаптационно-восстановительных процессов (, Мамина В.П.,2001,Конопля,2002). Было также выявлено благоприятное воздействие на 6 процесс сперматогенеза, которое проявляется в снижении уровня деструктивных процессов в сперматогенных клетках и повышении устойчивости структур гематотестикулярного барьера (Королев, 2004, Мамина В.П.,2003). По-мнению ряда исследователей, наиболее опасным для здоровья будущего потомства является воздействия облучения на родителей, оказывающее влияние на дальнейшее развитие половых клеток и участие их в оплодотворении, что приводит к переносу генетических нарушений на эмбрион будущих поколений [Karpenko NA. ,2000, Федосенко. О,2007] Важный отметить роль митохондрий в здоровье тканей и органов, так как на практике было обнаружено, что митохондриальная дисфункция - основной фактор человеческих болезней, которые связаны с дисфункциональными расстройствами ОФ (Hüttemann M,2008). Кроме того, было выявлено снижение подвижности спермы у пациентов с митохондриальными заболеваниями (нарушение активности митохондриальной дыхательной цепи) и снижение сперматоцитов патогенных мутантов mtDNA [Barratt CL,2005 ,Kazuto Nakada,2006, Sun ZM,2007]. Тем не менее, важно, что митохондрии играют главную роль в образовании и биосинтезе гормона семенников (Allen JA,2006, Midzak AS,2007, Andrew S,2007), поэтому, была сделана оценка связи функционального состояния семенников с митохондриями в них и сделан вывод, что поражение митохондрии является одной из первичных причин дисфункции семенников в диагностике. Перл и другие авторы считают, что фертильность сперматозоида зависит от митохондриального трансмембранного потенциала, который произведен электронно-транспортной цепью и регулируется равновесием окисления АФК [Marchetti,et at., 2002,Perl et al., 2006,]. Сегодня стало очевидным, что митохондрия как источник энергии играет уникальную роль во всех стадиях развития семенников [Martha E. ,2005]. Данные литературы свидетельствуют о том, что семенники - очень активные метаболические органы, выполняющие сложную работу (сперматогенез – самый активный репликационный процесс, способный производить около 1000 спермы в секунду. Разделения клетки, свойственные этому процессу, обеспечивают, соответственно, высокие уровни потребления кислорода зародышевого эпителия митохондрий, поэтому, клетки семенников характеризуются высоким содержанием митохондрий [Ashok Agarwal,2005, JUSTIN C. ST,2005,Hay-Yan J. 2007, Anna Gvozdjáková,2008]. Даже данные литературы свидетельствуют об исключительной роли ТД и ОФ в семенниках - обеспечение необходимой для сперматогенеза и подвижности спермы энергией, поэтому, клетки семенников 7 отличаются содержанием большого количества митохондрий [Mukai C, Okuno M.2004,Ford, 2006, Alexandra Amaral1, et al,2007]. Несколько авторов продемонстрировали, что наличие различных компонентов дыхательной цепи семенников приводит к высокой их активности окисления [XING XIAN YU,2000,Liu Z,2006, K Sabeur,2007, Anna Gvozdjáková,2008]. Результаты многих работ, проделанных в настоящее время, показали, что образование свободных радикалов является одним из универсальных патогенетических механизмов при различных типах повреждения клетки. Многие АФК, обладая высокой окисляющей способностью, являются основой патогенеза многих патологических процессов. Perl и другие авторы считают, что фертильность сперматозоида зависит от обслуживания митохондриального трансмембранного потенциала, образованного электронно-транспортной цепью и регулируемого равновесием сокращения окисления АФК (Perl et al., 2006,). Источниками АФК в человеческом организме могут быть нормальные метаболические процессы и под влиянием внешних факторов (например, радиация) могут образовываться свободные радикалы. Известно, что ионизирующее излучение - активный стрессор, поэтому, некоторые авторы характеризуют окислительный стресс как главный патологический фактор мужского бесплодия [Saleh et al., 2003; Nallella et al., 2004; Smith et al., 2006; Agarwal et al., 2006; Ishikawa et al., 2007 ; Smith et al., 2007 ,Kelton Tremellen ,2008, Terry t,2008, Birsen aydemir,2008 ,Wiwanitkit,2008, Agarwal A,2008, S. Venkatesh,2009]. Эти данные свидетельствуют о том, что окислительный стресс тестикулярных сперматозоидов является важной причиной бесплодия из–за высокого содержания ненасыщенных жирных кислот в составе мембраны сперматозоидов млекопитающих, чувствительных к кислороду, повреждение которых вызывает перекисное окисление липидов, увеличение количества неправильных сперматозоидов в поколениях под воздействием АФК и загрязнение лейкоцитов (лейкоцитосперм), что было определено в этиологии для мужского бесплодия [Sheweita, S. A ,2005, Zhaohui Meng,2006,Prashasnika Gehlot,2007,S. Venkatesh,2009]. Согласно данным, механизм АФК вызывает бесплодие двумя способами: вопервых, АФК повреждают мембрану спермы, что, в свою очередь, сокращает подвижность спермы и способность соединяться с ооцитом, во-вторых, через прямую передачу повреждения ДНК спермы от отцовского гена эмбриону [Agarwal et al., 2006, Kelton Tremellen ,2008, R, Venkatesh,2009]. В настоящее время собрано много данных, свидетельствующих об участии свободнорадикальных процессов в патогенезе бесплодия. Так, в 8 экспериментальных исследованиях динамики развития человеческой стерильности наблюдается в тестикулярной ткани и плазме крови активация свободнорадикального окисления. При этом интенсивность процессов ПОЛ зависит от степени выраженности воспалительного процесса. В связи с этим эффективность комплексной андрологии во многом зависит от степени защиты структуры и функции семенников, вот почему практически при любой патологии обосновано использование в андрологии антиоксидантных препаратов, так как тестикулярная АОС обладает исключительно высокой биологической активностью, кроме того, определение значения АОС сыграло важную роль в профилактике и лечении многих заболеваний мужской репродуктивной системы [Chen H,2005, Sönmez, M,2005, Gavazza MB, Catala A.,2006,Murugesan P,2007, Shrilatha B,2007, Kelton Tremellen ,2008]. Анализ отечественной и зарубежной литературы свидетельствует о том, что состояние митохондриального окисления имеет важное значение для здоровья мужской репродуктивной системы, кроме того, информация о состоянии митохондриального окисления в тканях семенников после воздействия малых доз облучения практически отсутствует. В связи с этим, целью настоящего исследования является изучение состояния митохондриального окисления в тканях семенников в условиях низкодозового радиационного воздействия. 9 ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ Связь работы с крупными научными программами и темами Диссертационная работа выполнялась в рамках Республиканских государственных научно-технических программ «Ионизирующие излучения» и «Метаболизм» 2001–2005 гг., а также темы «Биохимические закономерности формирования реакций организма человека и животных при инкорпорации радионуклидов» № госрегистрации 20001866 от 25.05.2000, сроки выполнения: 1999–2002 гг. Цель и задачи исследования Цель исследования заключается в изучении состояния митохондриального окисления в тканях семенников экспериментальных животных в условиях низкодозового радиационного воздействия. Задачи исследования 1. Дать характеристику митохондриального окисления в тканях семенников интактных животных. 2. Изучить влияние инкорпорации 137Сs в широком диапазоне доз при его пероральном поступлении на показатели тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования в тканях семенников белых крыс. 3. Изучить влияние внешнего облучения на показатели тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования ткани семенников белых крыс. 4. Исследовать морфологическую картину семенников при низкодозовом воздействии, вызванном внешним облучением. Объект и предмет исследования Объект исследования. Семенники, кровь контрольных животных и животных при пероральном поступлении различных количеств 137Cs, различных дозах и сроках после внешнего облучения. Предмет исследования. Параметры ТД и ОФ ткани семенников, показатели пероксидного стресса плазмы крови интактных и опытных животных, количество сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев. 10 Гипотеза. Семенники - активные органы, которые отличаются высоким уровнем ТД и ОФ и активно реагируют на пероральное поступление инкорпорации различных количеств 137Cs, а также на различные дозы и сроки после внешнего облучения. Нарушения митохондриального окисления в семенниках крыс вызывают выраженные морфологические изменения семенников, что может быть причиной развития различных патологических состояний и дисфункции семенников. Методология и методы проведенного исследования Данное исследование является фундаментально-ориентированным и прикладным, оно основано на использовании общенаучных методов, данных научной литературы, результатах собственных исследований, включая полярографию с применением закрытого электрода Кларка, радиометрию, спектрофотомерию. Общим методологическим подходом к решению поставленных задач явилось выявление направленности и степени изменений показателей ТД и ОФ семенников животных, подвергнутых воздействию различной радиации. Научная новизна и значимость полученных результатов В работе впервые: получены результаты комплексного исследования параметров и механизмов регуляции МО в ткани семенников интактных крыс. представлены данные, характеризующие влияние кратковременного и продолжительного перорального поступления и инкорпорации 137Сs на состояние и механизмы регуляции МО в ткани семенников крыс. представлены данные, характеризующие влияние внешнего облучения в разные сроки после воздействия однократного облучения на состояние и механизмы регуляции МО в ткани семенников крыс. получены результаты комплексного исследования, характеризующие морфологию семенников экспериментальных животных в условиях внешнего облучения . проведен комплексный анализ влияния инкорпорации 137Сs и внешнего облучения на состояние ТД и ОФ семенников, выполняющие разноообразные жизненно важные функции. Практическая значимость полученных результатов 11 Вырезано. Для приобретения полной версии работы перейдите по ссылке Присутствие в МХ семенников функционального ПДГ2, ПДГК3 важно для сперматозоидов, получающих почти всю их энергию из углеводов посредством окисления пирувата [Korotchkina LG,2006, Sugden MC2002]. Выраженность mGlu1 и-5 рецепторов в семенниках крыс с высокой степенью специфики, потому что их транскрипт отсутствовал в других эндокринных органах, включая надпочечники, которые также способны синтезировать стероидные гормоны. Зародышевые клетки семенников крыс были не только для mGlu1 и-5 рецепторов, но также и для белка парного рецептора 4 типа киназы (GRK4) [Sallese et al.2000], регулирующих сигналы рецептора и характеризующиеся высоким уровнем содержания в семенниках [Sallese et al.1999]. Вследствие этого mGlu1 и-5 рецепторы функциональны в семенниках крыс [Storto M,2001] . В человеческих семенниках mGlu5 (immunolabelling) характеризуется высокой интенсивностью в семенных канальцах, в то время как mGlu1a (immunol abelling) был обнаружен в клетках Лейдига между межтрубным пространством. Существует гипотеза, что mGlu1 рецепторы регулируют функцию клеток Лейдига. Согласно этой гипотезе считается, что mGlu5 рецепторы могут быть активными в регулировании подвижности спермы, а также что агонисты или антагонисты рецептора mGlu 5 неспособны к индуцированию существенных процентных изменений подвижности спермы, в которых выражается любой глутаматный рецептор крысы и семенники или сперма человека. Понимание механизма активации и функциональной роли рецепторов mGlu позволило бы выявить новые аспекты в физиологии и патофизиология мужской репродуктивной системы [Storto M,2001] (Рис.1.3): 12 13 (A) - mGlu1a окраска с использованием иммунной метки в семенниках пациента (TG) с варикоцелем и нормальным сперматогенезом; отмечается отсутствие mGlu1a иммунореактивности внутри канальцев; (B) - mGlu1a окраска с использованием иммунной метки в семенниках пациента (P G) с внутрибрюшным тестикулярным удерживанием и задерженным сперматогенезом; отмечаются только клетки Лейдига в межтрубном пространстве, показывающие цитоплазматические окраски с использованием иммунной метки (стрелки); (C) - mGlu5 окраска с использованием иммунной метки в семенниках пациента (PR) с гидроцельным и нормальным сперматогенезом; отмечается отсутствие окраски с использованием иммунной метки в сперматогониях (стрелки) и ее присутствие в клетках Сертоли (конец стрелы); (D) - mGlu5 окраска с использованием иммунной метки при высоком увеличении в канальцах пациента (GT) с гидроцельным и задерженным сперматогенезом; стрелки отмечают сперматогонии и наконечники стрелки – клетки Сертоли. Рисунок 1.5 – Выражение mGlu1 и 5 рецепторов относящимся к биопсии образцам семенников человека 14 Семенники экстраординарных органов метаболизма жирных кислот, богаты насыщенными жирными кислотами (PUFAs). Фосфолипиды мембраны семенников особенно восприимчивы к окислению не только из-за их высокого содержания полиненасыщенными жирными кислотами, но и потому, что ассоциации в мембране клеток с неферментативными и ферментативными системами способны производить проокислительно- свободные радикалы [. Gavazza M.B,. Catala A ´,2006, ]. 1.1.3 Характеристика митохондриального окисления в семенниках Согласно данным литературы, производство АТФ посредством гликолиза или окислительного фосфорилирования (ОФ) является главным источником энергии для поддержания различных функцией и подвижности спермы [ANDREW C ,2001,Ford, 2006,, Mukai C, Okuno M.2004, Ruiz-Pesini et al., 2000]. Это также увеличивает число и разнообразие подходящих субстратов, поэтому, рассматривая эффективность поставки энергии, ОФ, поддерживающее подвижность спермы, объясняет необходимость сильных инвестиций в митохондрии в течение сперматогенеза. Важно отметить, что сперматогенез - чрезвычайно активный динамический клеточный процесс, способный к производству около 1000 спермы в секунду, что приводит к глубоким транскрипционным и морфологическим изменениям, происходящим в семенных канальцах при высоком уровне пролиферации и для чего необходимо потребление большого количества кислорода [Roland H. ,2005,Reinhard Depping,2004]. Вырезано. Для приобретения полной версии работы перейдите по ссылке 1.6 Заключение 15 ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Характеристика экспериментальных животных Все эксперименты, результаты которых представлены в этой работе, были выполнены на белых беспородных крысах-самцах весом 220-240 г, полученных при разведении в виварии Гомельского государственного медицинского университета и при кафедре биологической химии. В наших исследованиях были использованы следующие экспериментальные модели облучения: 1 - острое однократное внешнее облучение на γ- установке «ИГУР-1», являющаяся источником 137 Сs. При этом суммарные дозы облучения в экспериментальных группах составили 0,5 и 1 Гр (мощность дозы 0,92 Гр/мин). Забор материала на исследование производили через 3,10,45,60,90 минут. 2 - инкорпораваневание 137Сs с обычным рационом вивария, дополнительно вводились разные количества 137Сs, образуя, таким образом, низкодозовое воздействие, вызванное инкорпорацией 137 Сs при его пероральном поступлении. Экспериментальные животные содержались в стандартных клетках по 7 голов на обычном рационе вивария и имели свободный доступ к пище и воде, кроме того, за ними осуществлялся тщательный уход. В таблице 2 представлено распределение животных по сериям исследований, проведенных в рамках данной работы. Таблица 2.1 – Количество животных, использованных в работе Серии исследований животных Отработка модели инкорпорации 137Cs и методики изучения ТД и ОФ Изучение показателей ТД и ОФ семенников при инкорпорации 137 Cs Изучение показателей ТД и ОФ семенников при внешнем облучении Количество животных 40 42 88 Исследование (морфологии) семенников 40 Всего: 202 16 При проведении экспериментальных исследований соблюдались все требования Хельсинкской декларации по гуманному обращению с животными [1975, пересмотр. 1993], а также Директивы Совета Европейского Сообщества по защите животных и другие нормативные акты, принятые в международной практике лабораторного животноводства [Zinko U., и др.,1997.]. 2.2 Введение витаминов Для выполнения этой части исследования экспериментальные животные были разделены на 2 группы: контрольная и опытная – «АОК», соответственно, получавшие антиоксидантный комплекс (АОК) витаминов. Контрольная группа содержалась на стандартном рационе вивария. Опытной группе «АОК» пять раз (через сутки) перорально вводили масляные растворы фармакопейных препаратов витаминов A, E и водный раствор витамина C. Однократные дозы приема витаминов составляли: витамина A – 0,002 мг/г веса животного, витамина E – 0,08 мг/г веса животного, витамина C – 0,2 мг/г веса животного [Рутковская Ж.А., 1996]. 2.3 Описание экспериментальной модели инкорпорации 137Cs Моделирование инкорпорации радиоцезия (137Cs) осуществляли путем кормления животных в течение определенных сроков (от недели до месяца) радиоактивным кормом (сушеные белые грибы с активностью 39 кБк/кг и мясо дикого кабана с активностью 600 кБк/кг). Контрольная группа животных получала соответствующий «чистый» рацион. В результате этого методического подхода были сформированы четыре экспериментальные группы с уровнями накопления Бк/кг, что соответствует, как показали расчеты [Бударков В. А., и др., 1992, Булдаков Л. А., 1990.Булдаков Л. А. Радиоактивные вещества и человек. – М.: Энергоатомиздат, 1990. – 160 с.] поглощенным дозам облучения мкГр. Дозиметрический контроль проводился на сцинтилляционном гамма-спектрометре LP 4900B (Финляндия). Оценку поглощенных доз внутреннего облучения рассчитывали по содержанию 137Cs в тушках крыс, используя формулу 2.1: C(t)=(КпАр)+(С0-КпАр)exp(-0,693t/T) (2.1) где С0 – начальная концентрация 137Cs у экспериментальных животных, Бк/кг; 17 С(t) – удельная концентрация 137Cs в тушках крыс ко времени t, Бк/кг; Кп – коэффициент перехода 137Cs из рациона в ткани животного, (Бк/кг)/(Бк/сутки); Ар – содержание 137Cs в суточном рационе, Бк/сутки; t – время, сутки; Т – период «полуснижения» содержания 137Cs в тканях, сутки. Мощность поглощенной дозы внутреннего облучения, обусловленного инкорпорированным 137 Cs, рассчитывали по формуле 2.2: Р(t)=1,3810-8C(t)E (2.2) где Р(t) - мощность дозы ко времени t, Гр/сут; C(t) - удельная концентрация 137Cs в тканях крыс ко времени t, Бк/кг; E – средняя энергия для -частиц, 0,195 МэВ [Брегадзе Ю.И., и др., 1990.]. Поглощенную дозу внутреннего облучения оценивали путем интегрирования мощностей доз по времени облучения. Практика показала, что такой подход наиболее полно отражает реальную дозовую нагрузку, полученную экспериментальными животными [Коваль А.Н., 2004, Конопля Е.Ф., и др., 2005, Кудряшов В.П., 2007.] 2.3.1 Определение показателей ТД и ОФ кусочков сменников Препараты семенников получали сразу же после декапитации животных. Для этого извлеченный орган отмывали в охлажденном физиологическом растворе, затем продавливали через плунжер с диаметром отверстий 0,5 мм. Все операции проводились при температуре 0 2°С. Полученные таким образом препараты ткани сохранялись в охлажденном растворе Хэнкса. У данных препаратов изучали показатели МО с помощью закрытого платинового электрода Кларка и полярографа ПУ-1 (РБ) при величине поляризующего напряжения 0,70 В и в термостатируемой ячейке объемом 2 мл при температуре +25°С. В этих условиях исходное количество кислорода, растворенного в заданном объеме ячейки, равнялось 250 наноатомам [Кондрашова М.Н., 1973]. Практика показала, что для более полной характеристики состояния энергетического обмена исследуемой ткани целесообразно определять скорость потребления кислорода (скорость дыхания) тканевым препаратом, используя следующие пробы [Грицук А.И., 1995, Коваль А.Н. 2004]: 18 1. 2. 3. 4. Эндогенное дыхание – як (10 ммоль) – ДНФ (100 мкмоль) (Vэнд–Vяк–Vднф). Эндогенное дыхание – глу (10 ммоль) – ДНФ (100 мкмоль) (Vэнд–Vглу–Vднф). Эндогенное дыхание – амитал (2,5 ммоль) – малонат (10 ммоль) (Vэнд–Vам–Vмал). Эндогенное дыхание – ДНФ (100 мкмоль) – амитал (2,5 ммоль) – малонат (Vэнд– Vднф –Vам–Vмал). (10 ммоль) Скорость дыхания выражали в нмоль O2мин/мг белка, которую рассчитывали по формуле 2.3: A B наноатом O 2 T C мин мг белка (2.3) где A – число миллиметров, соответствующих уменьшению диффузионного тока при дыхании за время T в минутах; B – цена 1 мм на записи в нА О2, т.е. отношение начальной концентрации кислорода в ячейке к первоначальной величине диффузионного тока; С – количество мг белка тканевого препарата, которое определяли биуретовым методом [Кочетков Г.А.,1980] в 0,5 мл гомогената использованного препарата селезенки. Пробы № 1 и 2 характеризуют скорость дыхания на эндогенных субстратах, а также количественное и качественное их соотношение, активность соответствующих дегидрогеназ (СДГ и глутаматДГ), состояние транспортных процессов, степень сопряжения ТД и ОФ. Кроме того, для более полной характеристики ТД и ОФ, рассчитывали ряд относительных величин: коэффициенты стимулирующего действия (СД), соответственно, для каждого субстрата и разобщителя 2,4-ДНФ (Форм. 2.4 - 2.6): СДяк = Vяк/Vэнд СДглу = Vглу/Vэнд СДднф = Vднф/V(глу) (2.4) (2.5) (2.6) Они дают возможность косвенно охарактеризовать эндогенный пул используемых субстратов энергетического обмена исследуемых тканей, степень сопряжения ОФ. 19 Используя метод ингибиторного анализа путем введения в инкубационную среду ингибитора I комплекса ДЦ – амитала Na (Vам) и конкурентного ингибитора СДГ – малоната Na (Vмал) – проба № 3 производили оценку соотношения основных субстратов МО (см. гл. 1, рис. 1.1). Она отражает активность пиридин (NAD)-зависимого и флавопротеид (FAD)-зависимого участков (комплексов I и II) ДЦ Мх, и позволяет оценить интенсивность и количественное соотношение окисления соответствующих субстратов (NAD-зависимых субстратов, жирных кислот и сукцината). На основании данных этой пробы рассчитывали показатели амиталрезистентного дыхания (АРД=Vам/Vэнд) и малонатрезистентного дыхания (МРД=Vмал/Vам), которые количественно выражают соотношение (NAD)-зависимого и флавопротеид (FAD)зависимого окисления в ДЦ. Скорость потребления кислорода является интегральным показателем, отражающим состояние энергетического метаболизма при условии сохранения жизнеспособности относительно интактного тканевого препарата. Кусочки тканей и тканевые срезы являются наиболее предпочтительными объектами исследования, поскольку, они, как и гомогенаты тканей, имеют достаточное количество эндогенных субстратов, АДФ и фосфата, необходимых для обеспечения довольно высокой дыхательной активности. Более того, сохранение микроархитектуры, свойственной для кусочков ткани, поврежденных минимально, является, на наш взгляд, важным условием для объективной оценки состояния энергетического обмена в исследуемой ткани. Эти обстоятельства дают больше оснований для более обоснованной интерполяции полученных результатов к условиям существования ткани “in vivo” [Ястребов А.П., и др., 1978, Маевский Е. И., и др., 2001, Грицук А. И., и др., 2002., Грицук А. И., и др.,2002 ]. 2.4 Полярографическое исследование тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования «Золотым» стандартом «митохондриологии», основным, широко распространенным и высокоточным методом изучения ТД и ОФ является метод полярографии [Кондрашова М.Н., 1973, Рэкер Э, 1979], позволяющий кинетически осуществлять непрерывный мониторинг потребления кислорода тканевым препаратом. С учетом исключительно высокой точности данного метода (до 10-9 моля! кислорода) его использование позволяет исследовать изменения МО в условиях сверхмалых и малых воздействии на организм. Теория метода полярографии, а также обоснование возможности применения полярографии в биологических исследованиях подробно изложены в работах многих авторов [Гейровский Я., и др., 1965. Кондрашова М.Н., 1973, Коваленко Е.А. и др, 1975]. 20 Для изучения ТД и ОФ обычно используется двухэлектродная система, состоящая из платинового электрода и хлорсеребряного электрода сравнения. При постоянном напряжении на рабочем электроде 0,65–0,70 В, в цепи возникает сила тока, величина которого прямо пропорциональна концентрации кислорода в растворе [Кондрашова М.Н., 1973]. Потребление кислорода клетками приводит к снижению его содержания в среде инкубации и соответствующему падению силы тока, которое можно регистрировать кинетически. 2.5 Определение продуктов пероксидных реакций Вырезано. Для приобретения полной версии работы перейдите по ссылке Спустя 90 суток с момента облучения животных в дозах 0,5 и 1 Гр (III и VI группы) морфологическая картина резко меняется. И хотя в срезах семенников крыс указанных групп присутствуют канальцы всех типов, канальцы I и II типов составляют абсолютное большинство. Однако, в отличие от контроля в семенниках животных III группы преобладают и достоверно превышают показатели контроля канальцы II типа. Они составляют 49,25±2,58%. Канальцы I типа у животных III группы составляют 25,50±0,85%. Облучение крыс в дозе 1 Гр спустя 90 суток (VI группа) вызывает в семенниках животных еще большее увеличение процентного содержания канальцев нормального строения. И хотя процент таких канальцев остается примерно в два раза ниже показателей контроля, однако, по сравнению с животными всех других групп, этот показатель является самым высоким и составляет 38,25±1,85%. Примерно такое же количество у животных VI группы составляют канальцы II типа. Их процент в указанной группе равен 39,75±1,93. Обращает на себя внимание тот факт, что спустя 90 суток после облучения животных в дозах 0,5 и 1 Гр в семенниках крыс резко снижается процент канальцев III типа. У животных обеих групп он одинаковый. Напомним, что спустя 3 и 10 суток после облучения в указанных дозах в семенниках крыс канальцы III типа преобладали и составляли абсолютное большинство. 5.2 Заключение 21 ЗАКЛЮЧЕНИЕ БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ 1. Альжабар, А. Митохондриальное окисление селезёнки крыс в условиях инкорпорации 137Cs А. Абдулкадер Проблемы здоровья и экологии. - 2007. №14. –С.145-149. 2. Анализ влияния общего облучения на сперматогенез и систему кроветворения крыс. Подходы к первичной профилактике радиационного облучения, приводящей к коррекции индуцированных нарушений/ Л.Ф.Курило [и др.] Андрология и генитальная хирургия. – 2004.– №1-2.–С.64–66. 3. Андреев, А.Ю. Метаболизм активных форм кислорода в митохондриях/ А.Ю. Андреев, Ю.Е. Кушнарева, А.А.Старков// Биохимия. – 2005.– Т.70, №2.–С.200– 214. 4. ВЕРЕЩАКО, Г.Г. МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ 22 СОСТОЯНИЕ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ КРЫС-САМЦОВ ПОСЛЕ ХРОНИЧЕСКОГО НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ОБЛУЧЕНИЯ В ДОЗЕ 1,0 ГР/ Г.Г. ВЕРЕЩАКО [И ДР.]// РАДИАЦ. БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ.– 2002.–№2.–С.136–140. 5. ВЕРЕЩАКО, Г. Г. ЭФФЕКТЫ ДЛИТЕЛЬНОГО НИЗКОИНТЕНСИВНОГО ИЗЛУЧЕНИЯ НА МАССУ ОРГАНОВ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ МУЖСКИХ ОСОБЕЙ КРЫС / Г.Г. ВЕРЕЩАКО, Е.Ф. КОНОПОЛЯ, А.М. ХОДИОСОВСКАЯ // РАДИАЦ. БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ. – 2003. – №1.– С.71–74. 6. Витаминный статус и сперматогенез крыс в поздние сроки после облучения разными дозами/ В.В. Евдокимов и др.// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 1999. – Т.128, №7. – С. 42-44. 7. Гудвин, Т. Введение в биохимию растений/ Т. Гудвин, Э. Мерсер // М.: Мир. – 1986. – Т.1. – 3992с. 8. Заводник, Л.Б. Изменение структуры и биохимических показателей печени крыс при многократном γ–облучении в дозе 1 Гр/ Л.Б. Заводник, В.У. Буко// Вестник ГРГУ. – 2007. – Сер. 2. – №4. – С. 9. СОСТОЯНИЕ ЭНДОКРИННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВОЗДЕЙСТВИЯХ (СТЕНДОВАЯ СЕССИЯ). ВОЗРАСТНАЯ ЗАВИСИМОСТЬ АДАПТИВНЫХ РЕАКЦИЙ РЕПРОДУКТИВНЫХ ОРГАНОВ МЫШЕВИДНЫХ ГРЫЗУНОВ В УСЛОВИЯХ ВОЗДЕЙСТВИЯ ИОНИЗИРУЮЩЕГО ИЗЛУЧЕНИЯ РАЗЛИЧНОЙ ИНТЕНСИВНОСТИ. ЭНДОКРИННАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ФУНКЦИЙ В НОРМЕ И ПАТОЛОГИИ: 2-Я НАУЧ. МЕЖДУНАР. КОНФЕРЕНЦИЯ ", ПОСВЯЩ. 80-ЛЕТИЮ СО ДНЯ РОЖД. ПРОФ. М. Г. КОЛПАКОВА, АКАДЕМГОРОДОК, 15-17 ОКТЯБРЯ 2002/ Л.А ИВАНОВА. – НОВОСИБИРСК, 2002. – С. 10. КАРПЕНКО, Н.А.СЕКСУАЛЬНАЯ ФУНКЦИЯ САМЦОВКРЫС,ПОДВЕРГНУТЫХ ДЕЙСТВИЮ КОМПЛЕКСА ФАКТОРОВ ЗОНЫ ОТЧУЖДЕНИЯ ЧАЭС./ КАРПЕНКО Н.А.// РАДИАЦ. БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ. – 2000. – Т40, №1. – С.86-91. 11. Карпенко Н.А.Сексуальная функция самцов крыс, подвергнутых действию комплекса факторов зоны отчуждения ЧАЭС/ Н.А. Карпенко // Радиац. биология. Радиоэкология.–2000.– Т40,№1. – С.86-91. 23 12. Конопля, Е.Ф. Законмерости радиационнго поражения репродуктивной системы самцов при хроническом облучении/ Е.Ф. Конопля, Г.Г. Верещако, А.М. Ходосовская// Радация и Чернобыль, ближайшие и отдаленные последствия. – Гомель. – 2007. – С.105–110. 13. Конопля, Е.Ф. Отдаленные эффекты внешнего облучения репродуктивной системы половозрелых крыс-самцов/ Е.Ф. Конопля, О.Л. Федосенко// Проблемы здоровья и экологии. - 2008. – №18. – С.117–119. 14. Королев, Ю.Н. Лазерное излучение в профилактике пострадиационных нарушений сперматогенеза крыс/ Ю.Н. Королев, Л.А. Никулина, М.С. Гениатулина// Акт. пробл. восстанов. мед., курортол. и физиол. – СПб., 2004. – С.141. 15. Кудряшов, Ю. Б. Молекулярно-клеточные механизмы биологического действия малых доз рентгеновского излучения на изолированные клетки млекопитающих/ Ю.Б. Кудряшов, И.М. Пархоменко // Радиац. биология. Радиоэкология. – 1987. – Т.27, №3. – С.297-302. 16. Кудряшов, Ю. Б. Лучевое поражение/ Ю.Б. Кудряшов. – М, 1987. – С.48-60. 17. Мамина, В.П. Гистологический анализ семенников Apodemus sylvaticus и Clethrionomys rutilus, живущих в радиактивных зонах/ В.П. Мамина// Радиац. биология. Радиоэкология. – 1998. – Т.38, №6. – С.813–818. 18. Мамина, В.П. Значение гонадотропных гормонов и состояния тироидадреналовой системы в реакции семенников на облучение/ В.П. Мамина// Пробл. репродукции. – 2001. – №5. – С.27–29. 19. Мамина, В.П. Оценка цитофизиологического состояния семенников мелких млекопитающих, обитающих в условия повышенного радиационного фона / В.П. Мамина// Радиац. биология. Радиоэкология. – 2005. – Т.45, №1.– С 91–95. 20. Мамина, В.П. О механизмах действия малых доз ионизирующей радиации на сперматогенный эпителий / В.П. Мамина// Пробл. репродукции. – 2003. – №2. – С.22–24. 21. Нефедов, И.Ю. Наследственные последствия облучения обоих родителей (экспериментальное исследование на крысах линии Вистар): автореф. дис. докт. биол. наук/ И.Ю. Нефедов. – Обнинск. – 1998. – 52с. 22. Николаевич, Л.Н. Влияние острого внешнего воздействия γ-излучения на репродуктивную систему крыс и частоту структурных мутаций в соматических клетках беременных самок и их потомства и нарушения функции щитовидной 24 железы / Л.Н. Николаевич [и др. ] // Радиац. биология. Радиоэкология. – 2000. – №1. – С.43–48. 25. Николс, Д. Д. Биоэнергетика. Введение в хемиосмотическую теорию/ Д.Д. Николс// М.: Мир. – 1985. – 190 с. 26. Попов, Е.Г. Рецепция андрогенов в семенниках крыс: анализ эффектов инкорпорированных 137Cs, L I и внешнего облучения / Е.Г. Попов, Ф.И. Куц, О.Л. Белоусов // Вестн. НАН Беларусь, Сер. биолог. наук. – 2001. – №2. – С.95–99. 27. Попов, Е.Г. Влияние радиоэкологической обстановки и экспериментального гипертиреоидного состояния на показатели рецепции андрогенов в семенниках и предстательной железе крыс / Е.Г. Попов, Ф.И. Куц, О.Л. Белоусов// Радиац. биология. Радиоэкология. – 2002. – Т.42, №1. – С.86–91. 28. Попов, Е. Г. Роль исходного состояния ткани коры надпочечников в результате действия внешнего облучения на её структуру-функциональное состояние и андроген рецепторное взаимодействие / Е. Г. Попов, Е.Ф. Конопля, Н.В. Бансцкин// Радиац. биология. Радиоэкология. – 2005. – Т.45, № 1. – С. 46–50. 29. Рэкер, Э. Биоэнергетические механизмы: новые взгляды / Э. Рэкер. – М.: Мир. – 1979. – 216 с. 30. Состояние репродуктивной системы и печени крыс-самцов и их потомства после фракционированного облучения в малой дозе / Е. Ф. Конопля [и др.]// Радиац. биология. Радиоэкология. – 2003. – Т43, №2. – С.221-222. 31. Трифонова, Ю.П. Диагностика и коррекция нарушения мужской фертильности в зависимости от состояния вильнорадикальних процессов: автореф. дис. канд. мед. наук: /Ін-т урологии АМН Украины. - К., 2005. – С.18. 32.Федосенко, О. Л. Влияние радиоэкологического фактора на репродуктивную систему и клетки костного мозга крыс-самцов в ряду поколений/ О. Л. Федосенко, О. А. Зайцева// Радиация и Чернобыль, ближайшие и отдаленные последствия. – Гомель. – 2007. – С.117–120. 33. Характеристика митохондрий и ультраструктура миокарда крыс в условиях продолжительной инкорпорации радионуклидов 137Cs / А. И. Грицук [и др.]// Авиакосмич. и экол. медицина . – 2002. – № 4, –С. 50–55. 34. A Ca2+ activated NADPH oxidase in testis, spleen, and lymph nodes / B. Banfi [et. al]//J Biol Chem. – 2001. – Vol, 276, №40. – P. 37594–37601. 35. Accidental radiation exposure and azoospermia / G. Bezold [et.al]//J Androl. – 2000. – Vol.21. – P.403–408. 25 36. A common ancestor for a subunit in the mitochondrial proton-translocating NADH: ubiquinone oxidoreductase (complex I) and shortchain dehydrogenases/reductases/ M. Baker, W. Grundy, C. Elkan //Cell Mol Life Sci. – 1999. – Vol.55. – P 450–455. 37. A comparison of the NADPH oxidase in human sperm and white blood cells / J.S. Armstrong [et. al] //Int. J. Androl. – 2002. – Vol.25, №4. – P.223–229. 38. Szewczyk, A. Mitochondria as a pharmacological target /A. Szewczyk, L. Wojtczak// Target, Pharmacol. Rev. – 2002. – Vol.54, №1. – P.101–128. 39. Adam-Vizi, V. The production of reactive oxygen species in intact isolated nerve terminals is independent of the mitochondrial membrane potential / V. Adam-Vizi, I. Sipos, L. Tretter //Neurochemical Research. – 2003. – Vol.28, №10. – P.1575–1581. 40. Agarwal, A. Role of reactive oxygen species in the pathophysiology of human reproduction/ A. Agarwal, R.A. Saleh, M.A. Bedaiwy// Fertil Steril. – 2003.–Vol.79, №4. – P.829–843. 41. Agarwal, A. Oxidative stress and antioxidants in male infertility: a difficult balance/ A. Agarwal, S. A. Prabakaran //Iranian J. Repr.Med. – 2005. – Vol. 3, №1. – P.1–8. 42. Agarwal, A. The role of free radicals and antioxidants in reproduction/ A. Agarwal, S. Gupta, S. Sikka// Curr Opin Obstet Gynecol. – 2006. – Vol.18, №3. – P.325–332. 43. Agarwal, A. Clinical relevance of oxidative stress in male factor infertility/ A. Agarwal, K. Makker, R. Sharma //An update. Am J Reprod Immunol. – 2008. – Vol. 59, №1. – P.2–11. 44. Agarwal, A. Relationship between oxidative stress, varicocele and infertility: a metaanalysis/ A. Agarwal, S. Prabakaran, S.S. Allamaneni// Reprod Biomed Online. – 2006. – Vol.12, №5. – P.630–633. 45. Ageing, oxidative stress, and mitochondrial uncoupling / M.E. Harper [et. al]// Acta Physiol Scand. – 2004. – Vol.182. – P.321–331. 46. Amaral, A. The Expression of polymerase gamma and mitochondrial transcription factor A and the regulation of mitochondrial DNA content in mature human sperm/ A. Amaral, J. Ramalho-Santos, C. Justin, St. John// Human Reproduction. – 2007. – Vol. 22, №6. – P.1585–1596. 47. Alleviation of pre-exposure of mouse brain with low-dose 12C6+ ion or 60Co gamma-ray on male reproductive endocrine damages induced by subsequent highdose irradiation / H. Zhang [et. al]// Int. J. Androl. – 2006. – Vol. 29, №6. – P.592596. 26 48. Altered metabolism and mitochondrial genome in prostate cancer/ G.D. Dakubo [et. al]//J Clin Pathol. – 2006. – Vol.59, №1. – P 10-16. 49. Analysis of age-associated changes in mitochondrial free radical generation by rat testis /M. Vázquez-Memije [et. al] // Mol Cell Biochem. – 2008. – Vol.307. – P.23– 30. 50. Analyses of stage-specific multiple forms of lactate dehydrogenase and of cytochrome c during spermatogenesis in the mouse/ E. Thomas [et. al]// Differentiation. – 2006. – Vol.9, №1-3. – P.37–41. 51. Anaerobic NADH-fumarate reductase system is predominant in the respiratory chain of echinococcus multilocularis, providing a novel target for the chemotherapy of alveolar echinococcosis / J. Matsumoto [et. al]// Antimicrobial agents and chemotherapy. – 2008. – Vol. 52, №1. – P. 164–170. 52. Andrew, C. The role of glucose in supporting motility and capacitationin human spermatozoa / C. Andrew, W. Williams, C. Ford // J. andrology. – 2001. – Vol. 22, №4. – P.680–695. 53. Gvozdjáková, A. Mitochondrial “spermatopathy”/ A. Gvozdjáková// Mitochondrial Medicine. – 2008. – P.263-266. 54. Antioxidant intake is associated with semen quality in healthy men / B. Eskenazi [et. al] //Human Reproduction. – 2005. – Vol.20, №4. – P. 1006–1012. 55.Apoptotic сell вeath induced by low-dose radiation in male germ cells: hormesis and adaptation crit rev / G. Liu [et. al] // Toxicol. – 2007. – Vol.37, №7.– P.587–605. 56. Arsenic-induced toxicity and the protective role of ascorbic acid in mouse testis./ Chang SI, .[et.al].// Toxicol Appl Pharmacol.–2007.–Vol.218,№2.–P.196–203. 57. Balaban RS. Cardiac energy metabolism homeostasis: role of cytosolic calcium./ Balaban RS. //J Mol Cell Cardiol .–2002.– Vol.34.–P 1259–1271. 58. Barratt, C.L. The impact of mitochondrial genetics on male infertility/ C.L. Barratt, J.C. St John, R.P. Jokhi //Int J Androl. - 2005. – Vol.28, №2.–P.65–73. 59. Beattie, D.S. Bioenergetics and oxidative metabolism: textbook of biochemistry with clinical correlations/ D.S. Beattie; edited by T.M Devlin. - New York: Liss, 2002.– P.535–596. 60. Bennetts, L.E. A comparative study of oxidative DNA damage in mammalian spermatozoa. / L.E. Bennetts, R.J. Aitken// Mol Reprod Dev. – 2005. – Vol.71.– P.77–87. 61. Botelho Cabral, M.G. Histomorphometry of sexually immature albino rat testis after x ray-irradiation/ M.G. Botelho Cabral, H. Hayashi, S.M. Miraglia //Interciencia. – 1997.– Vol.22, №2. – P.71-80. 27 62. Boussouar, F. Lactate and energy metabolism in male germ cells/ F. Boussouar, M. Benahmed// Trends Endocrinol Metab. – 2004. – Vol.15,№7.– P.345–350. 63. Brenner, C. Apoptosis. Mitochondria – the death signal integrators/ C. Brenner, G. Kroemer// Science . – 2000. – Vol 289. – P.1150–1151. 64. Brookes, P. Hypothesis: the mitochondrial NO· signaling pathway and the transduction of nitrosative to oxidative cell signals: an alternative function for cytochrome C oxidase / P. Brookes, V.M. Darley-Usmar// Free Radic. Biol. Med.– 2002.– Vol. 32. – P.370–374. 65.Brookes, P.S. Mitochondria: regulators of signal transduction by reactive oxygen and nitrogen species/ P.S. Brookes [et. al]// Free Radic. Biol. Med. – 2002. – Vol.33.– P.755–764. 66. Brown, M.T. Ancient invasions: from endosymbionts to organelles / M. T. Brown, P. J. Johnson, S. D. Dyall// Science . – 2004. – Vol.304, №5668. – P.253–257. 67. Burger, H.G. The testis / D.M Dekretser, H.G. // Raven Press, New York. – 1981.– P.171-194. 68. Calcium and mitochondria / R.I. Eliseev [et. al]//FEBS Lett. – 2004. – Vol.567.– P.96–102. 69..Calcium, ATP and ROS: a mitochondrial love-hate triangle/ S. Paul [et. al]// Am. J. Physiol. Cell Physiol. – 2004. – Vol.287. – P.817–833. 70. Calcium signaling in single rat Leydig cells/ M. Tomic [et. al] //Endocrinology.– 1995. – Vol.136. – P. 3422–3429. 71.Casellas, P. Peripheral benzodiazepine receptors and mitochondrial function/ P. Casellas, S. Galiegue, A.S. Basile // Neurochem. Int. – 2002. – Vol.40. – P.475–486. 72.Characterization of novel Ucp5/Bmcp1 isoforms and differential regulation of Ucp4 and Ucp5 expression through dietary or temperature manipulation/ Y. Xing Xian [et. al]// Faseb. 2000. – Vol.14. – P.1611–1618. 73. Cheburakov, BIu. Morphological changes in testicular tissue in clean-up personnel after the chernobyl nuclear reactor accident/ BIu. Cheburakov , SIu. Cheburakov, NIu. Belozerov// Arkh Patol. – 2004. – Vol.66, №2. – P.19–21. 74. Chen, Y M. Expression and regulation of glucose transporter 8 in rat Leydig cells/ Y. M. Chen., L. Nagpal, T. Lin//J. Endocrinology. – 2003. – Vol.179, №1. – P.63– 72. 75. Chitra, K.C. Vitamin E prevents nonylphenol-induced oxidative stress in testis of rats /Chitra K.C, P.P. Mathur //Indian. J. Exp. Biol. – 2004. – Vol.42, №2. – P.220223. 28 76. Chomyn, A. MtDNA mutations in aging and apoptosis/ A. Chomyn, G. Attardi //Biochem. Biophys. Res. Commun. – 2003. – Vol.304, №3. – P.519-529. 77. Christenson, L.K. Steroidogenic acute regulatory protein (StAR) and the intramitochondrial translocation of cholesterol/ L.K. Christenson, J.F. Strauss// Biochim. Biophys. Acta. – 2000. – Vol.1529. – P.175–187. 78. Chronic contamination with 137Cesium in rat: effect on liver cholesterol metabolism / M. E. Souidi [et. al]// Int. J. Toxicol. – 2005.–Vol.25, № 6. – P.493-497. 79. Cione, E. Characterization of rat testes mitochondrial retinoylating system and its partial purification/ E. Cione, G. Genchi//J. Bioenerg. Biomembr. – 2004. – Vol.36, №2. – P.211–217. 80. Comparison of effects of 0.5 and 3.0 Gy x-irradiation on lipid peroxidation and antioxidant enzyme function in rat testis and liver / V. Peltola [et. al]// Andrology.– 1993.–Vol.14, №4.–P 267–274. 81. Complete structure of the 11-subunit bovine mitochondrial cytochrome bc1 complex / S. Iwata [et. al]// Science. – 1998. – Vol. 281. – P.64–71. 82.Correlation of sperm motility with mitochondrial enzymatic activities / E. Ruiz pesini [et. al]// Clin. chem. – 1998. – Vol.44. – P.1616–1620. 83.Cross-talk of NO, superoxide and molecular oxygen, a majesty of aerobic life / M. Inoue [et. al]// Free Radic. Res. – 1999. – Vol.31. – P. 251–260. 84. Cox7a2 mediates steroidogenesis in TM3 mouse Leydig cells / C. Liang [et. al]// Asian J. Androl. – 2006. – Vol 8, №5. – P.589–594. 85. Darley-Usmar, V.M. Mitochondria, a practical approach/ V.M. Darley-Usmar, D. Rickwood, M.T. Wilson// Oxford: IRL. – 1987. – P. 86. Kretser, D.E. Sertoli Leydig cell interaction in the regulation of testicular function /D.E. Kretser// International Journal of Andrology. – 1982. – №5. – P.11–17. 87. Delhumeau-Ongay, G. Changes of Ca2C-Mg2C ATPase activity in rat testis throughout maturation / G. Delhumeau-Ongay, R. Trejo-Bayona, L. Lara-Vivas //J. Reprod. Fertil. – 1973. – Vol.33. – P. 513–517. 29 88. Differenccs of sperm motility in mitochondrial DNA haplogroup U sublineages/ F. Montiel Sosa [et. al]// Gene. – 2006. – Vol. 368. – P 21–27. 89. Differential activity and synthesis of lactate dehydrogenase isozymes A (muscle), B (heart), and C (testis) in mouse spermatogenic cells./ S.S. Li [et. al]//Biol. Reprod. – 1989. – Vol.40. – P.173–180. 90. Differential expression of growth factors in irradiated mouse testes/ C. Mauduit [et. al]//International journal of radiation oncology biology physics. – 2001. – Vol.50, №1. – P 203–212. 91. Differential regulation of testosterone vs. 5α-dihydrotestosterone by selective androgen response elements/ Pei-Wen [et. al]// Molecular and Cellular Biochemistry. – 2000. – Vol. 206, № 1–2. – P 169-175. 92. Direct maldi-ms analysis of cardiolipin from rat organs sections/ J. Hay-Yan [et. al]// J. Am. Soc. Mass. Spectrom. – 2007. – Vol.18, №3 – P.567–577. 93.On the structure of the stator of the mitochondrial ATP synthase/ V.K. Dickson [et. al]// EMBO J. – 2006. – Vol.25. – P.2911–2918. 94. Dobrzyńska, M.M. The change in reproductive ability of male mice exposed to vinblastine and X-rays / M.M. Dobrzyńska, M.G. Słowikowska, U. Mikulska// Rocz. Panstw. Zakl. Hig. – 2004. – Vol.55, №2. – P.147–157. 95. Duan, C. Inhibition of lactate dehydrogenase C4 (LDH-C4) blocks capacitation of mouse sperm in vitro/ C. Duan, E. Goldberg// Cytogenet. Genome. Res. – 2003. – Vol.103, №3-4. – P 352–359. 96.Dufau, M.L. The luteinizing hormone receptor/ M.L. Dufau //Annu. Rev. Physiol. – 1998. – Vol.60. – P 461–496. 97. Effect of antioxidant intake on sperm chromatin stability in healthy nonsmoking men / W. Elana [et. al]// Andrology. – 2005. – Vol.26, №4. – P 550–556. 98. Effects of extremely low frequency electromagnetic fields on male reproduction in mice /R. Hong [et. al]// Zhonghua. Lao. Dong. Wei. Sheng. Zhi. Ye. Bing. Za. Zhi. – 2003. – Vol.21, №5. – P.342-345. 99. Effect of low-level radiation on the death of male germ cells/ Liu. Guangwei [et. al]//Radiat. Res. – 2006. – Vol.165, №4. – P.379–389. 100. Effect of myxothiazol on Leydig cell steroidogenesis: inhibition of luteinizing hormone-mediated testosterone synthesis but stimulation of basal steroidogenesis/ S. Andrew [et. al]// Endocrinology. – 2007. – Vol.148, №6. – P.2583–2590. 30 101. Effects of prenatal irradiation with accelerated heavy-ion beams on postnatal development in rats: III. Testicular development and breeding activity/ B. Wanga [et.al]//Advances in space research. – 2007. – Vol.40, № 4. – P.550–562. 102. Effects of Basella alba and hibiscus macranthus extracts on testosterone production of adult rat and bull Leydig cells/ P.F. Moundipa [et. al] // Asian J. Androl. – 2005. – №7. – P 411–417. 103. Effects of metabolic blockade on the regulation of intracellular calcium in dissociated mouse sensory neurones/ M.R. Duchen [et. al]//J. Physiol. – 1990. – Vol.424. – P. 411–426. 104. Effects of pre-exposure of mouse testis with low-dose (16)O8+ ions or 60Co gamma-rays on sperm shape abnormalities, lipid peroxidation and superoxide dismutase (SOD) activity induced by subsequent high-dose irradiation/ H. Zhang [et. al]//Int. J. Radiat. Biol. – 1998. – Vol.73, №2. – P.163–167. 105. Effects of vitamins C and E on steroidogenic enzymes mRNA expression in polychlorinated biphenyl (Aroclor 1254) exposed adult rat Leydig cells/ P. Murugesan [et. al]// Toxicology. – 2007. – Vol.232, №3. – P.170-182. 106. Elawady Mostafa, K. Steroid 5α reductase mRNA type I is differentially regulated by androgens and glucocorticoids in the rat liver / K. Elawady Mostafa, Elgarwael, L. Elhoussieny// Endocrine . – 2004. – Vol.51, №1. – P 37–46. 107. Elston, T. Energy transduction in ATP synthase / T. Elston, H. Wang, G. Oster// Nature. – 1998. – Vol.391, №6666. – P. 510–513. 108. Energized, polarized, and actively respiring mitochondria are required for acute Leydig cell steroidogenesis/ J.A. Allen [и др.]// Endocrinology. – 2006. – Vol.147. – P.3924–3935. 109. Enhanced mitochondrial testicular antioxidant capacity in Goto-Kakizaki diabetic rats: role of coenzyme Q/ M. Carlos [et. al] //Am J. Physiol. Cell. – 2001. –Vol.281, №3. – P.1023–1028. 110. Enhancement of a spermatogonial proliferation and differentiation in irradiated rats by gonadotropin-releasing hormone antagonist administration/ G.A. Shuttlesworth [et. al]// Endocrinology. – 2000. – Vol.141. – P.37–49. 31 111. Essential role of neutrophils in germ cell-specific apoptosis following ischemia/reperfusion injury of the mouse testis / J.J. Lysiak [et. al]// Biol. Reprod. – 2001. – Vol.65. – P.718–725. 112. Expression of metabotropic glutamate receptors in the rat and human testis/ M. Storto [et. al]//J. Endocrinology . – 2001. – Vol.170. – P.71–78. 113. Expression of the gene for mouse lactate dehydrogenase C (Ldhc) is required for male fertility / F. Odet [et. al]// Biol. Reprod. – 2008. – Vol.79, №1. – P.26–34. 114. Extent of sperm DNA damage in spermatozoa from men examined for infertility. relationship with oxidative stress/ G.R. Smith [et. al]// Rev. Med. Chil. – 2007. – Vol.135. – P. 279–286. 115. Fas and Fas ligand expression in fetal and adult human testis with normal or deranged spermatogenesis/ S. Francavilla [et. al]// J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2000. – Vol.85, №8. – P.2692–2700. 116. Ford,W.C. Glycolysis and sperm motility: does a spoonful of sugar help the flagellum go round?/ W.C. Ford.// Hum. reprod. update. – 2006. – Vol.12, №3. – P 269-274. 117. Functional assessment of self-renewal activity ofmale germ line stem cells following cytotoxic damage and serial transplantation / M. Kanatsu-Shinohara [et. al]// Biol. Reprod. – 2003. – Vol.68. – P.1801-1807. 118. Gakh, O. Mitochondrial processing peptidases/ O. Gakh, P. Cavadini, G. Isaya// Biochim. Biophys. Acta. – 2002. – Vol.1592. – P.63–77. 119. Gavazza, M.B. The effect of alpha-tocopherol on lipid peroxidation of microsomes and mitochondria from rat testis/ M.B. Gavazza, A. Catalá// Prost. Leukot Es.Fat.Acids. – 2006. – Vol.74, №4. – P.247-254. 120. Genetic effects of radiotherapy for childhood cancer / J.D. Boice [et. al]// Health. Phys. – 2003. – Vol.85, №1. – P 65–80. 121. Germ cell survival through carbohydrate-mediated interaction with sertoli cells / T.O. Akama [et. al]// Science. – 2002. – Vol.295, № 5552. – P.124–127. 32 122. Gincel, D. Calcium binding and translocation by the voltage-dependent anion channel: a possible regulatory mechanism in mitochondrial function/ D. Gincel, H. Zaid, V. Shoshan-Barmatz// Biochem. J. – 2001. – Vol.358. – P.147–155. 123. GLUT8 is dispensable for embryonic development but influences hippocampal neurogenesis and heart function/ M. Membrez [et. al]// Molecular and cellular biology. – 2006. – P 4268–4276. 124. Glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase-s, a sperm-specific glycolytic enzyme, is required for sperm motility and male fertility/ K. Miki [et. al]// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2004. – Vol.104. – P.16501–16506. 125. Goldberg, E. Lactate dehydrogenase-x from mouse testes and spermatozoa/ E. Goldberg //Methods Enzymol. – 1975. – Vol.41. –P 318-323. 126. Gonadal function in patients with differentiated thyroid cancer treated with (131) I/ A.F. Esfahani [et. al]// Hell. J. Nucl. Med. – 2004. – Vol.7№1. – P.52–55. 127. Gonadal protection from radiation by GnRH antagonist or recombinant human FSH: a controlled trial in a male nonhuman primate (Macaca fascicularis)/ A. Kamischke [et. al]//J. Endocrinology. – 2003. – Vol.179, №2. – P.183–194. 128. Grootegoed, J.A. Energy metabolism of spermatids / P.J. Boer; a review D.W. Hamilton, G.M. Waites// Scientific basis of fertility regulation. Cellular and molecular events in spermiogenesis. – Cambridge: Cambridge University Press. – 1990. – P.193–216. 129. Habert, R. Origin, differentiation and regulation of fetal and adult Leydig cells / R. Habert, H. Lejeune, J.M. Saez// Mol. Cell Endocrinol. – 2001. – Vol.179, №(1-2). – P.47–74. 130. Haider, S.G. Cell biology of Leydig cells in the testis/ S.G. Haider// Int. Rev. Cytol. 2004. – Vol.233. – P.181–241. 131. Harris, R.A. Carbohydrate metabolism I: major metabolic pathways and their control/ R.A. I Harris; edit. by T.M. Devlin// Bichemistry with clinical correlations. – New York: Wiley-Liss. – 2002. – P.597–664. 132. High radiosensitivity of germ cells in human male fetus/ R. Lambrot [et. al]//J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2007. – Vol.92, №7. – P.2632–2639. 133. Homologs of Gp91phox: cloning and tissue expression of Nox3, Nox4, and Nox5/ G. Cheng [et. al]// Gene. – 2001. – Vol.269. – P.131–140. 33 134. Huekins, C. Morphological and quantitative analysis of spermatogonia in mouse testes using whole mounted seminiferous tubules. II. The irradiated testes / C E. Huekins, F. Oakberg// Anat. Rec. – 1978. – Vol.192, №4. – P.529–541 135. Huhtaniemi, I. Fetal Leydig cells: cellular origin, morphology, life span and special functional features/ I. Huhtaniemi, L. Pelliniemi// Proc. Soc. Exp. Biol. Med. – 1992. – Vol.201, №2. – P 125–140. 136. Human chorionic gonadotropin (hCG) increases cytosolic free calcium in adult rat Leydig cells/ S. Kumar [et. al] //Cell Calcium. – 1994. – Vol.15. – P.349–355. 137. Human mtDNA haplogroups associated with high or reduced spermatozoa motility / E. Ruiz Pesini [et. al]//Am. J. Hum. Gener. – 2000. – Vol.67. – P.682–696. 138. Hüttemann, M. Cytochrome c oxidase of mammals contains a testes-specific isoform of subunit VIb – the counterpart to testes-specific cytochrome c/ M. Hüttemann, S. Jaradat, L.I. Grossman// Mol. Reprod. – 2003. – Vol.66. – P.8–16. 139. Impact of folate and homocysteine metabolism on human reproductive health/ T. Forges [et. al] //Hum. Reprod. Update. – 2007. – Vol.13. – P 225–238. 140. Increased lipid peroxidation and ascorbic acid utilization in testis and epididymis of rats chronically exposed to lead/ M. Marchlewicz [et. al]// Biometals. – 2007. – Vol.20, №1. – P.13-19. 141. Increased sperm DNA damage in patients with varicocele: relationship with seminal oxidative stress/ R. Smith [et. al]// Hum. Reprod. – 2006. – Vol. 21. – P.986–993. 142. Increased testicular 8-hydroxy-2’-deoxyguanosine in patients with varicocele/ T. Ishikawa [et. al]// BJU Int. – 2007. – Vol.100. – P.863–866. 143. Induction of apoptotic program in cell-free extracts: requirement for dATP and cytochrome c / X. Liu [et. al] //Cell. – 1996. – Vol.86. – P.147–157. 144. Induction of cytogenetic adaptive response in spermatogonia and spermatocytes by pre-exposure of mouse testis to low-dose 12C6+ ions/ C. Hong Zhanga [et. al]// Mutation Research. – 2008. – Vol.653. – P 109–112. 145. Inhibition of recovery of spermatogenesis in irradiated rats by different androgens / G. Shetty [et. al]// Endocrinology. – 2002. – Vol.143, №9. – P.3385–3396. 34 146. In vivo and in vitro peripheral-type benzodiazepine receptor polymerization: functional significance in drug ligand and cholesterol binding/ F. Delavoie [et. al]// Biochemistry. – 2003. – Vol.42. – P. 4506–451. 147. In vivo effects of chronic contamination with 137 cesium on testicular and adrenal steroidogenesis / E. Grignard [et. al]//Arch. Toxicol. – 2008. – Vol.82, №9. – P.583– 589. 148. Irradiation causes acute and long-term spermatogonial depletion in cultured and xenotransplanted testicular tissue from juvenile nonhuman primates jens/ K. Jahnukainen [et.al]// Endocrinology. – 2007. – Vol.148, №11. – P.5541–5548. 149. Alvarez, J.G. Nurture vs Nature: how can andrology lab corner optimize sperm quality/ J.G. Alvarez// Andrology. – 2003. – Vol.24, №5. – P.640–648. 150. Kangasniemi, M. Failure of spermatogenesis to recover despite the presence of a spermatogonia in the irradiated LBNF1 rat/ M. Kangasniemi, I. Huhtaniemi, M. Meistrich // Biology of Reproduction. – 1996. – Vol.54, №6. – P.1200–1208. 151. Karbowski, M. Dynamics of mitochondrial morphology in healthy cells and during apoptosis / M. Karbowski, R.J. Youle // Cell Death Differ. – 2003. – №10. – P.870–880. 152. Testicular edema is associated with spermatogonial arrest in irradiated rats / L. Karen [et.al] // Endocrinology. – 2006. – Vol.147, №3. – P.12971305. 153. Tremellen, K. Oxidative stress and male infertility – a clinical perspective human reproduction/ K. Tremellen // Update 2008. – Vol.14, №3. – P.243-258. 154. Kim, J.S. Mitochondrial permeability transition: a common pathway to necrosis and apoptosis / J.S. Kim, L. He, J.J. Lemasters// Biochem. Biophys. Res. Commun. – 2003. – Vol.304, №3. – P.463–470. 155. Kim, S.T. The expression of GLUT8, GLUT9a and GLUT9b in the mouse testis and sperm/ S.T. Kim, K.H. Moley // Reprod. Sci. – 2007. – Vol.14, №5. – P.445455. 156. Kliesch, S. Cryopreservation of sperm/ S. Kliesch, A. Kamischke, E. Nieschlag// In andrology: male reproductive health and dysfunction. – Heidelberg: Springer, 2000. – P. 349–356. 157. Krawczuk-Rybak, M. Male gonadal function before and after chemotherapy in prepubertal boys / M. Krawczuk-Rybak, E. Solarz, Woczyñski //Roczniki Akademii 35 Medycznej w Biaymstoku. Proceedings Annales Academiae Medicae Bialostocensis.·– 2004.– Vol. 49.– Suppl. 1. – P.126-128., 157. Korotchkina, L.G. Characterization of testis-specific isoenzyme of human pyruvate dehydrogenase / L.G. Korotchkina, S. Sidhu, M.S. Patel // J. Biol. Chem. – 2006. – Vol.281, №14. – P.9688–9696. 158. Kroemer, G. Mitochondrial control of cell death / G. Kroemer, J.C. Reed// Nat. Med. – 2000. – №6. – P.513–519. 159. Lenaz, G. The mitochondrial production of reactive oxygen species: mechanisms and implications in human pathology/ G. Lenaz // IUBMB Life. – 2001. –Vol.52, №(3-5). – P.159–164. 160. Leonard, J.V. Mitochondrial respiratory chain disorders I: mitochondrial DNA defects/ J.V. Leonard, A.H.V. Schapira // Lancet. – 2000. – Vol. 355. – P.389–394. 161. Liaginskaia, A.M. Kinetics of metabolism and mechanisms of formation of absorbed doses in the mouse testis from incorporated 137Cs / A.M. Liaginskaia, V.A. Osipov, S. I. Dement'ev // Radiats Biol. Radioecol. – 1998. – Vol. 38, №1. – P.2730. 162. Littarru, G.P. Bioenergetic and antioxidant properties of coenzyme Q10: recent developments / G.P. Littarru , L. Tiano// Mol. Biotechnol. – 2007. – Vol.37, №1. – P.31–37. 163. Liu, S.S. Cooperation of a “reactive oxygen cycle” with the Q cycle and the proton cycle in the respiratory chain-superoxide generating and cycling mechanisms in mitochondria/ S.S. Liu // J. Bioenerg. Biomembranes. – 1999. – Vol.31. – P. 367– 376. 164. Liu, Z. Remarkably high activities of testicular cytochrome C in destroying reactive oxygen species and in triggering apoptosis/ Z. Liu [et.al]// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2006. – Vol.103, №24. – P.8965–8970. 165. Loeffler, M. The mitochondrion in cell death control: certainties and incognita / M. Loeffler, G. Kroemer //Exp. Cell Res. – 2000. – Vol.256. – P.19–26. 166. Lycopene protects against cyclosporine A-induced testicular toxicity in rats / M. Sonmez [et.al]// Theriogenology. – 2007. – Vol.67. – P.778–785. 36 167. Long-term effects of irradiation before adulthood on reproductive function in the male rhesus monkey / G. Dirk [et.al]// Biology of reproduction. – 2002. – Vol.66.– P.486-494. 168. Lysenko, A.I. Morphological changes in male sexual glands in Kaluga regions contaminated with radionuclides / A.I. Lysenko, I.D. Kirpatovskiĭ, S.S. Pisarenko //Arkh. Patol. – 2000. – Vol.62, №4. – P.27–31. 169. Maechler, P. Mitochondria as the conductor of metabolic signals for insulin exocytosis in pancreatic beta-cells/ P. Maechler // Cell Mol. Life Sci. – 2002. – Vol.59. – P.1803–1818. 170. Makinta, M.J. Radiation exposure exerts its adverse effects on sperm maturation through estrogen-induced hypothalamohypophyseal axis inhibition in rats/ M.J. Makinta, J.M. Brinders, K.A. Smith //African Zoology. – 2005. – Vol.40, №2. – P.243–251. 171. Male gonadal dose in adjuvant 3-d-pelvic irradiation after anterior resection of rectal cancer. Influence to fertility/ M.D. Piroth [et.al]// Strahlenther Onkol. – 2003. – Vol.179, №11. – P. 754–759. 172. Martianov, I. Late arrest of spermiogenesis and germ cell apoptosis in mice lacking the TBP-like TLF/TRF2 gene/ I. Martianov [et.al]// Molecular Cell. – 2001. – Vol.7, №3. – P.509–515. 173. Mathiesen, C. Transmembrane topology of the nuoL, M and N subunits of NADH: quinone oxidoreductase and their homologues among membrane-bound hydrogenases and bona fide antiporters/ C. Mathiesen, C. Hagerhall // Biochim. Biophys. Acta. – 2002. – Vol.1556, № 2-3. – P 121–132. 174. McBride, H.M. Mitochondria: more than just a powerhouse/ H.M. McBride, M. Neuspiel, S. Wasiak //Curr. Biol. – 2006. – Vol 16, №14. – P.551–560. 175. Mechanism of Ca2+ activation of the NADPH oxidase 5 (NOX5) / B. Bánfi [et.al]// J. Biol. Chem. – 2004. – Vol.279, №18. – P.18583–18591. 176. Mechanisms of male infertility: role of antioxidants / S.A. Sheweita , A. M. Tilmisany, H. Al-Sawaf// Current Drug Metabolism. – 2005. – Vol.6, №5. – P. 495– 501. 37 177. Mechanism of protection of rat spermatogenesis by hormonal pretreatment: stimulation of spermatogonial differentiation after irradiation/ M.L. Meistrich [et.al]// Andrology. – 2000. – Vol.21. – P.464–469. 178. Meinhardt, A. Expression of mitochondrial marker proteins during spermatogenesis / A. Meinhardt, B. Wilhelm, J. Seitz // Hum. Reprod. – 1999. – Update. – Vol.5. – P. 108–119. 179. Meistrich, M.L. Spermatogonial stem cells: assessing their survival ability to produce differentiated cells/ M.L. Meistrich, M. Vaneek // Methods in toxicology academic press. – New York. – 1993. – P.106-123. 179. Metabolic inhibition with cyanide induces calcium release in pulmonary artery myocytes and xenopus oocytes / Y.X. Wang [et.al]// Am. J. Cell Physiol. – 2003. – Vol.284. – P. 378–388. 180. Metabolic strategy of boar spermatozoa revealed by a metabolomic characterization/ S. Marin [et.al]// FEBS Lett. – 2003. – Vol.554, №3. – P 342–346. 181. Metabolism of amino acids by cultured rat Sertoli cells/ G.R. Kaiser [et.al]// Metabolism clinical and experimental. – 2005. – Vol.54, №4. – P.515 – 521. 182. Mitochondria-related male infertility [Electronic resource] / N. Kazuto [et.al]// PNAS. –2006. – Vol. 103, №41. – Mode of access: http://www.pnas.org/cgi/content/full/103/41/15148%20-%20COR1#COR1. 183. Mitochondrial ATP synthase. Crystal structure of the catalytic F1 unit in a vanadate-induced transition-like state and implications for mechanism / C. Chen [et.al]// J. Biol. Chem. – 2006. – Vol.281. – P. 13777–13783. 184. Mitochondrial calcium transport: mechanisms and functions / T.E. Gunter [et.al]// Cell Calcium. – 2000. – Vol.28. – P.285–296. 185. Mitochondrial differentiation during meiosis of male germ cells/ J. Seitz [et.al] //Int. J. Androl. – 1995. – Vol 18, №2. – P.7–11. 186. Mitochondrial disease in mouse results in increased oxidative stress/ LA. Esposito [et.al]// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 1999. – Vol.96. – P. 4820–4825. 187. Mitochondrial intermembrane proteins in cell death / M. Van Gurp [et.al]// Biochem. Biophys. Res. Commun. – 2003. – Vol.304, №3. – P. 487–497. 38 188. Mitochondrial reactive oxygen species in cell death signaling / C. Fleury, B. Mignotte, J.L. Vayssiere // Biochimie. – 2002. – Vol.84. – P.131–141. 189. Molecular identity, expression and functional analysis of interleukin-1alpha and its isoforms in rat testis/ T. Sultana [et.al]// Asian J. Androl. – 2004. – №6. – P.149– 153. 190. Monesi, V. Relation between x-ray sensitivity and stages of the cell cycle in spermatogonia of the mouse/ V. Monesi // Rad. Res. – 1962. – Vol.17. – P.809-838. 191. Montero, M. A. Novel regulatory mechanism of the mitochondrial Ca2+ uniporter revealed by the p38 mitogen-activated protein kinase inhibitor SB202190/ C.D. Lobaton, A. Montero, J. Alvarez // FASEB J. – 2002. – Vol.16. – P.1955– 1957. 192. Moreno, S.G. High sensitivity of rat foetal germ cells to low dose-rate irradiation / S.G. Moreno, B. Dutrillaux, H. Coffigny //Int. J. Radiat. Biol. – 2001. – Vol.77. – P. 529–538. 193. Moreno, S.G. Study of the gonocyte cell cycle in irradiated TP53 knockout mouse foetuses and newborns / S.G. Moreno, B. Dutrillaux, H. Coffigny //Int. J. Radiat. Biol. – 2002. – Vol.78. – P.703–709. 194. Morris, I. Protection against cytotoxic induced testis damage-experimental approaches/ I. Morris // European Urology. – 1993. – Vol.23. – P.143–147. 195. Mukai, C. Glycolysis plays a major role for adenosine triphosphate supplementation in mouse sperm flagellar movement/ C. Mukai, M. Okuno //Biol. Reprod. – 2004. – Vol.71. – P.540-547. 196. Nicholls, D.G. Mitochondria and calcium signaling/ D.G. Nicholls// Cell Calcium. – 2005. – Vol.38. – P.311–317. 197. Nicholls, D.G. The integration of mitochondrial calcium transport and storage/ D.G. Nicholls, S. Chalmers // J. Bioenerg. Biomembr. – 2004. – Vol.36. – P. 277– 281. 198. Nicholls, D. Bioenergetics 3/ D. Nicholls, S. Ferguson. – London: Academic Press. – 2002. – P. 39 199. Noji, H. The rotary machine of the cell, ATP synthase / H. Noji, M. Yoshida // J. Biol. Chem. – 2001. – Vol. 276. – P.1665–1668. 200. Okamoto, M. Fertilizing ability in vitro of golden hamster after acute testicular xirradiation/ M. Okamoto // Experimental Animals. – 1992. – Vol.41, №1. – P.33–38. 201. Outer mitochondrial membrane permeabilization: an open-and-shut case/ J.D. Robertson [et. al]// Cell Death Differ. – 2003. – Vol.10, №5. – P.485–487. 202. Oxidation flux change on spermatozoa membrane in important pathologic conditions leading to male infertility/ V. Wiwanitkit // Andrologia. – 2008. – Vol.40. – P. 192–194. 203. Oxidative lipidomics of apoptosis: redox catalytic interactions of cytochrome c with cardiolipin and phosphatidylserine / V.E. Kagan [et.al]// Free Radic. Biol. Med. – 2004. – Vol.15, 37, №12. – P.1963–1985. 204. Oxidative Stress: a common factor in testicular dysfunction / T. Terry [et.al]// J. Andrology. – 2008. – Vol. 29, №5. – P .488–498. 205. Pagliarini, D.J. Mitochondrial modulation: reversible phosphorylation takes center stage/ D.J. Pagliarini, J.E. Dixon //Trends Biochem. Sci. – 2006. – Vol.31, №1. – P. 26–34. 206. Papadopoulos, V. Peripheral-type benzodiazepine receptor-mediated action of steroidogenic acute regulatory protein on cholesterol entry into Leydig cell mitochondria/ T. Hauet [et.al]// Mol. Endocrinol. – 2005. – Vol.19. – P.540–554. 207. Payne, A.H. Overview of steroidogenic enzymes in the pathway from cholesterol to active steroid hormones / A.H. Payne, D.B. Hales // Endocr. Rev. – 2004. – Vol.25. – P.947–970. 208. Pentikainen, V. Male germ cell apoptosis/ V. Pentikainen, L. Dunkel, K. Erkkila // Endocr. Dev. – 2003. – №5. – P.56-80. 209. Perinuclear, perigranular and sub-plasmalemmal mitochondria have distinct functions in the regulation of cellular calcium transport / M. Park [et.al]// EMBO J. – 2001. – Vol.20. – P. 1863–1874. 210. Prasad, K.N. Handbook of radiation/ K.N. Prasad. – Florida: CRC Press Inc, 1984. – P. 48–62. 40 211. Gehlot, P. Alterations in oxidative stress in testes of swiss albino Mice by aloe vera leaf extract after gamma irradiation / P. Gehlot, D. Soyal, P.K. Goyal // Pharmacologyonline. – 2007. – №1. – P.359-370. 212. Primary infertility in nuclear industry employees: report from the nuclear industry family study/ P. Doyle [et.al] // Occup. Environ. Med. – 2001. – Vol.58 . – P.535– 539. 213. Print, C.G. Germ cell suicide: new insights into apoptosis during spermatogenesis/ C.G. Print, K. Loveland// Bioessays. – 2000. – Vol. 22. – P.423–430. 214. Protection from radiation-induced damage to spermatogenesis by hormone treatment / B. Kurdoglu [et.al]// Radiation research. – 1994. – Vol.139, №1. – P.97– 102. 215. Pubertal development and growth after total-body irradiation and bone marrow transplantation for haematological malignancies / B. Bakker [et.al]// Eur. J. Pediatr. –2000. – Vol.159, № 1-2. – P. 31–37. 216. Quantitative analysis of spontaneous mitochondrial depolarizations / C.M. O'Reilly [et.al]// Biophys. J. – 2003. – Vol.85. – P.3350–3357. 217. Radiation exposure impairs luteinizing hormone signal transduction and steroidogenesis in cultured human Leydig cells/ S. Ramadoss [et.al]// Toxicological sciences. – 2006. – Vol.91, №2. – P.550–556. 218. Radiation-induced cell death in the mouse testis: relationship to apoptosis / M. Hasegawa [et.al]// Radiat. Res. – 1997. – Vol.147, №4. – P. 457-467. 219. Radiosensitivity of testicular cells in the fetal mouse / R. Vergouwen [et.al]// Radiat. Res. – 1995. – Vol.141. – P.66–73. 220. Rastogi, V.K. Structural changes linked to proton translocation by subunit c of the ATP synthase/ V.K. Rastogi, M.E. Girvin // Nature. – 1999. – Vol.402. – P.263–268. 221. Rat testis as a radiobiological in vivo model for radionuclides. Radiation protection/ M.G. Grafstro [et.al]// Dosimetry. – 2006. – Vol.118, №1. – P. 32– 42. 222. Reactive oxygen species derived from the mitochondrial respiratory chain are not responsible for the basal levels of oxidative base modifications observed in nuclear DNA of mammalian cells/ S. Hoffmann [et.al]// Free Radic. Biol. Med. – 2004. – Vol.36. – P. 765–773. 41 223. Redox control of cell death / S. Ueda [et.al]// Antioxid. Redox. Signal. – 2002. – № 4. – P.405–414. 224. Regulation of human male germ cell death by modulators of ATP production/ K. Erkkila [et.al]// Am J. Physiol. Endocrinol. Metab. – 2006 . – Vol. 290, №6. – P. 1145–1154. 224. Regulation of oxidative phosphorylation, the mitochondrial membrane potential and their role in human disease/ M. I. Hüttemann [et.al]// J. Bioenerg. Biomembr. – 2008. – Vol.40, №5. – P.445–456. 225. Regulation of rat Sertoli cell function by FSH: possible role of phosphatidylinositol 3-Kinase/ S.B. Meroni [et.al] // J. Endocrinol. – 2002. – Vol.174. – P.195-204. 226. Relations among hormonal treatments, suppression of spermatogenesis and testicular protection from chemotherapy induced damaged / M. Meistrich [et.al //Endocrinology. – 1996. – Vol.137, №9. – P.3823-–3831. 227. Relationship of interleukin-6 with semen characteristics and oxidative stress in patients with varicocele/ K.P. Nallella [et.al] // Urology. – 2004. – Vol. 64. – P. 1010–1013. 228. Respiratory chain complexes and membrane fatty acids composition in rat testis mitochondria throughout development and ageing/ M. Vazquez-Memije [et.al]// Exp. Gerontol. Jun. – 2005. – Vol. 40, №6. – P. 482-490. 229. Ricci, J.E. Mitochondrial functions during cell death, a complex (I-V) dilemma/ J.E. Ricci, N. Waterhouse, D.R. Green // Cell Death Differ. – 2003. – №10. – P.488– 492. 230. Role of reactive oxygen species in the pathogenesis of mitochondrial DNA (mtDNA) mutations in male infertility / S. Venkatesh [et.al]// Indian J. Med. Res. – 2009. – Vol. 129. – P. 127–137. 42 231. Rubinstein, J.L. Structure of the mitochondrial ATP synthase by electron cryomicroscopy / J.L. Rubinstein, J.E. Walker, R. Henderson //EMBO J. 2003. – Vol.22. – P. 6182–6192. 232. Sabeur, K. Characterization of NADPH oxidase 5 In equine testis and spermatozoa/ K. Sabeur, B. A. Ball // Reproduction. – 2007. – Vol.134. – P.263-270. 233. Fayed, S. Anti-oxidant activity of seminal plasma in fertile and infertile men / S. Fayed, A. Ashraf // European Society of Endocrinology. – 2007. – Vol.14. – P.655. 234. Sallese, M. Two isoforms of G protein-coupled receptor kinase 4 identified by molecular cloning/ M. Sallese, M.S. Lombardi, A. De Blasi // Biochemical and Biophysical Research Communications. – 1999. – P.848–854. 235. Sazanov, L.A. Structure of the hydrophilic domain of respiratory complex I from thermus thermophilus / L.A. Sazanov, P. Hinchliffe //Science. – 2006. – Vol.311. – P.1430–1436. 236. Schultz, N.A. Multitude of genes expressed solely in meiotic or postmeiotic spermatogenic cells offers a myriad of contraceptive targets/ N.A. Schultz, F.K. Hamra, D.L. Garbers // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2003. –Vol.100. – P.12201– 12206. 237. Schon, E. A. Mitochondrial genetics and disease/ E. A. Schon // Trends Biochem. Sci. – 2000. – Vol. 25 – P. 555–560. 238. Sex hormone status in male rats after exposure to 50 hz, 5 mtesla magnetic field / R. M. Mostafa [et.al]// Andrology. – 2006. – Vol.52, №5. – P. 363–369. 239. The morphological changes of adult mouse testes after 60Co γ-radiation / K. Morteza [et.al]// Iranian Biomedical Journal. – 2008. – Vol.12, №1. – P.35–42. 240. Shima, J.E. The murine testicular transcriptome: characterizing gene expression in the testis during the progression of spermatogenesis/ J.E. Shima [et.al]// Biol. Reprod. – 2004. – Vol.71. – P.319-330. 241. Shrilatha, B. Occurrence of oxidative impairments, response of antioxidant defences and associated biochemical perturbations in male reproductive milieu in the streptozotocin-diabetic rat/ B. Shrilatha, Muralidhara// Int. J. Androl. – 2007. – Vol.30, №6. – P.508-518. 43 242. Shrilatha, B. Early oxidative stress in testis and epididymal sperm in streptozotocin-induced diabetic mice: its progression and genotoxic consequences / B. Shrilatha, Muralidhara// Reprod. Toxicol. – 2007. – Vol. 23, №4. – P.578–587. 243. Sönmez, M. The effect of ascorbic acid supplementation on sperm quality, lipid peroxidation and testosterone levels of male wistar rats/ M. Sönmez, G. Türk, A. Yüce // Theriogenology. – 2005. – Vol. 63, №7. – P.2063–2072. 244. Spermatogenesis and epididymal sperm after scrotal gamma irradiation in adult rats / M.R. Bansal [et.al] // Reproductive Toxicology. – 1990. – Vol.4, №4. – P.321– 324. 245. Steroidogenic acute regulatory protein and peripheral-type benzodiazepine receptor associate at the mitochondrial membrane / L.A. West [et.al]//Endocrinology. – 2001. – Vol.142. – P.502–505. 246. Stocco, D.M. Starting to understand cholesterol transfer/ D.M. Stocco // Nat. Struct. Biol. – 2000. – №7. – P.445–457. 247. Structure of mitochondrial respiratory membrane protein complex II / F. Sun [et.al] // Crystal Cell. – 2005. – Vol.121. – P.1043–1057. 248. Stuart, R. Insertion of proteins into the inner membrane of mitochondria: the role of the oxa1 complex / R. Stuart // Biochim. Biophys. Acta. – 2002. – Vol. 1592. – P.79–87. 249. Studies on the effects of irradiation of cellular particulates. Acceleration of recovery of phosphorylation by polyanions, recovery of phosphorylation/ T. Henry [et.al]// Biol. Bull. – 1964. –Vol.127. – P.526-537. 250. Succinate links TCA cycle dysfunction to oncogenesis by inhibiting HIF-alpha prolyl hydroxylase / M.A. Selak [et.al]// Cancer Cell. – 2005. – №7. – P.77–85. 251. Sugden, M.C. Therapeutic potential of the mammalian pyruvate dehydrogenase kinases in the prevention of hyperglycaemia / M.C. Sugden, M.J. Holness //Cur. Drug Targets Immune Endocr. Metabol. Disord. – 2002. – Vol.2, №2. – P.151-165. 252. Sullivan, M.H. The role of Ca2+ in steroidogenesis in Leydig cells. Stimulation of intracellular free Ca2+ by lutropin (LH), luliberin (LHRH) agonist and cyclic AMP / M.H. Sullivan, B.A. Cooke // Biochem J. – 1986. – Vol.236. – P.45–51. 44 253. Suppression of m ouse sper matogenesis by a gonadotropin releasing. Hormone antagonist and anti-androgen: failure to protect against radiation induced gonadal damage / K. Dodge [et.al]// Endocrinology. – 1996. – Vol.137, №3. – P.949–955. 254. Suresh C. S. Role of oxidative stress and antioxidants in andrology and assisted reproductive technology/ C.S. Suresh // J. of Andrology. – 2004. – Vol. 25, № 1. 255. Syed, G. H. Leydig cell steroidogenesis: unmasking the functional importance of mitochondria/ G. H. Syed // Endocrinology. – 2007. – Vol.148, №6. – P.2581–2582. 256. Targeted disruption of Slc2a8 (GLUT8) reduces motility and mitochondrial potential of spermatozoa/ V. Gawlik [et.al] // Mol. Membr. Biol. – 2008. – Vol.25, №3. – P.224-235. 257. Testicular dose and hormonal changes after radiotherapy of rectal cancer / R.M. Hermann [et.al]// Radiother. Oncol. – 2006. – Vol.78, №1. – P.107–108. 258. Testicular dose and fertility in men following I (131) therapy for thyroid cancer/ S. Hyer [et.al] //Clin. Endocrinol. – 2002. – Vol.56.– P 755–758. 259. Testicular dose in prostate cancer radiotherapy/ D. Boehmer [et.al]// Strahlentherapie and onkologievolume. – 2005. – Vol.181, №3. – P.179–184. 260. Testicular function after 131I therapy for hyperthyroidism / C. Ceccarelli [et.al] // 2006. – Vol.65, №4. – P.446–452. 261. Testis-specific cytochrome c-null mice produce functional sperm but undergo early testicular atrophy /N. Sonoko [et.al]// Molecular and cellular biology. –2002. – Vol.22, №15. – P.5554–5562. 262. Testis-specific lactate dehydrogenase (LDH-C4; Ldh3) in murine oocytes and preimplantation embryos /C. Scott [et.al]. – 2006. – Vol.27, №4. – P.502–509. 263. The cardiolipin-cytochrome c interaction and the mitochondrial regulation of apoptosis / S.L. Iverson, S. Orrenius // Arch Biochem Biophys. – 2004. –Vol.423, №1. – P.37–46. 264. The gene expression of superoxide dismutase and the changes of the ultrastructure of rat testis after exposed to electromagnetics / Z. Li-Hua [et.al]// Environmental electromagnetics. – 2003. – №4–7. – P.153 – 156. 265. The G-protein coupled receptor kinase GRK4 regulates metabotropic glutamate receptor signaling in cerebellar purkinje cells / M. Sallese [et.al]// FASEB. – 2000. – Vol.14. – P.2569–2580. 45 266. The impact of mitochondrial genetics on male infertility / C. Justin [et.al]// Inter. J. of Andrology. – 2005. – Vol.28, №2. – P. 65–73. 267. The Influence of oxidative damage on viscosity of seminal fluid in infertile men/ Birsen Aydemir [et.al]// J. Andrology. – 2008.–Vol. 29, №1. – P.41–46. 268. The low ionic strength crystal structure of horse cytochrome c at 2.1 A resolution and comparison with its high ionic strength counterpart / R. Sanishvili [et.al]// Structure. – 1995. – №3. – P.707–716. 269. The relative biological effectiveness of low doses of 14 Mev neutrons in steadystate murine spermatogenesis as determined by flow cytometry / U.B. Hacker-Klom [et.al] // Radiat Res. – 2000. – Vol.153, №6. – P.734-742. 270. The role of androgens in the initiation of spermatogenesis in man /E. Steinberger [et.al]// Journal of clinical endocrinology and metabolism. – 1973. – Vol.37. – P.746. 271. The structure of the central stalk in bovine F (1)-ATPase at 2.4 A resolution / C. Gibbons [et.al]// Nat. Struct. Biol . – 2000. – №7. – P.1055–1061. 272. The whole structure of the 13-subunit oxidized cytochrome c oxidase at 2.8 A/ T. Tsukihara [et.al]// Science. – 1996. – Vol. 272. – P.1136–1144. 273. Transaldolase is essential for maintenance of the mitochondrial transmembrane potential and fertility of spermatozoa / A. Perl [et.al]// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. – 2007. – Vol. 103. – P. 14813–14818. 274. Turrens, J.F. Generation of superoxide anion by the NADH dehydrogenase of bovine heart mitochondria/ J.F. Turrens, A. Boveris// Biochem. J. – 1980. –Vol.191, №2. – P.421–427. 275. Ultrastructure and function of mitochondria in idiopathic asthenospermia: study of 151 cases/ Z.M. Sun [et.al]//Z honghua Yi Xue Za Zhi. – 2007. – Vol. 87. – P.12631265. 276. Uptake, localization, and dosimetry of 111In and 201Tl in human testes / J. S. Nettleton [et.al]// Nuclear Medicine. – 2004. – Vol.45, № 1. – P.138-146. 277. Use of organ culture to study the human fetal testis d: effect of retinoic acid / R. Lambrot [et.al] //J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2006. – Vol.91, №7. – P.2696–2703. 46 278. Valerie, A. Is the metabolism of testosterone to 5α-dihydrotestosterone required for androgen action in the skin/ A. Valerie, F.J. Randall, Ebling// British journal of dermatology. – 2006. – Vol.107, № 23. – P.47-53. 279. Vitamin, E. Aging and Leydig cell steroidogenesis/ H. Chen [et.al] //Exp. Gerontol. – 2005. – Vol.40, №8-9. – P.728–736. 280. Walker, D.W. Mitochondrial "swirls" induced by oxygen stress and in the drosophila mutant hyperswirl / D.W. Walker, S. Benzer// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. –2004. – Vol.101. – P.10290–10295. 281. Wartenberg, H. Differentiation and development of the testes. – New York: Raven Press Gondos B 1980 Development and differentiation of the testis and male reproductive tract/ H. Wartenberg, A. Steinberger, E. Steinberger// Testicular development, structure, and function. – New York: Raven Press. – 1989. – P.3–20. 282. Williams, A.C. The role of glucose in supporting motility and capacitation in human spermatozoa / A.C. Williams, W.CL. Ford // J. Androl. – 2001. – Vol.22.– P.680–695. 283. Yen, S.S.C. Reproductive endocrinology / S.S.C Yen, R.B. Jaffe. – New York: W.B. Saunders. – 1978. – P.47–89. 284. Yoon, Y. Mitochondrial division: new partners in membrane pinching /Y. Yoon, M.A. McNiven // Curr Biol. – 2001. – №11. – P.R67–R70. 285. Zirkin, B.R. Regulation of Leydig cell steroidogenic function during aging / B.R. Zirkin, H. Chen //Bio. Reprod. – 2000. – Vol. 639. – P.977–981. 47